一种植物源多效组合物及其制备方法和应用与流程

1.本发明属于化妆品领域，具体涉及一种植物源多效组合物及其制备方法和应用。


背景技术：

2.随着社会的发展和生活水平的提高，人们对化妆品功能性的多样化和产品品质提出了更高的要求。化妆品中丰富的营养物质极易导致微生物在产品中生长繁殖，在反复使用过程中，极易因接触微生物而导致化妆品被污染进而变质。
3.添加防腐剂可抑制化妆品中微生物滋生，防止产品变质。据《化妆品安全技术规范》(2015版)目前化妆品准用防腐剂共51种，包括对羟基苯甲酸酯、苯氧基乙醇、异噻唑啉酮等。但一方面，现有的化学合成防腐剂仍有各种潜在的危害未能排除；另一方面，消费者对化学添加剂有着强烈的排斥心理。为了满足消费者日益增长的需求，开发不添加化学防腐剂的化妆品已经成为热点。


技术实现要素：

4.为了解决现有技术的不足，本发明提供一种植物源多效组合物，通过在常用化妆品原料中筛选出具有防腐功效的化合物，并进行优化组合，最终提供一种能够快速长效抑菌、具有美白功效、对人体皮肤安全无刺激的植物源多效组合物，该多效组合物的各组分间具有抑菌协同增效作用。
5.为达到本发明的目的，本发明采用了如下技术方案：
6.一种植物源多效组合物，其特征在于包含植物源抑菌美白成分和溶剂，其中植物源抑菌美白成分包含以下物质的至少三种：丁香酚，香豆素，水解原花青素，肉桂酸苄酯。
7.所述植物源抑菌美白成分中各组分的质量百分比为：丁香酚0.5-15％，香豆素0.5-15％，水解原花青素1-20％，肉桂酸苄酯1-20％，其中，所述质量百分比表示为各组分重量相对于植物源多效组合物的总重量。
8.所述植物源抑菌美白成分由如下质量百分比的组分组成：丁香酚0.5-15％，香豆素0.5-15％，水解原花青素1-20％。
9.所述植物源抑菌美白成分由如下质量百分比的组分组成：丁香酚0.5-15％，肉桂酸苄酯1-20％，水解原花青素1-20％。
10.所述植物源抑菌美白成分由如下质量百分比的组分组成：肉桂酸苄酯1-20％，香豆素0.5-15％，水解原花青素1-20％。
11.所述植物源抑菌美白成分由如下质量百分比的组分组成：丁香酚0.5-15％，香豆素0.5-15％，肉桂酸苄酯1-20％。
12.所植物源抑菌美白成分由如下质量百分比的组分组成：丁香酚0.5-15％，香豆素0.5-15％，水解原花青素1-20％，肉桂酸苄酯1-20％。
13.优选地，所述植物源抑菌美白成分的组成及其质量百分比为：丁香酚7％，香豆素7％，水解原花青素10％。
丁二醇76g搅拌均匀，混合溶解，即可得到植物源多效组合物。
29.实施例2 植物源多效组合物(ii)及其制备方法。
30.植物源多效组合物(ii)按质量百分比组成如下：丁香酚4％，水解原花青素7％，肉桂酸苄酯13％，1,3-丁二醇76％。其制备方法为：将丁香酚4g、水解原花青素7g、肉桂酸苄酯13g、1,3-丁二醇76g搅拌均匀，混合溶解，即可植物源多效组合物。
31.实施例3 植物源多效组合物(iii)及其制备方法。
32.植物源多效组合物(iii)按质量百分比组成如下：香豆素4％，水解原花青素7％，肉桂酸苄酯13％，1,3-丁二醇76％。其制备方法为：将香豆素4g、水解原花青素7g、肉桂酸苄酯13g、1,3-丁二醇76g搅拌均匀，混合溶解，即可植物源多效组合物。
33.实施例4 植物源多效组合物(iv)及其制备方法。
34.植物源多效组合物(iv)按质量百分比组成如下：丁香酚5％，香豆素5％，肉桂酸苄酯14％，1,3-丁二醇76％。其制备方法为：将丁香酚5g、香豆素5g、肉桂酸苄酯14g、1,3-丁二醇76g搅拌均匀，混合溶解，即可植物源多效组合物。
35.实施例5 植物源多效组合物(
ⅴ
)及其制备方法。
36.植物源多效组合物(v)按质量百分比组成如下：丁香酚3％，香豆素3％，水解原花青素6％，肉桂酸苄酯12％，1,3-丁二醇76％。其制备方法为：将丁香酚3g、香豆素3g、水解原花青素6g、肉桂酸苄酯12g、1,3-丁二醇76g搅拌均匀，混合溶解，即可植物源多效组合物。
37.对比例1
38.按质量百分比组成如下：丁香酚24％、1,3-丁二醇76％。其制备方法为：丁香酚24g、1,3-丁二醇76g搅拌均匀，混合溶解，即可得到单组分组合物。
39.对比例2
40.按质量百分比组成如下：香豆素24％、1,3-丁二醇76％。其制备方法为：香豆素24g、1,3-丁二醇76g搅拌均匀，混合溶解，即可得到单组分组合物。
41.对比例3
42.按质量百分比组成如下：水解原花青素24％、1,3-丁二醇76％。其制备方法为：水解原花青素24g、1,3-丁二醇76g搅拌均匀，混合溶解，即可得到单组分组合物。
43.对比例4
44.按质量百分比组成如下：肉桂酸苄酯24％、1,3-丁二醇76％。其制备方法为：肉桂酸苄酯24g、1,3-丁二醇76g搅拌均匀，混合溶解，即可得到单组分组合物。
45.实施例6最小抑菌浓度(mic)和最低杀菌浓度(mbc)的测定。
46.实验方法：
47.1.培养基的制备。
48.称牛肉膏5g，蛋白胨10g，葡萄糖10g，氯化钠5g，加水煮沸使各成分充分溶解，并定容至1000ml。冷却至常温后，用一定浓度的氢氧化钠调ph为7.0～7.8。
49.将上述培养基放在高压蒸汽0.1mpa、121℃的条件下保持30min进行灭菌，待冷却后，置于4℃冰箱中保存备用。
50.2.菌悬液的制备。
51.实验菌种：金黄色葡萄球菌atcc6538，来源为广东省微生物菌种保藏中心。
52.取对数生长期的金黄色葡萄球菌，液体培养基接种，37℃条件下培养10h。用无菌
液体培养基将菌液调配成0.5麦氏浊度的菌悬液，进行1:1000比例稀释至含菌量约为105cfu/ml。
53.3.最小抑菌浓度(mic)和最低杀菌浓度(mbc)的测定。
54.采用二倍稀释法探寻合适抑菌浓度范围，分别吸取不同浓度植物源多效组合物(实施例1-5)或单组分组合物(对比例1-4)溶液一定量分别加入装有含0.1％吐温-80等量液体培养基的试管中，使培养基含植物源多效组合物或单组分组合物浓度为：10、20、40、80、160、320、640、1280μg/ml，然后各管均加入供试菌液0.05ml，置培养箱中37℃下培养24h，观察生长情况，记录试管中无细菌生长的最低浓度，以确定合适抑菌浓度范围。
55.随后，采用梯度法确定最低抑菌浓度(mic)。分别吸取不同浓度植物源多效组合物(实施例1-5)或单组分组合物(对比例1-4)溶液一定量分别加入装有含0.1％吐温-80等量液体培养基的试管中，使培养基含植物源多效组合物或单组分组合物浓度梯度为10μg/ml，然后各管均加入供试菌液0.05ml，每个待测样品做3个平行组，另取试管不加任何菌液作为空白对照，0.1％吐温80以及200μg/ml1,3-丁二醇作为空白，置培养箱中37℃下培养24h，观察生长情况，以试管中无细菌生长的最低浓度为该试验样品最低抑菌浓度(mic)。从无菌生长的各个试管中吸取0.2ml样液均匀涂布于平板培养基上，37℃恒温条件下培养24h后观察，含植物源多效组合物或单组分组合物最少并且平板上无菌生长的试管，对应的浓度为对应产品对试验菌种的最低杀菌浓度(mbc)，如表1所示。本实验中，若待测样品的物质浓度为1280μg/ml时仍不能抑制金黄色葡萄球菌生长，则视其无抗菌作用。
56.表1.最小抑菌浓度和最低杀菌浓度测试结果。
[0057][0058]
通过表1可知，单组分使用时，丁香酚、肉桂酸苄酯、香豆素均具有抑菌效果，而水解原花青素在实验设置的浓度范围内，未体现抑菌效果。而使用植物源多效组合物作用于金黄色葡萄球菌时，植物源多效组合物表现出良好的抑菌效果，且各组分间具有抑菌协同增效作用。组分中，肉桂酸苄酯、香豆素、丁香酚的含量越多，抑菌效果越好。水解原花青素虽然不具有抑菌效果，但其加入并没有降低组合物的抑菌效果，在保持增效的抑菌效果的
同时，经过四组分科学复配的优选方案中，其最低抑菌浓度和最低杀菌浓度也进一步优化。
[0059]
实施例7防腐挑战评价实验。
[0060]
实验方法：
[0061]
1.实验菌种：本实验所使用的细菌为铜绿假单胞菌atcc9027、大肠埃希氏菌atcc8739和金黄色葡萄球菌atcc6538混合菌；真菌为白色假丝酵母菌atcc10231、黑曲霉atcc16404，来源为广东省微生物菌种保藏中心。
[0062]
2.试样的制备：根据表2的配方，将实施例1-5制得的植物源多效组合物和对比例1-4制得的单组分组合物(实施例1-5制备的植物源多效组合物和对比例1-4制备的单组分组合物统称为组合物)分别加入表2的配方中，制备保湿霜，作为待测试样，配方见表2。
[0063]
3.试验方法：参照ctfa挑战实验要求，即在化妆品中添加一定量的混合微生物菌悬液，添加混合菌量分别为：细菌3.0
×
107cfu/g(cfu/ml)和真菌1.0
×
105cfu/g(cfu/ml)，混合后的样品在特定时间分离检测观察微生物的存活情况。
[0064]
试验结果判定：0小时(即接种后立刻取样)、7天、14天、21天和28天结果，要求在第7天时的细菌降低99.9％，真菌降低90％；并且在28天内持续下降为零来判断保湿霜的防腐效果，具体的判断结果参考表3。
[0065]
实施例8保湿霜的制备。
[0066]
表2.保湿霜配方。
[0067]
名称质量分数(％)组合物0.5硬脂醇醚-22.0硬脂醇醚-213.0十六-十八醇5.0棕榈酸异丙脂5.0角鲨烷5.0氢化聚异丁烯2.0dc-200/1001.5透明质酸0.1丙二醇5.0氨基酸保湿剂(nmf-50)2.0卡波9340.3三乙醇胺0.3香精0.02去离子水余量
[0068]
制备方法：
[0069]
1.油相：将硬脂醇醚-2、硬脂醇醚-21、棕榈酸异丙脂、角鲨烷、氢化聚异丁烯、dc-200/100加入夹套溶解锅内，开启蒸汽加热，在不断搅拌条件下加热至70℃，使其充分熔化或溶解均匀待用。组合物、香精在乳化前加入油相；
[0070]
2.先将去离子水加入夹套溶解锅中，十六-十八醇、丙二醇、氨基酸保湿剂(nmf-50)、三乙醇胺加入其中，搅拌下加热至90-100℃，维持20min灭菌，然后冷却至70-80℃待
用；
[0071]
3.透明质酸、卡波934单独配制，将其溶解在水中，在室温下充分搅拌使其均匀溶胀，防止结团，如有必要可进行均质，在乳化前加入水相。为补充加热和乳化时挥发掉的水分，按配方多加3％-5％的水；
[0072]
4.上述油相和水相原料通过过滤器按照一定的顺序加入乳化锅内，在70-80℃条件下，进行一定时间的搅拌和乳化。乳化后，乳化体系冷却到接近室温，并继续搅拌约10min，停止搅拌、降温、然后送检待出料；
[0073]
5.出料后将储料桶密封，并移至静置间待用。
[0074]
表3.实施例8制备得到的保湿霜的微生物防腐挑战试验结果。
[0075][0076]
由表3可知，含有实施例1-5制备的植物源多效组合物的保湿霜均通过了防腐挑战测试，具有强效的防腐效果。含有对比例1-4制备单组分组合物的保湿霜随着时间的推移，细菌和真菌总数均有下降，说明均有一定的防腐效果，但均未通过防腐挑战测试，另外，由表3还可看出，含有实施例1-5制备的植物源多效组合物的保湿霜的防腐效果比含有对比例1-4制备单组分组合物的保湿霜的防腐效果要好，说明丁香酚、香豆素、水解原花青素、肉桂酸苄酯任意三组分的复配可以提高防腐效果。而将丁香酚、香豆素、水解原花青素、肉桂酸苄酯四种物质通过科学复配后的防腐效果进一步提高，说明丁香酚、香豆素、水解原花青素、肉桂酸苄酯任意三组分的复配和丁香酚、香豆素、水解原花青素、肉桂酸苄酯四种物质通过科学复配后均具有协同增效作用，丁香酚、香豆素、水解原花青素、肉桂酸苄酯四种物质通过科学复配后的协同增效最佳，提高了防腐能力。
[0077]
实施例9面膜液的制备。
[0078]
表4.面膜液配方。
[0079]
名称质量分数(％)组合物0.51,3-丙二醇5汉生胶0.1
小核菌胶0.1羟乙基纤维素0.15尿囊素0.15海藻糖1氨基酸保湿剂2透明质酸钠0.1eg-12胶原蛋白粉2维生素b32k20.16去离子水余量
[0080]
制备方法：
[0081]
1.先加入1,3-丙二醇，一边搅拌一边将汉生胶、小核菌胶、羟乙基纤维素投入搅拌锅中，直至搅拌分散均匀；
[0082]
2.继续边搅拌边将尿囊素、海藻糖、氨基酸保湿剂、透明质酸钠、eg-1，直至搅拌分散均匀；
[0083]
3.加入70份的去离子水，然后加热至体系温度约85-90℃；
[0084]
4.静置保温20min以灭菌，然后边搅拌边徐徐降温至60℃以下，补加足量的去离子水，其后将胶原蛋白粉、维生素b3、k2投入体系中；
[0085]
5.继续搅拌降温至40℃左右时，将组合物加入体系中，并继续搅拌约10min，停止搅拌，降温，然后送检待出料；
[0086]
6.出料后将储料桶密封，并移至静置间待用。
[0087]
体外试验：
[0088]
1.试验目的：与市售美白剂进行酪氨酸酶抑制性比较。
[0089]
2.试验仪器与试剂。
[0090]
主要仪器：分光光度计spectronicgenesys-5，美国thermo公司。
[0091]
主要试剂：酪氨酸酶(美国sigma公司)，其他试剂为常规试剂。
[0092]
3.试验方法。
[0093]
在各试管中分别加入磷酸缓冲液pbs(ph 6.8，0.1mol/l)、样品液、酪氨酸溶液。置于37℃水浴中10min，然后加入酪氨酸酶，再于37℃水浴中反应10min，在475nm测吸光度值，重复实验3次，求其平均值。
[0094]
实验体系设计见表5，c1为空白对照，c2用于空白调零，s1为样品管，s2用于样品调零。根据表4的配方，将实施例1-5制备的植物源多效组合物和对比例1-4制备的单组分组合物(实施例1-5制备的植物源多效组合物和对比例1-4制备的单组分组合物统称为组合物)分别加入表4的配方中，制备面膜液，作为待测试样，配方见表4。
[0095]
酪氨酸酶抑制率＝(空白对照吸光度值-样品吸光度值)/空白对照吸光度值
×
100％
[0096]
表5.酪氨酸酶抑制实验体系加样表。
[0097]
试剂c1/mlc2/mls1/mls2/ml
pbs22.511.5样品0011l-酪氨酸1111酪氨酸酶溶液0.500.50
[0098]
4.试验结果见表6。
[0099]
表6.实施例9制备得到的面膜液的酪氨酸酶抑制率测定。
[0100][0101][0102]
由表6可知，含有实施例1-4制备的植物源多效组合物的面膜液的防腐效果比含有对比例1-4制备的单组分组合物的面膜液的美白要好，说明丁香酚、香豆素、水解原花青素、肉桂酸苄酯任意三组分的复配可以提高美白效果。而实施例5制备的植物源多效组合物的面膜液的防腐效果更佳，说明将丁香酚、香豆素、水解原花青素、肉桂酸苄酯四种物质通过科学复配后添加到化妆品中，化妆品的美白效果进一步提高。因此，丁香酚、香豆素、水解原花青素、肉桂酸苄酯任意三组分的复配和丁香酚、香豆素、水解原花青素、肉桂酸苄酯四种物质通过科学复配后均具有美白协同增效作用，丁香酚、香豆素、水解原花青素、肉桂酸苄酯四种物质通过科学复配后的美白协同增效最佳。