本发明具体涉及一种大建中汤的提取方法。
背景技术：
大建中汤源于张仲景《金匮要略·腹满寒疝宿食病》。大建中汤为温里剂，具有温中补虚，降逆止痛之功效。主治中阳衰弱，阴寒内盛之脘腹剧痛证。心胸中大寒痛，呕不能食，腹中寒，上冲皮起，出见有头足，上下痛而不可触近，手足厥冷，舌质淡，苔白滑，脉沉伏而迟。
大建中汤临床应用广泛，所治疗的腹痛一般病势较重,病情较急,素体又虚,需要及时服药,现代大建中汤多用于改善术后肠梗阻样症状,目前没有改善术后肠梗阻样症状的药物，住院患者术后多用大建中汤治疗,而且宜早期给药。
仅采用汤剂常规的水煎煮法，药材中药效成分提取率较低，无法发挥大建中汤的全部药效，影响患者的临床治疗效果，不仅无法及时缓解患者病情病势，还会延长治疗时间，或者增加药物的使用量，造成人力物力资源的浪费。因此，需进一步优化大建中汤的提取工艺。
技术实现要素：
为解决上述问题，本发明提供了一种大建中汤的制备方法。
本发明提供了一种大建中汤的制备方法，它包括如下操作：
取大建中汤处方量药材，用提取溶剂提取；溶剂的使用量是药材重量的6～15倍；再加入溶剂提取0～3次，即可。
进一步地，所述溶剂加入的方式是，先加入药材4.5～12.5倍量的溶剂，再加入药材1.5～2.5倍量的溶剂；
或，直接加入药材6～15倍量的溶剂。
进一步地，首次加入溶剂后，还包括浸泡操作，浸泡时间为0～90分钟。
进一步地，所述方法包括如下操作：
1)取处方量药材；
2)先加入药材4.5～12.5倍量的溶剂，浸泡0～90分钟，再加入药材1.5～2.5倍量的溶剂；
或，直接加入药材6～15倍量的溶剂，浸泡0～90分钟；
3)煎煮，过滤，收集滤液。
进一步地，步骤2)溶剂加入方式为：先加入药材6～10倍量溶剂，再加入药材1.5～2.5倍量溶剂；
或，直接加入药材7.5～12.5倍量溶剂；
优选地，步骤2)溶剂加入方式为：先加入药材8倍量溶剂，再加入药材1.9倍量溶剂。
进一步地，步骤2)浸泡时间为0～60分钟。
进一步地，步骤3)煎煮时间为30～150分钟。
进一步地，所述煎煮时间为60～120分钟。
进一步地，所述方法还包括如下操作：
取过滤后余下的固体，继续加入药材4.5～12.5倍量的溶剂，煎煮提取0～3次。
进一步地，所述溶剂加入量为药材的6～10倍量；所述煎煮提取次数为2次。
进一步地，所述溶剂为水。
进一步地，所述大建中汤处方配比如下：
花椒6～10份，干姜10～15份，人参6～10份。
本发明的大建中汤制备方法，首次提取时额外加入1.5～2.5倍干药材重量份的水，消除干了药材吸水对提取效果的影响；克服了汤剂常规水煎煮法对中药药材提取率低、影响大建中汤临床效果的缺点，大建中汤处方药材中药效成分(如人参皂苷rg1、re)的提取率显著提高，提取液浓缩干燥后所得干膏量大，更有利于大建中汤临床疗效的发挥，在工业化生产和临床应用上均有较大的应用价值。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
具体实施方式
仪器与材料
1仪器
agilent1200高效液相色谱仪(美国安捷伦科技有限公司)、超声波清洗仪、电子恒温水浴锅、电子分析天平、旋转蒸发仪、烘箱、电磁炉、电热套、dhg-9245a鼓风恒温干燥箱(上海一恒科学仪器有限公司)、小型粉碎机等。
2材料
人参(吉林，批号：171000231)、干姜(四川，批号：170202681)、花椒(四川，批号：170501341)均购自成都康美药业生产有限公司，经鉴定均符合《中国药典》2015版一部(饮片)项下相关规定
3试剂
正丁醇、甲醇、氨试液、乙酸乙酯、乙醇、乙腈(色谱醇)、甲醇(色谱醇)、超纯水。
4对照品
人参皂苷re对照品(批号：110754-201626)、人参皂苷rg1对照品(批号:110703-201731)，均购自中国食品药品检定研究院。
实施例1本发明大建中汤提取方法
1取花椒6g，干姜12g，人参6g；
2首先加入8倍量水，浸泡60分钟后，继续加入1.9倍量水，煎煮，保持微沸提取60分钟，过滤，收集滤液后，继续分别加入10倍量水提取两次，每次提取时间为60分钟，合并三次提取液，浓缩，即得。
实施例2本发明大建中汤提取方法
1取花椒6g，干姜12g，人参6g；
2首先加入6倍量水，浸泡60分钟后，继续加入1.8倍量水，煎煮，保持微沸提取90分钟，过滤，收集滤液后，继续加入6倍量水提取一次，提取时间为90分钟，合并两次提取液，浓缩，即得。
实施例3本发明大建中汤提取方法
1取花椒6g，干姜12g，人参6g；
2首先加入10倍量水，浸泡30分钟后，继续加入2倍量水，煎煮，保持微沸提取120分钟，过滤，收集滤液后，浓缩，即得。
实施例4本发明大建中汤提取方法
1取花椒6g，干姜12g，人参6g；
2加入11.9倍量水，煎煮，保持微沸提取60分钟，过滤，收集滤液后，继续分别加入10倍量水提取两次，每次提取时间为60分钟，合并三次提取液，浓缩干燥，即得。
实施例5本发明大建中汤提取方法
1取花椒10g，干姜15g，人参10g；
2首先加入4.5倍量水，浸泡90分钟后，继续加入1.5倍量水，煎煮，保持微沸提取150分钟，过滤，收集滤液后，继续分别加入4.5倍量水提取3次，每次提取时间为150分钟，合并4次提取液，浓缩，即得。
实施例6本发明大建中汤提取方法
1取花椒6g，干姜10g，人参6g；
2首先加入12.5倍量水，浸泡60分钟后，继续加入2.5倍量水，煎煮，保持微沸提取30分钟，过滤，收集滤液后，继续分别加入12.5倍量水提取两次，每次提取时间为30分钟，合并三次提取液，浓缩，即得。
实施例7本发明大建中汤提取方法
1取花椒6g，干姜12g，人参6g；
2加入15倍量水，煎煮，保持微沸提取60分钟，过滤，收集滤液后，继续分别加入12.5倍量水提取两次，每次提取时间为60分钟，合并三次提取液，浓缩，即得。
实施例8本发明大建中汤提取方法
1取花椒6g，干姜12g，人参6g；
2加入6倍量水，煎煮，保持微沸提取150分钟，过滤，收集滤液后，继续分别加入4.5倍量水提取3次，每次提取时间为150分钟，合并4次提取液，浓缩，即得。
以下通过实验例来说明本发明的有益效果：
实验例1大建中汤处方药材吸水率实验
按2倍大建中汤处方量称取药材三份，置烧杯中称重，加5倍量水浸没药材，浸泡过夜，至透心后，停止浸泡，滤过(不挤压)，药渣称重，计算药材吸水率，实验结果如表1所示。药材吸水率计算公式：
吸水率＝(药材透心后湿重-药材浸泡前干重)/药材浸泡前干重
表1处方药材吸水率实验结果
由吸水率考察结果可知，本实验测定大建中汤处方药材平均吸水率为183％。
所以，每次在第一次提取时多加入1.9倍量的水，可消除干药材吸水对提取效果的影响。
实验例2不同提取条件对大建中汤提取效果比较
1样品制备
按照表2所示提取参数提取制得大建中汤溶液，过滤，合并滤液，定容，即得各份大建中汤水煎备用液。其中，各实验中，第一次浸泡时，在加入表2中所述量的水浸泡后，再额外加入1.9倍的水，然后煎煮提取。
表2各份大建中汤水煎备用液提取参数
2评价指标
根据大建中汤处方组成特点，选用干膏量和人参皂苷rg1、re作为评价指标，进行综合评价。文献资料表明人参皂苷rg1、re是该方贵细药材人参的主要有效成分，其含量对大建中汤的临床疗效较大，权重系数相应较高，应为0.35为宜。干膏量与药效不成量效关系，故权重系数相对较小，应为0.3为宜。在此基础上进行总加权评分，以综合评分(z)对实验结果进行分析：以x表示指标成分的测定值，以各指标的最大值(xmax)作为参照对同一指标的各数值进行标准化处理，e表示试验中该指标成分测定值得标准化数据(e＝x/xmax)。综合评分z＝e人参皂苷rg1×35+e人参皂苷re×35+e干膏收率×30。
3干膏量测定
精密量取各水煎备用液的20％置于已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，于105℃干燥3h，取出，置干燥器中冷却30min，精密称定重量，计算出膏率(％)。
4人参皂苷含量测定
1)色谱条件
色谱柱：c18柱(250mm×4.6mm，5μm)；流动相：乙腈(a)、水(b)；检测波长：203nm；柱温：35℃；流速：1.0ml/min；进样量：10μl；梯度洗脱如下：
2)对照品溶液的制备
精密称取人参皂苷rg1对照品、re对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的混合溶液，摇匀，即得。
3)供试品溶液的制备
精密量取水煎备用液100ml，蒸干，置索氏提取器中，用乙酸乙酯加热回流3个小时，弃去乙酸乙酯液，药渣挥尽溶剂，用甲醇回流提取至回流液无色，提取液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和正丁醇振摇提取3次(20,10,10)，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的氨试液洗涤2次(20,10)，再用正丁醇饱和的水30洗涤，正丁醇夜蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，稀释100倍，即得。
4)阴性供试品溶液的制备
取缺人参的处方量药材，按供试品溶液制备方法制成阴性供试品溶液。
5)测定方法
分别精密吸取对照品溶液2μl，4μl，6μl，8μl，10μl，15μl，20μl，注入液相色谱仪中测定，进行测定。以人参皂苷rg1、re的进样量为横坐标，对应的峰面积为纵坐标进行回归，得到人参皂苷rg1、re的线性回归方程。
精密吸取大建中汤供试品溶液20μl，注入液相色谱仪中测定，计算人参皂苷中rg1、re含量。
5实验结果
实验结果见表3。
表3不同提取参数对大建中汤提取效果比较
实验结果说明：
1)从实验1可以看出，仅采用汤剂常规的水煎煮法，即：加水直接煎煮1次，提取的干膏量最低，人参皂苷中rg1和re提取量也不高，对大建中汤提取效果最差。说明：仅采用汤剂常规的水煎煮法，药材中药效成分提取率较低，会影响大建中汤的临床药效；
2)实验1、5、9，提取次数为1次，所得干膏量均低于15％；实验2、6、7，提取次数为2次，所得干膏量为20％左右；实验3、4、8，提取次数为次，所得干膏量均大于22％。说明提取次数对提取效果影响较大，且提取3次效果最佳；
3)实验8，人参皂苷rg1提取量大于3％，人参皂苷re提取量大于3.6％，干膏量大于23％，综合提取效果最佳。故，确定本发明大建中汤的最佳提取工艺为：加8倍量水，浸泡60分钟，再额外加入1.9倍的水，提取3次，每次提取1小时。
综上所述，本发明的大建中汤提取方法，克服了汤剂常规水煎煮法对中药药材提取率低，影响大建中汤临床效果的缺点，且对大建中汤处方药材中药效成分(如人参皂苷rg1、re)的提取率高，提取液浓缩干燥后所得干膏量大，所得提取液或提取物更有利于大建中汤临床疗效的发挥，在工业化生产和临床应用上均有较大的应用价值。
综上，本发明的大建中汤提取方法，首次提取时额外加入1.5～2.5倍干药材重量份的水，消除干了药材吸水对提取效果的影响；克服了汤剂常规水煎煮法对中药药材提取率低、影响大建中汤临床效果的缺点，对大建中汤处方药材中药效成分(如人参皂苷rg1、re)的提取率显著提高，提取液浓缩干燥后所得干膏量大，更有利于大建中汤临床疗效的发挥，在工业化生产和临床应用上均有较大的应用价值。