一种EGCG在改善心肌梗塞后焦虑症状中的应用的制作方法

本发明涉及生物学和药学领域，尤其涉及一种表没食子儿茶素没食子酸酯在改善心肌梗塞后焦虑症状中的应用。

背景技术：

炎症反应在动脉粥样硬化的发生、发展及最终形成过程中有重要作用。血清高敏c反应蛋白(hs-crp)、肿瘤坏死因子(tnf)-α、白细胞介素(il)-1β和il-6是机体重要的炎症反应标志物，在冠状动脉粥样硬化病理的发生与发展中起重要作用。冠心病(chd)发生后常出现复杂的心理反应，多表现为情绪障碍和抑郁。研究表明抑郁与chd的不良预后有关，抑郁的chd病人2年内死亡率是非抑郁病人的2倍，抑郁是chd病人死亡的预测因子，抑郁可能通过诱导和促进炎症过程导致chd的发生与发展。

近年来，从天然植物中寻找有效的抗抑郁成分成为精神类药物研发领域的新思潮。茶叶中含有大量茶多酚，具有较强的抗氧化能力，一直作为天然的食品抗氧化添加剂儿茶素类以表没食子儿茶素没食子酸酯(egcg)含量最高，占50％～60％，具有抗癌、抗突变、预防和治疗心脑血管系统疾病以及调理内分泌、免疫系统等生物活性。因此，egcg可能作为一种新型药物在心梗后焦虑中发挥治疗作用。

技术实现要素：

本发明目的在于提供一种egcg在改善心肌梗塞后焦虑症状中的应用，主要研究egcg对于心梗后大鼠(模拟心梗后的动物模型)焦虑症状的作用。

为实现上述目的，采用了以下技术方案：本发明所述应用方法包括以下步骤：

s1，制备心梗大鼠模型：

将wistar大鼠用10％的水合氯醛、0.4ml/100g麻醉后，仰位固定于手术台上，采用成都泰盟公司的生物信号定量分析系统bl420记录大鼠术前及术后标准体表心电图；

正中剃毛，碘酒常规消毒，手术刀正中切开，用止血钳钝性分离肋间肌肉，自左侧4～5肋间开胸，暴露心脏，在肺动脉圆锥及左心耳之间，距左冠状动脉起点2～3mm处，用3～0无创缝合线结扎左冠状动脉前降支，立刻将心脏送回胸腔，挤出胸腔内气体，待心率及呼吸平稳后用5～0缝合线缝合，假手术组在心脏左冠状动脉左前降支处穿线不接扎，余过程与模型建立相同；

术后模型组及假手术组大鼠肌注青霉素钠注射液80000u/天，共3天，以防止感染；

s2，药物治疗：

手术前灌胃给予egcg组大鼠egcg-50mg/kg共7天，心梗手术后继续给予egcg14天，假手术组和心梗大鼠给予相同体积生理盐水；

s3，焦虑行为测定：通过旷场实验和明暗穿梭箱检测大鼠焦虑行为；

旷场实验：

s3-1-1，实验箱底部平均划为25格，中央9格为中央区域，其余16格为外周区域；

s3-1-2，在安静且昏暗的房间，捏住大鼠距根部1/3处的尾巴将大鼠轻放入实验箱中央，观察其在5min内总活动路程和中央区域停留时间，红外照明，摄像头记录过程；

s3-1-3，1次oft后清理箱内粪便等残留物，喷洒酒精并用纱布拭擦干净，以除去上一只大鼠的气味，避免影响下一只大鼠实验结果；

高架十字迷宫：

s3-2，每只大鼠置于epm的中央平台处，使其头部正对其中一个开放臂，释放后即开始记录5min内下述指标：进入开放臂次数、进入开放臂时间；

s4，egcg可以减轻心梗大鼠血清和脑组织炎症反应：通过elisa方法检测各组大鼠血清和海马组织il-6，no含量。

与现有技术相比，本发明应用具有如下优点：egcg是一种天然茶叶提取物，应用于人体副作用小，同时也具有营养心肌的作用。

附图说明

图1是本发明应用中大鼠进入开放臂次数的结果图。

图2是本发明应用中大鼠进入开放臂时间的结果图。

图3是本发明应用中通过elisa方法检测各组大鼠血清和海马组织il-6、no含量的结果图。

具体实施方式

下面结合附图对本发明做进一步说明：

本发明所述应用方法包括以下步骤：

s1，制备心梗大鼠模型：

将wistar大鼠用10％的水合氯醛、0.4ml/100g麻醉后，仰位固定于手术台上，采用成都泰盟公司的生物信号定量分析系统bl420记录大鼠术前及术后标准体表心电图；

正中剃毛，碘酒常规消毒，手术刀正中切开，用止血钳钝性分离肋间肌肉，自左侧4～5肋间开胸，暴露心脏，在肺动脉圆锥及左心耳之间，距左冠状动脉起点2～3mm处，用3～0无创缝合线结扎左冠状动脉前降支，立刻将心脏送回胸腔，挤出胸腔内气体，待心率及呼吸平稳后用5～0缝合线缝合，假手术组在心脏左冠状动脉左前降支处穿线不接扎，余过程与模型建立相同；

术后模型组及假手术组大鼠肌注青霉素钠注射液80000u/天，共3天，以防止感染；

s2，药物治疗：

手术前灌胃给予egcg组大鼠egcg-50mg/kg共7天，心梗手术后继续给予egcg14天，假手术组和心梗大鼠给予相同体积生理盐水；

s3，焦虑行为测定：通过旷场实验和明暗穿梭箱检测大鼠焦虑行为；

旷场实验：

s3-1-1，实验箱底部平均划为25格，中央9格为中央区域，其余16格为外周区域；

s3-1-2，在安静且昏暗的房间，捏住大鼠距根部1/3处的尾巴将大鼠轻放入实验箱中央，观察其在5min内总活动路程和中央区域停留时间，红外照明，摄像头记录过程；

s3-1-3，1次oft后清理箱内粪便等残留物，喷洒酒精并用纱布拭擦干净，以除去上一只大鼠的气味，避免影响下一只大鼠实验结果；

高架十字迷宫：

s3-2，每只大鼠置于epm的中央平台处，使其头部正对其中一个开放臂，释放后即开始记录5min内下述指标：进入开放臂次数、进入开放臂时间；结果见图1、图2。

s4，egcg可以减轻心梗大鼠血清和脑组织炎症反应：通过elisa方法检测各组大鼠血清和海马组织il-6，no含量。结果见图3。

以上所述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。

技术特征：

技术总结
本发明公开了一种EGCG在改善心肌梗塞后焦虑症状中的应用，包括以下步骤：制备心梗大鼠模型；手术前灌胃给予EGCG组大鼠EGCG‑50mg/kg共7天，心梗手术后继续给予EGCG14天，假手术组和心梗大鼠给予相同体积生理盐水；通过旷场实验和明暗穿梭箱检测大鼠焦虑行为；每只大鼠置于EPM的中央平台处，使其头部正对其中一个开放臂，释放后即开始记录5min内下述指标：进入开放臂次数、进入开放臂时间；通过ELISA方法检测各组大鼠血清和海马组织IL‑6，NO含量。本发明应用对于人体副作用小，同时也具有营养心肌的作用等优点。

技术研发人员：王金鹏;章北林
受保护的技术使用者：吉林大学
技术研发日：2019.04.25
技术公布日：2019.06.14