1.本技术主张于2019年7月8日申请的美国临时申请第62/871,335号的利益与优先权，其全部内容通过引用合并于本文。2.本发明提供一种用于改善或抑制胃肠道不适的组合物及方法。
背景技术：
：：3.便秘及/或腹泻虽然不危及生命，但已大幅影响生活品质。近来，功能性肠病(functionalboweldisorder，fbd)被定义为一种病症，具有中段或下段胃肠道症状，包括功能性便秘、功能性腹泻和大肠激躁症(irritablebowelsyndrome，ibs)，尽管fbd的确切病因基础尚不清楚。在缺乏结构或生化解释的情况下，fbd可通过特征性症状诊断；对于ibs，最常见的症状是腹痛或便秘和腹泻交替引起的不适。目前推断ibs是同时具有生理性和心理社会性因素的复杂疾病，其中肠道的运动性或感觉改变是由中枢神经系统的输入信号而调节。最常推荐用于fbd的治疗方法是膳食纤维/增体剂(bulkingagents)。4.便秘是一种胃肠道疾病，其临床表现为大便频率低、排便困难并具疼痛感和坚硬感。便秘缺乏合适的定义，导致广泛的报导患病率(全球范围内为1％至80％)。此外，慢性便秘为老年人的复杂症状。在此方面，这种状况与患者的生活品质，以及消耗健康资源有着密切的关系。5.便秘的多种起因局限了目前常规治疗的临床疗效，这些常规治疗使用仅经由单一路径发挥作用的单一药物。然而，草药具有针对多种路径的能力，而成为目前便秘的新兴疗法。6.樟属(cinnamomum)是樟科(laurelfamily，lauraceae)的一属，但目前针对来自其叶片的缓泻剂活性的研究相当少。技术实现要素：7.在本发明中意外地发现，牛樟树叶片或其萃取物可有效改善或抑制胃肠道不适，尤其是便秘。8.实施例中确认了牛樟树叶片或其萃取物具有缓泻剂活性。9.本发明的目的是提供一种牛樟树叶片或其萃取物用于制备改善或抑制胃肠道不适，尤其是便秘的组合物的用途。10.在本发明的一具体实施例中，该胃肠道不适选自于由便秘、逆流性食道炎、自闭症肠病、肠胃胀气、口臭、慢性疲劳症候群(chronicfatiguesyndrome，cfs)、腹胀、暂时性肛门痛、小肠细菌过度生长(smallintestinalbacterialovergrowth，sibo)和大肠细菌过度生长(largeintestinalbacterialovergrowth，libo)、慢性恶心和功能性消化不良组成的群组。11.在本发明的一特定具体实施例中，该胃肠道不适为便秘。12.在本发明的一具体实施例中，牛樟树叶萃取物为水或乙醇萃取物。13.在本发明的一具体实施例中，牛樟树叶片或其萃取物实质上不含黄樟素。14.在本发明的一具体实施例中，牛樟树叶片或其萃取物具有缓泻剂活性。15.在一具体实施例中，该组合物更包含至少一额外的缓泻剂。16.在一具体实施例中，该组合物更包含至少一额外的益生菌。17.在一较佳实施例中，本发明的组合物为制成饮料组合物。18.在一较佳实施例中，本发明的组合物为制成牛樟树叶茶包。19.应当理解，前面的一般叙述和以下的详细描述都只是示例性和说明性的，并不限制本发明。附图说明20.当结合附图阅读时，将更好地理解前述
发明内容以及以下本发明的详细描述。为了说明本发明，在附图中列出目前较佳的具体实施例。21.于附图中：22.图1为lesct-a(其为牛樟树叶片的水萃取物)的示例性气相层析-质谱(gc-ms)层析图。23.图2为lesct-b(其为牛樟树叶片的乙醇萃取物)的示例性gc-ms层析图。24.图3显示lesct-a和lesct-b对于肠道中活性碳移动的影响。洛哌丁胺(loperamide)的投药显著减少未经处理的便秘小鼠的肠道活性碳移动。具体实施方式25.将参考以下示例的具体实施例进一步描述本发明上述
发明内容。然而，不应理解为本发明的内容仅限于以下具体实施例，且基于本发明上述
发明内容的所有发明都落于本发明范畴中。26.除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语皆具有与本发明所属领域的技术人员通常理解的相同含义。27.如本文所用，单数形式的“一(a)”、“一(an)”和“该(the)”包括复数指示物，除非上下文另外明确指出。因此，例如提及“样本”包括本领域技术人员已知的多个此类样本及其等同物。28.本发明提供一种牛樟树叶片或其萃取物用于改善或抑制胃肠道不适，尤其是便秘的药物的用途。29.如本文所用，“胃肠道不适”一词是指可获益于肠道传送加速的任何症状，包括便秘、逆流性食道炎、自闭症肠病、肠胃胀气、口臭、慢性疲劳症候群(cfs)、腹胀、暂时性肛门痛、小肠细菌过度生长(sibo)和大肠细菌过度生长(libo)、慢性恶心、功能性消化不良和腹胀。30.如本文所用，“便秘”一词是指便秘、功能性便秘、慢性便秘、急性便秘、大肠激躁症(ibs)-便秘、憩室相关性便秘、假性梗阻、传送缓慢便秘、患有糖尿病和胃轻瘫的淤滞。31.如本文所用，“改善”一词是指治疗、治愈、减轻、缓解、改变、补救、改善、增进或影响该事件或特征(例如，胃肠道不适)的作用。32.如本文所用，“抑制”一词是指减轻或停止事件或特征(例如，胃肠道不适)的作用。33.如本文所用，“个体”一词包括人类或非人类动物，例如陪伴动物(例如狗、猫等)、农场动物(例如牛、绵羊、猪、马等)，或实验动物(例如大鼠、小鼠、天竺鼠等)。34.如本文所用，“有效量”一词是指与未接受此剂量的对应个体相较，在治疗、治愈、预防、改善或抑制疾病、症状或副作用，或降低疾病或病症的进展速度的剂量。该术语亦包括在其范围内可有效增强正常生理功能的量。35.根据本发明的一具体实施例，亦可制成饮料组合物，例如，但不局限于，茶(如茶饮料或茶包成份)、汽水、果汁(如水果萃取物或果汁饮料)、牛奶、咖啡。本发明的用于改善或抑制胃肠道不适的饮料组合物在任何前述形式下皆可用于改善或抑制胃肠道不适。根据本发明的一具体实施例，可制成茶包形式。36.本发明的lesct可进一步配制成用于投药的医药组合物。因此，本发明更提供一种包含一治疗有效量的牛樟树叶片或其萃取物和一或多种医药上可接受的载体的医药组合物。37.为了递送和吸收目的，一治疗有效量的本发明活性成分可与医药上可接受的载体一同配制成合适形式的医药组合物。根据投药路径，本发明的医药组合物较佳包含总重量的0.1％至100％的活性成分。38.本文使用的“医药上可接受的载体”一词是指与配方中的其他成分相容，且对于将投予该医药组合物的个体无害的可接受载体、稀释剂或赋形剂。本领域中通常已知或使用的任何载体、稀释剂或赋形剂，均可用于本发明，取决于该医药配方的要求。根据本发明，该医药组合物可用于经由任何适当的路径投药，包括但不限于口服、直肠、鼻、局部、阴道或肠胃外途径。在本发明的一特定范例中，该医药组合物配制为口服投药。此类制剂可通过药学领域中已知的任何方法来制备。39.如本文所用，“医药上可接受的”是指该载体与组合物中的活性成分相容，较佳可稳定该活性成分，且对于接受治疗的个体是安全的。该载体可为活性成分的稀释剂、载剂、赋形剂或基质。赋形剂的某些适当范例包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨糖、甘露糖、淀粉、阿拉伯树胶、磷酸钙、藻酸盐、黄耆胶、明胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素、无菌水、糖浆和甲基纤维素。该组合物可额外包含润滑剂，例如滑石粉、硬脂酸镁和矿物油；润湿剂；乳化和悬浮剂；防腐剂，例如羟基苯甲酸甲酯和羟基苯甲酸丙酯；甜味剂；和调味剂。在投予患者后，本发明的组合物可提供活性成分的快速、持续或延迟释放的效果。40.根据本发明，该组合物形式可为锭剂、丸剂、粉剂、口含片、小包、口含锭、酏剂、悬浮剂、洗剂、溶液、糖浆、软和硬明胶胶囊、栓剂、无菌注射液以及成包粉末。41.本发明组合物可经由任何生理上可接受的路径递送，例如口服、肠胃外(例如肌内、静脉内、皮下和腹膜内)、穿皮、栓剂和鼻内方法。关于肠胃外投药，其较佳以无菌水溶液形式使用，其可包含足以使该溶液与血液呈等张的其他物质，例如盐类或葡萄糖。该水溶液可视需要经适当地缓冲(ph值较佳为3至9)。在无菌条件下制备合适的肠胃外组合物，可以本领域技术人员熟知的标准药理技术完成。42.根据本发明，本文描述的方法及组合物可更包含一或多种益生菌，其中任选地，该益生菌包含经培养的或由粪便萃取的微生物或细菌，或细菌成分，且任选地为细菌或细菌成分，包含或衍生自拟杆菌(bacteroidetes)、厚壁菌(firmicutes)、乳酸杆菌(lactobacilli)、双歧杆菌(bifidobacterium)、大肠杆菌和粪链球菌(strepfaecalis)，及其等同物。43.根据本发明，本文所述的方法及组合物可与至少一种额外的缓泻剂组合投予个体。有效的示例性缓泻剂包括但不限于比沙可啶(bisacodyl)(例如，dulcolaxtm、durolaxtm、fleettm、alophentm，或correctoltm)、多库酯钠(docusatesodium)、泊洛沙姆(poloxamer)、山参皂苷、乳果糖、山梨糖醇、蔗糖、苹婆(sterculia)或山黄(frangula)、石蜡油或其等同物，或其组合。44.本发明以下列实施例进一步说明，提供这些具体实施例是为了说明而非限制。45.实施例46.材料与方法47.1.牛樟树叶片萃取物的制备48.牛樟树叶片萃取物(lesct)获自吉亚生物科技股份有限公司(arjilpharmaceuticalsllc)。为了制备lesct，将牛樟树的新鲜叶片进行室内萎凋/翻动(tossing)、流送和揉捻。将加工后的叶子置于50-150℃的温度下热风干燥，然后进行乙醇和水萃取，分别得到lesct-a和lesct-b分液。49.2.lesct中的黄樟素分析50.15g黄樟树叶片经加热回流，使用200ml水或200ml的95％乙醇萃取。之后将萃取液进行水/二氯甲烷分层，并通过气相层析-质谱(gc-ms)系统分析该二氯甲烷分液，以检测黄樟素的存在。51.3.实验动物52.雄性icr小鼠(7-8周大)获自biolascotaiwanco.,ltd(中国台湾台北)。在实验之前，将动物在12小时的暗光周期中，于22±1℃的恒定温度和55±5％的相对湿度下，置于plexiglas笼子中饲养至少2周。任意提供动物食物和水。所有实验程序均根据动物相关管理规定的指导进行，且该流程已获得相关部门批准。53.4.诱导小鼠便秘54.口服投予1ml洛哌丁胺(loperamide)(10mg/kg体重，溶于0.9％氯化钠中)，以在动物中诱导便秘，而对照组小鼠仅投予一般生理食盐水。排出降低量、坚硬和干燥的粪便沉淀物代表小鼠有便秘现象。55.5.实验设计56.将小鼠分为六组，每组五只。第1组(对照组)和第2组(便秘对照组)中的动物投予蒸馏水。第3、4、5和6组分别包含投予lesct-a(0.25、0.5和1g/kg体重/日)和lesct-b(0.5g/kg体重/日))的便秘小鼠。在实验期间记录所有小鼠的水摄入、饲料摄入和体重增加，并持续处理7天。在投予测试样本7天后，每组小鼠禁食16小时。1小时后，模型对照组(第2组)和实验组(第3、4、5和6组)经胃内投予洛哌丁胺(loperamide)(10mg/kg)，而空白对照组(第1组)则投予蒸馏水。57.6.粪便颗粒的总数、时间和干重58.测定粪便颗粒的总数、时间和重量。测量小鼠第一次排便时间、6小时内的排便次数和排便重量，以反映出模型小鼠的排便情况。59.7.肠道中活性碳移动比的测量60.投予测试样本7天后，随意饮用水。投予洛哌丁胺(loperamide)诱导便秘0.5小时后，给动物喂食活性碳餐(1mg/100kg体重)(在10％阿拉伯胶中的5％活性炭悬浮液)。投予活性碳餐30分钟后，首先以颈椎脱臼法牺牲动物，然后打开腹腔。移出肠子并测量肠总长度(从幽门括约肌到盲肠)，以及活性碳餐的移动距离。肠道的活性碳移动比计算如下：活性碳移动比(％)＝(活性碳行进的距离)/(小肠的总长度)×100％。61.8.统计分析62.由动物实验获得的数据以平均值和平均值的标准差(±s.e.m)表示。学生t检验是用于检验多组之间或两组之间的差异。统计显著性表示为*p《0.05、**p《0.01，以及***p《0.001。63.实施例164.分析lesct中黄樟素的存在65.黄樟素(safrole)为一种类苯丙烷化合物，见于广范围的植物中，其功能为天然的拒食剂。然而，毒理学研究显示黄樟素的代谢转化物会致癌。为了确认lesct中是否存在黄樟素，对lesct-a和lesct-b进行gc-ms分析，结果显示在lesct-a(图1)和lesct-b(图2)中均未检测到黄樟素。此外，lesct-a(图1)和lesct-b(图2)中均不存在樟脑。这些数据共同显示黄樟素和樟脑会在本发明的萃取过程中除去。66.实施例267.lesct对肠道活性碳移动的影响68.在洛哌丁胺(loperamide)处理组中，在投予洛哌丁胺(loperamide)后记录肠道活性碳移动的减少，且与正常小鼠组相较，此减少维持显著较高(p《0.001)直到第7天为止(从57.63±3.32cm至27.94±3.86cm)。与洛哌丁胺(loperamide)组相较，洛哌丁胺(loperamide)+lesct-a(0.25、0.5和1g/kg)(p《0.001)和lesct-b(0.5g/kg)(p《0.01)检测到肠道活性碳移动比具有统计学显著的降低。洛哌丁胺(loperamide)的投药显著降低未经处理的便秘小鼠的胃肠蠕动。然而，与小鼠中洛哌丁胺(loperamide)诱导的便秘相较，以萃取物(lesct-a和lesct-b)处理，会以剂量依赖性方式增加胃肠道运动。69.实施例370.lesct抑制洛哌丁胺(loperamide)诱导的便秘小鼠便秘的时间和粪便特性71.主要通过时间、粪便颗粒数和重量评估便秘，以确定lesct-a和lesct-b对于洛哌丁胺(loperamide)诱导便秘的作用。洛哌丁胺(loperamide)显著减少排便时间、粪便颗粒的数量和重量(表1)，表示在小鼠中诱导便秘。然而，lesct-a和lesct-b萃取物可显著降低洛哌丁胺(loperamide)诱导便秘的时间，并增加便秘小鼠的粪便颗粒数量和重量。72.表1：在洛哌丁胺(loperamide)-诱导的便秘中，lesct-a和lesct-b对于便秘小鼠的时间和粪便特性的影响73.[0074][0075]###p《0.001是与对照组样本比较。[0076]***p《0.001，是与单独投予洛哌丁胺(loperamide)组比较。[0077]本研究清楚显示，lesct-a和lesct-b具有缓泻剂活性。本研究显示口服投予lesct-a和lesct-b，会在洛哌丁胺(loperamide)诱导的便秘小鼠中展现出缓泻剂活性。这说明该草药对增进肠道蠕动具有助益。然而，非常值得注意的是，与0.5g/kg体重的lesct-b相较，0.5g/kg体重的lesct-a会表现出更佳的缓泻剂作用。这些发现为以lesct作为缓泻剂的民间疗法用途提供科学依据。[0078]上面的描述仅相关于本发明中的较佳具体实施例，且应指出，对于本领域的普通技术人员来说，在不背离本发明的前提下亦可做出一些增进和修饰，且这些增进和修饰也应视为在本发明的保护范围之内。当前第1页12当前第1页12