本发明公开了一种兽药组合物，具体涉及一种重要组合物及其制备方法，尤其涉及用于治疗母猪不孕症的中药组合物及其制备方法。
背景技术：
：中国是世界第一的养猪大国，在全球占比超过半壁江山，多达7亿头，猪肉产量超过了5000万吨，生猪市场规模高达1.323万亿元，占全国gdp的1.8%。养猪环节占据整个猪肉市场份额70%~80%，psy是养猪业的核心竞争力，是发展养猪业的关键所在。而目前我国养猪市场效率还较低，根据国际上衡量一个养猪场效率指标psy测算，即每年能繁殖的母猪每年能提供的断奶仔猪数量，我国的psy数值约为15，而美国的psy数值大约为25，是中国的1.7倍左右。影响psy的主要因数如下：每窝活仔猪数、每年产窝数。每窝活仔猪数主要取决于产仔数、仔猪死亡率。每年产窝数由于猪的生理特征会有产仔时间间隔、断奶时长和配种的成功率。而产仔数、仔猪死亡率、每年产窝数、产仔时间间隔、断奶时长和配种的成功率又与不孕症发生率、治愈率息息相关。母畜不孕症一般是指繁殖适龄母畜经过三个发情周期的时间仍不发情，或经过三个发情周期的配种仍不受孕以及超过了初配年龄仍不发情的母畜疾病。母畜不孕症不是一种独立的疾病，而是由多种原因引起的一种后果，病情也比较复杂，可以概括为先天器质性生理缺陷和后天功能性病理变化两大类，前者无论采用药物或手术治疗现在仍然难以解决问题；属于病理变化、功能失常的一般可以治愈。具体病理性原因有卵巢疾病类不孕症、持久黄体性疾病类不孕症和子宫内膜炎导致的不孕症。针对不同病理性原因导致的不孕症，中西医一般疗法为找出主要致病因素，然后分别采用或西医或中医或中西结合的方法对症治疗。由于目前养猪业市场由于缺乏疗效能媲美化药疗法的兽药，母猪不孕症治疗仍多为西医疗法。如对于子宫内膜炎的治疗，西兽医主要应用抗生素类和防腐消毒类药物进行子宫冲洗和灌注；对于卵巢静止和持久黄体性不孕症的治疗，西兽医主要采用激素疗法；更有甚者，部分养殖户在更大经济利益的驱动下和缺乏正确科学知识的指导下，滥用药物，如使用一些禁用或淘汰的药品，如抗生素诺氟沙星、氧氟沙星等，雌激素等性激素等。长期用药和不正确使用多种药物等；乃至正常使用抗生素、激素等化药产品等，都易导致兽药大量残留。人体当摄入一定量的兽药残留超标的动物源性食品后，或长期食用兽药残留超标的动物源性食品，当体内蓄积的药物浓度达到一定量时，人体将会产生各种急、慢性中毒、不良反应、导致人体胃肠道菌群失衡及耐药菌株的产生。举例说，一些抗菌药物如青霉素类、磺胺类、四环素类及某些氨基糖苷类抗生素能使部分人发生过敏反应，当这些被致敏的个体再接触磺胺类药物治疗时，磺胺类药物就会与抗体结合生成抗原抗体复合物，进而产生严重的过敏问题，甚至产生变态反应；人体胃肠道寄生的大量菌群，长期与动物源性食品中低剂量的抗菌药物残留接触，将会使人体内有益菌和致病菌之间的平衡收到破坏；猪和人体的敏感菌株在长期或较低剂量接触抗菌药物后均容易产生耐药等。此外，各种药物原型及其代谢物随着粪便、尿液的排除对生态环境造成的污染也不容忽视。针对不同病理性原因导致的不孕症，一般疗法为先找出主要致病因素，然后对症治疗。如中国专利cn201610030763公开了一种治疗母猪母猪子宫内膜炎的中药口服液，对治疗母猪内膜炎具有疗效高、抗菌作用明显等优点，但仅能治疗子宫内膜炎导致的母猪不孕症，应用时需先分析主要致病因素，然后筛选子宫内膜炎导致的不孕症进行治疗，一是对养殖场人员素质要求较高，二是存在较高的误诊错治的风险，三是人力、物力、财力投入较大，可操作性相对较低。现有文献报道中，能同时预防和治疗卵巢疾病类不孕症、持久黄体性疾病类不孕症和子宫内膜炎导致的不孕症的药物少之又少。如中国专利cn200310106276公开的防治母畜不孕症的中药灌注液，对多种原因导致的母畜不孕症均有较好疗效，但由于中药灌注液的特殊应用部位要求，根据《中国兽药典》2015年版附录0112灌注剂通则规定，子宫灌注剂按《中国兽药典》2015年版附录1101无菌检查项下检查，应无菌。故现有中药灌注液制备方法中，均加有适量防腐剂以确保满足用药要求，如cn200310106276添加的防腐剂为硼砂。但硼砂毒性较高，世界各国多禁用为食品添加物，容易导致药物残留，人体若摄入过多的硼，会引发多脏器的蓄积性中毒。技术实现要素：本发明所要解决的技术问题是在于提供一种可用于治疗母猪不孕症的中药组合物及其制备方法，采用这种组合物制备得到的子宫灌注液作用范围广，不但可以用来防治卵巢静止、持久黄体性疾病导致的不孕症，对子宫内膜炎导致的不孕症也有理想效果，而且采用本发明的中药组合和制备方法，无需添加防腐剂，制备得到的药液疗效确切、起效快、治愈率高、成本低廉、无防腐剂添加、无毒副作用。本发明所述的治疗母猪不孕症的中药组合物，按重量份数计，由以下组分组成：苦参5-30份，益母草5-20份，淫羊藿1-20份，石榴皮5-15份，肿节风0-15份，地榆0-10份，千里光0-10份，土荆皮0-10份，两面针0-10份，苦木0-10份，儿茶0-10份，大黄0-10份，黄连0-10份，黄柏0-20份，黄药子0-10份，当归0-10份。其中，本发明所述的治疗母猪不孕症的中药组合物，按重量份数计还可以为：苦参15-25份，益母草10-20份，淫羊藿5-20份，石榴皮5-15份，肿节风10-15份，地榆0-5份，千里光0-5份，土荆皮0-10份，两面针0-5份，苦木0-10份，儿茶0-5份，大黄0-10份，黄连0-10份，黄柏0-10份，黄药子0-5份，当归0-5份。为解决上述技术问题，本发明还提供了所述的中药组合物的制备方法，其制备方法包括：（1）按重量份数称取药材，加水回流提取2次，将提取液过滤，合并滤液；（2）滤液浓缩，加入澄清剂澄清，冷藏，离心；（3）离心液加注射用水适量，精滤，分装，高压灭菌获得中药组合物子宫灌注剂。步骤（1）为提取步骤，具体步骤如下：药材加10-12倍量水浸泡1.5-2小时后，回流提取1.5小时，提取液过滤，滤渣加8-10倍量水回流提取1小时，提取液过滤，将2次的提取液滤液合并。步骤（2）为浓缩澄清步骤，澄清剂为明胶，具体为按浓缩液5%-10%的体积加入1%的明胶溶液。步骤（3）为成型步骤，在该子宫灌注液中无需加入防腐剂。为了研究得到一种疗效能媲美激素和抗生素的低毒高效无残留的纯中药制剂，且同时能预防和治疗卵巢疾病类不孕症、持久黄体性疾病类不孕症和子宫内膜炎导致的不孕症，申请人经过长期摸索和实验发现，采用苦参、益母草、淫羊藿、石榴皮、肿节风、地榆、土荆皮、两面针、儿茶、黄连、黄药子、当归、红花、白术复配制备得到的子宫灌注剂可以满足效果，但是为了满足无菌要求，必须添加适量防腐剂。为了避免防腐剂的添加导致的药物残留，申请人经过大量试验后偶然发现，在上述处方的基础上进一步优化处方后得到本发明的中药处方，同时采用本发明的特定工艺参数，制备得到的中药灌注剂，由于药液中各药材成分之间发生的种种已知或未知的作用，可以满足无菌要求。药材多含蛋白质，蛋白质遇沸水则凝固在细胞内，妨碍有效成分浸出，因此，在提取前须加常温慢透适当时间，使水浸入药材内部，将蛋白质先溶解出来。本研究中，考察了各处方药材的吸水情况，经试验表明，本发明处方的吸水浸泡时间为1.5-2小时。提取次数、加水量、提取时间为影响中药提取效果的三个主要因素，其中提取次数一般为1-3次，提取时间一般为1-2h，加水量一般为8-12倍。申请人以苦参总碱、淫羊藿苷、总生物碱为评价指标，以提取次数、提取时间、加水量为考察因素，正交筛选处方样品的最佳提取工艺。通过长期摸索表明，提取工艺采用以下参数能得到满意效果，药材加10-12倍量水浸泡1.5-2小时后，回流提取1.5-2小时，提取液过滤，滤渣加8-10倍量水回流提取1-1.5小时，提取液过滤，将2次的提取液滤液合并，但该提取工艺仍不能解决防腐剂问题。进一步优化后，得到如下特定的提取工艺：药材加10-12倍量水浸泡1.5-2小时后，回流提取1.5小时，提取液过滤，滤渣加8-10倍量水回流提取1小时，提取液过滤，将2次的提取液滤液合并；特定澄清工艺参数指的是，使用澄清剂明胶，具体为按浓缩液5%-10%的体积加入1%的明胶溶液。本剂型中药提取液为水提液，成分复杂。中药液中如蛋白质、粘液质、多糖及树胶等一些高分子物质本身即是天然表面活性剂和增粘剂，高分子物质具有增溶、助悬、乳化和润湿等作用，可作为疏水胶体保护剂，使中药液中的固体细微颗粒和乳浊液微滴等难溶性成分处于相对稳定状态。目前中药提取液澄清及分离纯化工艺主要有离心法、醇沉法、壳聚糖絮凝法、明胶絮凝法、活性炭吸附法、大孔树脂分离法、膜分离法等。申请人采用大量试验，对上述方法进行考察，结果表明，采用壳聚糖絮凝法和明胶絮凝法可以有效去除提取液中的蛋白质等杂质。进一步试验偶然发现，得到如下特定澄清工艺：使用澄清剂明胶，具体为按浓缩液5%-10%的体积加入1%的明胶溶液。本发明必将对母猪不孕症的治疗带来翻天覆地的变化，促进猪场走向绿色环保优质高效的道路，保障饮食安全，促进产业健康可持续发展。与现有技术相比，本发明的优势之处在于：（1）本发明针对母猪特征，专治母猪不孕症，能用于防治卵巢疾病类不孕症、持久黄体性疾病类不孕症和子宫内膜炎导致的不孕症，应用范围广泛。（2）本发明所述的组合物，纯中药处方不仅避免了使用西药导致的抗生素和激素的滥用，也就避免了因此导致的耐药性问题，也不会扰乱子宫的自我防御机能；同时该剂型直达病灶也避免了使用中药口服制剂起效较慢的问题；采用本发明所述的组合物及其制备方法，制备过程中无需添加防腐剂即能满足无菌要求，避免了使用常规中药子宫灌注液中添加防腐剂导致防腐剂蓄积引起的母猪脏器的毒副作用问题，且具有疗效确切、起效快、治愈率高、成本低廉、无防腐剂添加、无毒副作用的优点。具体实施方式以下通过数个具体实施例来进一步说明本发明方案，应当理解，下述的任何一个实施例并非任何形式的对本发明的进一步限定。实施例1以1000ml药液计处方量药材：苦参200g，益母草100g，淫羊藿100g，石榴皮150g，地榆50g，千里光50g，苦木50g，儿茶50g，大黄50g，黄连50g，黄药子50g，当归50g。制备方法：在配制好的药材中，加12倍量水浸泡1.5小时后，回流提取1.5小时，提取液过滤，滤渣加10倍量水回流提取1小时，提取液过滤，将2次的提取液滤液合并，浓缩，按浓缩液10%的体积加入1%的明胶溶液，混匀，冷藏过夜，离心，离心液加注射用水至1000ml，精滤，分装，高压灭菌获得。实施例2以1000ml药液计处方量药材：苦参150g，益母草150g，淫羊藿50g，石榴皮100g，肿节风100g，地榆30g，土荆皮10g，两面针10g，苦木10g，儿茶10g，大黄20g，黄连10g，黄柏10g，黄药子10g，当归10g。制备方法：在配制好的药材中，加11倍量水浸泡2小时后，回流提取1.5小时，提取液过滤，滤渣加9倍量水回流提取1小时，提取液过滤，将2次的提取液滤液合并，浓缩，按浓缩液6%的体积加入1%的明胶溶液，混匀，冷藏过夜，离心，离心液加注射用水至1000ml，精滤，分装，高压灭菌获得。对比实施例1以1000ml药液计处方量药材：苦参200g，益母草100g，淫羊藿100g，石榴皮150g，地榆50g，千里光50g，苦木50g，儿茶50g，大黄50g，黄连50g，黄药子50g，当归50g。制备方法：在配制好的药材中，加12倍量水浸泡1.5小时后，回流提取1小时，提取液过滤，滤渣加10倍量水回流提取1小时，提取液过滤，将2次的提取液滤液合并，浓缩，按浓缩液10%的体积加入1%的明胶溶液，混匀，冷藏过夜，离心，离心液加注射用水至1000ml，精滤，分装，高压灭菌获得。对比实施例2以1000ml药液计处方量药材：苦参200g，益母草100g，淫羊藿100g，石榴皮150g，地榆50g，千里光50g，苦木50g，儿茶50g，大黄50g，黄连50g，黄药子50g，当归50g。制备方法：在配制好的药材中，加12倍量水浸泡1.5小时后，回流提取2小时，提取液过滤，滤渣加10倍量水回流提取1.5小时，提取液过滤，将2次的提取液滤液合并，浓缩，按浓缩液10%的体积加入1%的明胶溶液，混匀，冷藏过夜，离心，离心液加注射用水至1000ml，精滤，分装，高压灭菌获得。对比实施例3以1000ml药液计处方量药材：苦参200g，益母草100g，淫羊藿100g，石榴皮150g，地榆50g，千里光50g，苦木50g，儿茶50g，大黄50g，黄连50g，黄药子50g，当归50g。制备方法：在配制好的药材中，加12倍量水浸泡1.5小时后，回流提取1.5小时，提取液过滤，滤渣加10倍量水回流提取1小时，提取液过滤，将2次的提取液滤液合并，浓缩，按浓缩液10%的体积加入1%的壳聚糖溶液，混匀，冷藏过夜，离心，离心液加注射用水至1000ml，精滤，分装，高压灭菌获得。对比实施例4以1000ml药液计处方量药材：苦参200g，益母草150g，淫羊藿100g，石榴皮100g，肿节风100g，地榆30g，土荆皮10g，两面针10g，儿茶10g，黄连10g，黄药子10g，当归10g，红花50g，白术50g。制备方法：在配制好的药材中，加12倍量水浸泡1.5小时后，回流提取1.5小时，提取液过滤，滤渣加10倍量水回流提取1小时，提取液过滤，将2次的提取液滤液合并，浓缩，按浓缩液10%的体积加入1%的明胶溶液，混匀，冷藏过夜，离心，离心液加注射用水至1000ml，精滤，分装，高压灭菌获得。对比实施例5以1000ml药液计处方量药材：苦参150g，益母草150g，淫羊藿50g，石榴皮100g，肿节风100g，地榆30g，土荆皮10g，两面针10g，儿茶10g，黄连10g，黄药子10g，当归10g，红花50g，白术50g。制备方法：在配制好的药材中，加12倍量水浸泡1.5小时后，回流提取1.5小时，提取液过滤，滤渣加10倍量水回流提取1小时，提取液过滤，将2次的提取液滤液合并，浓缩，按浓缩液10%的体积加入1%的明胶溶液，混匀，冷藏过夜，离心，离心液加注射用水至1000ml，加入苯酚1g，精滤，分装，高压灭菌获得。实施例3质量检测分别采用高效液相色谱法、无菌检查法等测定各实施例样品的苦参总碱、淫羊藿苷、干浸膏含量和无菌情况，其中苦参总碱和淫羊藿苷含量以目标成分转移率表示，无菌为样品生产后40℃条件下放置30天检测，结果见下表。实施例1实施例2对比实施例1对比实施例2对比实施例3对比实施例4对比实施例5苦参总碱/%60.2%%62.8%%52.3%%59.6%%60.1%%59.6%56.0%%淫羊藿苷/%84.1%85.0%76.2%84.3%84.3%84.3%84.1%干浸膏/%15.2%14.8%10.3%17.1%15.0%15.5%15.2%无菌无菌无菌有菌有菌有菌有菌无菌实施例4预防母猪不孕症的临床效果观察试验方法选择胎龄、膘情基本一致、上一胎次有发情延迟和子宫内膜炎病史的母猪50头，随机分为a、b两组，于产后24小时，a组分别灌注按实施例1制备的药液100ml，b组分别灌注按实施例2制备的药液100ml，观察用药后子宫内膜炎的发生率、发情间隔（分娩至发情时间）和受孕情况，并与自身上一胎次的发病率和发情间隔进行比较。试验结果往常该猪场母猪产后子宫内膜炎的发病率在24%左右，而预防给药的50头母猪，a组仅2例、b组仅1例在用药后出现子宫内膜炎症状，但均在72小时内康复，均能明显降低子宫内膜炎的发病率，起到预防子宫内膜炎的效果。50头母猪前一胎次的发情间隔时间为41.3天，用药后，a组、b组发情间隔均较前一胎次分别缩短8~48和11~51天，分别平均缩短25.3天和26.1天，且受孕率100%，均能预防母猪不孕症的发生。实施例5治疗母猪卵巢静止、持久黄体的临床效果观察试验方法选择胎龄、膘情基本一致、空怀的卵巢静止病母猪10头和胎龄、膘情基本一致、空怀的持久黄体病母猪10头，分别灌注按实施例2制备的药液100ml，观察用药后发情情况，10天未见发情者再灌注1次，观察记录配种受孕情况。试验结果用药后，10头卵巢静止病母猪均发情配种受孕，其中7头用药1次，3头用药2次。10头持久黄体病母猪均发情配种受孕，其中4头用药1次，6头用药2次。20头母猪经配种后均在第一情期受胎。试验结果表明，说明采用本发明制备的药液对能有效治疗卵巢静止和持久黄体导致的母猪不孕症。实施例6治疗母猪子宫内膜炎导致的不孕症的临床效果观察试验方法选择胎龄、膘情基本一致，2-8胎次，不同程度的患有子宫内膜炎（子宫分泌物呈粘液脓性或脓性，并有明显的体温升高、食用或不食症状）的母猪150头，随机分为a、b、c三组。清洗子宫后，a组分别灌注按实施例1制备的药液100ml一次；b组分别灌注按实施例2制备的药液100ml一次；c组灌入肌缩宫素，2小时后，用0.9%生理盐水100ml稀释林可霉素和新霉素各2g，再加10ml碳酸氢钠，灌注于子宫内，一日一次，逐日观察症状的变化。治疗子宫内膜炎疗效评价经药物治疗后的母猪，若发情正常，流出的黏液透明清亮，无脓性分泌物排除，判定为治愈；若用药后子宫内膜炎症状影响环节，子宫黏液基本恢复正常，判定为治疗有效；否则判定为无效。由下表可以看出，a、b两组的母猪治愈数和有效数明显高于c组，说明采用本发明制备的药液疗效好，治愈率高。组别母猪数/头治愈数/头治愈率/%有效数/头有效率/%无效数/头无效率/%a组503978510612b组50428436510c组5031621122822不孕治疗评价给药物治愈的母猪，发情后配种，在配种之后，进行产仔数以及成活率对比。由下表可以看出，a、b两组的母猪在治愈后配种，怀胎数、怀胎率、产仔数和仔猪成活率都优于c组，并且治愈数和有效数明显高于西药对照组，说明采用本发明制备的药液疗效好，治愈率高。组别治愈数/头怀胎数/头怀胎率/%下崽数/头平均产仔/头成活数/头成活率/%a组393897.43168.331098.1b组424095.23218.031698.4c组312683.91616.215193.8当前第1页12