含有羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物的用于改善皮肤状态的化妆料组合物的制作方法

本发明涉及一种含有羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物的用于改善皮肤状态的化妆料组合物，更加详细而言，涉及一种作为有效成分含有羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物的用于强化皮肤屏障功能、改善皮肤保湿力以及促进皮肤角质更新的化妆料组合物。

背景技术：

皮肤(skin)中位于最外层的表皮(epidermis)其最重要的功能为，防御从外部的多种刺激(化学物质、大气污染物质、干燥的环境、紫外线等的物理或者化学性刺激因素)和阻止体内水分通过皮肤过度发散的保护功能，该保护功能仅在由角质形成细胞构成的角质层正常形成时才能维持其功能。表皮中存在于最外层的角质层(stratumcorneum,horneylayer)由角质形成细胞形成，由结束分化的角质细胞和围绕角质细胞的脂质层构成(elias,j.invest.dermatol.,80:44s-49s,1983)。角质细胞是在表皮最下层持续增殖(proliferation)的基底细胞(basalcell)按阶段经过形态以及功能上的变化，上升至皮肤表面的特定细胞，经过一定时间后，老化的角质细胞从皮肤脱落，新的角质细胞代替其功能，将所述反复的一系列的变化过程称为“表皮细胞的分化”或者“角化(keratinization)”。角化过程中，角质形成细胞生成天然保湿因子(naturalmoisturizingfactor；nmf)和细胞间脂质(神经酰胺、胆固醇、脂肪酸)的同时，形成角质层，使角质层具有牢固性和柔软性，从而拥有作为皮肤屏障(skinbarrier)的功能。

然而，所述角质层因过度洁面或者洗浴等的生活习惯因素、干燥的大气、污染物质等的环境因素以及特硬性皮炎皮肤或者老年状皮肤之类的内在疾病等而其功能可能容易发生损坏，实际上进入现代后因更多的因素而最近诉苦干燥皮肤症状以及由此导致的诸多障碍的人逐渐增多。因此，为了保持适当的皮肤水分，进行过许多从外部供应水分或者用于防止水分从体内流失的研究，实际上开发出多种具有锁水功能的保湿剂(moisturizer)，从而主要多用于化妆品领域中。

生活环境中对人类的危害因素逐渐增多，老龄化人口急剧增多，同时角质层的生成-脱落速度(turnoverrate)变慢，角质形成细胞的脂质合成能力变低，或者在表皮中正常细胞的分裂、成熟以及分化不顺利，从而具有角质层的保湿因子和脂质的量减少而无法维持正常角质层的功能的状态，即，皮肤屏障功能被瓦解的状态的皮肤的人逐渐增多。

因所述异常的表皮细胞的分裂、分化，皮肤诱发皮肤干燥症、特异性皮炎以及牛皮癣等多种皮肤疾病，对于该类皮肤疾病，仅通过本身仅具有锁水功能的通常的保湿剂虽然可以稍微缓解该症状，然而难以期待根本上的治愈。

人的皮肤随着年龄的增长，厚度变薄，皱纹变多，弹力下降，不仅如此，皮肤血色也变暗淡，常发生皮肤问题，引起黄褐斑、雀斑以及老年斑也会增加等多种变化。

随着老化，会发生作为构成皮肤的物质的胶原蛋白、弹性蛋白、透明质酸以及糖蛋白的含量以及排列发生变化或者变少的症状，因自由基以及活性有害氧而受到氧化压力。另外，因老化的进行或者紫外线而在构成皮肤的大部分细胞中，作为酵素的环氧合酶-2(cox-2,cyclooxygenase)的生物合成增加，其中，该酵素周知生成引起炎症的促炎性细胞因子(proinflammatorycytokine)，由于该促炎性因子而作为分解皮肤组织的酵素的基质金属蛋白酶(mmp，matrixmetalloproteinase)的生物合成增加，而且因inos(induciblenitricoxidesynthase)而no(一氧化氮；nitricoxide)的生成增加。

正在开发具有皮肤保湿等的改善皮肤状态功效的多种化妆品原料，然而化学原料具有引起皮肤过敏或者皮肤病等副作用的问题，动物性原料则因消费者的喜好度的下降和疯牛病等的风波而对动物性原料的使用急剧减少，因此植物性等环保原料备受瞩目。

作为植物性原料的一例，可以举出羽衣甘蓝(kale；brassicaoleracea；brassicaoleraceael.var.acephaladc.)、豆瓣菜(watercress；nasturtiumofficinale)、甜菜根(beet；betavulgaris)等。

羽衣甘蓝为两年生草本植物，通过种子繁殖。羽衣甘蓝富含维生素、矿物质、氨基酸、脂肪、蛋白质、酶、纤维质等。尤其，羽衣甘蓝相比其他水果或者蔬菜，维生素a、b1、b2、c和ca高出最高405倍，β-胡萝卜素的含量高而预防癌症、降低胆固醇，防止动脉生成血栓。另外，周知羽衣甘蓝中含有的纤维素和叶绿素具有降低胆固醇、调节血压的功效，因此对造血、贫血治疗、解毒作用、胃肠病等成人病有功效，还有助于肝功能的改善。

豆瓣菜原产于欧洲中部、中亚，为多年生草本植物。中世纪法国将西洋菜的精油作为生发剂或者养发剂来使用。周知豆瓣菜营养上富含钙、磷、铁等无机质，维生素a或者c、钙、铁丰富，还具有防止血液氧化的效果或者强壮效果、消化、解热作用，对贫血症或者妊娠期的女性有益。

甜菜为双子叶植物纲中央种子目藜科的一年生或两年生草本植物，含有作为多糖类的半乳聚糖(galactans)、果胶(pectin)以及天冬酰胺(asparagine)、谷氨酰胺(glutamine)等的氨基酸、除此之外的有机酸、低聚糖等多种成分。甜菜根的糖分含量为15-16％，蔗糖(sucrose)为主要成分，为红色素的主要供应源。甜菜的主要色素为甜菜色素(betalain)成分，含有显示红色和紫色的甜菜红素(betacyanin)和显示黄色的甜菜黄素(betaxanthin)。周知作为所述甜菜的主要功效，具有降血糖以及预防或者缓解糖尿病并发症的效果、疼痛和炎症治疗效果、对流行性感冒的感染的保护效果、抗癌效果、对疱疹病毒的抗病毒功效，具有优秀的抗氧化能力。

周知海水由96.5重量％的纯水和3.5重量％的无机盐类构成，在构成所述无机盐类的30多种主要元素中，约99％为na⁺、k⁺、ca²⁺、mg²⁺、cl^-以及so4^2-。全世界海水的平均盐分浓度为约35‰(permil)，其是指在1kg的海水中溶解有约35g的盐类。然而，海水的盐分浓度可以根据日照量和蒸发量、基于降水量的淡水流入、干潮满潮之差带来的海水流入等而发生改变。虽然海水中包含的盐分浓度会根据地区而不同，然而海水中包含的无机盐类的主要元素(na⁺、k⁺、ca²⁺、mg²⁺、cl^-以及so4^2-等)之间的构成比率是比较一定的。一方面，观察海水的物理特性，海水的ph为ph8.1，海水密度为1.02-1.04g/cm³，海水的tds(总溶解固体；totaldissolvedsolids)为35000-45000mg/l，海水的比热容、热容量以及表面张力较大。

海洋深层水(deepoceanwater)是指不生成光合成的有机物，水深200m以下的海水。表层水发生光合成作用，因此水中的氮、磷、硝酸等被消耗，然而水深200m以下的深层区域则因太阳光无法到达，因此没有消耗营养物质的植物性浮游生物，几乎不发生光合成。由此，通过光合成消耗的氮、磷、硝酸等的无机营养盐类依旧留在深层水中。海洋深层水富含人体所需的矿物质或者必要微量元素，能够有助于补充容易缺乏的矿物质，因此可以有用于化妆料组合物的制备中。

熔岩海水(magmaseawater)是指海水被玄武岩层和沙泥质层自然过滤而流入到内部，长时间熟化的水，为淡水地下水和盐水相遇，即淡盐水混合地带(过渡带)中存在的海水，韩国是从济州特别自治道朝天邑分布至南元邑地区和城山邑地区等，从海岸朝陆地越来越少。熔岩海水相比一般海水以及深层水，不仅富含更多钠、镁、钙以及钾等必要矿物质，还相比深层水和三多水，富含更多的一般有用矿物质成分(铁、锰、锌、钼等)。另外，熔岩海水为未检测出大肠菌、硝酸态氮、磷酸盐磷、酚类等的纯净的地下水资源，未检测出砷、水银、镉等有害成分，或者检测到极其微量的铅，因此可以有用于化妆料组合物的制备中。

观察与由羽衣甘蓝提取物、豆瓣菜提取物以及甜菜根提取物构成的混合物有关的以往的研究，有报告指出含有羽衣甘蓝的植物性混合物的发酵提取物具有皮肤保湿效果，含有豆瓣菜提取物的植物性混合物具有促进生发的效果，甜菜根提取物具有皮肤保湿效果(参考以下专利文献1-3)。然而，尚未有报告指出在羽衣甘蓝、豆瓣菜、甜菜根使用海水来确认化妆学上关注的活性的研究结果。

在所述技术背景下，本发明人为了开发作为有效成分含有植物性提取物(多个)的用于改善皮肤状态的化妆料组合物而不断努力的结果，确认到含有利用海水制备的羽衣甘蓝提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物的组合物具有强化皮肤屏障功能、显著提高皮肤保湿功效的效果，由此完成了本发明。

【现有技术文献】

【专利文献】

(专利文献1)韩国授权专利第10-0687468号(2007年2月21日授权)

(专利文献2)韩国授权专利第10-1580283号(2015年12月18日授权)

(专利文献3)日本公开专利特开2000-290162(2000年10月17日公开)

技术实现要素：

技术问题

本发明的目的在于，提供一种作为有效成分含有羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物的用于改善皮肤状态的化妆料组合物。

技术方案

为了解决所述目的，本发明提供一种作为有效成分含有羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物的用于改善皮肤状态的化妆料组合物，优选为作为有效成分含有所述混合物的用于强化皮肤屏障功能、改善皮肤保湿力或者促进皮肤角质更新(turnover)的化妆料组合物。

本发明还提供一种在用于强化皮肤屏障功能的化妆料组合物或者化妆品的制备中，羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物的用途，尤其作为皮肤屏障功能强化剂的用途。

本发明还提供一种在用于改善皮肤保湿力的化妆料组合物或者化妆品的制备中，羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物的用途，尤其作为皮肤保湿力改善剂的用途。

本发明还提供一种在用于促进皮肤角质的更新的化妆料组合物或者化妆品的制备中，羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物的用途，尤其作为皮肤角质细胞的更新促进剂的用途。

发明效果

可以将根据本发明的含有羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物的用于改善皮肤状态的化妆料组合物用在具有强化皮肤屏障功能、改善皮肤保湿力以及促进皮肤角质更新功能的化妆品的制备中。

附图说明

图1是示出对利用海水或者净化水提取的羽衣甘蓝提取物、豆瓣菜提取物以及甜菜根提取物的混合物进行处理，由此角质细胞的透明质酸合成酶2(hyaluronansynthase2，has2)以及丝聚蛋白(filaggrin)各自的mrna表达水平的图。

图2是示出对利用海水或者净化水提取的羽衣甘蓝提取物、豆瓣菜提取物以及甜菜根提取物的混合物进行处理，由此角质细胞的闭合蛋白(occludin，ocln)的mrna表达水平的图。

具体实施方式

用于实施发明的优选形态

除非另有定义，本说明书中使用的所有技术及科学术语与本发明所属技术领域中熟练的专家通常所理解的术语具有相同含义。一般来说，本说明书中使用的命名法在本技术领域中公知且常用。

以下，针对本发明进行进一步的详细说明。

本说明书中，表达长度、面积、体积、时间(期间)、浓度、含量、温度等时使用的术语“约”是指在该数值或者数值范围中存在最大10％的允许误差。

在本发明的一实施例中，通过生成作为皮肤的主要保湿因子的透明质酸的透明质酸合成酶2(hyaluronansynthase2，has2)以及参与到角质形成细胞的天然保湿因子(naturalmoisturizingfactor)合成中的丝聚蛋白(filaggrin)的mrna表达水平，确认由羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物构成的混合物的皮肤保湿功能强化效果。其结果，如下图1所示，确认到相比比较例1(由羽衣甘蓝水提取物、豆瓣菜水提取物以及甜菜根水提取物构成的混合物)，实施例1(由羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物构成的混合物)的has2以及丝聚蛋白的mrna表达量显示显著高的水平(参考试验例1)。

在本发明的其他实施例中，通过参与到形成紧密连接(封闭连接，tightjunction，tj)的闭合蛋白(occludin，ocln)的mrna表达水平，确认由羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物构成的混合物的皮肤屏障功能强化效果。其结果，如下图2所示，确认到(i)相比比较例1(由羽衣甘蓝水提取物、豆瓣菜水提取物以及甜菜根水提取物构成的混合物)，实施例1(由羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物构成的混合物)的闭合蛋白的mrna表达量显示显著高的水平，(ii)实施例1中，相比0.15％(v/v)处理浓度，在0.3％(v/v)处理浓度中闭合蛋白的mrna表达量显示显著高的水平(参考试验例2)。

因此，本发明的一观点为，涉及一种作为有效成分含有羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物的用于改善皮肤状态的化妆料组合物，优选为作为有效成分含有所述混合物的用于强化皮肤屏障功能、改善皮肤保湿力或者促进皮肤角质更新的化妆料组合物。

在本发明中，所述羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物的特征可以为，从羽衣甘蓝、豆瓣菜以及甜菜根收获各自的海水提取物之后进行混合的混合物，或者为混合羽衣甘蓝、豆瓣菜以及甜菜根之后利用海水提取的混合物，优选为从羽衣甘蓝、豆瓣菜以及甜菜根收获各自的海水提取物之后进行混合的混合物。

所述羽衣甘蓝、豆瓣菜以及甜菜根的特征可以为，可以通过公知的天然物质提取方法提取，提取时使用的溶剂为海水，所述溶剂的量可以根据提取的羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的量而不同。例如，可以相对于羽衣甘蓝、豆瓣菜以及甜菜根各自的重量，添加5-1000倍，优选为10-100倍，更加优选为15-50倍，最优选为20-30倍重量的海水进行浸渍，从而制备各自的海水提取物之后，以适当的比率混合各个海水提取物。与此不同地，可以以适当的混合(重量)比混合羽衣甘蓝、豆瓣菜以及甜菜根的2种或者3种之后，在该混合物添加相对于重量5-1000倍，优选为10-100倍，更加优选为15-50倍，最优选为20-30倍重量的海水进行浸渍，从而制备混合海水提取物。

制备所述羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物时的浸渍温度为5-60℃，优选为12-30℃，最优选为10-20℃。

制备所述羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物时的浸渍时间不受特别限制，例如为1-24小时，优选为2-12小时，最优选为4-6小时。

所述羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物可以根据需要由公知的天然物质提取法制备。例如，可以通过冷浸提取、热水提取、超声波提取、回流冷却提取、加热提取法提取，可以优选通过热水提取或者回流冷却提取法提取，可以反复提取1次至10次，优选为2次至7次。

所述羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物可以过滤后作为液相使用，可以优选通过喷雾干燥或者冷冻干燥的干燥工艺进行固体化而使用。更加优选为，可以在喷雾干燥或者冷冻干燥之前混合糊精进行干燥。

本发明中，所述羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物的特征可以为，将羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物以重量为基准，以1:1:3-50，更加优选为1:1:4-20，最优选为1:1:5-15的组合比进行混合。

本发明中，所述组合物的特征可以为，以组合物的总重量为基准，以0.001-40重量％，更加优选为0.01-30重量％，最优选为0.1-10重量％含有羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物。

本发明中，所述组合物考虑到剂型稳定性和依据与化妆品的安全有关的规则的限用量，当所述组合物中羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物的总含量以组合物的总重量为基准不足0.001重量％时，无法体现作为化妆品所要达到的强化皮肤屏障功能、改善皮肤保湿力以及促进皮肤角质更新的功效，当所述组合物中羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物的总含量以组合物的总重量为基准超过40重量％时，无法充分溶解到剂型中，而无法与化妆品剂型的其他成分稳定配合，而且使用在皮肤上时，可能会有过度刺激皮肤等安全上的问题。

本发明中，所述海水可以是一般海水、海洋深层水、熔岩海水等，然而并不局限于此，优选为海洋深层水、熔岩海水或者其混合物。所述海洋深层水优选从近海的海底600至660m地点取水，可以根据取水地点的海水特性而不同。所述熔岩海水优选从涌出熔岩海水的水原地区的地表面挖掘而从地下(平均海平面基准)30至150m地点，例如从44.35m、86.35m或126.35m地点取水。

本发明中，所述海水的密度可以根据海水的温度、压力以及盐度(salinity)而不同，一般为1000-2000g/l，优选为1002-1100g/l，最优选为1005-1045g/l。

本发明中，所述海水可以使用利用灭菌过滤器，优选为0.2μm的过滤器去除取水的海水的微生物等杂质之后，通过公知的脱盐方法，例如闪蒸法、海水冷冻法、反渗透压法、离子交换树脂法、电渗析法(electrodialysis；ed)，或者使用市面上流通的电渗析设备或者脱盐设备进行脱盐的海水，可以优选使用通过将电导率值设为不同，从而能够调整脱盐海水的矿物质浓度以及硬度的电渗析法脱盐的海水。例如，可以通过将电导率值调整为8ms/cm、10ms/cm、12ms/cm、15ms/cm等，去除1价阳离子以及2价阴离子的脱盐过程，准备脱盐海水。

本发明中，所述组合物的特征可以为，增加对皮肤细胞的透明质酸合成酶2(hyaluronansynthase2，has2)进行编码的基因的表达水平。

本发明中，所述组合物的特征可以为，增加对皮肤细胞的丝聚蛋白(filaggrin)进行编码的基因的表达水平。

本发明中，所述组合物的特征可以为，增加对皮肤细胞的闭合蛋白(occludin，ocln)进行编码的基因的表达水平。

在根据本发明的组合物中，所述海水不仅作为提取溶剂，还可以作为辅助成分含有，所述辅助成分用于提高所述羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物的溶解度，还用于进一步提高所要达到的皮肤状态改善效果。

本发明中，含有羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物的化妆料组合物的特征可以为，剂型化为选自由柔软性化妆水、收敛性化妆水、营养性化妆水、乳液、眼霜、营养霜、按摩霜、洁面霜、洁面泡沫、卸妆水、粉、精华以及面膜而成的组中的任一种。

另外，所述组合物可以含有保湿剂(多元醇等)、粘度调节剂、增粘剂、ph调节剂、脂肪、有机溶剂、溶解剂、浓缩剂、凝胶剂、软化剂、皮肤保湿剂、悬浮剂、稳定剂、发泡剂(foamingagent)、芳香剂、表面活性剂、水、离子型乳化剂、非离子型乳化剂、填充剂、金属离子封锁剂、螯合剂、保存剂、维生素、润湿剂、油、染料、颜料、亲水性活性剂、亲油性活性剂、脂囊泡或者与化妆品中通常使用的任意其他成分相同的化妆品学或者皮肤科学领域中通常使用的助剂。所述助剂的导入量为在化妆品学或者皮肤科学领域通常所使用的量。另外，为了增加皮肤状态改善效果，本发明的组合物可以含有皮肤吸收促进物质。

本发明中包含的“多元醇(polyol)”可以是指多价醇，即具有两个以上的羟基(-oh)的脂肪族化合物。含有两个羟基的称为二醇或者二元醇(diol)，含有三个羟基的称为丙三醇，含有四个羟基的称为季戊四醇。

根据本发明的优选形态，所述多元醇可以选自含由山梨糖醇(sorbitol)、聚乙二醇(polyethyleneglycol)、聚丙二醇(polypropyleneglycol)、二丙二醇(dipropyleneglycol)、丙烯乙二醇(propyleneglycol)、1,3-丁二醇(1,3-butyleneglycol)、甘油(glycerin，glycerol)、丙二醇(propanediol)、乙基己二醇(ethylhexanediol)、1,2-己二醇(1,2-hexanediol)、peg/ppg/聚丁二醇-8/5/3甘油(peg/ppg/polybutyleneglycol-8/5/3glycerin)以及戊二醇(pentyleneglycol)的组，更加优选为选自含有甘油、丙烯乙二醇(propyleneglycol)、乙基己二醇、丙二醇(propanediol)、1,3-丁二醇、山梨糖醇以及聚乙二醇的组，最优选为选自含有甘油、丙烯乙二醇(propyleneglycol)、丁二醇、二丙二醇以及聚乙二醇的组。

所述多元醇以1-20重量％的量含有，当所述多元醇成分的含量不足1重量％时，乳化力以及保湿力可能会变弱，当所述多元醇成分的含量超过20重量％时，使用感可能会降低。

所述组合物中含有的油可以为选自由烃类油、高级脂肪酸类油、酯类油以及甘油酯类油构成的组中的一种以上，然而并不局限于此。

所述油可以为选自以下中的一种以上，例如选自角鲨烷(squalane)、聚丁烯(polybutene)、聚异丁烯(polyisobutene)、聚癸烯(polydecene)以及氢化聚癸烯(hydrogenatedpolydecene)等的烃类油；选自鲸蜡醇、十八烷醇、二十二烷醇、2-辛基十二烷醇以及异鲸蜡醇等的高级脂肪酸类油；选自棕榈酸异丙酯、2-辛基十二醇肉豆蔻酸酯、肉豆蔻酸异丙酯、丁基辛醇水杨酸酯、辛酸十六烷基酯、鲸蜡醇辛基己酸酯(cetyloctylhexanoate)、椰油醇辛酸酯/癸酸酯、椰油酸癸酯、异硬脂醇异硬脂酸酯、季戊四醇四(乙基己酸)酯以及碳酸二辛酯等的酯类油；以及选自辛酸/癸酸甘油三酯(caprylic/caprictriglyceride)等的甘油类油等。

所述油以组合物的总重量为基准含有5-10重量％，如果该含量不足或者超过所述范围，则组合物的稳定性降低而难以制备各种化妆品产品。

本发明中，所述粘度调节剂起到进一步提高肌肤中的紧张度、紧贴感以及紧致感效果的作用，起到提高化妆料的粘度，方便涂敷的作用。

所述组合物中包含的粘度调节剂例如为选自由聚乙烯醇、丙烯酸羟乙酯-丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物、聚羧乙烯聚合物、果胶、海藻酸钠、羧甲基纤维素、羟乙基纤维素、聚丙烯酸、烷基丙烯酸-丙烯酸共聚物以及黄原胶而成的组中的一种以上的化合物，然而并不局限于此。

所述组合物中包含的增粘剂是指增加粘度的物质，其中油增粘剂是指将油作为主要成分的增粘剂。所述油增粘剂包括蔗糖酯类、烷基松脂酸酯类、糊精酯或者聚甘油酯类。更加具体地，所述油增粘剂包括选自由二聚亚油醇氢化松脂酸酯(dimerdilinoleylhydrogenatedrosinate)、植物甾醇/异硬脂醇/鲸蜡醇/硬脂醇/山嵛醇二聚亚油酸酯(pytosteryl/isosteary/cetyl/stearyl/behenyldimerdilinoleate)、聚甘油-10-十二山嵛酸酯(polyglyceryl-10-dodecabehenate)、蔗糖油酸酯(sucroseoleate)、蔗糖四硬脂酸酯三乙酸酯(sucrosetetrastearatetriacetate)、甘油/聚甘油-6(异硬脂酸/山嵛酸)酯(glyceryl/polyglyceryl-6-isostearate/behenateesters)、糊精棕榈酸酯/乙基己酸酯(dextrinpalmitate/ethylhexanoate)、糊精肉豆蔻酸酯(dextrinmyristate)、甘油山嵛酸酯/二十酸酯(glycerylbehenate/eicosadioate)以及氢化松香(hydrogenatedrosine)而成的组中的一种以上。

所述组合物中包含的螯合剂中乙二胺四乙酸二钠(disodiumedta)与金属离子发生结合而起到防止它们进行催化作用的作用，阻止制备化妆品时使用的成分和制备工艺中混入可能性高的金属离子的活性，起到防止化妆品的质量降低、腐败等的作用。另外，起到促进剂的作用而有助于使皮肤有效吸收有效成分。优选为，在化妆料组合物中以0.01-0.5重量％的范围含有所述乙二胺四乙酸二钠。

用于实施发明的形态

以下，通过实施例更加详细说明本发明。本技术领域中具有通常知识的人员应明确该实施例仅是用于示例本发明，不应解释为本发明的范围受该实施例的限制。

<羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物的制备>

原料：从零售商购入羽衣甘蓝、豆瓣菜以及甜菜根，购入市售的淡水，海水是从(株)durae供应得到并用于羽衣甘蓝、豆瓣菜以及甜菜根各自的提取物的制备中。

为了比较海水和淡水的成分，向韩国化学试验研究院委托成分分析，海水的各个取水水深的矿物质含量(ppm)为如下表1所示。

从所述表1中确认到海水根据取水地点而与淡水在钒(v)、锗(ge)、硒(se)等的微量元素项目中存在显著差异。

以下，制备羽衣甘蓝、豆瓣菜以及甜菜根各自的提取物时使用的海水为将所述表1的海水2使用0.2μm的过滤器进一步过滤杂质之后，利用电渗析法(electrodialysis；ed)脱盐后使用的。

【制备例1】羽衣甘蓝海水提取物的制备

将羽衣甘蓝切成适当大小之后，利用粉碎机准备羽衣甘蓝粉碎物，然后在20g的所述粉碎物添加约0.5l的海水之后，在约15℃下浸渍约5小时，然后进行过滤获得羽衣甘蓝海水提取物(过滤液)。

【制备例2】豆瓣菜海水提取物的制备

将豆瓣菜切成适当大小之后，利用粉碎机准备豆瓣菜粉碎物，然后在20g的所述粉碎物添加约0.5l的海水之后，在约15℃下浸渍约5小时，然后进行过滤获得豆瓣菜海水提取物(过滤液)。

【制备例3】甜菜根海水提取物的制备

将甜菜根切成适当大小之后，利用粉碎机准备甜菜根粉碎物，然后在20g的所述粉碎物添加约0.5l的海水之后，在约15℃下沉浸约5小时，然后进行过滤获得甜菜根海水提取物(过滤液)。

【比较制备例1】羽衣甘蓝水提取物的制备

将羽衣甘蓝切成适当大小之后，利用粉碎机准备羽衣甘蓝粉碎物，然后在20g的所述粉碎物添加约0.5l的净化水之后，在约15℃下沉浸约5小时，然后进行过滤获得羽衣甘蓝水提取物(过滤液)。

【比较制备例2】豆瓣菜水提取物的制备

将豆瓣菜切成适当大小之后，利用粉碎机准备豆瓣菜粉碎物，然后在20g的所述粉碎物添加约0.5l的净化水之后，在约15℃下浸渍约5小时，然后进行过滤获得豆瓣菜水提取物(过滤液)。

【比较制备例3】甜菜根水提取物的制备

将甜菜根切成适当大小之后，利用粉碎机准备甜菜根粉碎物，然后在20g的所述粉碎物添加约0.5l的净化水之后，在约15℃下沉浸约5小时，然后进行过滤获得甜菜根水提取物(过滤液)。

【实施例1】羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物

利用制备例1-3以1:1:10的重量比混合羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物制备混合物。

【比较例1】羽衣甘蓝水提取物、豆瓣菜水提取物以及甜菜根水提取物的混合物

利用比较制备例1-3以1:1:10的重量比混合羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物制备混合物。

<试验例1：由羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物构成的混合物对皮肤保湿功能强化功效的评价>

为了评价基于实施例1的羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物试料的皮肤保湿功能强化效果，确认了生成作为皮肤的主要保湿因子的透明质酸的透明质酸合成酶2(hyaluronansynthase2，has2)以及参与到角质形成细胞的天然保湿因子(naturalmoisturizingfactor)合成中的丝聚蛋白(filaggrin)的mrna表达水平(参考papakonstantinouetal.,dermatoendocrinol.,4(3):253-8,2012；以及rawlingsetal.,dermatolther.,17,suppl1:43-8,2004)。

具体为，将实施例1的由羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物构成的混合物试料或者比较例1的由羽衣甘蓝水提取物、豆瓣菜水提取物以及甜菜根水提取物构成的混合物试料以体积为基准以0.15％或者0.3％处理浓度进行稀释，处理到角质形成细胞之后，测定角质形成细胞的has2以及丝聚蛋白的mrna表达水平，比较实施例1和比较例1的皮肤保湿功能强化效果。

has2以及丝聚蛋白的表达量的测定方法：将作为角质形成细胞的hekn细胞(humanepidermalkeratinocyte,neonatal)利用用于细胞培养的培养基(添加有kgm-goldkeratinocytegrowthmediumsinglequot(lonza#192152)的kbm-goldkeratinocytebasalmedium(lonza#192151))在60mm细胞培养皿(cellculturedish)以2×10⁵细胞/皿(cells/dish)的密度分株之后，在37℃、5％co2培养器上培养约24小时直到完成80％左右汇合(confluency)。在经培养的hekn细胞以0.3％(v/v)的处理浓度(即，在盛有2910μl的用于细胞培养的培养基的60mm细胞培养皿添加90μl的实施例1或比较例1的试料)处理实施例1的试料或者比较例1的试料之后，培养约24小时。然后，去除用于所述hekn细胞培养的培养基，添加1ml的trizol(invitrogen；美国英杰生命技术有限公司)，按照invitrogen公司的rna分离法分离rna。对所述经分离的rna利用紫外线检测仪(hewlettpackard；惠普)在260nm下对rna定量之后，进行逆转录(reversetranscription)合成cdna，进行实时pcr(real-timepolymerasechainreaction)测定参与到角质形成细胞的tj形成的has2以及丝聚蛋白的mrna表达水平。其中，为了分析对各个试料的相对性表达形态，以rpl13a(ribosomalproteinl13a)的mrna的表达量为基准进行了补正。

其结果，如下图1所示，确认到相比比较例1(由羽衣甘蓝水提取物、豆瓣菜水提取物以及甜菜根水提取物构成的混合物)，实施例1(由羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物构成的混合物)的has2以及丝聚蛋白的mrna表达量显示显著高的水平。

<试验例2：由羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物构成的混合物对皮肤屏障功能强化功效的评价>

为了评价基于实施例1的羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物试料的皮肤屏障功能强化效果，确认了参与到角质形成细胞的紧密连接(封闭连接，tightjunction，tj)形成中的闭合蛋白(occludin，ocln)的mrna表达水平。

具体为，将实施例1的由羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物构成的混合物试料或者比较例1的由羽衣甘蓝水提取物、豆瓣菜水提取物以及甜菜根水提取物构成的混合物试料以体积为基准以0.15％或者0.3％处理浓度进行稀释，处理到角质形成细胞之后，测定角质形成细胞的闭合蛋白的mrna表达水平，比较实施例1和比较例1的皮肤屏障功能强化效果。

闭合蛋白的表达量的测定方法：将作为角质形成细胞的hekn细胞(humanepidermalkeratinocyte,neonatal)利用用于细胞培养的培养基(添加有kgm-goldkeratinocytegrowthmediumsinglequot(lonza#192152)的kbm-goldkeratinocytebasalmedium(lonza#192151))在60mm细胞培养皿(cellculturedish)以2×10⁵细胞/皿(cells/dish)的密度分株之后，在37℃、5％co2培养器上培养约24小时直到完成80％左右汇合(confluency)。在经培养的hekn细胞以0.15％(v/v)或0.3％(v/v)的处理浓度处理实施例1的试料或者比较例1的试料之后，培养约24小时。然后，去除用于所述hekn细胞培养的培养基，添加1ml的trizol(invitrogen；美国英杰生命技术有限公司)，按照invitrogen公司的rna分离法分离rna。对所述经分离的rna利用紫外线检测仪(hewlettpackard；惠普)在260nm下对rna定量之后，进行逆转录(reversetranscription)合成cdna，进行实时pcr(real-timepolymerasechainreaction)测定参与到角质形成细胞的tj形成的闭合蛋白的mrna表达水平。其中，为了分析对各个试料的相对性表达形态，以rpl13a(ribosomalproteinl13a)的mrna的表达量为基准进行了补正。

其结果，如下图2所示，确认到(i)相比比较例1(由羽衣甘蓝水提取物、豆瓣菜水提取物以及甜菜根水提取物构成的混合物)，实施例1(由羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物构成的混合物)的闭合蛋白的mrna表达量显示显著高的水平；(ii)实施例1中，相比0.15％处理浓度，在0.3％处理浓度下闭合蛋白的mrna表达量显示显著高的水平。

最终，确认到根据本发明的羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物显著提高角质形成细胞的has2、丝聚蛋白以及闭合蛋白的表达量，强化皮肤保湿功能，促进紧密连接(tj)形成，从而发挥强化皮肤屏障功能的效果，尤其对所述皮肤屏障功能的强化具有减少皮肤的水分流失，增加皮肤的保湿力的效果。

一方面，周知皮肤老化是因皮肤内存在的胶原蛋白、弹性蛋白、透明质酸等的细胞外间质(extracellularmatrix)成分的含量减少产生的，有报告指出伴随有皮肤水分量的减少时，促进皮肤老化(减少皮肤弹力等)，已知参与到形成紧密连接(tj)的cldn(claudin)系列的蛋白质和闭合蛋白还参与到皮肤再生，因此判断根据本发明的羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物基于如上所述强化皮肤屏障功能、防止皮肤水分流失以及促进皮肤角质更新，还具有发挥皮肤抗老化功效的效果(参考bazzonietal.,jcellbiol.,156(6):947-9.2002；furuseetal.,jcellbiol.,156(6):1099-111,2002；nakajimaetal.,jpharmacolexpther.,354(3):440-7.,2015；volksdorfetal.,amjpathol.,187(6):1301-1312,2017；papakonstantinouetal.,dermatoendocrinol.,4(3):253-8,2012)。

根据本发明的将羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物作为有效成分含有的化妆料组合物可以以多种剂型成为产品化(化妆品等)，考虑所要体现的产品的功能性、费用及其他条件，可以控制到适当含量比率。

【剂型例1】软膏的制备

混合含有油相成分和水相成分的表2的成分，制备含有根据本发明的羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物的软膏。

【表2】

【剂型例2】营养化妆水(牛奶润肤露)的制备

混合含有油相成分和水相成分的表3的成分，制备含有根据本发明的羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物的营养化妆水。

【表3】

【剂型例3】按摩霜的制备

混合含有油相成分和水相成分的表4的成分，制备含有根据本发明的羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物的按摩霜。

【表4】

【剂型例4】面膜的制备

混合含有油相成分和水相成分的表5的成分，制备含有根据本发明的羽衣甘蓝海水提取物、豆瓣菜海水提取物以及甜菜根海水提取物的混合物的面膜。

【表5】

以上详细说明了本发明内容的特定部分，对于具有本领域通常知识的人员而言，应明确所述具体说明仅是优选的实施形态，并不由此限制本发明的范围。因此，应认为本发明的实质上的范围由权利要求书和其等价物而定义。