[0001]
本发明属于生物工程技术领域，涉及一种中药野菊花的提取工艺优化。
背景技术：
[0002]
野菊花为菊科多年生草本植物野菊的头状花序，外形与菊花相似，在我国分布广泛，多生于石质山坡、草地、田边、路旁等处，秋冬二季花初开放时采摘，晒干或蒸干后入药。现代医学实践证明野菊花具有广泛的药用价值，包括抗微生物、抗炎、免疫调节、抗肿瘤、保肝、保护神经系统、保护心血管、抗血小板聚集等多种药理作用，且具有高效、低毒的特点，有较好的临床应用价值和研发潜力。近年来，野菊花也开始应用于食品、环保等领域。
[0003]
野菊花总黄酮是野菊花中重要的药效成分，具有保护心血管系统、降压和抗炎作用，具有很高的药用价值。以往一般釆用醇提或水提法从野菊花中获得总黄酮提取物，此工艺路线获得的野菊花黄酮粗提物含有多种杂质，降低了其药用价值。因此本工艺尝试通过先提取后萃取精制的办法从野菊花中提取总黄酮，并分别对提取工艺和萃取精制工艺进行优化，以提高提取效果和萃取效果。
技术实现要素：
[0004]
本发明的目的是提供一种中药野菊花的提取工艺优化，研究中草药提取液对3种供试菌的抑菌效果，选择最适宜提取条件。
[0005]
本发明的方法，包括以下步骤：步骤1取金银花、甘草、胖大海和薄荷 4 种中草药除去碎石块等可见杂质, 并进行烘干；步骤2分别称取一定量的烘干中草药至于容器中, 并加入一定量的水搅拌, 在一定时间一定温度下进行提取；步骤3之后使用 3 层纱布过滤混合物, 除去中草药渣, 得到滤液；步骤4将中草药渣置于离心杯中, 在转速为5000 r/min 条件下离心 5 min, 取上清液；步骤5将滤液和上清液在 60 ℃下旋转蒸发后定容至 1 g/ml, 并过 0.22μm 滤膜除菌, 密封 4 ℃保存备用。
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步骤2所述提取温度为70℃;步骤2中液料比为1：30g/ml。
[0007]
下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
[0008]
具体实施方式：实施例1取10g粉碎后的野菊花粉末（40-50目），精密称量，恒温水浴70℃，150rpm搅拌下， 液固比为7：1，分别用浓度为20%、40%、60%、80%、100%的乙醇和纯水进行提取，得到 的提取液在
旋转蒸发仪中减压浓缩得到膏状物，再放入烘箱干燥至恒重，称重后重新溶解， 用 紫外分光光度计检测，计算提取物得率。结果可见，随着浓度的改变开始时，纯水和乙醇提取时总黄酮得率都较低，60%到80%乙醇水溶液的得率较高，因此选择70%的乙醇水溶液作为提取剂。
[0009]
实施例2取10g粉碎后的野菊花粉末（40-50目），精密称量，恒温水浴70℃，150rpm搅拌下，根据上个单因素实验优选的乙醇浓度加入提取剂，分别采用液固比s为5：1、7：1、10：1、15：1、20：1、25：1、30：1ml/g进行提取实验，计算提取物得率。结果可见，总黄酮得率随着液固比增大而增大，当液固比由5ml/g增加到30ml/g时，得率由6%增大到9%增效果明显，但增大的幅度逐渐减小。当液固比大于20：1ml/g时，得率基本不变，因此选择液固比为20：1ml/g。
[0010]
实施例3取10g粉碎后的野菊花粉末（40-50目），精密称量，150rpm搅拌下，根据前两个单因素实验所优选的乙醇浓度和液固比加入提取剂，恒温水浴分别控制在40、50、60、70、80℃（常压下乙醇沸点为78.3℃）进行提取实验，计算提取物得率。随着温度升高，总黄酮得率也增大；当温度达到60℃时，得率最高，温度继续上升，黄酮得率反而下降。这是因为增加提取温度可使植物组织软化变快，促进组织膨胀，增加黄酮溶解度，增大扩散系数；并且温度适当升高，可使原料中的酶被破坏而增加提取液的稳定性，并可避免微生物污染和发酵。但温度过高会导致提取液中杂质含量增高，并且过高的温度会使野菊花中含有的酚类物质发生氧化褐变等反应，使产品颜色变深，影响产品质量。因此选择提取温度为60℃。
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实施例4取10g粉碎后的野菊花粉末（40-50目），精密称量，150rpm搅拌下，根据前三个单因素实验所优选的乙醇浓度、液固比和提取温度，控制提取时间分别为0.25h、0.5h、1h、2h、3h进行提取实验，计算提取物得率。结果可见，随提取时间的延长，提取得率增加，但当扩 散达到平衡时，时间延长，提取率变化不大，而提取液中的杂质成分却随之增加，因此实验选择提取时间为1h。
[0012]
实施例5取10g粉碎后的野菊花粉末（40-50目），精密称量，150rpm搅拌下，根据前四个单因素实验所优选的乙醇浓度、液固比、提取温度和提取时间进行提取实验，提取3次，分别计算每一次的提取物得率。结果可见，多次提取时随着提取次数的增加，被提取出的黄酮量越来越少。第一次提取时得率最高，第二次提取时得率已小于1%，第三次提取时为微量，因此选择提取一次较为合适。