VX-765在制备心梗坏死预防药物中的应用的制作方法

本发明涉及医药领域，尤其是涉及vx-765在制备心梗坏死预防药物中的应用。

背景技术：

冠心病是冠状动脉血管发生动脉粥样硬化病变而引起血管腔狭窄或阻塞，造成心肌缺血、缺氧或坏死而导致的心脏病，ami是冠心病发展的严重类型，是造成我国人群死亡的最主要原因之一。目前药物或器械治疗大多只能缓解症状，但却不能逆转心脏组织损伤。心脏移植虽能彻底改善心脏状态，但因供体来源稀缺、免疫排斥以及昂贵的治疗费用等因素，在临床上很难广泛应用。

目前，心梗早期治疗药物包括以下三类：第一是抗血栓药物包括抗血小板药物，如阿司匹林，氯吡格雷，对于阿司匹林不能耐受的患者，可以使用氯吡格雷或者其咯他唑进行代替；第二是抗凝药物，目前常用的为低分子肝素钙，包括依诺肝素，那曲肝素或者是达肝素；第三是抗心肌缺血的药物，主要包括硝酸脂类、镇痛药物、β受体阻滞剂和钙离子拮抗剂。

vx-765(化学名称：(s)-1-((s)-2-{[1-(4-amino-3-chloro-phenyl)-methanoyl]-amino}-3,3-dimethyl-butanoyl)-pyrrolidine-2-carboxylicacid((2r,3s)-2-ethoxy-5-oxo-tetrahydro-furan-3-yl)-amide)(商品名为belnacasan)是一种有效的选择性caspase-1抑制剂，可通过口服吸收。目前vx-765已通过美国食品和药物管理局(fda)临床i期的安全性评价，并批准用于治疗银屑病和癫痫的ii期临床试验。

技术实现要素：

本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种vx-765在制备心梗坏死预防药物中的应用，通过在在心梗极早期药物中添加casp1抑制剂vx-765，以此可以显著改善心梗的发生情况，vx-765可以作为心梗早期延缓心梗症状的关键分子。

在本发明中发现，细胞凋亡在ami致心肌损伤中发挥着重要作用，ami后各种刺激因素激活心肌细胞的凋亡过程是心肌受损的关键因素，本发明也正是基于此展开研究的。细胞代谢在细胞功能调节中起着重要作用，生理状态下，细胞通过有氧代谢产生大量三磷酸腺苷(adenosinetriphosphate,atp)为心肌细胞供能，而在ami引发的缺血缺氧状态下，atp生成减少，细胞则主要以无氧代谢的方式供能。atp生成减少则导致各种代谢产物(乳酸、嘌呤核苷等)堆积，并进一步限制无氧呼吸，导致线粒体肿胀变形、糖原含量下降、钙离子内流，重塑心肌细胞膜结构和功能，导致细胞凋亡发生。

而研究证明caspase-1在细胞凋亡进程中发挥重要作用，急性心梗发生后，caspase-1激活明显增加，其mrna水平升高。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：

本发明中所述vx-765具有如下结构式：

进一步地，所述心梗坏死预防药物为抑制caspase1药物。

进一步地，所述心梗坏死预防药物中以vx-765或其药学上可接受的盐为有效成分。

进一步地，所述心梗坏死预防药物中还包括载体。

进一步地，所述心梗坏死预防药物以5mg/kg对象体重至50mg/kg对象体重之间的剂量给药。

进一步地，所述心梗坏死预防药物通过静脉内、腹膜内、脑室内、鞘内或肌内注射进行给药。

进一步地，所述vx-765是一种不可逆il-转换酶/caspase1抑制剂。

进一步地，所述vx-765的ic50为0.8nm。

进一步地，所述vx-765为一种口服可吸收的vrt-043198前药。

进一步地，所述vx-765口服给药后可有效转化为vrt-043198，抑制脂多糖诱导的细胞因子分泌。

与现有技术相比，本发明用vx-765在心梗极早期干预可否延缓心梗的症状和心肌的损伤。在心梗后72h，vx-765处理组心肌组织caspase1的活性明显降低。蛋白水平也发现，活性的casp1的含量也明显减少，这表明vx-765发挥了显著的效果。

同时本发明通过心动超声检测发现，小鼠的心肌的射血分数也有了改善，而且给药4周之后，检测心肌细胞的纤维化情况发现vx-765处理组的情况也要明显优于对照组，可见在心梗极早期添加casp1抑制剂vx-765处理可以显著改善心梗的发生情况，vx-765可以作为心梗早期延缓心梗症状的关键分子。

附图说明

图1为本发明中的实验模式介绍图；

图2为本发明中心梗造模之后小鼠的心动超声图；

图3为本发明中心梗造模之后24小时和72小时小鼠的射血分数(ef％)变化；

图4为本发明中gsea分析心肌梗死后72h细胞焦亡相关基因变化情况；

图5为本发明中检测vx-765对心肌梗死效果模式；

图6为本发明中vx-765处理对心梗组织caspase1活性的影响；

图7为本发明中vx-765处理对心梗组织caspase1表达的影响；

图8为本发明中vx-765处理对心梗小鼠心脏收缩能力的影响；

图9为本发明中vx-765处理对心梗小鼠射血分数的影响；

图10为实施例心肌细胞的纤维化情况对比图。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例对本发明进行详细说明。

实施例

动物实验建模：在本发明中，为了寻找心肌梗死过程中发生明显变化的蛋白和基因，采用模型鼠c57构建心肌梗死模型。首先采用对冠状动脉中的左前降支进行结扎的方法构建心梗模型，参见图1。

心肌梗死后24h和72h之后检测梗死效果，可见小鼠的心脏收缩能力大幅降低，小鼠心脏的射血分数ef值显著下调，证明梗死实验成功，参见图2与图3。

图4为心肌梗死后72h检测基因表达谱变化情况，通过gesa分析焦亡(pyroptosis)通路变化情况：可见这样通路负调控的基因显著下调，这暗示心梗可能促进了这一通路，具体基因分析显示，pyroptosis相关基因casp1和gsdmd的表达都显著升高。

caspase-1在细胞凋亡进程中发挥重要作用，急性心梗发生后，caspase-1激活明显增加，其mrna水平升高。本实施例中用vx-765(一个选择性的casp1抑制剂，可以抑制焦亡)在心梗极早期干预可延缓心梗的症状和心肌的损伤(实验原理参见图5)。结果发现，在心梗后72h，我们发现vx-765处理组心肌组织caspase1的活性明显降低(参见图6)。蛋白水平也发现，活性的casp1的含量也明显减少，这表明vx-765发挥了显著的效果(参见图7)。同时本实施例通过心动超声检测发现，小鼠的心肌的射血分数也有了改善(参见图8和图9)。

目前市场上并未有基于抑制caspase1的治疗方案，本实施例中所采用的vx-765是一种新型的不可逆il-转换酶/caspase1抑制剂，ic50为0.8nm，是一种口服可吸收的vrt-043198前药。而vrt-043198是ice/caspase1亚家族caspases的有效选择性抑制剂，是一种活性代谢物vx-765。vrt-043198对其他caspase3和-6-9具有100-10000倍的选择性。vx-765口服给药后可有效转化为vrt-043198，抑制脂多糖诱导的细胞因子分泌。

而且给药4周之后，本实施例检测心肌细胞的纤维化情况，发现，vx-765处理组的情况也要明显优于对照组(参见图10，上为对照组，下为实验组)。

综上可见在心梗极早期添加casp1抑制剂vx-765处理可以显著改善心梗的发生情况，vx-765可以作为心梗早期延缓心梗症状的关键分子。

上述的对实施例的描述是为便于该技术领域的普通技术人员能理解和使用发明。熟悉本领域技术的人员显然可以容易地对这些实施例做出各种修改，并把在此说明的一般原理应用到其他实施例中而不必经过创造性的劳动。因此，本发明不限于上述实施例，本领域技术人员根据本发明的揭示，不脱离本发明范畴所做出的改进和修改都应该在本发明的保护范围之内。