一种治疗妇科阴道炎的中药制剂的制作方法

本发明涉及一种治疗妇科阴道炎的中药制剂，属于消毒品技术领域。

背景技术：

随着现代生活节奏的加快，社会压力的加大及抗生素的滥用，妇科阴道炎疾病在女性中发病率较高，并处于逐步增加的势态。阴道炎是常见的女性疾病之一，它不仅发病率高，且容易反复，对女性患者心理的影响也比较严重。阴道炎一般包括细菌性阴道炎、念珠菌性阴道炎、滴虫性阴道炎等多种。世界卫生组织(who)发布的数据表明，中国女性中有40％多患有不同程度的生殖道感染，妇科门诊患者中，因感染性疾病就诊者就占一半以上。由于阴道较为特殊生理结构，某些内外因素，如长期使用激素类药物、抗生素等，会导致阴道内环境发生改变，使得妇女患者外阴部时轻时重的瘙痒、灼痛，这也对学习和工作造成较大影响。

目前市场上治疗阴道炎的中药产品有：消糜栓、克痒舒洗液、苦参洗液等药物，上述药物在使用过程中，使患者出现过敏等不良反应并且不能长时间用药。红核妇洁洗液是山东步长神州制药有限公司的核心妇科外用产品，由山楂核一味中药材为原料，经干馏等现代制备工艺精制而成，富含酚类、醛类、酮类、有机酸类等70余种有效活性成份，具有解毒祛湿，杀虫止痒的功效，为治疗霉菌性阴道炎和非特异性阴道炎的有效药物。该产品之前已经申请多件发明专利申请：其专利申请号为：03139655.0、201210071276.x、201210070908.0、201210070797.3、201410348891.x，上述专利保护内容主要集中在洗液、栓剂以及相关临床新用途方面。由于该产品临床上用量较大，上述红核洗液剂型单一，在妇科患者使用过程中，患者用药体验不佳，依从性差，导致其生物利用度较低，以及存在难闻的烟熏刺激气味等缺陷，为了进一步改善患者的临床使用的顺应性和该药物的临床疗效，因此急需开发一种疗效确切，患者使用方便的新型制剂，显得尤为必要。

技术实现要素：

为实现上述目的，本发明提供一种治疗妇科阴道炎的中药制剂，该中药制剂具有疗效可靠、安全性高、工艺质量稳定的优点。本发明中药制剂能够使患者使用方便，无刺激性、无毒副作用，具有抑菌止痒，达到清洁护理的作用。

本发明经过反复试验和研制，制成一种新型泡沫剂。选用山楂核提取物为原料，其原料药中含有多种有机酸、糠醛类、愈创木酚、熊果酸、齐墩果酸等有效物质成分，其药液的ph＜4，符合女性阴道生理功效，具有一定的杀菌止痒功效。通过加入十二烷基硫酸钠，吐温-80，可以使得本发明的山楂核提取物有效成分形成均匀分散的泡沫溶液，并喷洒于女性患病部位，可使瞬间产生细小泡沫，由于泡沫药液的强吸附力，在肌肤表面形成致密药物缓释膜，再加入甘油，明显更滋润。克服现有的普通洗液，难以达到的治疗死角，达到持续释放药效，发挥消毒杀菌的作用。

方中配合加入香精，可掩盖山楂核提取物本身具有的烟熏味，使得本发明中药制剂舒适芳香，改善患者使用顺应性。本发明能调节女性私处ph值，持久维持弱酸状态，配方中加入羧甲基纤维素，维持泡沫制剂的稳定性，最后方中加入薄荷油，有特殊清凉香气。

本发明提供如下技术方案：

本发明所述的一种消毒杀菌作用的中药制剂，所述中药制剂包括如下重量份数的原料药制成：山楂核提取物10～30份、十二烷基硫酸钠5～100份、吐温80(0～40份)、甘油20～200份、苯甲酸钠0.2～2份、香精0～10份。

本发明的山楂核提取物主要成分是由山楂核干馏液和山楂核干馏油组成，山楂核干馏液的重量份是1-5份，山楂核干馏油的重量份是99-95份。

本发明的山楂核提取物主要成分是由山楂核干馏液和山楂核干馏油组成，山楂核干馏液的重量份是5份，山楂核干馏油的重量份是95份。

山楂核提取物中含有原儿茶酸、儿茶酚，其中原儿茶酸的含量是0.19-0.57mg/ml，儿茶酚的含量是0.07-0.21mg/ml。

其上述原儿茶酸、儿茶酚的含量检测分析方法为：采用高效液相色谱法，色谱条件：安捷伦c18柱(250mm×4.6mm,5μm)，甲醇-(乙腈-0.6％冰醋酸溶液)(31：69)为流动相，进行梯度洗脱，流速：1.0ml/min；柱温：30℃，检测波长：260nm。

梯度具体是：其上述原儿茶酸、儿茶酚的含量检测分析方法为：采用高效液相色谱法，色谱条件：安捷伦c18柱(250mm×4.6mm，5μm)，以甲醇(a相)-(乙腈-0.6％冰醋酸溶液)(b相)为流动相，进行梯度洗脱，洗脱梯度比例为：0-2min，98％a，2％b；2-5min，98-70％a，2-30％b；5-18min，70-63％a，30-37％；流速：1.0ml/min；柱温：30℃，检测波长：260nm。

山楂核提取物中还含有糠醛、愈创木酚，经检测可知，其成分中的糠醛含量≥8mg/ml，愈创木酚含量≥1.5mg/ml。

本发明采用测定山楂核提取物中糠醛、愈创木酚二组分含量的气相色谱法，采用db-ffap毛细管柱(30m×0.32mm×0.25μm)；fid检测器；色谱条件：柱温从95℃开始以1℃·min^-1升到105℃，再以10℃·min^-1升到140℃(保持8分钟)，以20℃·min^-1升到190℃(保持5分钟)。进样口温度205℃、检测器温度210℃；分流进样，分流比1∶15。

本发明所用的山楂核提取物来源于山东步长神州制药厂提供，其所有效成分物质为山楂核干馏液和山楂核干馏油，其含有有机酸、熊果酸、糠醛类、酚类等多种有效成分。

其制备方法工艺如下：

取山楂核，将山楂核置于干馏釜中，投料量为设备容积率的55％，采用以氮气为驱动力的动态干馏工艺，加热升温速率为40℃/小时，控制干馏液的反应过程，保持干馏釜内压力0.04-0.12mpa，在加热温度达到160～190℃，加热保温时间为1小时，收集160℃以上的干馏产物，并在加热温度达到250～280℃，保持温度为3小时，进行馏分收集，可得本发明的山楂核干馏液和干馏油。通过上述方法制得其山楂核干馏油和干馏液的外观为棕红色至黑色液体，有烟熏香味，其ph为2.0～3.0，其成分中的糠醛含量≥8mg/ml，愈创木酚含量≥1.5mg/ml。

所述中药制剂还包括薄荷油4～12份、羧甲基纤维素70～120份、醋酸氯己定10～30份。

作为本发明中药制剂的优选，其包括如下重量份数的原料药制成：山楂核提取物15～25份、十二烷基硫酸钠10～90份、吐温80(0～20份)、甘油40～160份、苯甲酸钠0.4～1.2份、香精0～8份、薄荷油6～10份、羧甲基纤维素80～110份、醋酸氯己定15～25份。

所述中药制剂中香精为玫瑰香精或茉莉香精。

优选的，所述中药制剂包括如下重量份数的原料药制成：山楂核提取物20份、十二烷基硫酸钠10份、吐温80(20份)、甘油50份、茉莉香精1份。

优选的，所述中药制剂包括如下重量份数的原料药制成：山楂核提取物20份、十二烷基硫酸钠10份、吐温80(20份)、甘油50份、苯甲酸钠1份、茉莉香精1份。

优选的，所述中药制剂包括如下重量份数的原料药制成：山楂核提取物20份、十二烷基硫酸钠10份、吐温80(20份)、甘油50份、苯甲酸钠1份、玫瑰香精1份。

优选的，所述中药制剂包括如下重量份数的原料药制成：山楂核提取物20份、十二烷基硫酸钠80份、甘油160份、苯甲酸钠8份、薄荷油8份、羧甲基纤维素96份、醋酸氯己定24份。

优选的，所述中药制剂包括如下重量份数的原料药制成：山楂核提取物20份、十二烷基硫酸钠80份、甘油160份、苯甲酸钠8份、茉莉香精8份、薄荷油8份、羧甲基纤维素96份、醋酸氯己定24份。

优选的，本发明的山楂核提取物主要成分是由山楂核干馏液和山楂核干馏油组成，山楂核干馏液的重量份是5份，山楂核干馏油的重量份是95份。

所述中药制剂可以制成抑菌泡沫剂和喷剂洗液。

本发明所用的山楂核提取物来源于山东步长神州制药厂提供，其所有效成分物质为山楂核干馏液和山楂核干馏油，主要含有有机酸、熊果酸、糠醛类、酚类等多种有效成分。

实验例1：为了突出本发明喷剂，以及泡泡制剂工艺的科学性，我们将工艺优选的部分实验例结果展示如下。

表1本发明喷剂制备辅料用量比例选择实验

从表1实验结果可知，经过多次预实验的筛选，制成泡泡制剂，上述香精为玫瑰或茉莉香精，若处方中的十二烷基硫酸钠的含量较低，其制成喷剂存在乳化不完全和溶液颜色浑浊，综合其香味和外观形状的指标，选用本发明喷剂处方3和4为备选处方。

表2本发明泡沫剂制备辅料用量比例选择实验

从表2实验结果可知，上述所选香精为玫瑰或茉莉香精，处方1和处方2的抑菌率均未达60％，且制成的泡沫剂的液体比较浑浊，综合各项指标结果来看，处方3和处方4的抑菌率都比较高，其泡沫剂的外观形状指标较好，可以作为本发明泡沫剂的备选处方。

实验例2：为了突出本发明喷剂，以及泡泡制剂工艺的科学性，我们提供本发明中药制剂的分析检测方法如下：

2.1样品制备

⑴、取红核泡沫剂4.0ml，用乙醚20.0ml萃取3次，合并乙醚萃取液，经氮气浓缩和无水硫酸钠干燥后,加入2.0ml三甲基硅烷基和乙酰胺+0.9ml三甲基氯硅烷,振荡30min,离心分离6min，离心速率为1500rpm/min，取上清液，密封-10℃保存，作为分析样品1。

2.2样品测定

色谱柱程序升温方法：柱温40℃，保持时间为9min，以升温速率20℃/min升至210℃，15min；载气为氦气(7.0psi)。

分析条件：ei离子源，电子能量100ev，离子源温度230℃,接口温度260℃,用微量进样器移取0.5μl样品进样。

2.3样品制备

取红核喷剂4.0ml，用乙醚20.0ml萃取3次，合并乙醚萃取液，经氮气浓缩和无水硫酸钠干燥后,加入1.0ml三甲基硅烷基和乙酰胺+0.6ml三甲基氯硅烷，振荡30min，离心分离5min，离心速率为1000rpm/min，取上清液，密封-10℃保存，作为分析样品。

2.4样品测定

色谱柱程序升温方法：柱温60℃，维持时间为12min，以升温速率25℃/min升至230℃，10min；载气为氦气(7.0psi)。

分析条件：ei离子源，电子能量100ev，离子源温度230℃,接口温度260℃,用微量进样器移取0.5μl样品进样。

按照上述方法测定本发明红核泡沫液(按照下述的本发明实施例1方法)和喷剂(按照下述的本发明实施例3方法)的含量成分，其检测结果如下见表3。

表3本发明红核泡沫液和喷剂的有效成分含量

经表3结果可知，本发明泡沫剂和喷剂中所含的愈创木酚、香草醛、2-甲基丁酸、5-甲基糠醛等有效物质成分含量明确，进一步保证其上述药品的内在质量。

本发明中药制剂的有益效果：

本发明处方中，以山楂核提取物为主要有效成分，并制备成质量稳定，疗效确切。本发明处方中加入羧甲基纤维素辅料，可以增加本发明制剂的泡沫稳定性、保持水分。本发明处方再配以十二烷基硫酸钠作为发泡剂，方中还可以配伍醋酸氯己定，以保持阴道的酸性环境，有利于山楂核提取物发挥药物的治疗效果。最后，方中加入香精可以使得本发明中药制剂的气味清香，并可以掩盖中药提取物令人难闻的异味，提高患者使用的顺应性。

附图说明

此处所说明的附图用来提供对本发明的进一步理解，构成本发明的一部分，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。

图1：抑菌护理喷剂生产工艺流程图；

图2：抑菌护理泡沫剂生产工艺流程图。

具体实施方式

以下是本发明内容的具体实施例，用于阐述本申请文件中所要解决技术问题的技术方案，有助于本领域技术人员理解本发明内容，但本发明技术方案的实现并不限于这些实施例。

实施例1泡沫剂洗液

1、按处方量准确称量山楂核提取物20ml、十二烷基硫酸钠80g、甘油160g、苯甲酸钠8g、薄荷油8ml、羧甲基纤维素96g、醋酸氯己定24g，备用；

2、取纯化水适量，加入称量好的羧甲基纤维素96g，浸泡12小时，待其完全溶胀，备用。

3、依次将山楂核提取物、醋酸氯己定、薄荷油、十二烷基硫酸钠、甘油、苯甲酸钠、加入步骤2项溶液中，边加边搅拌，搅拌均匀。

4、再补加纯化水至8000ml，搅拌混匀，静置，过滤。

5、分装、检验、包装，检验、入库。

实施例2泡沫剂洗液

1、按处方量准确称量山楂核提取物20ml、十二烷基硫酸钠80g、甘油160g、苯甲酸钠8g、茉莉香精8g、薄荷油8ml、羧甲基纤维素96g、醋酸氯己定24g；

2、取纯化水适量，加入称量好的羧甲基纤维素钠，浸泡12小时，待其完全溶胀，备用。

3、依次将山楂核提取物、醋酸氯己定、薄荷油、十二烷基硫酸钠、甘油、苯甲酸钠、茉莉香精、加入2项溶液中，边加边搅拌，搅拌均匀。

4、再补加纯化水至8000ml，搅拌混匀，静置，过滤。

5、分装100ml/瓶、检验、包装，检验、入库。

实施例3喷剂洗液

1、按处方量准确称量山楂核提取物20ml、十二烷基硫酸钠80g、吐温80，20ml、甘油50g、苯甲酸钠1g、茉莉香精1g，备用。

2、取纯化水适量，依次加入称量好的山楂核提取物、十二烷基硫酸钠、聚山梨酯-80、甘油、苯甲酸钠、茉莉香精，边加边搅拌，搅拌均匀。

3、再补加纯化水至8000ml，搅拌混匀，静置24小时，过滤。

4、分装100ml/瓶、检验、包装，检验、入库。

实施例4喷剂洗液

1、按处方量准确称量山楂核提取物20g、十二烷基硫酸钠10g、吐温80，20ml、甘油50g、苯甲酸钠1g，备用。

2、取纯化水适量，依次加入称量好的山楂核提取物、十二烷基硫酸钠、聚山梨酯-80、甘油、苯甲酸钠，边加边搅拌，搅拌均匀。

3、再补加纯化水至8000ml，搅拌混匀，静置24小时，过滤。

4、分装100ml/瓶、检验、包装，检验、入库。

实施例5

制备方法与实施例1或2相同，所述制剂的原料配比如下：山楂核提取物25ml、十二烷基硫酸钠90g、吐温80，20ml、甘油40g、苯甲酸钠1.2g、香精8g、薄荷油10ml、羧甲基纤维素110g、醋酸氯己定25g。

实施例6

制备方法与实施例1或2相同，所述制剂的原料配比如下：山楂核提取物15ml、十二烷基硫酸钠10g、甘油160g、苯甲酸钠0.4g、薄荷油6ml、羧甲基纤维素80g、醋酸氯己定15g。

实施例7

制备方法与实施例1或2相同，所述制剂的原料配比如下：山楂核提取物30ml、十二烷基硫酸钠100g、吐温80，40ml、甘油20g、苯甲酸钠0.2g、香精10g，薄荷油4ml、羧甲基纤维素120g、醋酸氯己定30g。

实施例8

制备方法与实施例1或2相同，所述制剂的原料配比如下：山楂核提取物10ml、十二烷基硫酸钠5g、甘油200g、苯甲酸钠2g、薄荷油12ml、羧甲基纤维素70g、醋酸氯己定10g。

实施例9泡沫剂洗液

1、按处方量准确称量山楂核提取物20ml、十二烷基硫酸钠80g、甘油160g、苯甲酸钠8g、薄荷油8ml、羧甲基纤维素96g，备用；

2、取纯化水适量，加入称量好的羧甲基纤维素96g，浸泡12小时，待其完全溶胀，备用。

3、依次将山楂核提取物、薄荷油、十二烷基硫酸钠、甘油、苯甲酸钠、加入步骤2项溶液中，边加边搅拌，搅拌均匀。

4、再补加纯化水至8000ml，搅拌混匀，静置，过滤。

5、分装、检验、包装，检验、入库。

实施例10泡沫剂洗液

1、按处方量准确称量山楂核提取物20ml、十二烷基硫酸钠80g、甘油160g、苯甲酸钠8g、茉莉香精8g、薄荷油8ml、羧甲基纤维素96g；

2、取纯化水适量，加入称量好的羧甲基纤维素钠，浸泡12小时，待其完全溶胀，备用。

3、依次将山楂核提取物、薄荷油、十二烷基硫酸钠、甘油、苯甲酸钠、茉莉香精、加入2项溶液中，边加边搅拌，搅拌均匀。

4、再补加纯化水至8000ml，搅拌混匀，静置，过滤。

5、分装100ml/瓶、检验、包装，检验、入库。

实施例11喷剂洗液

1、按处方量准确称量山楂核提取物20ml、十二烷基硫酸钠80g、吐温80(20ml)、甘油50g、苯甲酸钠1g、茉莉香精1g，备用。

2、取纯化水适量，依次加入称量好的山楂核提取物、十二烷基硫酸钠、聚山梨酯-80、甘油、苯甲酸钠、茉莉香精，边加边搅拌，搅拌均匀。

3、再补加纯化水至8000ml，搅拌混匀，静置24小时，过滤。

4、分装100ml/瓶、检验、包装，检验、入库。

实施例12喷剂洗液

1、按处方量准确称量山楂核提取物20g、十二烷基硫酸钠10g、吐温80，20ml、甘油50g、苯甲酸钠1g，备用。

2、取纯化水适量，依次加入称量好的山楂核提取物、十二烷基硫酸钠、聚山梨酯-80、甘油、苯甲酸钠，边加边搅拌，搅拌均匀。

3、再补加纯化水至8000ml，搅拌混匀，静置24小时，过滤。

4、分装100ml/瓶、检验、包装，检验、入库。

为了进一步验证本发明中药制剂的疗效，我们将上述具体实施例1、实施例2方法制备的泡沫剂洗液，以及实施例3、实施例4中制备喷剂抑菌洗液，进行了相应的药理药效试验，现将相关药理结果整理如下。

一、本发明泡泡剂和喷剂的抑菌效果评价

1.1仪器和试剂

cp225d型十万分之一电子分析天平；hh-2型数显恒温水浴锅；电热恒温培养箱；jb-cj-1000fx无菌超净工作台；transferpettesbrand移液枪；氯化钠，市售；营养琼脂，市售；水为超纯水，市售；其他试剂均为市售分析纯。

1.2菌种

金黄色葡萄球菌staphylococcusaureus、大肠杆菌escherichiacoli、绿脓杆菌p.aeruginosa。

1.3动物

健康家兔40只，雌雄各半(雌性未孕)，体质量3～5kg，普通级，市售。

1.4受试药物的制备

本发明药物1组的药物：为采用本发明实施1组方法制备的泡沫剂洗液；本发明药物2组的药物：为采用本发明实施2组方法制备的泡沫剂洗液；本发明药物3组的药物：为采用本发明实施3组方法制备的喷剂洗液；本发明药物4组的药物：采用本发明实施4组方法制备的喷剂洗液。对照药物制备：称量醋酸氯己定24g、苯甲酸钠8g，加纯化水至8000ml，边加边搅拌，搅拌混匀，静置，过滤，即得。

1.5实验方法

1.5.1培养基的制备

称取营养琼脂35g，溶解于1000ml超纯水中，并不断搅拌均匀，再加热煮沸直至琼脂完全溶解，于121℃高温高压灭菌30min，待温度降至70℃时，分装至已灭菌的培养皿中，备用。

1.5.2菌种活化

分别吸取金黄色葡萄球菌、大肠杆菌与绿脓杆菌的菌500μl，加入玻璃试管中，倒入试管的1/4～1/2营养肉汤液体培养基，在37℃活化培养8h后，当培养液由完全澄清逐步变为浑浊时，这表明上述该培养的菌种已活化。

1.5.3菌液的稀释

取已活化好的菌液适量，用无菌生理盐水将活化菌液分别稀释至100、1000、10000、10000倍，放入到培养皿中，再倒入营养肉汤琼脂培养基，待上述培养基凝固后，倒扣平板，37℃培养20h。并采用细菌平板计数法，再将各种菌悬液的浓度稀释至5×10⁵～5×10⁶cfu/ml，备用。

1.5.4抑菌圈实验

本发明实验采用孔洞法，以对照药物溶液、以本发明药物1组的泡沫剂洗液、本发明药物2组的泡沫剂洗液、本发明药物3组喷剂洗液、本发明药物4组喷剂洗液，作为给药组。精密吸取金黄色葡萄球菌、大肠杆菌与绿脓杆菌供试菌菌液300μl，吸入到无菌培养皿中，并倒入营养肉汤琼脂培养基10～16ml，不断摇动使菌液均匀，待培养基冷却凝固，进行培养皿上等采用距离打孔，做好标记。加入100μl的对照、上述供试组样品，轻轻晃动混匀，待干后，倒扣平板，置于37℃有氧恒温培养箱中培养，并在1h、2h、8h、12h、24h后观察结果，测量抑菌圈大小，测定3次，取平均值，抑菌圈实验结果见表5。抑菌圈实验判定标准：抑菌圈直径大于20mm，极敏：15～20mm，高敏：10～15mm，中敏：7～9mm，低敏：小于7mm，不敏感。

1.5.5安全性及疗效结果

表4本发明泡沫剂和喷剂对3种菌的抑菌圈测定结果

与对照组比较：^**p＜0.01，^*p＜0.05。

实验结果表4可知，对照组药物给药1小时后，其对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌抑菌圈直径的影响较小。并在2h～12h抑菌圈直径大小几乎无变化。这说明，对照组药物对上述三种细菌无明显抑菌作用。与对照组比较，本发明药物1组、本发明药物2组、本发明药物3组、本发明药物4组，经1h给药后，其对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌与绿脓杆菌的抑菌圈直径增长变化幅度较大，且在8h～24h内，本发明给药1组、2组、3组、4组对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌以及绿脓杆菌的抑菌圈有增大的趋势。但总体来看，上述各给药组的抑菌圈增大无显著性区别。这也说明，本发明泡沫剂洗液和喷剂洗液在1小时左右，可以完成绝大多数山楂核提取物药物的释放，并能起到快速抑菌作用效果。在8h后按照抑菌圈试验判定标准判定，本发明山楂核提取物泡沫剂洗液和喷剂洗液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌，绿脓杆菌仍然有明显的抑制作用，由此说明，本发明各给药组具备长效抑菌作用，也说明本发明中药制剂的疗效是主要是由山楂核提取物制备成适宜的剂型所带来，而对照组药物中醋酸氯己定和苯甲酸钠成分，在制剂辅料中主要起着调节酸碱度或防腐作用，对细菌性阴道炎的作用甚微，不会直接影响主药的疗效。

1.5.6、家兔皮肤刺激性实验

实验选择健康家兔40只，分为5组，每组8只，雌雄各半，并于实验前24h，将入选的家兔背部脊柱两侧皮肤脱毛，脱毛范围左、右各约3cm×3cm，温水清洗，擦干皮肤，观察脱毛区域有无红斑、水肿以及破损。家兔背部脊柱左侧实验区皮肤均匀涂抹含有醋酸氯己定和苯甲酸钠药物组分的对照药物溶液，本发明实施例1方法制备的泡沫剂洗液，本发明实施例2方法制备的泡沫剂洗液，本发明实施例3方法制备的喷剂洗液，本发明实施例4方法制备的喷剂洗液，作为给药组。给药剂量分别为0.8g/kg，用二层消毒纱布覆盖并以无刺激性胶布加以固定，另一侧皮肤作为自身对照。采用封闭试验，一次敷药时间为4h。给药4h后，用温水清除残留受试物，于清除残留受试物后1h、24h、48h、72h观察并记录皮肤给药部位有无红斑、水肿等皮肤刺激反应，并进行评分。评分方法与刺激指数计算方法参照《消毒技术规范》。按下列公式计算每天每只动物平均积分(刺激指数)，判定皮肤刺激强度。每天每只动物平均积分为每只动物14d的红斑和水肿总积分/(受试动物数×天数)。

根据实验结果可知，在对实验家兔给予对照组药物，进行多次皮肤刺激，1小时观察正常的家兔有2只出现红斑，且皮肤有轻微的隆起，且24小时后的刺激反应平均积分值在1.89，属于轻度刺激反应范畴。在本发明药物1组、2组、3组、4组给药相应的泡沫剂洗液和喷剂洗液，连续对家兔完整皮肤涂抹，24小时后，上述4组并未发现其皮肤红斑、水肿等异常反应，其皮肤刺激性指数为0，对家兔皮肤为无刺激性。由此可见，对照组药物溶液对家兔有轻刺激性作用，而本发明实施例1-4组泡沫剂洗液和喷剂洗液，对家兔皮无任何皮肤刺激反应，表明本发明中药制剂具有使用完全性高的优势。