一种含人脐带间充质干细胞分泌因子和裂解因子抗衰老护肤品及其制备方法与流程

[0001]
本发明涉及化妆品制备技术领域，具体涉及一种含人脐带间充质干细胞分泌因子和裂解因子的抗衰老护肤品及其制备方法。


背景技术：

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皮肤老化是指皮肤功能衰老性损伤，使皮肤对机体的防护能力，调节能力等减退，由此皮肤不能适应内外环境的变化，出现颜色、色泽、形态、质感等外观整体状况的改变。皮肤的老化分为内源性老化和外源性老化。内源性老化是指皮肤随年龄增长的自然老化。表现为皮肤变白，出现细小皱纹、弹性下降、皮肤松弛等。外源性老化的最主要原因是日晒所致的光老化。表现为皱纹、皮肤松弛、粗糙、淡黄或灰黄色的皮肤变色、毛细血管扩张、色素斑形成等。
[0003]
常规化妆品几乎都为化学有机溶剂混合制成，只能解决皮肤表面的缺水以及色素沉淀，治标不治本。一旦停用极易复发，但长期或频繁使用会对皮肤组织有极大伤害。
[0004]
一般的护肤品中，会添加香料、防腐剂和色素等容易致敏的成分。特殊护肤品中添加的或化学防晒剂、或粉类、或美白成分、或祛痘抑菌成分、抑或是提拉收紧得大分子功效成分都或多或少有可能导致肌肤敏感甚至过敏。
[0005]
同样，护肤品中使用的油脂等基础成分的质量如果不好的话，也不容易被人体皮肤吸收，容易导致粉刺或皮肤炎等。
[0006]
现在一些生物活性物质逐渐被发现对人体皮肤有美白抗衰老的作用，例如纯露、干细胞培养分泌因子、干细胞裂解因子、维生素c、维生素b3、透明质酸等。
[0007]
公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。


技术实现要素：

[0008]
本发明的目的在于提供一种含人脐带间充质干细胞分泌因子和裂解因子抗衰老护肤品及其制备方法，以解背景技术中常规化妆品和护肤品存在的问题。
[0009]
为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：
[0010]
一种含人脐带间充质干细胞分泌因子和裂解因子的抗衰老护肤品，由以下成分构成：干细胞分泌因子粉、干细胞因子溶剂和裂解因子。
[0011]
本发明还给出了上述含人脐带间充质干细胞分泌因子和裂解因子的抗衰老护肤品的制备方法，包括以下步骤：
[0012]
(1)制备干细胞分泌因子粉：分离培养人脐带间充质干细胞，待细胞在培养瓶中培养，当其覆盖率达到90％后，收集细胞培养液；将收集到的细胞培养液冷冻，干燥，即获得干细胞分泌因子粉；
[0013]
(2)制备干细胞因子溶剂：按照质量比将5-15％透明质酸、1-20％纯露、0.1-4％维
生素c、0.1-3％维生素b3与纯化水混匀，即获得干细胞因子溶剂：
[0014]
(3)制备裂解因子：将干细胞经低温渗透压差进行破碎释放出裂解因子，收集；
[0015]
(4)按照质量比将0.1-2％的干细胞分泌因子粉和裂解因子加入到干细胞因子溶剂中，配置成抗衰老护肤品。
[0016]
作为优选，步骤(1)中人脐带间充质干细胞的培养基为t4无血清培养基，p3代细胞流式细胞术检测cd73 97.09％，cd90 100％，cd105 99.75％，cd14-1.26％，cd34-0.94％，cd19-0.1.63％，cd45-0.72，hla-dr-0.61％。
[0017]
作为优选，步骤(1)中间充质干细胞培养条件为温度37℃，二氧化碳浓度为5％，湿度99％。
[0018]
作为优选，步骤(2)中透明质酸为高分子透明质酸与低分子透明质酸等质量混合而成。
[0019]
作为优选，所述的高分子透明质酸为分子量范围1800000-2200000的透明质酸；所述的低分子透明质酸为分子量范围400000-1000000的透明质酸。
[0020]
作为优选，步骤(2)中纯露为茉莉花纯露或玫瑰纯露。
[0021]
作为优选，步骤(3)中以个：ml计算，干细胞的数量：护肤品的体积为3：1-10：1。
[0022]
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
[0023]
(1)本发明的护肤品所含的干细胞分泌因子粉通过低温冷冻干燥细胞培养液制备获得；干细胞裂解因子则通过低温渗透压差破碎干细胞释放因子获得，充分保证了其中所含的各种干细胞培养分泌因子和裂解因子的活性；维生素c、维生素b3、丁二醇、透明质酸、纯露等作为溶剂可长久保持干细胞分泌因子粉和干细胞裂解因子的活性，且干细胞分泌因子粉和干细胞裂解因子作为溶质不与溶剂发生反应，能充分发挥其护肤效果。
[0024]
(2)本发明护肤品不添加有机溶剂，温和无刺激，易被肌肤吸收利用，不会导致肌肤敏感或过敏，可有效改善人体肌肤现状。
具体实施方式
[0025]
下面对本发明专利的技术方案进行清楚、完整的描述，显然，所描述的实施例是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域所属的技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0026]
脐带间充质干细胞分泌因子和裂解因子，主要含以下几种因子，含量指的是护肤品中所含因子的含量。
[0027]
①
干细胞因子(scf)：激活和复苏人体处于休眠状态的干细胞使其重新工作，令人体组织和器官再新发育，逆转衰老，再现青春，延长寿命，提高生命质量。含量50-60pg/ml。
[0028]
②
神经细胞生长因子(ngf)：激活和复苏人体处于休眠状态的神经干细胞，使神经系统得到再次发育，从而起到增强思维和分析能力，增强记忆力；调节交感神经和副交感神经恢复生物钟的正常工作，从而改善睡眠，提高睡眠质量。含量10-15pg/ml。
[0029]
③
成纤维细胞生长因子(fgf)：它的作用是促进内皮细胞的游走和平滑肌细胞的增殖，不能使平滑肌细胞游走。能够促进新血管形成，修复损害的内皮细胞。fgf被认为是病灶形成促进因子，但从修复角度看它也有有利的一面。含量30-40pg/ml。
[0030]
④
表皮生长因子(egf)：是皮肤生长和弹力纤维合成的主要动力元素。有效生成和
强化组织纤维，迅速改善皮肤代谢状态，促进肌肤浅层、中层和深层组织细胞代谢，促进弹性纤维和胶原蛋白的合成，起到抗皱、嫩肤、美肤的作用。含量60-80pg/ml。
[0031]
⑤
内皮细胞生长因子(vegf)：它能够丰富皮下微血管网，梳理肌肤组织营养供应渠道，改善肌肤组织细胞生活微环境，令核酸等营养物质成分能够充分补给到新生细胞中，让组织细胞时刻处在最佳生理状态，预防衰老，减少心脑血管性疾病的发生。含量50-70pg/ml。
[0032]
实施例1
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一种含人脐带间充质干细胞分泌因子和裂解因子的抗衰老护肤品的制备方法，包括以下步骤：
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(1)制备干细胞分泌因子粉：分离培养人脐带间充质干细胞，待细胞在培养瓶中培养，当其覆盖率达到90％后，收集细胞培养液；将收集到的细胞培养液冷冻，干燥，即获得干细胞分泌因子粉；其中，所述人脐带间充质干细胞的培养基为t4无血清培养基，p3代细胞流式细胞术检测cd73 97.09％，cd90 100％，cd105 99.75％，cd14-1.26％，cd34-0.94％，cd19-0.1.63％，cd45-0.72，hla-dr-0.61％；步骤(1)中间充质干细胞培养条件为温度37℃，二氧化碳浓度为5％，湿度99％；
[0035]
(2)制备干细胞因子溶剂：按照质量比将5％透明质酸、1％纯露、0.1％维生素c、0.1％维生素b3与纯化水混匀，即获得干细胞因子溶剂；其中，透明质酸为高分子透明质酸与低分子透明质酸等质量混合而成；更为优选的为：高分子透明质酸为分子量范围1800000的透明质酸；低分子透明质酸为分子量范围400000的透明质酸；
[0036]
(3)制备裂解因子：将干细胞经低温渗透压差进行破碎释放出裂解因子，收集；
[0037]
(4)按照质量比将0.1％的干细胞分泌因子粉和裂解因子加入到干细胞因子溶剂中，配置成抗衰老护肤品。
[0038]
另外，在本实施例中，步骤(2)中纯露为茉莉花纯露；步骤(3)中以个：ml计算，干细胞的数量：护肤品的体积为3：1。
[0039]
实施例2
[0040]
一种含人脐带间充质干细胞分泌因子和裂解因子的抗衰老护肤品的制备方法，包括以下步骤：
[0041]
(1)制备干细胞分泌因子粉：分离培养人脐带间充质干细胞，待细胞在培养瓶中培养，当其覆盖率达到90％后，收集细胞培养液；将收集到的细胞培养液冷冻，干燥，即获得干细胞分泌因子粉；其中，所述人脐带间充质干细胞的培养基为t4无血清培养基，p3代细胞流式细胞术检测cd73 97.09％，cd90 100％，cd105 99.75％，cd14-1.26％，cd34-0.94％，cd19-0.1.63％，cd45-0.72，hla-dr-0.61％；步骤(1)中间充质干细胞培养条件为温度37℃，二氧化碳浓度为5％，湿度99％；
[0042]
(2)制备干细胞因子溶剂：按照质量比将15％透明质酸、20％纯露、4％维生素c、3％维生素b3与纯化水混匀，即获得干细胞因子溶剂；其中，透明质酸为高分子透明质酸与低分子透明质酸等质量混合而成；更为优选的为：高分子透明质酸为分子量范围2200000的透明质酸；低分子透明质酸为分子量范围1000000的透明质酸；
[0043]
(3)制备裂解因子：将干细胞经低温渗透压差进行破碎释放出裂解因子，收集；
[0044]
(4)按照质量比将2％的干细胞分泌因子粉和裂解因子加入到干细胞因子溶剂中，
配置成抗衰老护肤品。
[0045]
另外，在本实施例中，步骤(2)中纯露为茉莉花纯露或玫瑰纯露；步骤(3)中以个：ml计算，干细胞的数量：护肤品的体积为10：1。
[0046]
实施例3
[0047]
一种含人脐带间充质干细胞分泌因子和裂解因子的抗衰老护肤品的制备方法，包括以下步骤：
[0048]
(1)制备干细胞分泌因子粉：分离培养人脐带间充质干细胞，待细胞在培养瓶中培养，当其覆盖率达到90％后，收集细胞培养液；将收集到的细胞培养液冷冻，干燥，即获得干细胞分泌因子粉；其中，所述人脐带间充质干细胞的培养基为t4无血清培养基，p3代细胞流式细胞术检测cd73 97.09％，cd90 100％，cd105 99.75％，cd14-1.26％，cd34-0.94％，cd19-0.1.63％，cd45-0.72，hla-dr-0.61％；步骤(1)中间充质干细胞培养条件为温度37℃，二氧化碳浓度为5％，湿度99％；
[0049]
(2)制备干细胞因子溶剂：按照质量比将10％透明质酸、5％纯露、2％维生素c、1％维生素b3与纯化水混匀，即获得干细胞因子溶剂；其中，透明质酸为高分子透明质酸与低分子透明质酸等质量混合而成；更为优选的为：高分子透明质酸为分子量范围2000000的透明质酸；低分子透明质酸为分子量范围700000的透明质酸；
[0050]
(3)制备裂解因子：将干细胞经低温渗透压差进行破碎释放出裂解因子，收集；
[0051]
(4)按照质量比将0.5％的干细胞分泌因子粉和裂解因子加入到干细胞因子溶剂中，配置成抗衰老护肤品。
[0052]
另外，在本实施例中，步骤(2)中纯露为茉莉花纯露或玫瑰纯露；步骤(3)中以个：ml计算，干细胞的数量：护肤品的体积为6：1。
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使用效果调查：
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使用方法：每日早晚洗净并擦干面部后分别取实施例1-3中护肤品2ml，均匀涂于面部，轻轻拍打1min使其完全吸收，1个月后对面部进行观察，统计，各取100例，同时设置3组对照例，对照例1，对照例2和对照例3。
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表1本发明的护肤品的使用效果调查
[0056][0057]
注：对照例1-3中不含干细胞分泌因子，其它条件分别与实施例1-3一致。
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由表1可知，在每组100例试用案例中，实施例1-3中无任何1例有面部不适及其他过敏现象；至少35例面部皱纹明显消除；至少85例皮肤明显变白且痘印及色斑消失；至少55例毛孔缩小；至少92例面部皮肤明显细腻有光泽。
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与对照例相比，面部皱纹明显消除、皮肤明显变白且痘印及色斑消失、毛孔缩小和面部皮肤明显细腻有光泽的例数显著高于对照例。说明本发明含人脐带间充质干细胞分泌因子和裂解因子抗衰老护肤品可有效改善人体肌肤现状。
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前述对本发明的具体示例性实施方案的描述是为了说明和例证的目的。这些描述并非想将本发明限定为所公开的精确形式，并且很显然，根据上述教导，可以进行很多改变和变化。对示例性实施例进行选择和描述的目的在于解释本发明的特定原理及其实际应用，从而使得本领域的技术人员能够实现并利用本发明的各种不同的示例性实施方案以及各种不同的选择和改变。本发明的范围意在由权利要求书及其等同形式所限定。