一种长效治疗脱发的基因药物的制作方法

本发明涉及生物技术与医学应用领域，具体为腺相关病毒载体携带成纤维细胞生长因子1(fibroblastgrowthfactor1，fgf-1)基因在长效治疗脱发中的应用。

背景技术：

脱发是指头发脱落的现象，相对于其他疾病而言，脱发对生命并没有威胁，但病理性脱发会对患者身心带来莫大的创伤，干扰生活质量。统计数据表明，我国脱发人群约达2亿，男性脱发人数约1.3亿，且每年以15％的速度递增。其中70前人群占比7.1％；70后占比17.8％；80后占38.5％；90后占36.1％；00后占0.4％。因为脱发人员众多，已经成为继肥胖之后第二大社会性病症。目前，市场上已有一些治疗脱发的药物，但都有存在不可忽视的副作用和局限性。非那雄胺，作为特异性ii5α-还原酶抑制剂，能够抑制外周睾酮转化为二氢睾酮，降低血液和前列腺、皮肤等组织中二氢睾酮水平，进而降低体内雄激素水平，达到抑制脱发的效果，但其会导致性功能问题，包括性冷淡、勃起障碍和乳腺发育等，同样会影响到患者的生活质量，且该药主要针对雄激素性脱发，有一定的使用局限性。另一种常用药物，米诺地尔，可扩张局部血管，使得毛囊供血充足，减少毛囊死亡，但外用会使头皮血管扩张，分泌物增多，药物使用刚开始有一段脱毛期，并且有较强的依赖性和抗药性，并不治疗本质，随时间推移而丧失药效。此外还可通过植发手术来解决脱发，一般而言植发手术后有30％以上的毛囊不能成活，且需要进行多次治疗，价格昂贵，一次植发最少4-5万元。因此，基于广大脱发人群的需求，开发一种能够从根本上激活毛囊，长效促进毛发生长的药物，具有广泛的市场。

fgf-1是对来源于中胚层及神经外胚层的细胞有广泛作用的微量活性物质，主要分布于脑、垂体、神经组织、视网膜、肾上腺、心脏和骨等器官或组织内，血清和体液中以极低的浓度存在，其他组织含量很少。现在针对创面组织修复fgf-1显示了良好的治疗效果，因此在烧伤创面的临床应用极为广泛。近年来有研究表明，fgf-1在毛囊成熟过程中发挥了重要作用，在小鼠皮下注射fgf-1重组蛋白，能够促进毛发的早期生长和延长生长，且并未产生明显的副作用。

重组腺相关病毒(recombinantadeno-associatedvirus，raav)是简单的非致病性单链dna病毒，是利用野生非致病腺相关病毒的某些特性，经过基因工程改造后产生的一种可供人工转基因的载体，重组腺相关病毒本身不会自我复制。raav能够定点整合的哺乳动物dna病毒。raav以其高稳定性，低致病性、低免疫原性、以及持久表达(6个月以上)目的基因等多方面优势，被认为是最有希望的临床基因药物治疗载体。

与传统治疗脱发的药物一样，fgf-1本身的作用持续时间有限，其在血液中半衰期极短，入血三小时血内含量后为0，主要蓄积在皮肤，对皮肤亲和力极高。为解决fgf-1半衰期短的缺点，本实验室将fgf-1基因构建到raav载体中，达到长效表达fgf-1，从而治疗脱发的目的。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种用于治疗脱发的基因药物，以解决现有治疗脱发药物所存在的服药频繁和副作用问题。

本发明所述基因药物，其特征在于，所述基因治疗药物为成纤维生长因子1(fgf-1)基因与腺相关病毒载体(aav)的重组体，所说fgf-1基因序列如seqno.1所示。

本发明所涉及的fgf-1，可以是fgf-1本身，氨基酸序列如seqno.2所示，也包括以fgf-1为主要结构进行小于30％的氨基酸替换或修饰的新型酸性成纤维生长因子。

本发明所述基因药物，其特征在于，所述的病毒载体不仅限于腺相关病毒，也包括慢病毒、腺病毒等可致基因长效表达的病毒载体。

本发明所述的基因药物的用途，其特征在于，包括脂溢性脱发、斑秃性脱发、精神性脱发、营养性脱发等疾病。

附图说明

下面参照附图结合实施例对本发明作进一步的描述。

图1小鼠毛发生长图(脱毛两周后)

左：对照组小鼠；右：实验组小鼠。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步的说明。应当理解，下面的实施例用于说明本发明的内容，而非限定本发明的内容，任何形式上的变动和/或变通，将落入本发明的保护范围。

实施例1皮下多点注射raav-fgf-1

选择雄性c56bl/6黑色毛发小鼠，分为实验组和对照组，每组8只，实验组小鼠于12周时尾静脉注射raav-fgf-1病毒3×10¹¹v.g.，对照组小鼠注射相同滴度的空载raav。小鼠饲养在24±2℃环境中，正常饮水饮食，保持正常的昼夜节律(白天8：00-20：00，夜晚20：00-8：00)。饲养三个月后，小鼠经异氟烷吸入麻醉后，对其背部进行全部脱毛处理，先用宠物推剪将实验区毛发推短至5毫米以下，再涂抹脱毛膏，3分钟后用湿巾轻轻擦脱落毛发，再用纯净水清洗皮肤，除去残留脱毛膏。脱毛后的小鼠背部呈粉红色，无毛发附着。继续饲养两周后拍照，结果见图1。左侧对照组小鼠脱毛区域未完全恢复，尤其是臀部两侧毛发恢复缓慢，右侧实验组小鼠已基本恢复毛发，且毛发与之前相比更加黑亮、粗壮。

技术特征：

技术总结
本发明为一种治疗脱发的基因药物，所述药物为成纤维细胞因子1(FGF‑1)基因‑腺相关病毒载体重组体。本发明的药物可用于预防和治疗脱发，效果显著、持久且无毒副作用，有巨大的社会和经济效益。

技术研发人员：黄新语;张瑜;宁兴海
受保护的技术使用者：南京大学
技术研发日：2019.01.18
技术公布日：2019.04.09