盐酸阿比朵尔在制备治疗肺纤维化疾病药物中的应用的制作方法

1.本发明创造属于盐酸阿比朵尔的新用途，具体涉及盐酸阿比朵尔在制备治疗肺纤维化疾病药物中的应用。


背景技术：

2.随着环境污染问题的加剧，空气质量不断下降，雾霾天气增多，肺部疾病发病率持续升高。肺纤维化(pulmonaryfibrosis，pf)是许多病因各异的肺间质疾病的终末期临床表现，是以肺泡持续性损伤、成纤维细胞增殖及大量细胞外基质(extracellularmatrix，ecm)沉积为特征，从而导致肺泡和肺间质出现不同程度的炎症和纤维化，进而导致肺结构破坏和呼吸衰竭的一种疾病，所以也称间质性肺疾病 (interstitial lung disease，ild)或弥漫性实质性肺疾病(diffuseparenchymal lung disease，dpld)。
3.特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis，ipf)属于间质性肺疾病(ilds)家族中的特发性间质性肺炎(iip)组。ipf是一种病因不明的最常见的而且最严重的慢性炎症性间质性肺疾病，临床上表现为进行性呼吸困难伴刺激性干咳，病情常持续进展，中位生存期约为2.8年，5年生存率不足50％，患者多死于呼吸衰竭和继发肺部感染。世界各地均有报道，近年来ipf发病率呈不断上升的趋势且无明显地理和种族差别，患者多为中老年人，常在50～70岁发病，儿童发病罕见。鉴于大量的临床情况，ipf的患病率和发病率很难估计，100000人中有15
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250人的概率发生，根据国家、年龄、性别不同，每年有34000个新发病例。目前肺移植是唯一可延长肺纤维化患者生存期的治疗手段，《特发性肺纤维化诊断和治疗中国专家共识指南》推荐的ipf药物治疗主要包括吡非尼酮、尼达尼布、抗酸药物、 n
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乙酰半胱氨酸，其中获批的有效治疗ipf的药物仅有吡非尼酮和尼达尼布。虽然这些药物可以延缓肺功能下降速度，但不能逆转病情进展，而且相当一部分患者对治疗反应欠佳，其具体药理机制尚未完全阐明。因此阐明肺纤维化的发生发展机制，探索新的潜在的药物靶点，开发出针对肺纤维化的疗效确认、相对安全、价格合理的药物具有重要的社会意义和医学意义。
4.盐酸阿比朵尔，通过抑制流感病毒脂膜与宿主细胞的融合而阻断病毒的复制，具有抗病毒活性，1993年在俄罗斯首次上市，用于防治流行性感冒和其它急性呼吸道病毒感染。截至目前，尚无盐酸阿比朵尔可减缓肺纤维化的相关报道。盐酸阿比朵尔的结构式如下：
5.

技术实现要素：

6.有鉴于此，本发明旨在提供一种盐酸阿比朵尔的新用途，即盐酸阿比朵尔在制备治疗肺纤维化疾病药物中的应用。
7.优选的，所述肺纤维化疾病为特发性肺纤维化。即所述盐酸阿比朵尔是在制备治疗特发性肺纤维化药物中的应用。
8.优选的，所述盐酸阿比朵尔的推荐人体用量范围为 10mg/kg
‑
20mg/kg。
9.优选的，所述盐酸阿比朵尔的动物实验用量为100mg/kg
ꢀ‑
200mg/kg。
10.优选的，所述盐酸阿比朵尔的动物实验用量为100mg/kg。
11.本发明还提供一种药物组合物，包含盐酸阿比朵尔，以及盐酸阿比朵尔在药学上可接受的辅料，以及在药学上可接受的盐、酯、水合物中的一种以及两种以上。
12.优选的，所述药物组合物选自片剂、胶囊剂、丸剂、栓剂、气雾剂、口服液体制剂、颗粒剂、散剂、注射剂、糖浆剂、酒剂、酊剂、露剂、膜剂或它们的组合。
13.优选的，所述药物组合物的给药方式包括口服、注射、植入、外用、喷雾、吸入或它们的组合。
14.进一步的，所述药物组合物是采用常规或特殊制剂工艺制备而成的。
15.相对于现有技术，本发明具有以下优势：
16.本发明提供了一种盐酸阿比朵尔的新用途，即盐酸阿比朵尔在制备治疗肺纤维化疾病药物中的应用。本发明中盐酸阿比朵尔对肺纤维化有良好的功效，无不良反应，可减缓博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化，为治疗、缓解或改善肺纤维化疾病提供良好的应用前景。
附图说明
17.图1为各给药组小鼠体重变化图；
18.图2为各组改善博来霉素诱导后小鼠肺功能参数；
19.图3为各组减少博莱霉素诱导后小鼠肺部胶原含量；
20.图4a
‑
4c为各组减少博莱霉素诱导后小鼠肺纤维化面积(图4a 为生理盐水组，图4b为博莱霉素组；图4c为盐酸阿比朵尔组)；
21.图5为各组减少博莱霉素诱导后小鼠肺纤维化比例柱形图。
具体实施方式
22.除有定义外，以下实施例中所用的技术术语具有与本发明创造所属领域技术人员普遍理解的相同含义。以下实施例中所用的试验试剂，如无特殊说明，均为常规生化试剂；所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
23.下面结合实施例来详细说明本发明创造。
24.实施例：盐酸阿比朵尔减缓博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化。
25.动物模型制备：雄性c57bl/6j，野生型小鼠(周龄8
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10周)，以质量体积浓度10％水合氯醛按0.5ml/100g(体重)给予小鼠腹腔注射麻醉，气管内有创注射2u/kg博莱霉素。
26.具体实施方式如下：麻醉小鼠后称重记录，将小鼠固定于操作台，颈部用70％酒精消毒，用手术刀在小鼠颈部垂直划开大约1cm长创口，利用显微镊分离组织暴露气管，将注射器经气管软骨环间隙朝向心端刺入气管，然后按2u/kg的计量缓慢注入与其体重相适应
体积的博莱霉素生理盐水溶液，立即将动物直立并左右旋转，使药液在肺内均匀分布。
27.空白对照组注射同体积的生理盐水(0.9％nacl)。
28.分组给药：盐酸阿比朵尔治疗是指在博莱霉素处理第7
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14天时，每天通过灌胃给予小鼠100mg/kg盐酸阿比朵尔，以相应溶剂生理盐水作为对照，博莱霉素处理14天后检测肺胶原含量及纤维化严重程度。
29.肺功能检测：在博来霉素注射第14天时，10％水合氯醛按腹腔注射麻醉小鼠(0.5ml/100g)，取仰卧位固定于操作台，剪开颈部皮毛，暴露气管，并钝性分离气管，于气管近头部处剪一切口，将插管的气管接头处插入气管，并用棉线固定，转移小鼠至体描仪平台，连接呼吸机与气管接头，记录小鼠的用力肺活量(fvc)，如图2所示，检测结果显示盐酸阿比朵尔给药后，fvc有所增加，证明该药可改善博来霉素小鼠的肺功能。
30.肺胶原含量检测：即羟脯氨酸含量测定，是指在博莱霉素注射第 14天处死小鼠，分离小鼠右肺，放入5ml安培瓶，置于120℃烘箱中烘干，在盐酸作用下水解后调整ph至6.5
‑
8.0，过滤残渣，加入 pbs调整总体积为10ml，取50μl样品，加入350μl去离子水，加入 200μl氯胺t(chloramine t)溶液室温孵育20分钟，加入200μl高氯酸(perchloric acid)室温孵育5分钟，加入200μl对二甲氨基苯甲醛(p
‑
dmab)65℃孵育20分钟。取200μl至96孔板中测定样品于570nm的吸光值，利用标准品读数绘制标准曲线，进而根据标准曲线所得公式求得所测样品羟脯氨酸浓度cs。按以下公式换算为全部右肺所含羟脯氨酸的量w:w＝cs
×
8(所测样品稀释倍数)
×
10(样品总体积)。
31.博莱霉素(2u/kg)处理小鼠诱导肺纤维化发生后，灌胃给予小鼠100mg/kg盐酸阿比朵尔或相对应的溶剂(生理盐水)，小鼠在博莱霉素处理14天后取肺组织观察纤维化严重程度，造模对照试剂为生理盐水。盐酸阿比朵尔组小鼠自给药后体重开始缓慢回升(见图1)，且与给予生理盐水的小鼠相比，肺功能有所改善(见图2，*，p<0.05，即统计学上具有显著性差异)。此外，盐酸阿比朵尔组小鼠的肺组织中羟脯氨酸含量明显降低(表1，图3，**，p<0.01，即统计学上具有显著性差异)，这说明盐酸阿比朵尔能够减轻博莱霉素所诱导的胶原含量。对小鼠肺组织切片进行h&e染色(图4a
‑
4c所示，标尺:100μm)，并对肺组织切片进行纤维化的定量统计(图5，**，p<0.01，即统计学上具有显著性差异)，发现盐酸阿比朵尔组的小鼠肺纤维化程度和肺纤维化面积均明显低于生理盐水组小鼠(表2，图5)。
32.表1盐酸阿比朵尔抑制博莱霉素诱导的羟脯氨酸含量(微克/右肺)
33.对照组博来霉素组盐酸阿比朵尔组100.50
±
10.25147.25
±
10.60112.2
±
9.12
34.表2盐酸阿比朵尔抑制博莱霉素诱导的肺纤维化(百分比)
35.博来霉素组盐酸阿比朵尔组26.26
±
2.355.61
±
3.74
36.以上所述仅为本发明创造的较佳实施例而已，并不用以限制本发明创造，凡在本发明创造的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明创造的保护范围之内。