桉柠蒎肠溶微球及其制备方法与流程

1.本发明涉及生物医药领域，具体地，本发明涉及桉柠蒎肠溶微球及其制备方法。


背景技术：

2.桉油精、柠檬烯和α-蒎烯药物组合物是一种黏液溶解性祛痰药，适用于急慢性鼻窦炎、急慢性支气管炎、肺炎等呼吸系统疾病，具有祛痰、消炎、促进造影剂排出的作用。目前桉油精、柠檬烯和α-蒎烯药物组合物的已上市制剂为口服肠溶软胶囊剂，该药品治疗效果明确，通过肠溶技术掩盖挥发油类药物的刺激性气味。但仍有部分患者用药后发生反味、胃部刺激等不良反应。该不良反应发生的原因可能是软胶囊肠溶包衣破裂后，大量药物快速释放，刺激胃肠道。
3.因此，需要开发基于桉油精、柠檬烯和α-蒎烯的新型肠溶制剂，将药物分散包裹于肠溶微粒中，再按给药剂量制成胶囊或片剂等最终制剂。每个贮药微粒均有肠溶效果，进而可以有效降低药物在胃部的突释风险，减少刺激性。


技术实现要素：

4.本申请是基于发明人对以下事实和问题的发现和认识作出的：
5.目前已上市的桉柠蒎口服肠溶软胶囊剂对于吞咽困难的患者顺应性较差，不适用于儿童和老年人服用，且已上市的桉油精、柠檬烯和α-蒎烯药物组合物制剂，需要每天服用三次，服药次数较多容易发生漏服的现象。
6.本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。
7.发明人利用微粒给药技术，开发了含有桉油精、柠檬烯和α-蒎烯的新型口服制剂，使其便于吞咽服用，提高患者顺应性，同时，通过缓控释技术制备新型缓释制剂，减少给药次数。
8.在本发明的第一方面，本发明提出了一种桉柠蒎肠溶微球。根据本发明的实施例，所述桉柠蒎肠溶微球包括：微球芯油相，所述微球芯油相包括活性成分，所述活性成分包括桉油精、柠檬烯和α-蒎烯的至少之一；微球皮，所述微球皮包裹于所述活性成分的表面，所述微球皮由海藻酸钙骨架构成。根据本发明实施例的桉柠蒎肠溶微球便于吞咽服用，提高了患者顺应性，同时具有缓释效果，可有效减少给药次数。
9.根据本发明的实施例，上述桉柠蒎肠溶微球还可以进一步具有如下附加技术特征至少之一：
10.根据本发明的实施例，所述微球芯油相进一步包括乳化剂成分。进而可提高油相的均匀性和初乳的乳化效果。
11.根据本发明的实施例，所述乳化剂包括选自吐温80、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氢化蓖麻油的至少之一。根据本发明实施例的乳化剂可以采用单一或复合乳化剂。
12.根据本发明的实施例，所述乳化剂由吐温80和聚氧乙烯蓖麻油组成。发明人发现，当采用吐温80和聚氧乙烯蓖麻油组成的复配乳化剂时，油相混合更加均匀，初乳乳化效果
更佳，无油相出现。
13.根据本发明的实施例，所述活性成分与所述乳化剂成分的质量比为(1～4)：(0.75～1.5)。发明人发现，当活性成分与所述乳化剂成分的质量比在上述范围内，微球的包封率高于 80％。
14.根据本发明的实施例，所述活性成分与所述乳化剂成分的质量比为(1～4)：1.25。发明人发现，当活性成分与所述乳化剂成分的质量比在上述范围内，微球的包封率高达95％，且初乳流动性较好。
15.根据本发明的实施例，所述吐温80和聚氧乙烯蓖麻油的质量比为1:4～3:2，优选，2:3。发明人发现，所述吐温80和聚氧乙烯蓖麻油的质量比在上述范围内，乳化效果好且微球包封率高于80％。当吐温80和聚氧乙烯蓖麻油的质量比为2:3，微球包封率高达90％。
16.根据本发明的实施例，所述海藻酸钙骨架由海藻酸钠和钙盐络合交联形成。
17.根据本发明的实施例，所述钙盐包括选自氯化钙、碳酸钙的至少之一。
18.根据本发明的实施例，所述海藻酸钠和所述钙盐的质量摩尔比为(4～10)g:(0.03～0.04) mol。进而可进一步提高海藻酸钠和钙盐络合交联形成海藻酸钠球形骨架的概率。
19.根据本发明的实施例，所述活性成分、乳化剂成分以及海藻酸钠的质量比为(1～4)： (0.75～1.5)：(4～10)。发明人发现，当活性成分、乳化剂成分以及海藻酸钠的质量比在上述范围内，微球外观为球形且包封率高。
20.根据本发明的实施例，所述活性成分、乳化剂成分以及海藻酸钠的质量比为(1～4)： (0.75～1.5)：(6～10)。发明人发现，当活性成分、乳化剂成分以及海藻酸钠的质量比在上述范围内，微球外观为规整白色球形且包封率高。
21.根据本发明的实施例，所述活性成分、乳化剂成分以及海藻酸钠的质量比为(1～4)： (0.75～1.5)：8。发明人发现，当活性成分、乳化剂成分以及海藻酸钠的质量比在上述范围内，初乳乳化效果好，微球外观为规整白色球形且包封率高达90％。
22.根据本发明的实施例，所述活性成分、乳化剂成分以及海藻酸钠的质量比为(1～4)： 1.25：8。发明人发现，当活性成分、乳化剂成分以及海藻酸钠的质量比在上述范围内，初乳乳化效果好，流动性好，微球外观为规整白色球形且包封率高达90％。
23.根据本发明的实施例，所述微球皮进一步包括壳聚糖，所述壳聚糖与所述海藻酸钠交联。进而壳聚糖与未反应的海藻酸钠进一步交联，堵塞海藻酸钙生成的骨架网眼，使药物释放受阻，缓释效果更佳。
24.根据本发明的实施例，桉柠蒎肠溶微球的剂型为颗粒剂或混悬剂。所述桉柠蒎肠溶微球制成颗粒剂或混悬剂的剂型，更加便于吞咽，减少制备过程中药物的挥发和浪费。
25.在本发明的第二方面，本发明提出了一种制备前面所述的桉柠蒎肠溶微球的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括将溶解有预定量的海藻酸钠的水相与混合有预定量的所述活性成分和所述乳化剂成分的油相进行第一混合处理，以便获得初乳；将所述初乳与溶解有预定量的氯化钙的醋酸溶液进行第二混合处理，以便获得所述桉柠蒎肠溶微球。所述“预定量”的剂量如前面所述。根据本发明实施例的方法所制备的按拧蒎肠溶微球便于吞咽服用，患者顺应性高，缓释效果佳。
26.根据本发明的实施例，上述方法还可以进一步包括如下附加技术特征至少之一：
27.根据本发明的实施例，所述第一混合处理是在温度为40～50℃、转速为4000～
12000rpm 的条件下进行5～25min。发明人发现，所述第一混合处理在上述条件下进行，初乳的乳化效果好，微球的包封率高。
28.根据本发明的实施例，所述第一混合处理是在转速为6000rpm的条件下进行15min。进而可减少乳化过程中的热量的产生，提高初乳的稳定性，且所获得的微球的包封率高达 96％。
29.根据本发明的实施例，溶解有氯化钙的醋酸溶液进一步溶解有壳聚糖。进而可提高所获得微球的缓释效果。
具体实施方式
30.下面详细描述本发明的实施例。下面描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。
31.以下实施例1～4筛查组合物中活性成分桉柠蒎的比例以及桉油精、柠檬烯、α-蒎烯之间比例对肠溶微球的影响。
32.实施例1(药物组合物中桉柠蒎为3g)
33.(1)处方如表1所示。
34.表1：
[0035][0036][0037]
(2)制备方法
[0038]
取处方量海藻酸钠置于300ml蒸馏水中，50℃水浴加热使其溶解，作为水相。取处方量桉油精、柠檬烯、α-蒎烯和吐温80置于烧杯中混合均匀，作为油相。在50℃水浴加热下，将油相缓慢滴入水相中，8000rpm高速剪切15min，得初乳。取处方量氯化钙加入 1％醋酸溶液中，完全溶解后得氯化钙醋酸溶液。用注射器将初乳以每分钟20滴速度滴入氯化钙醋酸溶液，滴完后放置6h，得白色小球。用蒸馏水冲洗小球表面，转移至真空干燥箱中40℃干燥12h。
[0039]
实验现象和结果：该处方可以制备较为均匀的初乳，略有挥发油气味，滴入氯化钙醋酸溶液后可制得白色微球，形态较好，包封率为80.3％。
[0040]
实施例2(活性成分中蒎烯比例高)
[0041]
(1)处方如表2。
[0042]
表2：
[0043]
桉油精0.25g
柠檬烯0.25gα-蒎烯2.50g海藻酸钠6.0g吐温800.75g氯化钙3.75g1％醋酸溶液375ml
[0044]
(2)制备方法同实施例1。
[0045]
实验现象和结果：该处方制备的初乳较为均匀，略有气味，滴入氯化钙醋酸溶液后可制得白色微球，形态规整，包封率为78.5％。
[0046]
实施例3(活性成分只有桉油精的，活性成分总量4g)
[0047]
(1)处方如表3。
[0048]
表3：
[0049][0050][0051]
(2)制备方法同实施例1。
[0052]
实验现象和结果：该处方制备的初乳表面略有油滴，有桉油精气味，滴入氯化钙醋酸溶液后可制得白色微球，形态规整，包封率为62.7％。
[0053]
实施例4(桉柠蒎的量为1g)
[0054]
(1)处方如表4。
[0055]
表4:
[0056]
桉油精0.52g柠檬烯0.53gα-蒎烯0.45g海藻酸钠6.0g吐温800.75g氯化钙3.75g1％醋酸溶液375ml
[0057]
(2)制备方法同实施例1。
[0058]
实验现象和结果：该处方制备的初乳为白色乳液，静置不分层，滴入氯化钙醋酸溶液后可制得白色圆球形微球，包封率为84.8％。
[0059]
以下实施例5考察不同钙盐对肠溶微球的影响。
[0060]
实施例5用碳酸钙代替氯化钙
[0061]
(1)处方如表5。
[0062]
表5：
[0063]
桉油精1.05g柠檬烯1.05gα-蒎烯0.9g海藻酸钠6.0g吐温800.75g碳酸钙3.38g2.1％醋酸溶液375ml
[0064]
(2)制备方法：
[0065]
取处方量海藻酸钠置于300ml蒸馏水中，50℃水浴加热使其溶解，作为水相。取处方量桉油精、柠檬烯、α-蒎烯和吐温80置于烧杯中混合均匀，作为油相。在50℃水浴加热下，将油相缓慢滴入水相中，8000rpm高速剪切15min，得初乳。取处方量碳酸钙加入 2.1％醋酸溶液中，完全溶解后得醋酸钙-醋酸溶液。用注射器将初乳以每分钟20滴速度滴入醋酸钙-醋酸溶液，滴完后放置6h，得白色小球。用蒸馏水冲洗小球表面，转移至真空干燥箱中40℃干燥12h。
[0066]
试验现象及结果：本方法使用其他可溶性钙盐作为微球的沉淀剂。初乳为白色乳液，碳酸钙加入醋酸溶液中时产生大量气泡，待气泡排净，将初乳滴入醋酸钙-醋酸溶液中制得白色微球。包封率与氯化钙醋酸溶液相近，为83.1％。
[0067]
以下实施例6～9对乳化剂的种类、乳化剂的用量、海藻酸钠的用量进行筛选。
[0068]
实施例6乳化剂种类筛选
[0069]
固定处方中桉柠蒎油、海藻酸钠的处方不变，选择不同乳化剂制备初乳，以油相及初乳状态筛选适宜乳化剂。
[0070]
初步处方如表6。
[0071]
表6：
[0072]
桉油精1.50g柠檬烯1.05gα-蒎烯0.45g海藻酸钠6.0g乳化剂1.0g氯化钙3.75g壳聚糖0.8g1％醋酸溶液375ml
[0073]
筛选乳化剂类型及用量如表7。
[0074]
表7：
[0075]
试验编号乳化剂用量1吐温801g2聚氧乙烯蓖麻油1g3聚氧乙烯氢化蓖麻油1g
4吐温80+聚氧乙烯蓖麻油0.5g+0.5g5吐温80+聚氧乙烯氢化蓖麻油0.5g+0.5g
[0076]
制备方法：取处方量海藻酸钠置于300ml蒸馏水中，50℃水浴加热使其溶解，作为水相。取处方量桉油精、柠檬烯、α-蒎烯和乳化剂置于烧杯中混合均匀，作为油相。在50℃水浴加热下，将油相缓慢滴入水相中，8000rpm高速剪切15min，得初乳。取处方量氯化钙加入1％醋酸溶液中，完全溶解后加入处方量壳聚糖，得氯化钙-壳聚糖醋酸溶液。用注射器将初乳以每分钟20滴速度滴入氯化钙-壳聚糖醋酸溶液，滴完后放置6h，得白色小球。用蒸馏水冲洗小球表面，转移至真空干燥箱中40℃干燥12h。
[0077]
试验现象及结果如表8。
[0078]
表8：
[0079]
试验编号油相现象初乳现象1可以混合均匀白色乳液，有油滴2搅拌后混合均匀白色乳液，无油滴3分层，不能混合均匀白色乳液，无油滴4可以混合均匀白色乳液，无油滴5不能混合白色乳液，无油滴
[0080]
根据油相及初乳现象，筛选出4号乳化剂较好，易于混合且乳化效果好。因此选择复合乳化剂吐温80+聚氧乙烯蓖麻油作为后续乳化剂。
[0081]
实施例7复合乳化剂比例
[0082]
固定处方中桉柠蒎油、海藻酸钠的处方不变，筛选复合乳化剂吐温80-聚氧乙烯蓖麻油的比例，以油相、初乳状态及包封率筛选适宜乳化剂。
[0083]
初步处方如表9：
[0084]
表9：
[0085]
桉油精1.50g柠檬烯1.05gα-蒎烯0.45g海藻酸钠6.0g复合乳化剂1.0g氯化钙3.75g壳聚糖0.8g1％醋酸溶液375ml
[0086]
筛选乳化剂类型及用量如表10所示。
[0087]
表10:
[0088]
[0089][0090]
制备方法同实施例5。
[0091]
试验现象及结果如表11所示。
[0092]
表11:
[0093]
试验编号油相现象初乳现象包封率1稍加热后混合半透明白色乳液，无油滴87.3％2混合均匀白色乳液，无油滴90.0％3混合均匀白色乳液，无油滴88.7％4混合均匀白色乳液，无油滴81.9％5混合均匀白色乳液，略油滴72.4％
[0094]
根据试验结果，筛选出2号比例较好，乳化效果好且包封较高。因此选择复合乳化剂吐温80：聚氧乙烯蓖麻油比例为2:3。
[0095]
实施例8海藻酸钠用量筛选
[0096]
固定处方中桉柠蒎油、复合乳化剂的处方不变，筛选海藻酸钠用量，以初乳状态及包封率筛选海藻酸钠用量。
[0097]
处方如表12所示。
[0098]
表12：
[0099]
桉油精1.50g柠檬烯1.05gα-蒎烯0.45g海藻酸钠适量吐温800.4g聚氧乙烯蓖麻油0.6g氯化钙3.75g壳聚糖0.8g1％醋酸溶液375ml
[0100]
筛选海藻酸钠用量如表13。
[0101]
表13：
[0102]
试验编号12345海藻酸钠(g)246810
[0103]
制备方法同实施例5。
[0104]
试验现象及结果如表14。
[0105]
表14：
[0106]
试验编号初乳现象微球外观包封率1白色乳液较难成型82.6％2白色乳液不规整球形87.1％3白色乳液，略带黄色白色圆球89.3％4淡黄色乳液白色圆球92.5％5较为黏稠，淡黄色乳液白色圆球91.8％
[0107]
根据试验结果，筛选出4号比例较好，乳化效果好且包封较高。因此选择海藻酸钠的处方量为8g。
[0108]
实施例9乳化剂用量筛选
[0109]
固定处方中其他量及吐温80：聚氧乙烯蓖麻油比例不变，以初乳状态及包封率筛选复合乳化剂的用量。
[0110]
表15：
[0111]
试验编号吐温80(g)聚氧乙烯蓖麻油(g)乳化剂总量(g)10.20.30.520.30.450.7530.40.61.040.50.751.2550.60.91.5
[0112]
制备方法同实施例5。
[0113]
试验现象及结果。
[0114]
表16：
[0115]
试验编号初乳外观包封率1白色乳液，略带黄色78.9％2白色乳液，略带黄色86.4％3白色乳液，略带黄色91.3％4白色乳液95.7％5白色乳液96.0％
[0116]
根据试验结果，筛选出4号比例较好，乳化效果好，包封较高，且初乳流动性较好。因此选择乳化剂的用量为吐温80 0.5g，聚氧乙烯蓖麻油0.75g。
[0117]
以下实施例10～11对初乳剪切转速和时间进行筛选
[0118]
实施例10初乳剪切转速筛选
[0119]
固定处方中各物料用量不变，以包封率为指标筛选制备方法中初乳的剪切转速，筛选方案如表17。
[0120]
表17：
[0121]
[0122]
试验现象及结果如表18。
[0123]
表18：
[0124]
试验编号初乳外观包封率1白色乳液94.4％2白色乳液96.3％3白色乳液95.8％4白色乳液92.4％5白色乳液90.1％
[0125]
根据试验结果，筛选出2号剪切转速较好，因此确定剪切转速为6000rpm。
[0126]
实施例11初乳剪切时间筛选
[0127]
固定处方中各物料用量不变，以包封率为指标筛选制备方法中初乳的剪切时间，筛选方案如下表19。
[0128]
表19：
[0129][0130]
试验现象及结果如表20。
[0131]
表20：
[0132][0133][0134]
根据试验结果，筛选出3号剪切时间较好，因此确定剪切时间为15min。
[0135]
经过实施例6～11的筛选，得到的最优桉柠蒎海藻酸钠微球处方如表21所示。
[0136]
表21：
[0137]
桉油精1.6g柠檬烯1.05gα-蒎烯0.35g海藻酸钠8.0g吐温800.5g聚氧乙烯蓖麻油0.75g氯化钙3.75g壳聚糖0.8g
1％醋酸溶液375ml
[0138]
最优制备方法如下所述：
[0139]
取处方量海藻酸钠置于300ml蒸馏水中，50℃水浴加热使其溶解，作为水相。取处方量桉油精、柠檬烯、α-蒎烯、吐温80和聚氧乙烯蓖麻油置于烧杯中混合均匀，作为油相。在50℃水浴加热下，将油相缓慢滴入水相中，6000rpm高速剪切15min，得初乳。取处方量氯化钙加入1％醋酸溶液中，完全溶解后加入处方量壳聚糖，得氯化钙-壳聚糖醋酸溶液。用注射器将初乳以每分钟20滴速度滴入氯化钙-壳聚糖醋酸溶液，滴完后放置6h，得白色小球。用蒸馏水冲洗小球表面，转移至真空干燥箱中40℃干燥12h。
[0140]
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
[0141]
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。