估测血量的方法与流程

相关申请本申请要求于2017年1月11日提交的美国临时专利申请第62/445067号的优先权，将其整体并入本文发明背景在手术期间，从对象的身体中抽出血液、盐水和在某些情况下小组织，并收集在收集容器中。通常，这种抽出过程伴随着抽吸。在大多数情况下，收集罐中的组分包括至少一定体积的血液。然而，包含的血量难以以任何精确度进行评估。失血量评估对对象的健康至关重要，但目前其仅通过与专业主治医师/麻醉师在外科手术期间使用的生理盐水单位计数相关的粗糙技术进行评估。在手术结束时，麻醉师通常通过确定整个手术期间使用的生理盐水量，然后从收集罐中收集的混合材料总体积中减去该生理盐水体积来估测失血量。血液由rbc组成，并且rbc需要大量时间(超过3-6小时)从手术时收集的血液/流体混合物中沉降出来。除了需要大量时间来提供沉降的rbc体积读数之外，已发现沉降的rbc体积不能提供用于评估血液需求的足够的血量近似值。目前用于估测失血量的技术充满了挑战，包括人为失误(计算剩余生理盐水中“使用过的”生理盐水袋)和与常规含血流体分析相关的严格时间限制。在手术事件期间未准确地估计失血量导致患者出现许多潜在的严重健康并发症并增加医疗费用。例如，低估失血量可能导致未能向对象提供所需的输血。这在许多情况下反过来导致对象贫血，需要延长住院来使患者稳定和/或甚至导致死亡。过高估计失血量可能导致不必要的输血和/或其他不必要的医疗干预以及浪费单位血液。这也可能导致疾病(例如hiv、肝炎)传播风险增加。医学领域仍然需要改进的技术和材料来准确估测失血量。需要更精确地监测并估测流体中血量的方法。还需要适于提供更精确的血量近似值的流体收集产品，这也将用于降低与由此发生的不必要的医学治疗和干预相关的医疗成本。发明概述总体而言，本发明提供用于更可靠且精确地估测液体，特别是在外科手术期间中收集的液体中的血量的材料、装置和方法。在本公开内容中，应当理解，从含有血浆、盐水或任何其他流体(例如尿液)的流体分离的红细胞(rbc)体积的描述，并不意味着绝对或完全分离，而是流体中稳定沉降的rbc的近似值。应在室温下评估rbc沉降，并且其涉及通过重力(不离心)沉降样品液中rbc。估测液体中血量的方法。一方面，提供使用rbc絮凝剂测量哺乳动物(如人或兽医动物)失血量的方法。在一些实施方案中，该方法包括在其内含有rbc絮凝剂的容器中提供液体，其中液体中包含的血液中的rbc将沉降以允许目测基本上同时的rbc沉降体积。虽然沉降的rbc体积不等于液体中的血量，但rbc沉降体积可用于估测液体中的血量。该方法采用在rbc絮凝剂存在下观测到的rbc沉降体积、收集装置的长宽比和平均血细胞压积，以提供液体中血量目测可确定的近似值。使用本文所述的技术，使用本发明的装置和方法可在不到一小时内，甚至在15-30分钟内快速实现含有或可能含有血液的液体/流体中血量的目测确定近似值。校准以提供rbc絮凝剂存在下的红细胞沉降的非常短的时间框架以及随后近似血量的目测评估，为维持患者的健康提供了显著优势并为医疗护理人员节省了大量资源。该方法还可用于检测液体中血液的存在，并且以这种方式，其可以用于测试材料(如食品材料、水、药品等)是否存在血液污染。将有问题的材料与本文所述的rbc絮凝剂接触，并检查rbc沉降的存在。rbc沉降指示材料中存在血液。血液指示面板。在一些方面，提供血液指示面板(bip)，其具有被校准以与含有或疑似含有血液的流体中血量近似值相关联的明确分界，以及提供制备来自具体哺乳动物(人/非人)的血液特异性的bip的方法。还呈现了与定义的bip相关的具体收集设备。在rbc絮凝剂的存在下，bip可以与任何常规的流体收集装置和/或收集袋联合使用，以提供流体中的血量近似值。bip采用将估测的所评估血液类型的平均血细胞压积与确定的含有血液的流体的装置rbc压积合并的计算。bip专门用于兽医动物(马、牛、犬、猫)和人(成人、婴儿)用途。参考bip提供了通过交叉参考收集装置上沉降的rbc体积来估测混合流体/液体中的血量的有效方式(不需要进行单独计算)。在一些实施方案中，bip可以在没有常规体积测量的情况下使用，并且仅包括校准的血量标记以鉴定液体中的血量。在这种情况下，预先校准血液类型和装置，以提供近似血量测量，而无需参考沉降rbc水平。流体/液体中的rbc絮凝剂和rbc絮凝。一方面，鉴定了适于絮凝rbc，从而通过重力促进rbc沉降的具体絮凝剂。与在没有rbc絮凝剂的情况下流体中rbc沉降所需的数小时相比，rbc絮凝剂结合生物流体，如在外科手术或其他医疗程序进行期间收集的吸出物或其他手术流出物，其将促进混合流体内rbc的快速沉降，如在约15至约30分钟内。如在本发明的描述中所使用的，絮凝被定义为在包含血液或可能包含血液的流体内rbc簇的聚结或形成。因此，该方法可用于检测血液污染，以及通过根据本文公开的方法提供材料中rbc的检测和近似血量来量化材料中的血量。可能包含血液的流体包括生理盐水、手术吸出物、尿液、胆汁、其他生物废料、唾液、组织制备物、消化液、脑液、淋巴液、腹膜液、羊水及其任何混合物或组合。在这方面，实际上能够在室温下在少于约30分钟内促进rbc聚结以提供稳定的沉降rbc水平的任何部分或化学试剂均被认为可用作rbc絮凝剂以提供本发明的装置并用于本发明的方法。设想作为本发明的装置和方法的一部分，实际上可赋予荷负电的rbc正表面电荷的任何部分或化学实体均可用于促进rbc更快速的聚结或絮凝，并足以提高rbc沉降的速度。存在于含有血液的流体中的rbc在rbc絮凝剂的存在下互相结合，并且以这种方式形成在收集样品/材料的容器/瓶/管/可折叠袋或其他容器内沉降的较重颗粒。一旦rbc沉降，记录沉降的rbc体积并与预先确定的哺乳动物(动物/人)的血细胞压积和计算的与收集容器相关的rbc填充率一起使用，以提供液体或混合收集样本中近似血量的实时估测。在一些实施方案中，絮凝剂是聚二烯丙基二甲基氯化铵(聚dadmac)。实际上，在本发明的实践中，任何材料或化学制品均可用作rbc絮凝剂，只要该材料能够促进rbc彼此聚集，减少rbc聚集的时间并形成稳定的沉降水平，优选在约15分钟内。rbc絮凝剂的量应足以促进流体中存在的rbc在少于约60分钟内的稳定沉降。在一些实施方案中，rbc絮凝剂的量应当是在室温以及不存在离心的情况下，在约5分钟，约10分钟，约15分钟，约20分钟，约25分钟或约30分钟或在约5分钟至约20分钟的时间范围内，足以促进流体中rbc的稳定沉降的量。rbc絮凝剂的量应当足以赋予液体(如含血液的液体)中的rbc表面阳离子电荷。用作rbc絮凝剂的分子和材料包括聚合rbc絮凝剂和非聚合rbc絮凝剂。对于聚合rbc絮凝剂，rbc絮凝剂应具有至少约100,000da，或约200,000da，300,000da或400,000da的分子量，或这些的混合物，并具有相对正电荷。举例来说，聚合rbc絮凝剂可包括pei、pam、聚(丙烯酰胺-共-丙烯酸酯)，或能够赋予rbc表面正电荷的任何其它相对高分子量(大于或等于约1,400,000da)的荷正电聚合物。非聚合rbc絮凝剂可包括酸，如hcl或其他酸分子。其他合适的高分子量阳离子聚合物rbc絮凝剂可通过聚合制备，如通过一种或多种阳离子单体的乙烯基加成聚合以及通过一种或多种阳离子单体与一种或多种阳离子单体的共聚合。虽然可以使用阳离子单体形成阳离子聚合物rbc絮凝剂，但也可以使某些非离子乙烯基加成聚合物反应以产生带阳离子电荷的聚合物。这类聚合物包括通过聚丙烯酰胺与二甲胺和甲醛反应产生曼尼希(mannich)衍生物而制备的那些聚合物。rbc絮凝剂可以以固体形式、在水溶液中、作为油包水乳液或作为水中的分散体使用。可用作rbc絮凝剂的代表性阳离子聚合物包括：(甲基)丙烯酰胺与甲基丙烯酸二甲基氨基乙酯(dmaem)的共聚物和三元共聚物；丙烯酸二甲氨基乙酯(dmaea)；丙烯酸二乙基氨基乙酯(deaea)；甲基丙烯酸二乙基氨基乙酯(deaem)；或它们用硫酸二甲酯、氯甲烷或苄基氯制成的季铵形式。在可选实施方案中，rbc絮凝剂可包括二甲基氨基乙基丙烯酸酯甲基氯季铵盐-丙烯酰胺共聚物、丙烯酸钠-丙烯酰胺共聚物以及水解聚丙烯酰胺聚合物。在收集装置或在设计成符合包含rbc絮凝剂的收集装置的尺寸的可折叠袋内沉降rbc之后，可以使用已经校准以提供血量近似值的收集装置和/或可折叠袋上的刻度标记来估测沉降的rbc体积。可以确定填充率η，其使用沉降的rbc体积对比离心后的rbc体积来计算。确定填充率之后，可以根据以下公式，用沉降的rbc体积(vm)、对象的血细胞压积(hct)值(或从许多类似对象确定的平均hct)和填充率η来估测总血量，如失血量或收集装置中收集的流体中的总血量：vb＝vm/(hct×η)1)通常，在不存在絮凝剂的情况下，rbc沉降速率或红细胞沉降速率(esr)相对较低或者肉眼无法检测到(参见图18)。在没有絮凝剂的情况下，rbc在收集容器内未离心而于室温下沉降可能需要数小时甚至数天。虽然不意图限于任何特定的作用机制，但这可能至少部分归因于rbc之间天然存在的静电排斥力，因为rbc天然荷负电。在存在rbc絮凝剂(如rbc絮凝剂聚dadmac)的情况下，rbc沉降速率显著增加。在存在rbc絮凝剂的情况下，rbc沉降在不到约20分钟内发生，并且形成肉眼容易目测的稳定的rbc沉降体积。当可观察到的rbc沉降体积变化小于约0.5％/分钟时，rbc沉降体积被认为对于本发明的方法足够稳定。罐、收集袋和容器：提供收集装置，包括罐、收集袋和适于收集和目测估测失血量的容器。收集装置可以采用圆形、方形、八边形、圆柱形、圆锥形或几乎任何外形。收集装置应当足够透明或至少不反光，以允许目测检测收集装置内材料如沉降的rbc水平。收集装置可以是实心或柔性材料(如硬塑料或玻璃)或塑料材料。收集装置可包括与装置本身的体积相关的一系列体积分界，以及适于促进rbc絮凝的rbc絮凝剂的量。rbc絮凝剂也可以描述为具有足以允许rbc与絮凝剂结合而无需离心，于室温在不到30分钟内，或在约5分钟内，约10分钟，约15分钟甚至约20分钟内沉降的分子量。rbc絮凝剂在收集装置中可以以絮凝剂的干重或作为载体溶液中的絮凝剂量或作为收集装置上的预涂层(如均匀涂覆在至少一个表面、整个表面、在部分区域或沿着设备内部的条带)提供。这些描述作为示例提供，并不意图提供对本发明的装置和方法的设想用途和实践的潜在实施方案的限制。以下列表显示了含有处理和/或絮凝剂的收集容器的示例性描述：1200ml容器(具有罐构造)，5ml和/或10ml刻度标记，一个或多个入口以及一个或多个出口(适于连接适合施加抽吸的管，以通过第一入口处的管将流体吸入容器中)。500ml容器(具有罐构造)，1ml和/或5ml刻度标记，一个或多个入口以及一个或多个出口(适于连接适合施加抽吸的管，以通过第一入口处的管将生物流体吸入容器中。100ml、250ml或500ml容器(具有罐或锥形构造)，1ml和/或5ml刻度标记)、一个或多个入口、一个或多个出口，其中至少一个入口适于连接用于施加抽吸并将流体和其他材料吸入容器中的管。这些装置特别适用于儿科用途以及较小的外科手术(鼻窦手术)。500ml可折叠封套(具有1ml和/或5ml刻度标记、1或2个入口(可反复密封)和一个或多个适于连接适合施加抽吸以通过第一入口处的管将流体吸入容器的管)。100ml、200ml、250ml、300ml、400ml、500ml、1200ml和2500ml体积的可收缩封套(任选地具有5ml和/或10ml刻度标记)、1或2个入口(可重新密封的)和一个或多个出口(适于连接管以将袋与真空装置连接，从而通过第一入口处的管将流体吸入容器中)(图13)。可折叠袋应由类似于生理盐水袋容器的塑料材料制备，并且将包含适量的絮凝剂，如聚dadmac。可折叠袋还将包括位于一端的手柄或其他环(图13，#10)，以便于将袋悬挂在安装件，如静脉输液杆。bip也可以包含于袋上或者可以作为袋的附件放置，这将提供收集的流体中包含的血量的目测可鉴定的近似测量。该袋还可以包括常规的体积标记，如生理盐水和给液袋的常见标记。100ml、250ml和500ml锥形收集容器(任选地具有1ml、5ml和/或10ml刻度标记)、rbc絮凝剂、1或2个入口(可反复密封)和一个或多个出口(适于连接适合施加抽吸以通过第一入口处的管将流体吸入容器中的管)。这些较小的收集装置具有具体应用，并且对于较小(小于约500ml)血量的监测提供更高的准确度。这些较小装置和/或设计成可装入其中的可折叠袋，包括专门针对锥形容器尺寸的校准血量标记，尤其适用于新生儿，儿科和其他重要手术情况。估测流体中的血量和失血量的方法：在另一方面，提供估测液体中的血量的方法。在具体实施方案中，该方法用于估测在外科手术期间患者由于收集流体的失血量。该方法包括将一定体积的液体收集至收集装置中一段时间，该收集装置包括适于赋予rbc表面相对正电荷的rbc絮凝剂，该时间足以允许rbc在收集装置内通过重力沉降。在足够长的时间后沉降的rbc体积以及流体中动物/人血类型的估测的血细胞压积，与具体收集装置确定的计算的rbc填充率共同使用，以使用以上等式1计算收集的液体中的近似血量值。可选地，这些计算在作为本发明的一部分的称为血液指示面板(bip)的校准标记面板中提供，其可包含在血液收集装置上。因此，即时目测血量评估以在含有絮凝剂的收集装置沉降物中收集的流体中的rbc提供。在一些实施方案中，bip将包括与50ml、100ml、200ml、400ml和600ml的估计血量一致的校准标志物，以及用于在常规体积标记的流体收集装置内校准bip的体积校准标记(例如每5ml、10ml)，如常规1200ml罐中常见的标记。血量评估系统：流体收集罐和/或封套和管道系统：本发明还提供试剂盒，其将包括任何一种或多种上述容器，包括合适量的rbc絮凝剂，并用血量分界校准，适于将流体从一个区域抽吸到容器上的第一端口的第一长度管，适于与抽吸源和容器的第二端口连接的第二长度管，以便使该容器形成真空。该系统可以作为试剂盒提供，并且还可以包括指导插入件。附图简述图1.将50ml20％、40％和65％的牛血与200μl3x稀释的superflocc-591储备溶液混合。1-收集罐，2-rbc沉降水平(通过重力)，3-rbc沉降水平(通过重力)，4-rbc沉降水平(通过重力)，6-罐内总流体水平，7-罐内总水平，10-絮凝剂。图2.具有不同长宽比的容器具有不同的红细胞沉降速率。1-带刻度的锥形管，2-锥形管上以0.5毫米间隔的刻度，3-rbc沉降水平(重力)，4-100ml收集罐，5-罐内总流体水平，6-rbc沉降水平(重力)，10-絮凝剂。图3a-3d.图3a-沉降体积随时间的变化(含30％血液的生理盐水)血液浓度为30％的血液/生理盐水混合物样品中rbc沉降体积随时间的变化。图3b-沉降体积随时间的变化(含40％血液的生理盐水)。血液浓度为40％的血液/生理盐水混合物样品中红细胞沉降体积随时间的变化。图3c-沉降体积随时间的变化(含65％血液的生理盐水)。血液浓度为65％的血液/生理盐水混合物样品中rbc沉降体积随时间的变化。图3d-测量随着时间的平均rbc沉降体积的实验的设置。1-玻璃量筒，2-沉降的红细胞(重力)，2-总流体水平。图4.从左至右，当用生理盐水分别稀释至53.33％、40％和26.7％时，10ml80％血液中沉降的rbc。所有浓度均设定为相同的rbc压积。1-1200ml收集罐(含絮凝剂)，2-rbc沉降水平，3-罐内总流体。图5a-5b.5a-在静脉输液杆(6)上具有絮凝剂的收集罐(8)和盖(15)的手术室，盖(15)具有抽吸口(2)、入口(4)和真空口(11)。入口(4)可用于根据需要向收集罐中添加盐水或其他稀释剂。收集罐(8)可包括血液指示面板(bip)(5)。抽吸口(2)将接收用于在患者(7)外科手术期间将生物流体从手术区域吸出的管(1)。5b-收集罐(8)将包括盖(15)，盖(15)具有抽吸口(2)、入口(4)和真空口(11)。来自患者的抽吸流体将通过真空口(11)以抽吸的方式被抽吸到收集罐(8)中。图6.可以通过超声雾化(3,4,5)载体溶液中的絮凝剂材料，将絮凝剂以颗粒悬浮液(4)施加到容器内壁上。可以使用任何常规超声雾化装置(2)和注射泵来涂覆收集装置，如含有絮凝剂(如聚dadmac)的1200ml罐。图7a.使用超声雾化装置(3)将聚dadmac涂层(絮凝剂颗粒(10))施加于收集容器(1)如1200ml罐的表面(2)。图7b.表面具有两批聚dadmac涂层(3)(絮凝剂颗粒，10)的经处理的1200ml罐(1)。图8.具有盖(1)的絮凝剂(10)处理的罐，盖(1)具有第一入口(4)和第二真空口(5)，第一入口(4)通过一定长度的管(4)将罐连接到具有一定体积的血液混合物的容器，第二真空口(5)通过一定长度的管将罐连接到真空源，以在罐内产生抽吸力。图9a-9d.20％血液/生理盐水混合物实验的情况下，rbc沉降体积在20分钟内的变化。总血液/生理盐水混合物体积分别为200ml(图9a)，400ml(图9b)，800ml(图9c)和1200ml(图9d)。标志物作为bip的一部分形成，以提供血量近似值(未沉降的rbc体积)。图10a-10d.在40％血液/生理盐水中，rbc沉降体积在20分钟时间段内的变化。总血液/生理盐水混合物体积分别为：图10a-200ml；图10b-400毫升；图10c-800毫升；以及图10d-1200ml。(注意：每张图上的体积测量值来自制备用于用絮凝剂处理的1200ml罐的标志物。提供作为血液指示剂面板(bip)的一部分的标志物用于表示血量近似值。据估计，标志物提供血量近似值(未沉降的rbc体积)，其可能变化多达约20ml。)。图11a.在聚dadmac(絮凝剂颗粒，10)涂覆的1200ml罐(1)中，10-15分钟时观察到20％牛血/生理盐水混合物中稳定的rbc沉降。根据罐上的体积刻度，观察到罐中沉降的rbc体积为约110ml的体积水平(2)，并且总体积为950ml(3)。图11b-在涂覆聚dadmac(絮凝剂颗粒，10)的1200ml罐(1)中，约15-20分钟之后40％牛血/生理盐水混合物中rbc稳定沉降。根据罐上的常规体积刻度，观察到罐中沉降的rbc体积为约240ml的体积水平(2)，并且总体积约为1150ml(3)。图12i、12ii和12iii.准备三个絮凝剂处理的罐(从左到右，标记为i、ii和iii)来包括血液指示面板(4)。如图所示，血液指示面板(4)作为独立的指示面板呈现，并且可以与罐上的常规体积标记一起提供。血液指示面板包括提供血量近似值的一系列校准标记。在每个罐中检测的血液/生理盐水混合物为50％血液(i)、30％血液(ii)和20％(iii)。罐12iii中，bip(参见竖直白条)在絮凝剂(絮凝剂颗粒，12)的存在下显示约50ml的rbc沉降水平，其对应读数为约116ml的校准bip。图13.含有絮凝剂的可折叠塑料袋血液容器，其具有bip(20)、入口(3)、待放置在容器上的真空端口(4)以及允许添加生理盐水或其他稀释剂的第二入口(15)。该袋还应包括钩(10)，其被制成允许将袋放置在静脉输液杆或其他安装件上。图14.含有絮凝剂的锥形收集装置(临界体积和儿科应用)，其具有bip(5)、rbc絮凝剂(4)、入口(2)、真空端口(6)和第二入口(3)。图15.bip.适用于1200ml收集容器的典型bip可包括用于至少以下校准的近似血量的标志物：50ml、100ml、200ml、400ml和600ml。bip将提供收集液体内含有高达约50％或更少血液的血量的精确近似值。bip(20)包括校准系列的血量标记6(50ml)、7(100ml)、8(200ml)、9(400ml)和10(600ml)。该bpi与体积rbc沉降体积参考工具(1)一起显示，其包括收集装置15(约25ml)、4(约50ml)、3(约125ml)和2(约250ml)的常规体积测量。沉降的rbc体积不能提供收集流体中的血量的直接测量(在bip上指示)。相反，沉降的rbc水平是可以目测确定的适当血量的参考点。图16a-16b.对照(未经热处理的絮凝剂涂覆罐)和实验(热处理的絮凝剂涂覆的)罐中rbc沉降速率的图表数据。使用1000ml20％血液和生理盐水混合物(16a)以及500ml40％血液和生理盐水混合物(16b)进行测试。经热处理的罐保持在3分钟内(图16a)和6分钟内(图16b)将引入罐中的20％和40％血液/生理盐水混合物中的rbc絮凝的能力。图17a-图17b.与未高温处理的絮凝剂罐(图17a，图ii(20％血液)，图17b，图ii(40％血液))相比，在高温老化的絮凝剂涂覆罐中牛血rbc的沉降(图17a，图i(20％血液)，图17b，图ii(40％血液))。图18.马血研究：在含有或不含絮凝剂的100ml容器中的rbc沉降比较(使用容器上的过程体积标记目测检查近似体积读数。在具有絮凝剂的100ml容器中的rbc沉降：含絮凝剂的10％血液(w/f)；含絮凝剂的20％血液(w/f)；含絮凝剂的30％血液(w/f)；含絮凝剂的40％血液(w/f)；含絮凝剂的50％血液(w/f)；含有絮凝剂的65％血液(w/f)；在以下混合物中未观察到可目测检测的rbc沉降：无絮凝剂的10％血液(w/of)；无絮凝剂的20％血液(w/of)，无絮凝剂的30％血液(w/of)；无絮凝剂的40％血液(w/of)(未显示)；无絮凝剂的50％血液(w/of)(未显示)；或无絮凝剂的65％血液(w/of)，在试验期间(0至25分钟)于室温下检测混合物。图19.马新鲜血液研究：在絮凝剂涂覆的1200ml罐中，61.6％血液/生理盐水混合物中的rbc沉降。将约400ml新鲜马血与250ml生理盐水混合。记录rbc沉降体积。rbc在1分钟内开始沉降出来(500mlrbc沉降体积)。rbc在15分钟内沉降至约300ml的体积，并在该沉降体积下保持稳定直至观察期结束。优选实施方案详述除非另外定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与本公开所属领域的技术人员通常理解的相同的含义。虽然在本发明技术的实践和测试中可以使用与本文所述的那些方法和材料类似或等同的任何方法和材料，但是本文描述了优选方法和材料。本文使用的术语“絮凝剂”意图表示这样的分子，其具有阳离子电荷，在室温下能够促进rbc在流体中的聚结，并且在室温且不离心的情况下，不到30分钟就形成沉降的rbc团。通过不定冠词“一个/一种(a)”或“一个/一种(an)”提及元素不排除存在多个/多种元素的可能性，除非上下文明确要求存在一个/一种且仅一个/一种元素。因此，不定冠词“一个/一种(a)”或“一个/一种(an)”通常意为“至少一个/一种”。如本文所用的，“患者”或“对象”意为具有癌症或其他恶性肿瘤的症状或具有癌症或其他恶性肿瘤的风险的个体。患者可以是人或非人，并且可以包括例如动物，如马、狗、牛、猪或其他动物。同样地，患者或对象可包括人类患者，包括成人或青少年(例如儿童)。此外，患者或对象可以意为任何活体，优选哺乳动物(例如人或非人)，期望由本文考虑的组合物的施用来确定和/或监测来自所述哺乳动物的血量。如本文所用的，“约”意为在数值的统计学上有意义的范围内，所述值如所述的浓度、长度、分子量、ph、序列同一性、时间范围、温度或体积。这样的值或范围可以在给定值或范围的数量级内，通常在20％内，更通常在10％内，甚至更通常在5％内。“约”所涵盖的允许偏差将取决于所研究的具体系统，并且本领域技术人员可以容易地理解。提供以下实施例以说明本发明的优选实施方案。实施例1-rbc絮凝剂本实施例显示了可用作含有或疑似含有血液的流体中的rbc絮凝剂的材料。表i中的下列化学品可以作为rbc絮凝剂提供。表1实验室测试和向下选择：对表i中列出的所有鉴定的化学品进行测试并评估其适用性。将购自innovativeresearch(novi，mi)的牛全血用于确定以上各化学品作为rbc絮凝剂的适用性。全血中含有柠檬酸钠作为抗凝剂。用生理盐水稀释全血以提供以下在本研究中进行检测的血液浓度：20％、30％、40％、50％、65％和80％。明胶诱导rbc聚集但不引起沉降。最后，明胶将整个血液/生理盐水混合物样品转化为凝胶结构。在未将rbc与血浆和生理盐水分离的情况下，明胶不适合这种应用。右旋糖酐80+cacl2也将血液/生理盐水混合物样品转化为凝胶，而不是将rbc与血浆和生理盐水分离。通过添加1.8％的高浓度酸性6nhcl进行血液/生理盐水混合物样品的酸处理。将样品的ph变为约4.5。酸处理引起rbc的聚集和沉降。然而，使用相对大量的强酸对于该应用来说不划算，并且在过程中难以处理强酸。因此，酸处理可用于增加esr。pei是荷正电的聚合物，其引起rbc从血浆和生理盐水中沉降。pei必须在酸性条件(即ph<7.0)下溶解。换句话说，在中性ph下，血液/生理盐水混合物样品必须首先添加酸以降低ph，然后可将pei用于促进含有血液的生物流体中的rbc沉降。比较pei和聚dadmac的相对有效性。发现pei诱导的esr(红细胞沉降)低于聚dadmac诱导的esr。pei是含有血液的生物材料(液体)中rbc的可接受的絮凝剂。pam是可以荷负电或荷正电的聚合物。荷负电的聚合物不会诱导荷负电的rbc聚集和沉降。可以预期荷正电的pam可用于该应用。明矾是荷正电的分子。它确实促进较低的esr，但速率和量非常低。考虑絮凝剂的相对分子量以用作合适的絮凝剂，因为它增强了rbc由于重力的沉降。在用pei和聚dadmac的研究中，发现那些较高分子量的聚合物导致更快速的rbc沉降。聚dadmac是另一种荷正电的聚合物。它在中性ph下也是水溶性的。在血液/生理盐水混合物样品的存在下，聚dadmac具有快速引起rbc沉降的能力。只需少量聚dadmac即可诱导沉降。下面描述定量研究以确定与含有血液的生物混合物中的血量成比例需要的聚dadmac的比例。这些研究还提示，过量的聚dadmac可能会阻碍甚至停止rbc沉降。这可能是因为rbc被荷正电的聚dadmac涂覆并包围，因此涂覆的rbc通过正电荷而不是负电荷相互排斥，从而阻碍和/或防止聚集和沉降。低成本、高分子量(至少100kda、200kda、300kda或约400kda)、荷正电的聚dadmac被鉴定为快速诱导rbc沉降优选的、有成本效益的絮凝剂。其他高分子量、荷正电的聚合物絮凝剂(例如pei、pam等)也可用于本发明方法的实践和形成容器器皿。预期酸处理也可用作提供rbc沉降的方法的一部分。实施例2-失血量估测本实施例证明了材料聚dadmac作为包含在流体中的rbc的有效絮凝剂，以及该絮凝剂在估测含有血液和其他液体(包括生理盐水)的流体内总血量中的用途。从sigma-aldrich(目录号409022或409030)获得高分子量(至少100、200、300或400kda)研究级聚dadmac和工业级聚dadmac。工业级产品可从kemirachemical(商品名“superflocc-591”)商购获得，其含有20％浓度的聚dadmac。该材料用于水处理。进行研究以比较研究级和工业级产品之间的有效性。研究表明，superflocc-591在rbc沉降中产生的结果与研究级产品类似。工业级产品的成本比研究级产品低。c-591的纯度不同，导致rbc絮凝的一些差异。在使用研究级和工业级聚dadmac时，将20wt.％水储液用水稀释至6.67wt.％工作溶液，以降低溶液的粘度并增强易处理性。用于1200ml收集罐的絮凝剂的干重为约600mg聚dadmac。促进rbc沉降所需的絮凝剂的量。将superflocc-591(从制造商处获得(粘性液体，h2o中20wt.％)用作rbc絮凝剂以测试牛血和生理盐水混合物。测试促进更快的rbc沉降速率所需的絮凝剂的量。发现仅需将约0.4％(v/v％)的superflocc-591工作溶液添加到总血液/生理盐水混合物体积中，就可在混合物中提供可接受的rbc快速(在15分钟内)沉降。例如，在1升血液/生理盐水混合物样品中，无论混合物中的血液浓度如何，都只需要4mlsuperflocc-591工作溶液。对于1.2升罐，这转化为约320mg聚dadmac絮凝剂。图1显示了三个50ml体积的血液/生理盐水混合物样品，其血液浓度(图中从左到右)分别为20％、40％和65％。添加相同量的200μl(或50ml0.4％)superflocc-591工作溶液在所有这些血液浓度下诱导红细胞沉降。然而，如下所讨论的，发现沉降速率根据具体混合物中的血液浓度而不同。测试还显示可以使用更低或更高浓度的superflocc-591工作溶液。例如，发现低至0.3％(v/v％)和高达0.6％(v/v％)的浓度是有效的，然而未确定精确的上限和下限。发现向含有20％血液浓度的血液/生理盐水混合物样品中添加6％(v/v％)浓度的superflocc-591工作溶液诱导最小沉降，但这可能不是沉降的上限。血液容器(container)(容器(receptacle)或罐(canister))的长宽比。在实验期间，发现rbc沉降速率部分取决于容器的长宽比d：h，其中d是直径，h是容器的高度，例如如图2所示。长宽比d：h取决于容器的形状。当d：h较高时，沉降速率较高，因为较大的d为聚集的rbc通过重力的沉降提供了较大的面积或空间。因此，当使用不同的血液收集容器(或罐)时，沉降速率会不同。在实验期间的另一个发现是，如果在添加血液/生理盐水混合物样品之前将superflocc-591絮凝剂放入容器中以及在容器已经装有血液/生理盐水混合物样品之后添加superflocc-591絮凝剂到容器中时，superflocc-591絮凝剂使rbc沉降。沉降速率和血液浓度。目前的研究显示，血液/生理盐水混合物中的血液浓度也影响rbc沉降速率，具有较低血液浓度的样品对比含有较高浓度的样品的沉降速率更快。例如，图3a、3b和3c分别阐明了30％、40％和65％血液/生理盐水混合物样品中rbc的沉降速率。在这些研究中使用刻度玻璃量筒(图3d)来确定沉降速率的差异。在实验中使用三组60ml血液/生理盐水混合物样品，其中血液浓度为30％、40％和65％。首先将240μl(或60ml0.4％)superflocc-591工作溶液滴加到玻璃量筒中。然后向玻璃量筒中添加60ml血液/生理盐水混合物样品。通过玻璃量筒内的流体层的明显区分目测rbc的分离，其中沉降的rbc是朝向圆筒底部的较不透明的流体层，而血浆/生理盐水层是沉降rbc层上方较透明的流体层。通过参考量筒刻度标记记录量筒内沉降的rbc体积，并且每分钟进行记录。在时间0，将沉降rbc体积设定为60ml，因为在时间0没有可见的分离。在时间0之后，rbc开始从血浆/生理盐水层沉降并且最初以高沉降速率朝向容器底部沉降，但沉降速率随时间降低。在这方面，随着从血浆/生理盐水层分离的rbc的量增加，较少rbc与血浆和生理盐水分离。最终，rbc沉降速率非常低，因此rbc体积变化速率低于0.5％/分钟。此时，认为沉降的rbc体积是稳定的。换句话说，当沉降的rbc的体积变化小于0.5％/分钟时，则达到了稳定沉降。“rbc压积”表示为vm，其是当rbc沉降被认为稳定时容器底部rbc层的体积。图3a显示具有30％血液浓度的血液/生理盐水样品混合物在与絮凝剂混合后几乎立即开始rbc沉降。大部分沉降在一分钟内完成。在样品与絮凝剂混合后约10分钟达到稳定rbc沉降。稳定的rbc压积vm为约9.5ml。对于血液浓度为40％的血液/生理盐水混合物样品，沉降速率略微减慢(图3b)。大多数rbc的大部分沉降发生在2分钟而不是30％血液浓度样品观察到的1分钟。在约15分钟时达到40％浓度样品的稳定沉降，并且vm为约14ml。对于65％血液浓度样品，沉降较慢(图3c)。在观察到稳定沉降之前花了60多分钟。确定血液/生理盐水混合物中的血量的方法在含有50％或更少血液的液体中最佳且一致。快速沉降的特征为在室温下加入絮凝剂15分钟内在生理盐水/血液混合物中达到rbc的稳定沉降(在沉降过程中未搅拌混合物)。为了确保流体中的血液浓度保持低于约50％，可以添加血液(为了最佳rbc分离)、额外的生理盐水或其他适当的血液稀释剂。发现具有高浓度血液的血液/生理盐水混合物仍然可以实现快速沉降。沉降可以重新开始的一种方法是，沉降速率出现减缓，可以添加额外体积的生理盐水以进一步稀释血液。如图4所示，在三个瓶中制备三组10ml80％血液(含有柠檬酸钠抗凝剂的牛血)浓度的血液/生理盐水混合物样品。所有样品与30μl(约10ml0.3％)superflocc-591工作溶液(约2mg干重superflocc-591)混合。在稀释样品之前未观察到沉降。向每个瓶子添加生理盐水以稀释血液浓度，图4中从左到右，添加5ml、10ml和20ml生理盐水，将样品的血液浓度分别稀释至53.3％、40％和26.7％。轻轻搅拌容器以将添加的生理盐水与样品混合。稀释后，rbc开始沉降。26.7％血液浓度混合物和40％血液浓度混合物在约10分钟达到稳定沉降。53.3％血液浓度混合物在约16分钟达到稳定沉降。如图4所示，即使在存在不同量的生理盐水的情况下，所有三组样品中的最终rbc压积vm(即容器底部的较暗底层)相同。得到该结果是因为最初的10ml80％血液浓度混合物含有相同量的血量8ml。该研究表明：1)可以添加更多生理盐水来稀释血液/生理盐水混合物以有助于提高rbc沉降速率；2)可以通过rbc沉降来估测总血量，因为容器底部聚集的rbc体积(即rbc压积)不受血液/生理盐水混合物中生理盐水量的影响。应当注意，使用上面讨论的其他絮凝剂或其他化学处理时，随后可以使用先前概述的测试方案进一步测试以确定最佳絮凝剂浓度和血液/生理盐水比例。可重复性。重复三次使用40％血液(含柠檬酸钠抗凝剂的牛血)浓度混合物的rbc沉降研究(图10a)。标准偏差误差线在图10a图中线上的不同点处显示。实验的可重复性非常好，特别是线上在沉降接近稳定时的点。最初发生的相对较大变化如线上那些点处的较长标准偏差误差线所示，但是这些变化可能是由于在那些点处沉降rbc层体积的快速变化所引起的目测读数误差。当沉降接近稳定时，数据变化非常小。换句话说，当沉降稳定时，rbc压积vm的变化很小。总血量估测。为了证明估测总血量的可行性，基于沉降的rbc体积vm开发了一种算法来估测血液/生理盐水混合物中的总血量。如果实际rbc体积表示为vc(通过离心确定)，总血量表示为vb，且患者的血细胞压积表示为hct，则创建以下关系：η＝vm/vc，hct＝vc/vb→vb＝vm/(hctxη)由于hct可从手术前测量的患者数据获得并且vm可基于上述方法测量，因此当预先实验(本文给出了方法和实例显示确定填充率η的方法)确定vm和vc之间的填充率(η)的值时即可估测总血量vb。对于不同的血液类型(例如人对比非人)，填充率η的值可能不同。填充率值也可能是容器特异的，因为它可以根据用于收集血液的容器的尺寸和形状(长宽比)而变化。在这方面，回忆测试显示容器形状影响esr(红细胞沉降速率)。因此，在使用相同血液类型和容器形状用于血液测量的情况下，填充率η应保持相同。通过使用已知血细胞压积值和已知血液体积的血液/生理盐水混合物，凭经验确定填充率η。优选地，通过从具有不同已知血液浓度的许多血液/生理盐水混合物样品中获得平均填充率值来确定填充率η的值。在这方面，通过用来自相同动物物种(牛、马、人)的血液和具有限定大小和形状的容器进行研究，在存在如本文所述的絮凝剂的情况下，当检测不同的已知血液/生理盐水检测浓度混合物时，可以计算适当的填充率η。检测的不同血液/生理盐水混合物的数量越多，得到的平均填充率值在统计学上越可靠。如上所讨论的，在一些实施方案中，收集的流体的血液浓度应为约50％或更少血液。另外，可以从由代表性数目的对象(动物/人)获得的许多血细胞压积值确定平均血细胞压积。如本领域技术人员已知的，可以使用常规毛细管离心法计算血细胞压积。当具体收集期间血量已知时，一组动物(如一组人或一组马等)的平均血细胞压积值将提供可在本文所述的公式和方法中使用的值vc。如上所述，填充率η的值优选是由限定收集容器中的一组血液/生理盐水混合物样品计算的平均填充率值。对于许多单独的样品，将确定在rbc絮凝剂存在下(在室温下，通过普通重力)促进的实际rbc体积vc和沉降的rbc体积vm，并确定平均填充率值。为了确定实际rbc体积vc，将添加到混合物样品中的血液的血细胞压积乘以添加到该样品中的血量。接下来，如上所述，可以使用容器上的常规体积刻度标记确定各混合物样品的rbc压积vm。也就是说，在存在絮凝剂的情况下，可以通过读取rbc沉降的体积来确定vm。作为该方法的一部分，应向收集容器中添加相同类型和量(总流体混合物体积中的浓度)的rbc絮凝剂。如表2所示，即使絮凝剂聚dadmac的浓度发生变化，填充率η仍相对一致。因此，可以使用一系列絮凝剂浓度(在总液体体积中絮凝剂的范围为约0.3％、0.4％和0.75％絮凝剂)来诱导rbc沉降而不显著影响填充率。另外，表2中的数据表明，当絮凝剂浓度保持相对相同时，填充率对液体混合物(血液/生理盐水)中的血量相对不敏感。利用每个混合物样品的实际rbc体积vc和沉降的rbc压积vm，可以确定每个样品(即每种不同的血液浓度混合物)的填充率值η值。然后，可以计算平均填充率值。例如，对于牛血，计算的平均填充率为1.61(参见表2)。为了证实填充率值的经验确定，确定从购自商业供应商的牛血的填充率η的值，这些血液材料含有柠檬酸钠(作为抗凝剂)。使用标记体积(ml)的塑料罐，并且如图4所示。结果如下表2所示。在实验之前，由大量牛血样品计算牛血的平均血细胞压积hct，并确定平均为37.3％。该平均hct用于下表中，并且用于样品中血量的当前估测值。将常规的毛细管离心法用于确定单个hct值。表2由这些实验得到的填充率值显示出相对较小的差异。在这些实验中，上表中所有血液/生理盐水混合物样品的血液浓度小于50％，因为可以通过添加生理盐水稀释具有较高血量的混合物以提供血液低于50％的混合物。在确定hct为37.3％并且平均填充率η值等于1.61之后，可以使用以下公式(来自等式1)来估测血液/生理盐水混合物中的总血量：vb＝vm/37.3％×1.61)＝1.67×vm上式中的数字1.67是1/37.3％(平均hct)×1.61(来自表2的平均η值)的计算值。下表显示了已知存在于各样品中的实际血量与通过使用上述公式确定的血量计算确定的样品中近似血液体积(以ml计)之间的比较。结果证实，在rbc絮凝剂(例如聚合絮凝剂，如聚dadmac)存在下，此处提供的公式和技术可用于提供含有哺乳动物血液(例如牛血)的液体样品中血量的近似值。此外，数据显示，收集的混合血液/生理盐水液体样品中存在的近似血量与液体中的实际血量密切相关。表3表2中记录的20％血液每1000ml流体混合物由200ml牛血和800ml生理盐水组成。实施例3-流体收集罐本实施例显示了用rbc絮凝剂准备特定的流体收集容器。含血液体收集容器。以下实施例中使用的流体收集容器是1200ml抽吸罐，如图7b所示。向该罐(1)中应用絮凝剂聚dadmac，其显示为罐的底部和壁上分散的絮凝剂颗粒(2)的膜。絮凝剂-聚dadmac。将kemira的“superflocc-591”用作聚dadmac的来源。该产品的质量或纯度不一致。因此，使用sigma-aldrich版本的高分子量(200-350kda)20％聚dadmac(sigma目录号#409022)。结果表明，sigma版本的聚dadmac显著提高了测试结果。然而，预期实际上可以在本发明的实践以及在包含本文所述的絮凝剂并用其处理的流体收集容器的制造中使用任何数量的不同来源的絮凝剂。实施例4-聚dadmac作为絮凝剂用于1200ml收集罐，用于包含血液的混合物的血量近似值的优化在手术室中，生物流体废物收集罐可用于收集一定体积的流体，其将包括未知体积的血液。1200ml罐体积中的血量可在10ml至1200ml之间变化。收集的收集流体中的血量也可以根据动物的具体种类、患者的性别和体重以及正在进行的具体医疗程序而变化。然而，在一般成人外科手术过程中收集罐中收集的流体中的血量通常含有约20％至约50％的血液。在标准医院操作设置中使用的用于血量确定的常规技术仅提供血量的总估测，其大多数时间至少50％-75％不准确，并且在外科手术完成后数小时才可获得。在大多数情况下，外科手术期间抽吸的流体中的血量为50％或更少。在流体含有超过50％血液的那些情况下，本发明的方法和装置可用于通过下述来精确确定血量：向流体中添加生理盐水或其他稀释剂以降低血液浓度，从而在rbc絮凝剂聚dadmac存在的情况下促进流体中rbc的沉降。本实施例证实，相对恒定量的rbc絮凝剂(如聚dadmac)，可用于实现含有约50％或更低血液浓度的流体的相对精确的血量估测。这通过使用含有rbc絮凝剂的校准罐中rbc的沉降体积的目测读数来实现。然后将该rbc沉降体积用于计算以确定混合物中的血量。单独的沉降的rbc体积值不足以精确估测混合物中的血量。对40％血液的三种不同体积的血液/生理盐水混合物进行测试。测试的40％血液/生理盐水混合物的体积为：200ml、800ml和1200ml。用生理盐水稀释sigma-aldrich聚dadmac(含20wt.％的水)溶液，以提供水中含6.67wt.％聚dadmac的工作溶液。将该工作溶液用于提供本研究中絮凝剂的近似量。表4提供了检测的各体积40％血液/生理盐水混合物的最佳絮凝剂量。最佳絮凝剂量被确定为提供红细胞从混合物中沉降出来的最快速率所需的絮凝剂的量。检测的各混合物体积中的rbc在罐内达到了可目测辨别的沉降水平，其中于室温在血液/生理盐水混合物与絮凝剂组合后约15分钟时，在可目测辨别的沉降的rbc弯液面上方观察到相对透明的流体。观察到沉降速率根据混合物中提供的絮凝剂的量而变化。根据表4，平均约0.75ml至约1.5ml的絮凝剂工作溶液(约50mg至约100mg干重聚admac)对于促进100ml体积的血液/生理盐水混合物中rbc的快速沉降最佳。对于体积约为1200ml的较大的1200ml罐，将在罐底部或罐壁上提供约9ml聚dadmac絮凝剂工作溶液(或约600mg干重聚dadmac)，以促进体积高达1200ml的血液/生理盐水混合物中的rbc快速沉降。在以下研究中，每100ml(或0.75％v/v)血液/生理盐水混合物使用约0.75ml至约1.5ml絮凝剂工作溶液。当使用工业级絮凝剂superflockc-591版本的聚dadmac时，该浓度值略大于本文所述研究中使用的0.4％至0.6％。基于所鉴定的0.75％v/v聚dadmac浓度，可以收集多达1200ml含血液的流体的1200ml罐将需要约9ml聚dadmac工作溶液(或约600mg干重聚dadmac)。表4表4显示了不同体积的40％血液/生理盐水混合物达到rbc沉降最佳的絮凝剂的量。如所示，9mlrbc絮凝剂聚dadmac(约600mg干重)在1200ml体积的血液生理盐水混合物中提供最佳rbc沉降。实施例5-准备絮凝剂处理过的罐的方法本实施例描述了多种方法，其中可以提供絮凝剂并将其分布在流体采集容器内和/或流体采集容器上，特别是含有血液的流体。尽管在本实施例中使用特定的聚合物絮凝剂聚dadmac，但许多其它聚合和非聚合絮凝剂均可用于本发明的实践中，以提供本文所述的方法和装置。罐壁上的竖直带涂层。用含有600mg絮凝剂的9ml体积的材料涂覆1200罐。以罐中1”宽的竖直带的形式涂覆罐。这样，只有浸没在血液/生理盐水混合物中被溶解或释放到混合物中的絮凝剂才能引起rbc沉降。换句话说，聚dadmac涂层的竖直带可以提供与血液/生理盐水混合物的体积成比例的絮凝剂的控制释放。使用两种方法来涂竖直带涂层。一种是使用刷子直接在罐壁上提供1”带。另一种方法是在1”宽透明胶带上涂絮凝剂涂层，然后将透明胶带粘在罐壁上。罐具有疏水表面，使得絮凝剂溶液难以留在壁上。开发臭氧处理以将疏水性罐壁变为亲水性。使用该技术改善絮凝剂粘附。在涂覆竖直絮凝剂带之后，用商购自商业供应商处的牛血对罐进行测试。具有絮凝剂带的罐确实促进了rbc沉降。然而，沉降速率稍慢。rbc需要20多分钟才能沉降在罐底部。通常，需要更快的rbc沉降速率。虽然不意图限于任何理论或具体作用机理，但较慢的速率可能至少部分与絮凝剂涂层溶解和在整个血液/生理盐水体积内扩散所需的时间有关。将絮凝剂从单带涂层扩散到整个血液/生理盐水混合物需要更多的时间。预期分布在整个罐中的较薄涂层可加速絮凝剂的溶解和分布。使用超声波雾化技术在整个罐上均匀涂覆。将基于超声波的方法用于涂覆血液采集罐内部。超声波雾化涂层是无压低速(通常为每秒3-5英寸数量级)涂层，其与喷涂涂层区别开来。压电换能器将电输入转换为振动形式的机械能。高频声振动将液体雾化成细雾状喷雾(图6)。无压低速喷雾显著减少了过喷量，因为液滴倾向于沉降在基材上，而不是从底部反弹。喷雾模式可以精确控制和成型。使用这些类型的专用喷雾成型设备可以产生小至0.070英寸宽到大至1-2英尺宽的喷涂图案。该方法中使用的雾化装置具有60khz超声波喷嘴。图7a显示了使用超声波雾化器的罐的手动涂覆过程。雾化器尖端沿着罐壁移动，从罐的底部开始逐渐向上移动到罐的顶部。通过雾状喷涂涂覆的区域将透明壁变为雾状表面，这引导手动涂覆过程覆盖整个罐壁并且基于目视观察使涂层尽可能均匀。未来可以开发自动涂覆方法以进行均匀涂覆。使用不同浓度的聚dadmac对多个参数进行测试，并将高汽化醇(如甲醇和乙醇)掺入喷雾溶液中以加速干燥过程。使用强度设置“10”的超声波雾化装置，聚dadmac工作溶液(在di(去离子)水中制备)提供最佳雾状喷雾以沉降絮凝剂(图7a)。注射泵设置为60ml/h。需要约4.5ml絮凝剂涂覆溶液来覆盖整个1200ml的罐壁。因此，为了将9ml絮凝剂溶液涂到罐上，需要两批絮凝剂涂层。9ml体积的絮凝剂溶液含有约600mg聚dadmac。在各涂层之间，使罐在烘箱内几小时或在室温下24小时以完全干燥。图7b显示了在其整个壁上涂两批涂层的罐。使用更强有力的超声波雾化装置将允许更高浓度的涂层溶液。以这种方式，可以使用单批涂层来递送包含所有聚dadmac的4.5ml溶液非9ml体积，以提供上述絮凝剂浓度。流程方案提供准备絮凝剂处理(涂覆)罐的手动步骤：涂层的制备1.通过将一份20wt.％的聚dadmac(sigma目录号#409022)与两份di水混合来制备聚dadmac工作溶液。2.用聚dadmac工作溶液填充60ml注射器。3.将超声雾化装置的强度设置为“10”。4.将注射泵速率设置为60ml/h，并且输送体积为4.5ml。手工涂覆方法1.打开超声波雾化装置，开始从罐底部移动超声波喷嘴，在罐壁和底部涂雾状喷雾。2.沿着螺旋路径逐渐将超声波喷嘴从罐底部移动到顶部，并确保壁上任何地方均涂覆聚dadmac。涂覆聚dadmac雾的区域显示雾状外观，如下图所示。3.通常，4.5ml稀释的聚dadmac足以为整个罐提供一层涂层。4.让涂覆的罐在室温下干燥过夜。5.在第一层涂层干燥后，以与上述相同的方式将第二层涂于罐上。两次涂层后就将总共9ml稀释的聚dadmac涂于罐上。6.再次将罐干燥过夜，然后准备好使用罐。实施例6-估测聚dadmac涂覆的1200ml罐的填充率(η)使用体积为1200ml并且具有在手术室中使用的生物废物罐尺寸的罐来准备聚dadmac涂覆的1200ml罐。图5中提供了手术室环境中这种罐的典型构造。首先，确定与该涂覆罐相关的填充率η。在本研究中使用商购自商业供应商处的牛血。将该血液冷藏，然后在测试时加热至23℃。另外，牛血含有柠檬酸钠以防止凝固。将牛血和生理盐水添加到絮凝剂处理过的罐中，以得到确定的血液/生理盐水比例。为了模拟常规操作期间将含有血液的液体提供到采集罐内的过程，例如根据以下技术将600ml体积的血液/生理盐水混合物(40％血液)输送到絮凝剂处理过的罐中。准备容器a以包含240ml血液，并且准备容器b以包含360ml生理盐水。使用血清移液管作为抽吸探针。抽吸探针通过管连接到罐的入口(患者端口)。使用罐的第二端口将罐进一步与真空管线连接，并用于在罐中形成真空。在真空下，将移液管放入包括血液的容器或包含生理盐水的容器中，以将相应的流体选择性抽吸至含有絮凝剂的罐(聚dadmac)中(图8)。因此，罐中提供600ml40％血液的总流体体积。在将所有血液和生理盐水抽吸进第三个罐后，监测混合物以评估在絮凝剂存在下rbc与血浆和生理盐水的分离/沉降。每分钟记录rbc沉降线的体积，持续20分钟。使用不同体积的40％血液/生理盐水混合物溶液(200ml、400ml、800ml和1200ml)进行研究。每项研究重复三次。图10a-10d显示了使用40％血液混合物在20分钟时间内rbc沉降体积的变化。该研究还用200、400、800和1200ml体积的20％血液/生理盐水混合物溶液进行三次(图9a-9d)。为了获得适用于该罐中采集的不同体积和不同血液浓度混合物的流体的平均填充率η，对20％和40％两种血液浓度以及200ml至1200ml四种不同体积进行检测。使用20％血液混合物(20％血液/80％生理盐水)，rbc在絮凝剂处理的罐中非常快速地沉降。在室温下10至15分钟内达到可目测观察的30ml(vm)rbc沉降(图11a)。三次重复实验的平均vm和计算的vic(基于测量的牛血血细胞压积(35.4％)和研究中使用的未知血量)，20％和40％血液制剂的所有四种不同的总混合物体积列于表5中。这些实验证明，聚dadmac涂层促进rbc于室温下15分钟内快速沉降出血液/生理盐水混合物。在没有絮凝剂的情况下，室温下这些血液/生理盐水混合物中rbc的沉降将需要3-6小时。估测填充率η。使用来自上述实验的数据，可以凭经验确定沉降的rbc体积(vm)和实际rbc体积(vc)之间的填充率η(参见等式1)。表5显示了1200mlmedi-vac罐的经验确定的填充率，其平均值为1.20。由于填充率涵盖200至1200ml的大体积范围以及大血液浓度范围，填充率的变异相对较高，高于13％。这些填充率的变异也会影响失血量估测的方差。计算每种相应血液混合物的以下填充率η值。然后计算平均值η。表5经验确定的填充率在本研究中，使用的牛血的平均血细胞压积值为35.4％，并且得出的平均填充率η为1.2。使用等式1中的公式，创建以下公式以估测含有絮凝剂的罐中采集的流体中的血量：vb＝vm/35.4％×1.2＝2.35×vm每种血液混合物1-8的失血量的估测值在下表6中给出，并将其与样品中已知血量进行比较。表6血液混合物vm(ml)估测的血量(ml)实际血量(ml)1.200ml20％血液1842.30402.400ml20％血液3070.50803.800ml20％血液60141.01604.1200ml20％血液100235.02405.200ml40％血液3070.5806.400ml40％血液70164.51607.800ml40％血液160376.033208.1200ml40％血液233.3548.3480如上表所示，使用本公式计算的失血量与流体中的实际血量相关。因此，本发明的方法和装置被证明为手术环境中外科手术中的医师/保健专业人员提供失血量的同步视觉指示工具，其比传统方法(生理盐水袋使用评估和/或根据总的患者流体采集术后评估)更精确。基于在絮凝剂存在下在刻度罐中观察到的rbc沉降体积(以ml计)，不需要任何电、温度或其他材料操作程序，使用上述公式设计血液指示面板，其为采集的体液中的近似总血量提供直接的目测工具。实施例7-用于生物流体容器中血量评估的血量指示面板的创建为了使用户通过目视检测容器(如含有絮凝剂的容器)中沉降的rbc来容易地估测血量，为流体采集容器提供具有校准标记的血量指示面板，并且根据采集容器中存在絮凝剂时rbc的沉降水平，来指示采集的流体中的总近似血量。可预见这些采集容器可以包括或不包括传统的容积测量。为了对本发明容器(罐等)的血量指示面板创建刻度标记，使用以下等式2：vm＝vbxhctxη2)等式2将采用来自相同物种并且年龄近似、性别相同的多个动物/人计算的平均hct。例如，对于成年男性，平均hct为约45％。在该研究中，使用以下公式创建用于大型哺乳动物的血液指示面板：等式3：vm＝0.43×vb将使用该公式，并且牛血的平均hct为35.4％，以及平均填充率η＝1.20，如针对牛血所计算的(表5)。在血量指示面板上提供50ml估测血量标记，其与可目视辨别的约21.5ml的rbc沉降体积相对应。使用等式3(见表7)。可以在血量指示面板上生成100ml估测血量校准标记，其对应容器的43.02mlrbc沉降体积线，等等。血量指示面板的刻度标记提供一系列可目视识别的标记，这些标记与罐中的材料体积测量无关，但与该罐中采集的流体中近似血量相关。图15中提供了典型血液指示面板(bip)的示例(参见左图6，50ml、100ml、200ml、400ml、600ml处的校准标记)。在具有标准体积标记的常规采集容器上包括含血液指示面板(参见图16，右图1)，可提供所采集流体中的血量的即刻目测估测，而无需进行数学计算或对所采集或沉降材料的其他操作。如所示，用bpi的校准标记鉴定的血量与流体中的常规rbc沉降体积不一致。相反，将rbc沉降体积与血细胞压积以及限定的长宽比一起用作计算的一部分，以提供近似血量。在没有絮凝剂的情况下，液体中的血量不可能在约3-6小时内估测，因为除其他方面外，rbc直到3-6小时后才开始沉降。此外，单独存在絮凝剂，尽管促进快速rbc沉降，但不能立即估测出液体中的血量。如在本结果中所证明的，液体中rbc的沉降体积小于包含已知量血液的测试流体中包含的已知实际血量的约50％。在絮凝剂存在的情况下，必须进一步校正rbc沉降体积以适应血液平均血细胞压积和填充率，从而提供液体中的近似血量。基于平均血细胞压积(hct)的衍生来创建bip面板，例如人、牛、马等的平均hct。为了校正个体患者/动物中的hct差异，如由于性别、物种、年龄等造成的个体hct差异，可以通过校正显著更高或更低的个体血细胞压积值的因子来调整bip上指示的近似血量值。例如，如果患者的测量hct值较低，例如成年男性典型hct的80％，那么针对该患者观察到的面板上的血量指示值将被除以80％，以提供容器中估测血量的更接近的近似值。更具体地，如果根据指示面板上的刻度标记，面板上的血量指示值是50ml，则从该患者采集的生物材料中的实际血量将被计算为62.5ml，其中患者的hct是典型hct值的80％。类似地，如果患者测量的hct值较高，例如是成年男性典型血细胞压积值的110％，那么血量指示面板上的血量指示值将被除以110％，这将得到较低的血量。例如，如果血量指示面板上的血量指示值是100ml，则患者的实际失血量将被计算为90.9ml，以校正患者高于平均值的hct(例如，高出10％)。图8显示了具有血量指示面板的1200ml罐。放置在采集罐上的特定血液指示面板显示于图12中。创建bip以提供一定体积的20％血液/生理盐水混合物或40％血液/生理盐水混合物中的血量估测(使用牛血)。血液指示面板也可用于评估液体样品中的人体血量。这是因为牛和人都是哺乳动物，并且来自牛和人的血液有许多特征，包括相似的平均血细胞压积。表7.用于1200ml罐的血液指示面板标记的实例。这些校准的血量标记与流体样品中包含的血量估测相对应，将其在表中与对应的rbc沉降体积(由表中的值vm表示)进行比较。(含柠檬酸钠的牛血)该研究使用rbc絮凝剂聚dadmac涂覆的生物流体采集罐(1200-ml)成功开发了bip原型。将这种尺寸的罐用于人类患者：成人和儿科的手术室。使用牛血对原型进行的评估显示在该示例性rbc絮凝剂存在下rbc快速沉降，并且在20分钟内达到稳定的rbc沉降。专门设计的bip上的校准标记是为该采集罐设计的，并且其可用于提供采集的哺乳动物液体中总血量的目测估测。如果患者测量的血细胞压积与用于产生校准的bip标记的典型血细胞压积不同，则可以校正校准的血量以使血液血细胞压积百分比适应个体血量。以下提供了成年男性和成年女性的平均血细胞压积：正常hct值：男性-42-52％(平均hct，47)；女性-37-47％(平均hct，42)。实施例8-用絮凝剂准备100ml罐准备100ml罐，以包含约50mg絮凝剂。在该实施例中，使用的rbc絮凝剂是聚dadmac。以一定体积的本文所述的聚dadmac工作溶液提供絮凝剂。在典型的手术室环境中，可从手术区域抽吸出较小体积含有血液和其他材料(组织、尿液、非血液等)的流体。这些流体的抽吸导致不易测定患者的失血量。可以根据本发明准备较小的容器，以适应这些小的，有时是临界体积的采集流体中的失血量估测。因此，提供这些含有rbc絮凝剂(如聚dadmac)的100ml容器，并且其特别适用于确定少量采集流体中的血量。这些装置可用于例如儿科应用(婴儿)以及低体积临界流体采集程序。所述100ml采集装置的长宽比计算为0.96。在实施例9所描述的研究中使用含有rbc絮凝剂的小的100ml容器。实施例9-新鲜血液失血量估测提供本实施例是以证明用于估测含有哺乳动物新鲜血液(无抗凝剂)流体中的失血的方法和装置的效用。在该实施例中，存在于流体中的非血液材料是生理盐水。本实施例检测了用于使用新鲜的、从未冷藏的一定体积的哺乳动物血液进行血液估测的技术。此外，血液不含柠檬酸钙或任何其他抗凝剂。在本研究中，新鲜血液样本获自成年马。因此，该装置和方法特别适用于估测哺乳动物的失血量，包括人和兽医动物(马、狗、猫、奶牛、公牛、绵羊、猪等)。在该实施例中，从活的成年马(大约12岁，体重1,200磅)采集血液，其没有已知的临床病理，并且未进行任何已知的药物治疗。这只动物正在接受跛足治疗，并且正在接受神经阻滞以控制疼痛。与含有抗凝剂如柠檬酸钠(在先前的实施例中使用过)的从商业供应商处采集的血液不同，在从该研究中使用的马中采集的血液中不存在抗凝剂或其他药物。在本研究中使用总体积容量为100ml的总共十二(12)个罐。沿着罐的侧面以50ml和100ml的增量分界对于罐进行标记。计算的100ml容器的长宽比d：h(直径vs.高度)为约0.96。相比之下，1200ml罐的长宽比为约0.61。通常，采集装置的长宽比越大，采集的液体中的任何血液内包含的rbc将越快地在采集装置中沉降出来。因此，在类似条件下，在rbc絮凝剂存在下，与1200ml罐中rbc的沉降速率相比，预期100ml采集装置中rbc的沉降速率更快。100ml干燥罐加入50mgrbc絮凝剂聚dadmac，研究级(sigma目录号#409022)。(参见实施例7)。其他rbc絮凝剂以及这些絮凝剂的工业级版本(包括pei/pam等)，可以预期在本方法和装置中是有用的。然后将表8中所示量的新鲜马血和生理盐水加入每个罐中，并且每分钟记录rbc沉降体积，持续20分钟：表8-新鲜马血研究：rbc的沉降速率*nd＝不可通过目测检测抽取成年马的血液，并以上述量向各罐中添加一定体积的新鲜血液(体温)。然后将每个罐顶部放置到位，混合内容物以确保生理盐水、血液和絮凝剂适当混合。使每个罐在室温下静置并进行观察。观察rbc沉降时间，间隔1分钟至30分钟进行记录。图18显示了各种混合物的rbc沉降速率。在没有絮凝剂的情况下，用血液混合物基本上不能观察到可目视检测的rbc沉降。相反，在室温下5分钟内，在所有含有絮凝剂的血液混合物中快速观察到rbc沉降。表9显示了多种大型动物的血细胞压积。平均红细胞血红蛋白(meancorpuscularhemoglobil)(mch)、平均红细胞血红蛋白浓度(meancorpuscularhemoglobinconcentration)(mchc)、平均红细胞体积(mcv)和红细胞压积(pcv)的值，可用于提供如本公开中所述的适当的自定义血液指示面板和血量估测方法。表9-反刍动物和马的红细胞数据的正常值(mch，平均血细胞血红蛋白；mchc，平均血细胞血红蛋白浓度；mcv，平均红细胞体积；pcv，红细胞压积)表10-白细胞血像数据正常值(成年动物)生物组分牛绵羊山羊马白细胞(x103/μl)4-124-124-135.4-14.3中性粒细胞(x1.03/μl)0.6-40.7-61.2-7.22.3-8.6条带(x103/μl)0-0.12稀有稀有0-1淋巴细胞(x103/μl)2.5-7.52-92-91.5-7.7单核细胞(x103/μl)0.025-0.840-0.750-0.550-1嗜酸性粒细胞(x103/μl)0-2.40-10.05-0.650-1嗜碱性粒细胞(x103/μl)0-0.20-0.30-0.120-0.29中性粒细胞/淋巴细胞(n:l)0.3-0.60.3-0.70.6-3.60.8-2.8表11-反刍动物和马止血数据正常值(根据duncanjr等人:veterinarylaboratorymedicine,第2版,ames,iowa,1986,iowastateuniversitypress；和kanekojj:clinicalbiochemistryofdomesticanimals,第3版,newyork,1980进行改动)实施例10-在絮凝剂存在下使用含有新鲜马血(无抗凝剂)的罐进行的流体中血量估测本实施例以从成年马(12岁，约1,200磅)抽取的新鲜血液进行。马血不含任何抗凝剂。马血的血细胞压积为32％至53％。马血在抽出后立即使用，并且其在絮凝剂聚dadmac(600mg)存在下在与生理盐水混合时处于体温(约101°f，38.3℃)。使用通过喷涂约9ml聚dadmac工作溶液作为絮凝剂进行涂覆的1,200ml罐。因此，1,200ml罐均匀涂覆有总共约600mg干重的聚dadmac作为絮凝剂。由于絮凝剂沿罐壁均匀分布，所以絮凝剂的量与处理过的罐中提供的流体体积成比例地释放。随时间记录以下rbc沉降体积。将体积为400ml的新鲜马血(未冷藏、体温、无抗凝剂)置于处理过的罐中。将已知体积的250ml生理盐水添加到罐中。罐中流体的总体积为650ml，提供了61.5％的血液溶液。混合后立即记录rbc沉降体积(仅重力，无离心)vm，直至30分钟时间段。静置30分钟后，手动搅拌罐，然后再次使其在室温下静置。再次观察含有搅拌血液的罐，以获得室温下rbc沉降的证据。表1230分钟观察期结束后，手动摇动罐，随后静置。发生rbc的再沉降，每分钟进行观察，持续30分钟，获得观察到如表14中所示的rbc沉降水平。表14时间rbc(沉降的rbc)00ml1min0ml2.50ml3.0min350ml4.0min300ml5.0min300ml8min300ml10300ml20300ml30300ml40300ml50min250ml该研究中证明，室温下在含有新鲜全血的溶液中rbc的沉降体积在长至约30-40分钟内保持相对稳定。通过搅拌，似乎新鲜血液样品中的rbc再次沉降以提供可辨别的rbc沉降体积线vm，沉降非常快速(3至4分钟对比16-19分钟，rbc沉降体积约250ml至300ml)。流体中存在的新鲜血液的实际已知体积为400ml。可以使用经用多次马血样品评估rbc沉降体积(vm)和hct信息的实验确定的马血动物类型的平均血细胞压积(42.5％，马平均hct)、vm(可观察到的rbc沉降体积(以ml计))和新的填充率值(n)通过公式计算总近似血量，可以沿着采集罐的垂直轴创建并提供目测血液指示面板以用于大型动物，如马。这将提供含有马血的生物流体中即刻可目测辨别的近似血量。可将用于经处理的罐或其他容器的血液指示面板的开发用于提供马失血的目测指示，特别是用于评估比目前可获得的更精确的马失血。可以使用兽医领域的普通技术人员在此提供的信息和结果来开发马血指示面板，而不超过普通和常规的实验优化试验和误差。实施例11-用于估测失血的人类儿科应用提供本实施例以提供用于有效测量儿科患者失血的罐和方法。如在本实施例中所使用的，儿科患者被定义为体重高达70至80磅的12岁以下的个体。人的总血量(tbv)与体重有关。儿童的tbv约为75-80ml/kg，并且在新生儿期更高(在第一个月末其从85ml/kg升至105ml/kg的峰值，然后在随后的几个月内逐渐下降)。因此，3.5公斤2周大婴儿的tbv的总血量将为约350ml，而一个10公斤15个月大婴儿的tbv的总血量将为约800ml。由于儿科患者的总血量大大减少，因此提供设计用于根据从儿科患者采集的较小血量中精确估测失血的血液采集和失血估测系统和装置尤其重要。因此，在婴儿或新生儿的情况下，用含有本文所述的絮凝剂和罐分界的容器制作本发明专门设计的儿科失血估测装置，所述罐的总体积容量小于1000ml，如约500ml或甚至约250ml。儿科患者的大量急性失血可能损害血液循环，因此应该仔细监测失血，以便能够检测到具体儿科患者大约12％tbv的失血量(约10ml/kg)特定，假设孩子状态稳定并且在操作开始时具有正常的血红蛋白(hb)水平。举例来说，在一些实施例中，合适的儿科失血采集装置将具有250ml的容量。对于典型的儿科失血量，罐将优选提供适当的d：h长宽比。装置的d(直径)通常为2至3英寸，并且h(高度)为约2英寸至约3英寸。利用这些较小的尺寸，采集的失血量将提供rbc合理快速但可监测的沉降速率，以便警告主治医生失血量是否已经达到规定的向儿科患者的输血量。优选地，需实现这样的沉降速率：其在15分钟内提供罐中采集的血液的rbc沉降。在一些实施方案中，250ml容器具有圆锥形状(图14)。絮凝剂将在外科手术干预事件时提供给容器，或者可以作为对罐的预处理而提供(如通过喷涂)。向250ml采集装置中添加的絮凝剂的量为约50mg至约150mg，或约125mg，或足以达到溶液总体积的至少0.3％、0.4％或0.75％的量。为了便于描述，儿科组患者的以下平均总血量可用于计算何时发生12％或更多的失血。还可以计算儿科患者的类别/组(早产儿、足月新生儿、婴儿)的平均血细胞压积值，以及沿罐的一条轴线提供这些患者组的平均血细胞压积值标记，以便为主治医师或麻醉师提供现成的目测参考，从而参考并比较接受该操作的患者获得的血细胞压积：·早产新生儿95ml/kg·足月新生儿85ml/kg·婴儿80ml/kg可以通过公式使用具体体重范围和/或年龄的人类儿童或成年男性或成年女性的平均血细胞压积vm(可观察到的rbc沉降体积，以ml计)，以及确定的人血填充率值(n)来计算总近似血量。通过对rbc沉降体积(vm)和hct信息进行的多次人血样品评估，可以为人类，特别是儿科人体模型准备沿采集罐竖直轴定位的目测血量指示面板。这将提供含有人血的生物流体中包含的体积小于约250ml的可立即目测辨别的近似血量。鉴于本文提供的教导，本领域普通技术人员可以开发具有用于液体中的人血量评估特别是用于评估小的人体失血量的血液指示面板的竖直罐或开发其他容器＝，而不超过常规和普通量的试验和误差。实施例12-用于失血量采集的可折叠处理容器本实施例给出了可折叠塑料状容器(袋)，其可用于生物学液体损失采集，并用于估测失血量。可预见这种采集装置在作战环境或医疗设备空间有限的任何其他情况下特别有用。设想塑料袋容器将包括一定量的rbc絮凝剂，其适于提供本文所述的rbc沉降和失血估测特征。在一些方面，袋可以放置在支撑容器内，如盒子、罐或其他结构。袋还可以包括与体积测量(例如毫升)对应的沿袋竖直轴的多个标记。在一些方面，将体积容量为约1000ml含有约300毫克至约4700毫克絮凝剂如聚dadmac的透明塑料袋置于袋中。在一些实施方案中，袋可包括50ml、100ml、200ml、250ml、400ml、500ml、600ml、750ml和1升标志物处的校准分界。该袋还可以包括bip，如以粘合带形式，其可以放置在袋上并且用于基于采集袋/容器中的rbc沉降水平提供液体中近似血量的可目测辨别的指示。图13提供了该实施方案的示例。还提供了设计用于1200ml采集罐(如图11a中所示的罐)的含有rbc絮凝剂和校准的人血bip的插入袋。在这样的实施方案中，罐本身不需要用rbc絮凝剂处理，相反，插入袋含有rbc絮凝剂。插入袋还可任选地包括用于人血的校准bip。实施例13-失血采集试剂盒包含血量指示面板的含有絮凝剂的罐(1.2ml、500ml、250ml、10ml)可以与具有一定长度的抽吸管和第二长度的适于将生理盐水添加到罐和/或可折叠封套中的管一起作为试剂盒提供。可以提供说明书作为用于终端用户的试剂盒的一部分。实施例14-高温老化稳定性测试该实施例证明了在将聚dadmac涂覆的罐暴露于高温之后，含有血液的流体中rbc絮凝剂聚dadmac的稳定性和提供rbc聚结(絮凝)的保留活性。在本研究中，使用的絮凝剂是聚dadmac，其作为罐上的涂层提供，用于采集材料，如在外科手术过程中采集的含有血液组分的生物液体材料。将涂覆的罐在55℃下孵育6周(相当于室温下一年的保质期)。然后在高温老化之后，在功能测试中将涂覆的罐与未经历高温老化测试的涂覆的罐进行比较。材料：1)对照组-涂覆有600mg聚dadmac的四个罐(cardinalhealth)(图1)，使其在室温(≈22℃)下干燥过夜。2)实验组-涂覆有600mg聚dadmac的四个罐(cardinalhealth)，使其在室温(≈22℃)下干燥过夜。然后将罐在设定为55℃的对流烘箱中孵育六周。3)牛全血(innovativeresearchlot#24301)，其储存在冰箱中并在实验前加热至室温。4)室温下的等渗生理盐水(thermoscientific，lot#994448)。方法：1)分别从实验批次和对照批次中随机选择4个罐。2)将购自商业供应商的牛全血(含柠檬酸钠)分别在室温下与等渗生理盐水混合至20％和40％v/v血液的浓度。20％血液混合物的总体积为1000ml，且40％血液混合物的总体积为500ml。3)每次测试两个罐：一个实验vs.一个对照。通过真空抽吸将混合的血液和生理盐水溶液引入罐中。4)根据罐上现有的刻度，每分钟记录红细胞沉降量，持续20分钟。5)20分钟后，将两组图像进行比较。6)将数据绘制为rbc沉降量与时间的函数以进行比较。结果：图16a和16b比较了将血液生理盐水混合物引入对照和实验(热处理)罐后rbc的沉降。使用1000ml20％血液与生理盐水混合物(图16a)和500ml40％血液与生理盐水混合物(图16b)进行测试。两者都含有200ml牛血。每个测试重复一次。数据显示了20％血液测试中rbc沉降的体积变化曲线的紧密重叠。在将混合物引入对照和实验罐中后约15分钟，所有rbc体积沉降稳定在约125ml左右。在40％血液测试中，尽管一个实验的体积沉降滞后，但15分钟后所有体积沉降均稳定在约125ml。图17显示了对照和实验罐中的沉降rbc的图像。图17a(图i和ii)和图17b(图i和ii)比较了将血液和生理盐水混合物引入对照和实验(热处理)罐后rbc的沉降。使用1000ml20％牛血与生理盐水混合物(图17a)和500ml40％血液与生理盐水混合物(图17b)进行测试。已知两种液体均含有200ml牛血。各测试均重复一次。数据显示了20％血液测试中rbc沉降的体积变化曲线的紧密重叠。在将混合物引入对照(图17a)和实验(图17b)罐中后约15分钟，所有rbc体积沉降水平均稳定在约125ml。在40％血液测试中，尽管一个实验的体积沉降滞后，但15分钟后rbc沉降体积稳定在约125ml体积标记处。图17a和17b显示了对照(17a)和实验(17b)罐中沉降的rbc体积。研究证明，在热处理后对照和实验罐的功能之间没有可辨别的差异。在55℃下老化测试六周后，聚dadmac涂覆的罐显示无聚dadmac功能性降解或者促进液体中rbc絮凝的效果未降低。预期絮凝剂涂覆的罐(聚dadmac涂覆的罐)具有至少一年的保质期而不损失絮凝剂活性，以提供室温下储存的流体中的血量估测。上述实施例意图向本领域普通技术人员提供如何制备和使用所述方法的实施方案的完整公开和描述，用于预测可对目标生物分子进行选择的修饰，但并非意图限制发明人所认为的本公开的范围。本领域技术人员可以对实施本公开的上述模式进行修改，且其意图落入所附权利要求的范围内。应理解，本公开不限于特定的方法或系统，其当然可以变化。还应理解，本文使用的术语仅出于描述具体实施方案的目的，而不意图具有限制性。已经描述了本公开的多个实施方案。然而，应该理解，在不脱离本公开的精神和范围的情况下，可以进行各种修改。因此，其他实施方案也在以下权利要求的范围内。当前第1页12