一种胖大海提取物的制备方法及应用与流程

1.本发明涉及一种胖大海提取物的制备方法及应用。


背景技术：

2.胖大海，为梧桐科萍婆属植物的成熟种子，在降血压、润喉化痰方面功效显著，作为传统的清咽利喉的药食两用性药材。其入药史载于《本草拾遗》，称“安南子”。现代科学研究表明，胖大海种皮含有半乳糖、戊糖等多糖成分，此外，还含有胖大海素、鞣质、酚酸、氨基酸等活性成分以及钙、镁微量元素，其多糖类为其功能性成分，具有抗炎、治疗细菌性痢疾和抑制草酸钙结晶形成的功能。
3.目前，关于胖大海有效成分的相关报道主要集中在胖大海多糖成分上，其提取制备工艺多为溶剂热浸法、酶法、超声辅助法、微波辅助法。现有对胖大海的提取制备方法，存在活性多糖得率低，且过滤困难等问题。


技术实现要素：

4.基于上述现有技术的缺陷，本发明所要解决的问题是提高胖大海活性多糖物质提取率，降低多糖粘度指标，提供高提取率胖大海活性多糖制备工艺，从而使得胖大海提取物得以充分利用。
5.本发明所要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的：将胖大海粉碎处理后与水混合，在一定温度压力下进行提取，过滤得胖大海提取物。
6.根据本发明，所述提取温度为110～135℃。
7.根据本发明，所述压力为0.11～0.19 mpa。
8.根据本发明，所述提取时间为0.5～3.0 h。
9.根据本发明的一些优选实施方案，所述提取温度为110～128℃，所述提取压力0.11～0.17 mpa，所述提取时间为 1.0～2.0 h。
10.根据本发明的又一些优选实施方案，所述提取温度为121℃、压力条件为0.13 mpa、提取时间为1.0 h。
11.根据本发明，所述胖大海与水的质量比为1:20～1:80。
12.根据本发明，所述胖大海与水的质量比为1:20。
13.根据本发明，所用胖大海为干胖大海，粉碎后通过24-40目筛；根据本发明，所用的水优选去离子水。
14.本发明另一方面提供了上述制备方法得到胖大海提取物及其含有所述胖大海提取物的组合物。
15.根据本发明，所述组合物，其包括所述的胖大海提取物和分散剂。
16.根据本发明，所述分散剂为海藻糖、麦芽糊精、β-环糊精、甘露糖醇中的一种或多种。
17.根据本发明，所述分散剂用量为组合物重量的10-45wt%。
18.根据本发明，所述组合物通过以下步骤制备得到：（1）本发明所述的胖大海提取物加入0.5～2.0%活性炭脱色；（2）混合物过滤；（3）滤液复配分散剂、干燥、灭菌。
19.上述方法中，所述干燥方法为冷冻干燥、低温真空干燥或喷雾干燥中的一种。
20.上述方法中，所述灭菌方法为co60灭菌。
21.本发明再一方面提供了所述胖大海提取物或胖大海组合物在护肤品中的应用。
22.本发明有益效果：通过本发明制备工艺所得胖大海提取物，胖大海多糖得率提高，且多糖分子量和水溶液粘度较常压煎煮法降低。解决了现有技术中胖大海多糖分子量大不易经皮吸收，粘度大过滤困难的问题。得到的胖大海提取物或组合物应用在肌肤上，可以改善肌肤粗糙度，并且具有即时提拉紧肤的效果和滋润感，具有广阔的应用前景。
23.附图说明
24.为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将所需要使用的附图作简单地介绍。
25.图1是胖大海常压蒸煮得到的胖大海提取物的分子量分布图；图2是本发明制备工艺得到的胖大海提取物的分子量分布图；图3是本发明制备方法得到的胖大海提取物的护肤品对肌肤平滑度sesm的影响；图4是本发明制备方法得到的胖大海提取物的护肤品对肌肤平均粗糙度r3的影响；图5是本发明制备方法得到的胖大海组合物的紧肤和滋润效果评价结果图。
26.具体实施方式
27.下面结合具体实例对本发明进行进一步阐述，但本发明并不局限于此。
28.下面实施例所述的实验方法，如无特殊说明，具有常规方法；所述的实验材料和试剂，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
29.下列实施例中，所用原料：胖大海购于北京同仁堂药店。
30.本发明中使用的仪器如表1所示。
31.表1试验仪器名称型号供应商立式高压蒸汽灭菌锅ldzm-30l-ii上海申安高压灭菌器真空冷冻干燥机lgj-30fd北京松源华兴科技发展公司测试方法 1.多糖测试方法：采用醇沉、苯酚-硫酸法测试胖大海提取物中多糖得率（参考标准：《qb/t 2488-2006 化妆品用芦荟汁、粉》）； 2.多糖分子量测试方法：采用凝胶渗透色谱法（简称：gpc）检测胖大海提取物中多糖分子量及其分布。gpc法基于体积排阻的分离机理，集合示差折光检测器和激光光散射检测
器分析分子量分布。
32.具体试验方法： 标准品溶液的制备：称取93.0 mg燕麦葡聚糖，25 ml流动相（0.1 mol
·
l-1 nano3溶液和0.02% nan3），定容，混匀，制备成3.72 mg
·
ml-1 燕麦葡聚糖标准母液；称取900 μl燕麦葡聚糖标准母液，2700 μl流动相，制备成0.930 mg
·
ml-1
燕麦葡聚糖标准溶液。
33.gpc分析条件：凝胶色谱柱：sugar ks-805(8.0
×
300 mm, 7 μm) sugar ks-803(8.0
×
300 mm, 6 μm)；流动相：0.1 mol
·
l-1 nano3溶液（含0.02% nan3）；流速: 0.8 ml
·
min-1
；柱温：60℃；示差折光检测器(rid) 检测温度：50℃；进样体积：100 μl。
34.测定燕麦葡聚糖的标准曲线y=786302
×
x-24604，x为峰面积，y为多糖含量。按石斛多糖含量（mg/g）=燕麦葡聚糖标曲
×
f/样品取样质量，f为样品最后定容体积。
35.3.粘度测试方法：参考《gb/t 15357-2014表面活性剂和洗涤剂 旋转粘度计测定液体产品的粘度和流动性质》。
36.实施例1选取适量胖大海粉碎过24-40目筛（24目筛下，40目筛上备用），按1:20（m/m）比例添加去离子水，然后在110℃、0.11 mpa条件下蒸煮1.0 h，过滤，得胖大海提取液。
37.实施例2选取适量胖大海粉碎过24-40目筛（24目筛下，40目筛上备用），按1:20（m/m）比例添加去离子水，然后在110℃、0.11 mpa条件下蒸煮1.5 h，过滤，得胖大海提取液。
38.实施例3选取适量胖大海粉碎过24-40目筛（24目筛下，40目筛上备用），按1:20（m/m）比例添加去离子水，然后在110℃、0.11 mpa条件下蒸煮2.0 h，过滤，得胖大海提取液。
39.实施例4选取适量胖大海粉碎过24-40目筛（24目筛下，40目筛上备用），按1:20（m/m）比例添加去离子水，然后在121℃、0.13 mpa条件下蒸煮1.0 h，过滤，得胖大海提取液。
40.实施例5选取适量胖大海粉碎过24-40目筛（24目筛下，40目筛上备用），按1:20（m/m）比例添加去离子水，然后在128℃、0.17 mpa条件下蒸煮1.0 h，过滤，得胖大海提取液。
41.实施例6选取适量胖大海粉碎过24-40目筛（24目筛下，40目筛上备用），按1:30（m/m）比例添加去离子水，然后在110℃、0.11 mpa条件下蒸煮1.0 h，过滤，得胖大海提取液。
42.实施例7选取适量胖大海粉碎过24-40目筛（24目筛下，40目筛上备用），按1:40（m/m）比例添加去离子水，然后在110℃、0.11 mpa条件下蒸煮1.0 h，过滤，得胖大海提取液。
43.实施例8选取适量胖大海粉碎过24-40目筛（24目筛下，40目筛上备用），按1:60（m/m）比例添加去离子水，然后在110℃、0.11 mpa条件下蒸煮1.0 h，过滤，得胖大海提取液。
44.实施例9选取适量胖大海粉碎过24-40目筛（24目筛下，40目筛上备用），按1:80（m/m）比例添加去离子水，然后在110℃、0.11 mpa条件下蒸煮1.0 h，过滤，得胖大海提取液。
45.实施例10选取适量胖大海粉碎过24-40目筛（24目筛下，40目筛上备用），按1:20（m/m）比例添加去离子水，然后在110℃、0.11 mpa条件下蒸煮0.5 h，过滤，得胖大海提取液。
46.实施例11选取适量胖大海粉碎过24-40目筛（24目筛下，40目筛上备用），按1:20（m/m）比例添加去离子水，然后在110℃、0.11 mpa条件下蒸煮3.0 h，过滤，得胖大海提取液。
47.实施例12选取适量胖大海粉碎过24-40目筛（24目筛下，40目筛上备用），按1:20（m/m）比例添加去离子水，然后在135℃、0.19 mpa条件下蒸煮1.0 h，过滤，得胖大海提取液。
48.对比例1（常压蒸煮技术）选取适量胖大海粉碎过粉碎过24-40目筛（24目筛下，40目筛上备用），按1:40（m/m）比例添加去离子水，然后95-100℃常压蒸煮1.0 h，过滤，得胖大海提取液。
49.对比例2选取适量胖大海粗粉过24目筛，取筛上备用，按1:20（m/m）比例添加去离子水，然后在110℃、0.11 mpa条件下蒸煮1.0 h，过滤，得胖大海提取液。
50.实验结果：取原料胖大海，以水为提取溶剂，通过实施例和对比例工艺提取，并测试提取液中多糖得率，测试结果如下：表2提取液中多糖得率以多糖得率为研究目标，采用微压提取制备，考察原料粒度大小、不同料液比、提取时间、提取温度及对应压力对目标产物多糖的影响。发明人使用与实施例2相同的制备工艺，仅胖大海粉碎物粒度不同（24目筛，取晒筛上部分）结果，粒度较大（≥24目），多糖得率低（9.8%）；当粒度较小（＜40目），导致过滤困难，不易实现工业化。
51.表2数据表明较优的制备工艺为：胖大海粒度为24-40目筛，料液比1:20-1:80（m/m），提取时间为1.0-2.0 h，微压提取温度为110-128℃，对应压力为0.11-0.17 mpa，此时多糖得率在12.9-14.7%。
52.实施例4得到的胖大海提取液，冷冻干燥，进一步考察胖大海提取物理化指标。
53.gpc检测分子量及其分布：准确称量1.00 g胖大海提取物，加入去离子水溶解制备成1%水溶液，通过gpc凝胶色谱分析多糖分子量及其分布。
54.表3 胖大海提取物的理化性质通过微压提取技术提取胖大海中的多糖成分，多糖得率提高了81.5%，且多糖分子量分布降低1个数量级，同时，2%水溶液粘度降低至常压煎煮法同浓度下粘度的1/2，解决多糖分子量大，不易经皮吸收，且粘度指标降低，解决了工艺制备上粘度大，过滤困难的问题。
55.护肤功效测试1、胖大海提取组合物的制备以实施例4得到的胖大海提取物，加入1.5%活性炭脱色，过滤，复配36%甘露糖醇，滤液进行冷冻干燥，co60灭菌，得到本发明的胖大海提取组合物。
56.、样品制备按照表4的配方，将上述实施例4和对比例1制得的胖大海提取组合物分别配制成待测样品，进行护肤功效测试。
57.表4 待测样品配方及制备工艺制备工艺步骤如下：（1）a相原料加热到80℃混合均匀，备用；
（2）搅拌降温，60℃加入b相原料，搅拌均匀；（3）搅拌降温，40℃以下加入c相原料，搅拌均匀；（4）搅拌降温，38℃出料，加入d相。
58.3、肌肤粗糙度测试粗糙度采用visioscan vc98图像分析仪。其结果通过检测肌肤平滑度参数sesm变化率、平均皱纹深度r3变化率来表示；其中：sesm指标可以表征皮肤的平滑程度，其值越小，皮肤越平滑。r3指标表示平均皱纹深度，根据皮肤皱纹-粗糙度指数含义，r3值越小，皮肤越不粗糙。
59.其中：平滑度参数sesm变化率（%）的计算公式，见式(1)。
60.式(1)中：s0—未涂抹样品时皮肤基底数据采集值；sn—涂抹样品后各时间点数据采集值。
61.平均皱纹深度r3变化率（%）的计算公式，见式(2)。
62.式(2)中：r0—未涂抹样品时皮肤基底数据采集值；rn—涂抹样品后各时间点数据采集值。
63.（1）志愿者筛选年龄28-60岁，均为干性肌肤。
64.（2）测试方法选用24名志愿者，分为实验组、对照组，其中实验组使用含有2%实施例4制备的胖大海提取组合物护肤样品；对照组1使用含2%对比例1制备的胖大海提取组合物护肤样品；对照组2涂抹配方基质，该配方基质除了不加入胖大海提取组合物，其余与待测样品相同）；每组8人。
65.志愿者每天早、晚两次在测试区域涂抹样品，通过对使用前（0w）、使用1w、2w、4w后测试肌肤表面的平滑度参数sesm、平均皱纹深度r3，评价样品对皮肤粗糙度的改善效果。
66.（3）测试结果单个产品的各指标在使用前后的差异性分析，如果数据呈正态分布，采用statistica软件中的dunnett分析方法，如果数据呈非正态分布，则采用spss软件中的秩和检验进行分析，同一时间点两个产品之间的差异性用t检验进行分析。
67.平滑度参数sesm测试结果表明（图3），连续4周使用含2%的实施例4的胖大海提取组合物样品后，平滑度参数sesm相对初值下调23%，高于含2%对比例1制备的胖大海提取组合物样品（-14.3%）、配方基质的变化率（-7.7%），表明2%胖大海提取组合物可以有效改善肌肤的平滑度，且与对照组相比，呈显著性差异（p《0.05）。
68.平均皱纹深度r3测试结果表明（图4），连续4周使用含2%的实施例4的胖大海提取组合物后，平均皱纹深度r3相对初值下调38%，优于含2%对比例1制备的胖大海提取组合物（-25.6%）、配方基质的变化率（-14.1%），表明2%胖大海提取组合物可以有效改善肌肤粗糙
度，且与配方基质组相比，呈显著性差异（p《0.05）。
69.4、紧肤感和滋润感测试（1）志愿者选选取60名志愿者。
70.（2）测试方法将志愿者随机分为3组，每组20人，第一组使用含2%实施例4制备的胖大海提取组合物样品，第二组使用含2%对比例1制备的胖大海提取组合物样品，第三组使用配方基质，该配方基质不含胖大海提取组合物，其余均相同，涂抹于眼角周围肌肤，采用问卷反馈肌肤的提拉紧肤、滋润感效果，评价其效果。
71.（3）测试结果结果显示（图5），80%以上志愿者反馈含2%实施例4制备的胖大海提取组合物样品具有紧肤感和滋润感，效果优于对比例。