一种眼科用组合物及其制备方法与流程

本申请涉及眼科药品
技术领域：
，具体涉及一种眼科用组合物及其制备方法。
背景技术：
：近年来，随着电脑、手机等显示终端对日常生活的渗透，视疲劳、干眼症等眼部问题越来越常见，它们所引起的眼干、眼涩、眼酸胀、视物模糊甚至视力下降等不适症状给人们的工作和生活带来了很大的困扰和影响。滴眼液的使用很大程度上缓解了这种不适，但是通常应用的滴眼液有效成分是甘油、壳聚糖、纤维素衍生物等，常因其不足的治疗效果或副作用而不能达到令人满意的结果。四氢嘧啶的系统名称是2-甲基-1,4,5,6-四氢嘧啶-4-羧酸，羟基四氢嘧啶的系统名称是5-羟基-2-甲基-1,4,5,6-四氢嘧啶-4-羧酸，四氢嘧啶不仅是一种重要的渗透压补偿溶质，而且对处于高温、高盐、冷冻、干燥、辐射等不良环境刺激下的细胞和生物大分子(生物膜、蛋白质、酶和核酸)有着很好的保护作用。专利cn101491525a公开了四氢嘧啶在制备治疗干眼症药物中的应用，四氢嘧啶与医药学上可接受的载体甘油、苯扎溴铵等联合使用，有效缓解干眼症。为了保证滴眼液的无菌性，上述专利的滴眼液组合物中添加了苯扎溴铵等防腐剂，但是防腐剂的添加会损害眼表面细胞，并导致泪膜不稳定从而引发干眼症，这对干眼症的治疗是很不利的。技术实现要素：有鉴于此，本申请提供一种眼科用组合物，该组合物含有合适配比的复配透明质酸钠、透明质酸锌和四氢嘧啶，不含防腐剂，高、低分子量的透明质酸钠在水溶液中形成规则的网状结构，透明质酸锌和四氢嘧啶均匀分散在透明质酸钠所形成的网状结构中，三者协同作用，在减少眼泪蒸发、保护眼表细胞、稳定泪膜、缓解视疲劳等方面达到了意料之外的效果。本申请的目的之一是提供一种眼科用组合物的制备方法，高、低分子量的透明质酸钠在水溶液中形成规则的网状结构，透明质酸锌和四氢嘧啶等活性成分能均匀分散在透明质酸钠所形成的网状结构中。本申请的目的之二是提供一种眼科用组合物，该组合物在减少眼泪蒸发、保护眼表细胞、稳定泪膜、缓解视疲劳等方面都有意料之外的效果。本申请的目的之三是选择一种友好的成分替代眼科用组合物中的防腐剂。为实现上述目的，根据本申请的一个方面，提供了一种眼科用组合物以及制备方法。本申请提供如下技术方案。1、一种眼科用组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将不同分子量的透明质酸盐于加热条件下在水中溶解，加入氯化钠搅拌均匀，用无机碱或盐调节ph至碱性，经醇沉、洗涤、干燥得到复配透明质酸盐粉末；将所述复配透明质酸盐粉末溶于水中，然后加入透明质酸锌、四氢嘧啶或四氢嘧啶衍生物，得到混合溶液；调节所述混合溶液的ph，过滤除菌或热压灭菌得眼科用组合物。2、根据项1所述的制备方法，其特征在于，所述复配透明质酸盐为复配透明质酸钠，所述复配透明质酸钠包括高分子透明质酸钠和低分子透明质酸钠；所述高分子透明质酸钠分子量为500kda-2000kda，优选为600kda-1000kda，低分子透明质酸钠的分子量为50kda-150kda，优选为50kda-80kda；所述高分子透明质酸钠与低分子透明质酸钠的质量比为(5-9)：(1-3)，优选为8：2。3、根据项1所述的制备方法，其特征在于，选自氢氧化钠、碳酸钠、碳酸氢钠、乙酸钠中的一种或两种以上，无机碱或盐调节ph为8-13，优选ph为9.5-10.5。4、根据项1所述的制备方法，其特征在于，所述氯化钠的重量分数为1％-8％，优选为1％-4％。5、根据项1所述的制备方法，其特征在于，所述醇沉是以90％-95％乙醇或甲醇进行，优选为乙醇；所述洗涤是以75％-85％乙醇或甲醇洗涤，优选为乙醇。6、根据项1所述的制备方法，其特征在于，采用无机酸或有机酸及其缓冲溶液调节混合溶液的ph为6.5-7.5；所述无机酸或有机酸及其缓冲溶液为柠檬酸、盐酸、硼酸、磷酸或其缓冲溶液中的一种或两种以上，优选为柠檬酸钠缓冲溶液。7、根据项1～6所述的制备方法，其特征在于，包括以下相对于总重量100重量份数的眼科用组合物：四氢嘧啶或四氢嘧啶衍生物：1-5份；透明质酸锌：0.01-0.5份；复配透明质酸钠：0.1-0.6份。8、根据项7所述的制备方法，其特征在于，包括以下相对于总重量100重量份数的原料：四氢嘧啶或四氢嘧啶衍生物：1.5-2.5份；透明质酸锌：0.05-0.15份；复配透明质酸钠：0.15-0.25份。9、根据项1～8中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述透明质酸锌的分子量为1kda-50kda，优选为5kda-10kda。10、根据项1～9中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述四氢嘧啶或四氢嘧啶衍生物为四氢嘧啶或羟基四氢嘧啶，优选为四氢嘧啶。11、根据项1～10中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述眼科用组合物为滴眼剂或眼用凝胶剂，优选为滴眼剂。12、一种眼科用组合物，其特征在于，包括四氢嘧啶或四氢嘧啶衍生物、透明质酸盐。13、根据项12所述的眼科用组合物，其特征在于，所述透明质酸盐包括复配透明质酸钠和透明质酸锌。14、根据项13所述的眼科用组合物，其特征在于，所述复配透明质酸钠在水溶液中形成规则的网状结构，透明质酸锌和四氢嘧啶或四氢嘧啶衍生物均匀分散在透明质酸钠所形成的网状结构中。15、根据项12-14中任一项所述的眼科用组合物，其特征在于，包括以下相对于总重量100重量份数的眼科用组合物：四氢嘧啶或四氢嘧啶衍生物：1-5份；透明质酸锌：0.01-0.5份；复配透明质酸钠：0.1-0.6份。16、根据项15所述的眼科用组合物，其特征在于，包括以下相对于总重量100重量份数的原料：四氢嘧啶或四氢嘧啶衍生物：1.5-2.5份；透明质酸锌：0.05-0.15份；复配透明质酸钠：0.15-0.25份。17、根据权利要求13～16中任一项所述的眼科用组合物，其特征在于，所述透明质酸锌的分子量为1kda-50kda，优选为5kda-10kda。18、根据项13～17中任一项所述的一种眼科用组合物，其特征在于，所述复配透明质酸钠包括高分子透明质酸钠和低分子透明质酸钠；所述高分子透明质酸钠分子量为500kda-2000kda，优选为600kda-1000kda，低分子透明质酸钠的分子量为50kda-150kda，优选为50kda-80kda；所述高分子透明质酸钠与低分子透明质酸钠的质量比为(5-9)：(1-3)，优选为8：2。19、根据项13～18中任一项所述眼科用组合物，其特征在于，所述四氢嘧啶或四氢嘧啶衍生物为四氢嘧啶或羟基四氢嘧啶，优选为四氢嘧啶。20、根据项13～19中任一项所述的一种眼科用组合物，其特征在于，所述眼科用组合物为滴眼剂或眼用凝胶剂，优选为滴眼剂。21、根据项12～19中任一项所述的一种眼科用组合物，其特征在于，所述眼科用组合物还包括柠檬酸钠缓冲液和水，所述柠檬酸钠缓冲液用来调整所述眼科用组合物的ph，以使所述眼科用组合物的ph为6.5-7.5，然后所述水定容至100重量份。本申请提供的眼科用组合物的制备方法，特定分子量的复配透明质酸钠在水溶液中形成规则的网状结构，透明质酸锌和四氢嘧啶等活性成分均匀分散在透明质酸钠所形成的网状结构中，三者协同作用，发挥减少眼泪蒸发、保护眼表细胞、稳定泪膜、消炎、缓解视疲劳的功能。本申请提供的眼科用组合物，由于透明质酸锌具有防腐的功效，因此在所述眼科用组合物中不需要再添加防腐剂，可以避免防腐剂对眼表面细胞的损害，在眼部问题治疗过程中稳定泪膜，帮助眼部问题的恢复。本申请提供的眼科用组合物，在保存期间ph稳定，能有效减少患者用药过程中的眼刺激性。附图说明图1为本申请实施例5制备的复配透明质酸盐粉末水溶液的原子力显微镜图。具体实施方式以下对本申请的示范性实施例做出说明，其中包括本申请实施例的各种细节以助于理解，应当将它们认为仅仅是示范性的。因此，本领域普通技术人员应当认识到，可以对这里描述的实施例做出各种改变和修改，而不会背离本申请的范围和精神。同样，为了清楚和简明，以下的描述中省略了对公知功能和结构的描述。本申请提供一种眼科用组合物的制备方法，包括以下步骤：步骤一：将不同分子量的透明质酸盐于加热条件下在水中溶解，加入氯化钠搅拌均匀，用无机碱或盐调节ph至碱性，经醇沉、洗涤、干燥得到复配透明质酸盐粉末；步骤二：将所述复配透明质酸盐粉末溶于水中，然后加入透明质酸锌、四氢嘧啶或四氢嘧啶衍生物，得到混合溶液；步骤三：调节所述混合溶液的ph，过滤除菌或热压灭菌得眼科用组合物。在本申请所述的方法中，步骤一中的所述复配透明质酸盐为大分子网状结构，步骤二中的透明质酸锌和四氢嘧啶或四氢嘧啶衍生物可以镶嵌在大分子网状结构中形成大分子网状眼科用组合物，从而发挥减少眼泪蒸发、保护眼表细胞、稳定泪膜、消炎、缓解视疲劳的功能。在本申请中，所述复配透明质酸盐为复配透明质酸钠，所述复配透明质酸钠包括高分子透明质酸钠和低分子透明质酸钠；所述高分子透明质酸钠分子量可以为500kda-2000kda，优选为600kda-1000kda，低分子透明质酸钠的分子量可以为50kda-150kda，优选为50kda-80kda；所述高分子透明质酸钠与低分子透明质酸钠的质量比为(5-9)：(1-3)，优选为8：2。在本申请中，所述高分子透明质酸钠分子量可以为500kda、550kda、600kda、650kda、700kda、750kda、800kda、850kda、900kda、950kda、1000kda、1100kda、1200kda、1300kda、1400kda、1500kda、1600kda、1700kda、1800kda、1900kda、2000kda。在本申请中，所述低分子透明质酸钠分子量可以为50kda、60kda、70kda、80kda、90kda、100kda、110kda、120kda、130kda、140kda、150kda。在本申请中，所述无机碱或盐选自氢氧化钠、碳酸钠、碳酸氢钠、乙酸钠中的一种或两种以上，无机碱或盐调节ph为8-13，优选ph为9.5-10.5。在本申请中所述氯化钠的重量分数为1％-8％，优选为1％-4％。在本申请中，所述醇沉是以90％-95％乙醇或甲醇进行，优选为乙醇醇沉至沉淀析出完全。醇沉法(alcoholprecipitation)是利用杂质能溶于乙醇而有效成分不溶于乙醇的特性，在加入乙醇后，杂质转溶于乙醇中而有效成分则被沉淀出来的方法。醇沉的目的是为了除去杂质保留有效成分。在本申请中，所述洗涤是以75％-85％乙醇或甲醇洗涤，优选为乙醇洗涤4次。在本申请中，采用无机酸或有机酸及其缓冲溶液调节混合溶液的ph为6.5-7.5；所述无机酸或有机酸及其缓冲溶液为柠檬酸、盐酸、硼酸、磷酸或其缓冲溶液中的一种或两种以上，优选为柠檬酸钠缓冲溶液。所述混合溶液的ph可以6.5、6、7、7.5。在本申请中，所述眼科用组合物，包括以下相对于总重量100重量份数的眼科用组合物：四氢嘧啶或四氢嘧啶衍生物：1-5份；透明质酸锌：0.01-0.5份；复配透明质酸钠：0.1-0.6份。在本申请中，所述眼科用组合物，包括以下相对于总重量100重量份数的原料：四氢嘧啶或四氢嘧啶衍生物：1.5-2.5份；透明质酸锌：0.05-0.15份；复配透明质酸钠：0.15-0.25份。在本申请中，相对于总重量100重量份的眼科用组合物，所述四氢嘧啶或四氢嘧啶衍生物的含量可以为1份、1.5份、2份、2.5份、3份、3.5份、4份、5份。在本申请中，相对于总重量100重量份的眼科用组合物，所述透明质酸锌的含量可以为0.01份、0.03份、0.05份、0.08份、0.1份、0.13份、0.15份、0.18份、0.2份、0.23份、0.25份、0.3份、0.35份、0.4份、0.45份、0.5份。在本申请中，相对于总重量100重量份的眼科用组合物，所述复配透明质酸钠的含量可以为0.1份、0.15份、0.2份、0.25份、0.3份、0.35份、0.4份、0.45份、0.5份、0.55份、0.6份。在本申请中，所述透明质酸锌的分子量为1kda-50kda，优选为5kda-10kda。所述透明质酸锌的分子量可以为1kda、1.5kda、2kda、2.5kda、3kda、3.5kda、4kda、4.5kda、5kda、5.5kda、6kda、6.5kda、7kda、7.5kda、8kda、8.5kda、9kda、9.5kda、10kda、10.5kda、11kda、11.5kda、12kda、12.5kda、13kda、13.5kda、14kda、14.5kda、15kda、15.5kda、16kda、16.5kda、17kda、17.5kda、18kda、18.5kda、19kda、19.5kda、20kda、21kda、22kda、23kda、24kda、25kda、26kda、27kda、28kda、29kda、30kda、31kda、32kda、33kda、34kda、35kda、36kda、37kda、38kda、39kda、40kda、41kda、42kda、43kda、44kda、45kda、46kda、47kda、48kda、49kda、50kda。在本申请中，所述四氢嘧啶或四氢嘧啶衍生物为四氢嘧啶或羟基四氢嘧啶，优选为四氢嘧啶。在本申请中，所述眼科用组合物为滴眼剂或眼用凝胶剂，优选为滴眼剂。在本申请中，在步骤一利用复配透明质酸钠形成了大分子网状结构，可以参照本申请的申请人在先的专利号为201510037950.6的中国专利，该方法通过将高分子量透明质酸和低分子量透明质酸在一定条件下进行配制，从而使透明质酸分子聚集成网状结构并经由醇沉析出。而在本申请中，进一步通过添加分子量较小的透明质酸锌和四氢嘧啶或四氢嘧啶衍生物，可以使这些分子量较小的物质镶嵌在所述复配透明质酸钠的大分子网状结构中，从而形成具有大分子网状结构的眼科用组合物，该大分子网状结构的眼科用组合物可以减少眼泪蒸发、保护眼表细胞、稳定泪膜、消炎、缓解视疲劳的功能。本申请提供一种眼科用组合物，包括四氢嘧啶或四氢嘧啶衍生物、透明质酸盐。在本申请中，所述透明质酸盐包括复配透明质酸钠和透明质酸锌。四氢嘧啶的系统名称是2-甲基-1,4,5,6-四氢嘧啶-4-羧酸，羟基四氢嘧啶的系统名称是5-羟基-2-甲基-1,4,5,6-四氢嘧啶-4-羧酸，四氢嘧啶不仅是一种重要的渗透压补偿溶质，而且对处于高温、高盐、冷冻、干燥、辐射等不良环境刺激下的细胞和生物大分子(生物膜、蛋白质、酶和核酸)有着很好的保护作用，而且四氢嘧啶还具有一定的消炎作用，对于缓解眼部疲劳具有一定的作用。透明质酸锌是透明质酸的锌盐，通过锌离子与透明质酸钠羧基上的钠离子进行离子交换制得。锌离子具有抗菌、防腐的能力，锌又是人体必须的微量元素之一，在视网膜、脉络膜和前列腺为最高，锌被络合在蛋白质等生物大分子配位体中，参与各种视网膜功能。现有的滴眼液中锌离子一般以葡萄糖酸锌的形式加入，但是含葡萄糖酸锌的滴眼液在保存期间易发生ph下降，致使患者用药眼刺激性增强。透明质酸钠为天然高分子化合物，是构成组织基质的重要成分，具有较好的黏弹性，对角膜具有保护作用，与纤黏连接蛋白结合，促进角膜上皮细胞的连接和延伸，加快角膜创伤愈合。此外，透明质酸钠分子具有强亲水能力和润滑作用，可稳定泪膜、防止角膜干燥和减轻眼组织摩擦，缓解干眼症的不适症状。柠檬酸钠缓冲液用以调整所述眼部组合物的ph，以适于人的眼部环境。本申请提供的一种眼科用组合物，包括以下相对于总重量100重量份数的眼科用组合物：四氢嘧啶或四氢嘧啶衍生物：1-5份；透明质酸锌：0.01-0.5份；复配透明质酸钠：0.1-0.6份。本申请提供一种眼科用组合物，包括以下相对于总重量100重量份数的原料：四氢嘧啶或四氢嘧啶衍生物：1.5-2.5份；透明质酸锌：0.05-0.15份；复配透明质酸钠：0.15-0.25份。在本申请中，相对于总重量100重量份的眼科用组合物，所述四氢嘧啶或四氢嘧啶衍生物的含量可以为1份、1.5份、2份、2.5份、3份、3.5份、4份、5份。在本申请中，相对于总重量100重量份的眼科用组合物，所述透明质酸锌的含量可以为0.01份、0.03份、0.05份、0.08份、0.1份、0.13份、0.15份、0.18份、0.2份、0.23份、0.25份、0.3份、0.35份、0.4份、0.45份、0.5份。在本申请中，相对于总重量100重量份的眼科用组合物，所述复配透明质酸钠的含量可以为0.1份、0.15份、0.2份、0.25份、0.3份、0.35份、0.4份、0.45份、0.5份、0.55份、0.6份。在本申请中，所述透明质酸锌的分子量为1kda-50kda，优选为5kda-10kda。所述透明质酸锌的分子量可以为1kda、1.5kda、2kda、2.5kda、3kda、3.5kda、4kda、4.5kda、5kda、5.5kda、6kda、6.5kda、7kda、7.5kda、8kda、8.5kda、9kda、9.5kda、10kda、10.5kda、11kda、11.5kda、12kda、12.5kda、13kda、13.5kda、14kda、14.5kda、15kda、15.5kda、16kda、16.5kda、17kda、17.5kda、18kda、18.5kda、19kda、19.5kda、20kda、21kda、22kda、23kda、24kda、25kda、26kda、27kda、28kda、29kda、30kda、31kda、32kda、33kda、34kda、35kda、36kda、37kda、38kda、39kda、40kda、41kda、42kda、43kda、44kda、45kda、46kda、47kda、48kda、49kda、50kda。在本申请中，所述四氢嘧啶或四氢嘧啶衍生物为四氢嘧啶或羟基四氢嘧啶，优选为四氢嘧啶。在本申请中，所述眼科用组合物为滴眼剂或眼用凝胶剂，优选为滴眼剂。在本申请中，所述眼科用组合物还包括柠檬酸钠缓冲液和水，所述柠檬酸钠缓冲液用来调整所述眼科用组合物的ph，以使所述眼科用组合物的ph为6.5-7.5，然后所述水定容至100重量份。本申请所述的眼科用组合物具有较好的抑菌作用以及较好的ph稳定性，当透明质酸锌的分子量在1kda-50kda，复配透明质酸钠中的高、低分子量透明质酸的分子量分别在在500kda-2000kda和50kda-150kda，且四氢嘧啶、复配透明质酸钠以及透明质酸锌的含量比为(1-5)：(0.1-0.6)：(0.01-0.5)时，抑菌效果最好，而且14d的加速试验未见有明显的ph变化，稳定性较好。本申请所述的眼科用组合物，还能更好地治疗或预防干眼症、结膜炎症，当透明质酸锌的分子量在5kda-10kda，复配透明质酸钠中的高、低分子量透明质酸的分子量分别在在600kda-1000kda和50kda-80kda，且四氢嘧啶、复配透明质酸钠以及透明质酸锌的含量比为(1.5-2.5)：(0.15-0.25)：(0.05-0.15)时，所述眼科用组合物对缓解泪液分泌过少或泪膜不稳定等干眼症状的效果最好。实施例1取含量为80mg分子量为70wda的高分子透明质酸钠和含量为20mg分子量为6wda的低分子透明质酸钠，于60℃加热条件下在水中溶解，加入2mg氯化钠搅拌均匀，用氢氧化钠调节ph为9.5，搅拌下滴加2倍体积的95％的乙醇，沉淀析出完全，用85％的乙醇洗涤沉淀4次，真空干燥得复配透明质酸钠粉末；将所得复配透明质酸钠粉末溶于水中，充分搅拌使其溶解，加入1g四氢嘧啶和透明质酸锌(8kda)500mg，搅拌均匀，加注射用水至接近100ml容量，用柠檬酸钠缓冲液调节溶液ph＝7.0，继续加注射用水定容至100ml，用0.22μm孔径的滤膜过滤除菌，得到眼科用组合物，参数如表1所示。实施例2-实施例9以及对比例1-对比例4与实施例1不同之处在于四氢嘧啶或四氢嘧啶衍生物、透明质酸锌、复配透明质酸钠的含量以及分子量，详情参数见表1。对比例5对比例5与实施例5的各组分的分子量和加入的质量百分比相同，不同之处在于制备方法，具体采用的方法如下：取含量为160mg分子量为70wda的高分子透明质酸钠和含量为40mg分子量为6wda的低分子透明质酸钠，于60℃加热条件下在水中溶解，降到室温后加入2g四氢嘧啶和透明质酸锌(8kda)100mg，搅拌均匀，加注射用水至接近100ml容量，用柠檬酸钠缓冲液调节溶液ph＝7.0，继续加注射用水定容至100ml，用0.22μm孔径的滤膜过滤除菌，得到眼科用组合物，详情参数见表1。表1为各实施例以及对比例的原料组成对比表试验例1、原子力显微镜观察取实施例5所得复配透明质酸钠粉末10mg，溶于10ml水中，充分溶解后，移取复配透明质酸钠溶液滴在新鲜剥离的云母表面，用原子力显微镜观察。参数如下：multimodenanoscopeviii，探针是xsc11，扫描模式是scanasyst，扫描速度是1hz，分辨率是512×512。实施例5制备的复配透明质酸钠溶于水后呈规则的网状结构，结果如图1。2、抑菌效果取保存的金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、铜绿假单胞菌菌种，无菌条件下培养18～24h，得到指数生长期菌样本，配置106cfu/ml的菌悬液备用。取18个灭菌培养皿，在超净工作台上，每个培养皿倒入20ml培养基，凝固后，分别用接种环沾取上述菌悬液各200μl在平板表面均匀涂布，每种菌液涂布6个培养皿。将滤纸片剪成直径为10mm的圆片，在超净工作台上将灭菌滤纸片用无菌镊子分别放入到装有上述实施例1-实施例9和对比例1-对比例5制备的眼科用组合物的灭菌培养皿中浸泡，用无菌镊子夹取含药纸片，将多余药液在内培养皿边上擦掉，贴在含菌平板培养基表面，轻轻按压，使滤片与培养基密切接触，每个培养皿均匀放置5张滤片，滤纸片距离培养皿边缘20mm，每个滤纸片相隔不小于20mm，平行2份，设置无菌生理盐水滤片为对照组。放入37℃恒温培养箱中培养24h，取掉滤纸片，观察是否有抑菌圈，以十字交叉法测定其抑菌直径。结果如表2所示。表2为各实施例以及对比例制备的眼科用组合物的抑菌效果小结：从上表结果可以看出，本申请实施例1-9中，透明质酸锌和四氢嘧啶镶嵌在复配透明质酸钠构成的大分子网状结构中，得到的眼科用组合物具有较好的抑菌作用，尤其当透明质酸锌的分子量在5kda-10kda，复配透明质酸钠中的高、低分子量透明质酸的分子量分别在600kda-1000kda和50kda-80kda，且四氢嘧啶、复配透明质酸钠以及透明质酸锌的含量比为(1.5-2.5)：(0.15-0.25)：(0.05-0.15)时，本申请所述的眼科用组合物抑菌效果最好。3、ph稳定性将实施例1-实施例9以及对比例1-对比例5制备的眼科用组合物样品在60℃放置7d、14d，分别用酸度计对滴眼液的ph进行检测，考察各眼科用组合物在加速条件下，溶液ph的稳定性。结果如表3所示。表3为各实施例以及对比例制备的眼科用组合物的ph稳定性0d7d14d实施例16.986.856.76实施例27.016.836.77实施例37.006.926.88实施例47.016.916.87实施例57.006.966.90实施例67.006.906.78实施例76.996.896.79实施例86.996.906.86实施例97.006.896.87对比例17.006.816.53对比例26.986.836.56对比例36.996.886.61对比例47.006.796.52对比例56.986.736.68小结：由上表可知，本申请实施例1-9范围内的眼科用组合物均表现出较好的ph稳定性，14d的加速试验未见有明显的ph变化，尤其以优选范围内的组合物稳定性最好；而对比例的眼科用组合物相较上述实施例ph变化明显，对比例5虽然与实施例5的原料配比相同，但由于制备方法与本申请的方法不同，制备出来的眼部组合物ph稳定性较差。4、泪液分泌试验、泪膜破裂时间试验选6周龄wistar雌性大鼠75只，平均分成15组，分别为1组生理盐水对照组、14组实验组。生理盐水对照组和实验组后肢皮下注射3mg/ml的氢溴酸东崀菪碱建立干眼模型，每天注射4次(9点、12点、14点、18点)，每次0.5ml，左右两侧交替进行14d，建立大鼠干眼模型。对照组和实验组分别以生理盐水和实施例1-9以及对比例1-5制备的眼科用组合物，每3h点眼一次，每天点眼5次(8点、11点、14点、17点、20点)，连续28天。造模前、用药前及用药后7d、14d、21d、28d分别对各组大鼠行泪液分泌试验、泪膜破裂时间试验，记录数据。结果如表4-1和表4-2。泪液分泌试验：在造模前、用药前及用药后7d、14d、21d、28d的同一时间段使用酚红棉线进行泪液分泌试验测试大鼠双眼泪液分泌量。大鼠眼表不使用麻醉药物(测试主泪腺的分泌功能)，用镊子夹持酚红棉线，将其置于大鼠下睑结膜囊中外1/3处，停留30s取出。测量棉线湿润的长度并记录。泪膜破裂时间试验：将1μl10g/l荧光素钠滴至结膜囊，并闭合眼睑，裂隙灯显微镜钴蓝光下观察。3次瞬目后，以最后1次瞬目开始计时，至角膜出现第1个黑斑的时间即为泪膜破裂时间。表4-1为各实施例以及对比例的泪液泌分试验(mm)造模前0d7d14d21d28d实施例18.193.233.444.525.707.81实施例28.203.233.434.555.707.82实施例38.213.293.554.705.998.07实施例48.223.313.564.695.988.08实施例58.233.253.564.776.058.11实施例68.203.263.504.545.817.86实施例78.173.263.514.545.817.85实施例88.233.313.564.715.988.09实施例98.213.303.564.705.988.09对比例18.183.303.354.085.197.03对比例28.203.243.384.165.197.08对比例38.193.253.394.075.127.00对比例48.223.263.344.005.096.98对比例58.203.253.364.125.197.11对照组8.203.253.313.403.423.45表4-2为各实施例以及对比例的泪膜破裂时间试验(s)造模前0d7d14d21d28d实施例110.463.784.045.256.758.50实施例210.643.774.055.266.778.49实施例310.533.874.295.617.379.33实施例410.613.914.315.617.489.30实施例510.563.894.475.867.709.69实施例610.553.784.025.236.898.50实施例710.573.804.055.206.808.41实施例810.623.944.275.607.469.29实施例910.613.894.305.617.489.34对比例110.473.823.985.016.547.89对比例210.553.833.814.866.237.66对比例310.543.783.894.926.457.80对比例410.513.773.824.826.357.77对比例510.443.763.804.916.567.92对照组10.503.843.853.903.984.02小结：从上表结果可以看出，本申请实施例1-9所述的透明质酸锌和四氢嘧啶镶嵌在复配透明质酸钠构成的大分子网状结构中，得到的眼科用组合物更好地缓解症状，尤其当透明质酸锌的分子量在5kda-10kda，复配透明质酸钠中的高、低分子量透明质酸的分子量分别在600kda-1000kda和50kda-80kda，且四氢嘧啶、透明质酸钠以及透明质酸锌的含量比为(1.5-2.5)：(0.15-0.25)：(0.05-0.15)时，本申请所述的眼科用组合物对缓解泪液分泌过少或泪膜不稳定等干眼症状的效果最好。尽管以上本申请的实施方案进行了描述，但本申请并不局限于上述的具体实施方案和应用领域，上述的具体实施方案仅仅是示意性的、指导性的，而不是限制性的。本领域的普通技术人员在本说明书的启示下和在不脱离本申请权利要求所保护的范围的情况下，还可以做出很多种的形式，这些均属于本申请保护之列。当前第1页12