用于不经胞质抽吸的精子注射方法的保持卵母细胞的移液管与流程

用于不经胞质抽吸的精子注射方法的保持卵母细胞的移液管
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发明目的
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如本说明书的标题中所表达的，本发明涉及一种不经胞质抽吸用于精子注射方法的保持卵母细胞的移液管，它提供了其具有优点和新颖性特征的预期功能，这些优点和新颖性特征将在下文中详细描述并构成对本领域当前的技术水平的可替代的改进。
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更具体地，本发明的目的集中在用作胞质内精子注射技术或icsi(del ingles“intracytoplasmic sperm injection”)方法中保持卵母细胞的手段的微量移液管，不同于传统的移液管，其新颖的结构构造避免用注射针头抽吸胞质以确保胞质膜的破裂的步骤，因为新的移液管配备喇叭形末端，通过吸取保持卵母细胞，使卵母细胞在该末端内稍稍变形，并且所述变形导致卵母细胞膨胀增大，从而使用注射移液管使胞质膜破裂，而不经首先吸取胞质。
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本发明的应用领域
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本发明的应用领域包含在专用于医疗器械制造的行业内，特别是集中在适用于细胞水平的操作和干预的微型装置领域，且更具体地，涉及预期用于辅助生殖操作的装置。
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发明背景
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众所周知，胞质内精子注射技术或icsi是辅助生殖技术，其由在得到和制备配子后借助于使用微型移液管将精子注射到其胞质内使卵母细胞受精组成，得到和制备配子的目的在于获得可以转移到母亲的子宫中的胚胎。
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为了实施所述技术，必须用保持移液管保持在先剥落的卵母细胞，同时用另一移液管(在这种情况下为注射移液管)注射精子。
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问题在于，由于其高弹性卵母细胞周围的膜是难以破裂的膜；实际上，可以将注射针头插入胞质而实际上不破坏膜(通过注射移液管在显微镜下使膜凹入，但并未破坏)。破坏膜的常规方式在于用注射移液管进行抽吸，直至破坏膜。然而，如果在胞质抽吸过程中改变其排列方式，这导致胞质紊乱，从而可能严重影响有丝分裂纺锤体(仅可以估计其位置，因为使用常规icsi技术无法观察到)。
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膜必须破裂以使精子正确释放到胞质中，并且进一步激活ca++或钙离子通道机制，进而干预细胞分裂机制的激活。
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为了解决该问题，申请人本人是实用新型es1187335u的所有人，其描述了“用于在胞质内精子注射技术中保持卵母细胞的移液管”，其特征在于保持卵母细胞并通过其膜进行注射而不经事先胞质抽吸。具体地，所述保持移液管的构造具有借助于压力保持卵母细胞的创新工作端，为此其具有减小的截头圆锥形部分，其中其圆柱体的直径显著减小，直至限定小支撑尖端，其具有平面的、笔直的以及具有相对于圆柱体成角度的构造。
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因此，所述保持移液管借助于轻微的压力而不是像常规移液管那样借助于吸取来保持卵母细胞，该压力引起卵母细胞膨胀增大，且由此允许在不经抽吸胞质的情况下破坏细胞质膜。
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本发明的目的是开发另一种不同的、可替代的保持移液管模型，该模型不经注射移液管抽吸胞质，该模型不同于上述举出的，在保持卵母细胞时提供了更大的保证，因为这
是移液管易于改进的方面。
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具体地，本发明不是借助于压在卵母细胞上的工作尖端来起作用，这可能构成高技能的操作，以使得卵母细胞在被压迫时不会向任一侧滑动，而本发明借助于用保持移液管自身吸取卵母细胞而起作用，就像常规移液管一样，唯一的区别在于，虽然那些(常规)移液管仅进行抽吸以保持卵母细胞而不使其变形，但是该移液管(本发明的移液管)在将卵母细胞部分地容纳在其喇叭形工作端中时抽吸卵母细胞使其变形，如下面下文详细说明的。
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此外，作为参考当前本领域的状态，必须指出，申请人至少不知晓存在其他任何具有相同应用的移液管，用于将卵母细胞以胞质内精子注射方法保持或另一种具有与本文要求保护的移液管的结构和构成特征相同或相似的结构和构成特征的相似移液管。


技术实现要素：

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因此，将本发明提出的用于不经胞质抽吸的用于精子注射方法的保持卵母细胞的移液管构造成其应用领域中具有明显的新颖性，考虑到上述目的在实施过程中是具体地且令人满意地实现的，其实施具有特征细节使得在本说明书所附的最终权利要求中适当地描述了使之成为可能并与之区别。
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具体地，如上所述，本发明提出了用于在胞质内精子注射技术方法中保持卵母细胞的移液管，该移液管满足了不经胞质抽吸的保持目的，因为它避免了注射针头进行抽吸这样的步骤，而这是常规保持移液管所需要的，从而确保胞质膜破裂并引起卵母细胞活化，并使精子更容易沉积在胞质中，但是，如前一节所述，这可能破坏胞质的原始结构，在某些情况下，改变有丝分裂纺锤体的结构。
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为此，本发明的移液管包含细长和狭窄的圆柱体，其工作端、即用于保持卵母细胞的端部的特征在于具有漏斗形的喇叭状构造，该构造通过其较小的-直径的端部与沿圆柱形主体延伸的吸取导管联通，较大的相对端的尺寸可以以紧密贴合的方式容纳卵母细胞，从而在抽吸所述卵母细胞时，卵母细胞仍截留在所述喇叭形开口的端部内并变形至足以具有更膨胀的表面，这有利于注射移液管的应用，而不必事先用移液管抽吸胞质。
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因此，与常规的保持移液管一样，本发明的不经胞质抽吸的移液管满足以icsi方法保持卵母细胞的目的，但是避免使用注射针头抽吸胞质的步骤，这是在常规的移液管所必需的，所述常规移液管具有圆形工作端，以确保胞质膜破裂并且导致卵母细胞活化，且更易于使精子沉积在细胞质内，但这破坏胞质的原始结构，在某些情况下可能改变有丝分裂纺锤体的结构。
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类似于常规的保持移液管，本发明的保持移液管由经胚胎测试的玻璃，特别是硼硅酸盐制成，并且本发明的保持移液管的制造方法也类似于这些常规的移液管的制造方法。
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由此，构想移液管及其部件的尺寸，以便可以在使用常规保持移液管的相同显微注射设备中使用它，只需稍微更改icsi技术方案即可。
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因此，所述移液管代表了迄今为止尚不知晓的结构和构成特征方面的创新，这些原因合并其实际实用性，为其提供了充分的理由来获得所寻求的专有权益。
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附图描述
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为了补充所进行的描述并为了帮助更好地理解本发明的特征，将一组附图作为本
说明书的组成部分附于本说明书中，其中以非限制性的示例性方式示出了描述如下：
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图1显示了本发明的保持移液管物体的侧视图，其具有其总体构造和包含所观察到的主要部件。
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图2显示了根据本发明的图1所示的细节a并且相当于移液管的工作端的放大图，其中观察到其总体构造。
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图3和图4分别显示根据图2中所示的移液管的工作端的纵向截面图和放大的正视图的相应放大图，其中对其构造和尺寸进行了更详细的观察。
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图5和图6显示本发明的移液管的工作端的操作模式的相应示意图，该移液管用于借助于吸取和使卵母细胞变形和不经其细胞质抽吸来保持卵母细胞。
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本发明的优选实施方案
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鉴于所提及的附图并且根据所使用的编号，在其中可以观察到本发明的保持移液管的非限制性实施方案，该移液管包含以下详细指示和描述的部件和元件。
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在这种意义上，如所述附图所示，本发明的移液管(1)包含细长、狭窄和中空的圆柱体(100)，在其内部延伸吸取导管(101)，该吸取导管与保持卵母细胞(2)的工作端(1a)联通，所述工作端的特征在于具有限定内部锥形腔(105)的漏斗形的喇叭状构造，其较小直径的近端(102)与上述吸取导管(101)联通，而较大直径的远端(103)的尺寸被设计成以以紧密贴合的方式容纳卵母细胞(2)，使得在经由吸取导管(101)抽吸它时，卵母细胞部分地被截留在内部并变形，如图5和6所示，从静止状态下的球形变为卵圆形，其使表面张紧并确定更膨胀的卵母细胞，从而有利于应用注射移液管，而不必事先用移液管抽吸细胞质。
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在优选的实施方案中，圆柱体(100)具有(l1)约为5cm的长度和500微米(micra)的外径(d)，且吸取导管(101)具有沿其完整长度的80微米恒定内径(d)，但其与漏斗形工作端(1a)的连接点除外，在所述导管(101)的排出开口处，与所述漏斗的较小直径近端(102)相一致，存在缩颈(104)，其中所述直径显著减小至仅约为17微米。
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此外，所述漏斗形工作端(1a)所限定的内部锥形腔(105)还优选具有128微米的长度(l2)，并且在其较大直径的远端(103)处具有120微米的内径(d)，而工作端(1a)的所述远端(103)的外径(d)优选为180微米。
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已经充分描述了本发明的性质以及将其付诸实施的方式，认为没有必要扩展该解释，以使本领域技术人员将理解其范围和从中得出的优点，由此指出，在其本质上，本发明可以在其他实施方案中实施，这些实施方案在细节上与借助于实施例显示的不同，并且只要不改变、变化或变型基本原理，同样可以取得所寻求的保护。