用于大麻提取物和萜烯的微乳液递送体系的制作方法

用于大麻提取物和萜烯的微乳液递送体系
1.相关申请的引用
2.本技术要求2019年9月6日提交的题为“用于大麻提取物和萜烯的微乳液递送体系”的美国临时申请no.62/896,820的权益，通过引用的方式将其整体并入本文。


背景技术：

3.大麻素是作用于细胞中改变神经递质释放的大麻素受体的化合物。大麻素包括在动物体内自然产生的内源性大麻素、在大麻属植物和一些其它植物中发现的植物大麻素、以及合成的合成大麻素。1型大麻素受体主要发现于大脑中，而不存在于负责呼吸和心血管功能的脑干部分。2型大麻素受体主要发现于免疫系统中，似乎负责抗炎和可能的其它治疗作用。
4.植物大麻素是从大麻属植物中分离出来的，认为大麻属植物包括大麻(cannabis sativa)、印度大麻(cannabis indica)和莠草大麻(cannabis ruderalis)三个物种。含有以重量计低于0.3％的四氢大麻酚(tetrahydrocannabinol，thc)的大麻植物通常被称为“工业大麻(hemp)”，而含有以重量计0.3％以上的thc的植物通常被称为毒品大麻(marijuana)。从大麻属植物中可分离出至少113种不同的植物大麻素。植物大麻素是以其“a”或酸性形式被分离出来的，然后脱羧(通常是通过加热)，变成它们的更有生物活性的脱羧形式。
5.thc是最著名的大麻素，因为它与1型受体结合并被认为具有精神活性。大麻二酚(cannabidiol，cbd)正在成为更广为人知的非精神活性大麻素，因为它作用于1型和2型受体，且已知会减轻疼痛和炎症，并使一些神经反应(例如与儿童dravet综合征相关的反应)平息。此外，cbd可抵消与thc使用相关的认知障碍(包括短期记忆丧失)，除了作为抗氧化剂外，还可能具有额外的抗精神病作用。大麻萜酚(cannabigerol，cbg)是另一种非精神活性大麻素，可能具有与cbd类似的作用。大麻环萜酚(cannabichromene，cbc)、大麻酚(cannabinol，cbn)和cannabitriol(cbt)是正在研究其潜在生物活性的其它大麻素。
6.虽然关于大麻素的健康益处的研究仍在进行中，但对于上文提到的儿童dravet综合征、帕金森病、精神分裂症、焦虑症以及抑制某些癌细胞的发展而言，已证明或可能证明其药理学效用。由于人类内源性大麻素系统参与基本的生命功能，包括食欲、免疫反应、生殖和疼痛管理，大麻素对人体的影响可能是多样的。大麻素防止这些功能过度激活的能力可能使基于这些功能过度激活的疾病得到预防或使其进展减缓。
7.萜烯是从植物和一些昆虫中提取的，所述植物例如针叶树、花、柑橘类水果，昆虫例如白蚁和燕尾蝶。从分子的角度来看，所有萜烯都含有异戊二烯官能团，是一类多样的有机分子。除了作为香料的历史用途之外，萜烯为包括维生素a和类固醇在内的生物活性物质提供了基础。萜烯包括例如柠檬烯、蒎烯、芳樟醇和β-石竹烯等化合物。例如，β-石竹烯具有用作香料和抗炎药的用途。
8.用常规递送体系口服递送大麻素和萜烯可在给药20min后产生可忽略不计的血液浓度，且不能提供有效的血流浓度，据认为血流中大麻素的有效血流浓度为约0.4ng/ml以
上。事实上，对于低吸收个体，在不消耗不期望的大量常规口服递送体系的情况下，用常规口服递送体系在给药90min后可能无法或者根本无法达到有效的血流浓度。因此，在用常规口服递送体系消耗的大麻素或萜烯中，所消耗的大部分可能会被排泄掉而从未使用。
9.乳液是两种以上不溶解的液体的混合物。因此，两种以上液体不形成溶液，并且在合并的液体之间存在可识别的界面。乳液可以是粗乳液(macroemulsions)、假乳液、纳米乳液或微乳液。乳液可用于肠胃外递送、眼部递送、经皮递送、口服递送等。
10.图1a表示示例纳米乳液液滴100，其具有形成亲水性外部120和疏水性内部110的磷脂单壁(单层)。纳米乳液液滴100的单层壁由单层磷脂形成。由于磷酸盐官能团，外壁120是水溶性的，而由于烷基官能团，内部110是脂溶性的。图1b表示连续相150中的多个纳米乳液液滴100。
11.图2a表示微乳液液滴200，其具有形成亲水性外部220和疏水性内部210的磷脂单壁(单层)。与纳米乳液液滴100一样，微乳液液滴200的单层壁由单层磷脂形成。相对于所表示的纳米乳液液滴100，微乳液液滴200的直径要小得多——这对于微乳液来说是常有的情况。事实上，微乳液液滴200的直径减小到单层磷脂的非极性尾部230相互“挤压”，从而形成比图1中所示的纳米乳液液滴100的情况更“坚实”的内部疏水性屏障。图2b表示处于连续相250中的多个微乳液液滴200。在连续相250中还表示出未被掺入微乳液液滴200中的几个单独的磷脂分子260。
12.透皮乳膏通常是“假乳液”，其中可递送物的固体颗粒没有完全溶解在形成乳膏的乳液液滴中。与较大液滴的粗乳液和假乳液相比，较小液滴的纳米乳液和微乳液提供了下述潜力：提供比可从粗乳液和假乳液常规获得的更好的递送性能，以用于透皮或口服吸收。
13.虽然以压力(包括剪切力)、温度以及它们的组合的形式所使用的用以形成纳米乳液的高能混合可提供微乳液的较小液滴，但此种纳米乳液不是热稳定的，因此不是贮存稳定的微乳液，并且类似于粗乳液，纳米乳液的组分最终分离成不混溶的极性和非极性液体。因此，如图1和图2所示，纳米乳液液滴往往比微乳液液大，这是因为纳米乳液液滴在形成后不断扩大直径，直到集聚的液滴从连续相分离。
14.通常，粗乳液、纳米乳液和微乳液已被用于油溶性或水溶性的可递送物。大麻提取物和萜烯是油溶性的，但当溶于油时，通过肠道吸收相对缓慢且不稳定。然而，无论乳液形式如何，包含大麻提取物和一些萜烯的常规水包油型(oiw)乳液通常会形成油滴，随着油滴中的大麻提取物浓度提高，油滴很容易从乳液水相中解离。当通过常规水包油型乳液递送时，油滴从常规水包油型乳液的水相中的这种解离导致大麻素和萜烯的血液摄取速率和总血液递送量显著损失。这被认为归因于这样一个事实，即当乳液的油滴从水相中解离时，得到的解离乳液变成油、水和乳液的任何残余物，解离的油具有近似于油单独的递送曲线，因此变得缓慢和不稳定。因此，包含大麻提取物和一些萜烯的常规水包油型乳液往往遭受与纯油制剂相似的血流摄取缺陷，因为当常规乳液被消耗时，油相已经从水相中解离。
15.持续需要用于口服递送体系的简单且有效的材料和方法，以用于将大麻素和萜烯快速且按消耗量以更高浓度递送到血流中。由于gi吸收途径，常规油混合物在传统上一直受到摄取异常缓慢、量低且不稳定的困扰。常规水包油型乳液体系在传统上具有缺陷，包括对冷和热的稳定性差，特别是在乳液中保持期望的平均液滴直径方面，这对于有效口内递送至血流、防止油和水组分的相分离以及防止可递送物和/或油从乳液中解离而言是重要
的。除了导致可递送物的缓慢、差和不稳定的血液摄取这些缺陷之外，常规乳液体系还具有相对于可递送物的质量或体积需要过大体积的乳液的缺陷。
16.通过使得能够将大麻素和萜烯方便、快速、有效和可重复地口服递送到血流中，本发明的微乳液和方法克服了与常规口服递送体系相关的至少一个缺陷。


技术实现要素：

17.在一个方面，本发明提供了一种组合物，所述组合物包含：油溶性物质；以及，经改性的水包油型微乳液，所述经改性的水包油型微乳液包含经改性的油相和经改性的极性连续相，其中，所述油溶性物质溶解在所述改性的油相中，所述经改性的油相包含磷脂、聚乙二醇衍生物、油和醇，并且其中，所述改性的极性连续相包含糖或糖醇和水。
18.在本发明的另一个方面，涉及形成包含油溶性物质的经改性的水包油型微乳液的方法，所述方法包括：将磷脂、聚乙二醇衍生物、油和醇合并，以形成醇-脂质混合物；将糖或糖醇和水合并，以形成经改性的极性连续相；以及，在大气压下将油溶性物质与醇-脂质混合物和经改性的极性连续合并，以形成经改性的水包油型微乳液。
19.在本发明的另一个方面，将油溶性物质递送至人类受试者的血流的方法，所述方法包括：将经改性的水包油型微乳液经口内引入人类受试者；以及将所述油溶性物质递送至所述人类受试者的血流，其中，在将所述经改性的水包油型微乳液引入所述人类受试者的20min内，约1ml的所述经改性的水包油型微乳液向所述人类受试者提供血液浓度为0.3ng/ml-1.5ng/ml的所述油溶性物质。
20.在检查以下附图和详细描述后，本发明的其它组合物、方法、特征和优点对于本领域技术人员来说将是显而易见的或者将变得显而易见。旨在将所有此类额外的组合物、方法、特征和优点都包括在本说明书中，在本发明的范围内，并受随后的权利要求保护。
附图说明
21.参考以下附图和描述可以更好地理解本发明。图中的组分不一定是按比例的，也不旨在准确地表示分子或它们的相互作用，而是强调说明本发明的原理。
22.图1a表示具有形成亲水性外部和疏水性内部的磷脂单壁(单层)的纳米乳液液滴。
23.图1b表示处于连续相中的多个纳米乳液液滴。
24.图2a表示具有形成亲水性外部和疏水性内部的磷脂单壁(单层)的微乳液液滴。
25.图2b表示在连续相中表示的多个微乳液液滴。
26.图3表示制备包含油溶性物质的moiw微乳液的方法。
27.图4以图表形式提供了cbd血液摄取速率和浓度分析的结果。
28.图5以图表形式提供了由血流浓度分析确定的累积auc值。
具体实施方式
29.描述了其中疏水性液滴分布在连续亲水性液相中的微乳液。相对于常规水包油型(oiw)微乳液，可认为所描述的微乳液是经改性的水包油型(moiw)微乳液，其中，微乳液的“油”相和“水”相均被改性。moiw微乳液的油相液滴经醇改性，相较于油混合物或常规水包油型(oiw)微乳液的油相，可更好地将油溶性物质递送至血流中。moiw微乳液的极性连续“水”相经糖或糖醇改性。优选地，moiw微乳液的经改性的极性连续相主要是糖或糖醇相。经改性的油相液滴分散在moiw微乳液的经改性的极性连续相中。
30.moiw微乳液可以使得油溶性物质通过口腔和胃粘膜以及通过皮肤透皮被摄取至哺乳动物的血流。相比常规oiw微乳液的油相，moiw微乳液可以更快地将有效浓度的油溶性物质口服递送至个体的血流中，例如在引入的20min内，尤其是当个体吸收率较低时。此外，在引入的油溶性物质中，相比常规oiw微乳液的油相，moiw微乳液可以递送显著更高百分比的口服引入至个体血流中的油溶性物质。
31.认为经改性的极性连续相允许微乳液的经改性的油相液滴的掺入，并保持高的醇含量。因此，认为经改性的极性连续相迫使醇进入油和油溶性物质，驻留在由磷脂和聚乙二醇衍生物形成的单层壁的内部，从而进入经改性的油滴的疏水性核心，而含有糖或糖醇和水的经改性的极性连续相驻留在单层外部。
32.与常规oiw乳液的水连续相不同，经改性的极性连续相的糖或糖醇不容易与醇形成共沸物，因此相对于水，从油滴中提取醇的能力降低。相对于常规oiw乳液，由磷脂尾部形成的单层壁的疏水性部分以及与所述比例的聚乙二醇衍生物相组合也被认为减少了油滴中的醇损失。
33.相对于常规oiw乳液，由经改性的极性连续相与疏水性单层相组合而提供的经改性的油相液滴中保留的高醇含量被认为是增加了moiw微乳液的经改性的油滴中的油溶性物质的溶解度。油溶性物质在moiw的经改性的油滴中的此种提高的溶解度被认为减少了油溶性物质在储存期间从moiw微乳液的油滴中的解离(例如重结晶、沉淀等——由此分离)，从而使moiw微乳液成为优选视觉上澄清的贮存稳定的微乳液。此外，相对于常规oiw乳液，油溶性物质在moiw的经改性的油滴中的提高的溶解度被认为每单位体积moiw微乳液向血流递送更大量的油溶性物质。
34.在moiw微乳液中，包含油溶性物质的经改性的油相液滴的平均液滴直径为1nm-100nm，优选的平均液滴直径为5nm-50nm。更优选地，moiw微乳液的经改性的油相液滴的平均液滴直径为10nm-30nm。
35.moiw微乳液的油溶性物质可通过moiw微乳液经粘膜(例如口腔、鼻内、阴道或直肠)或经皮递送。优选地，包含油溶性物质的moiw微乳液是可摄取且可食用的。
36.moiw微乳液优选包含以重量计比例为1:2:(0.6-3.3):4:(7-9):(2-3.5)的磷脂、油、聚乙二醇衍生物、醇、糖或糖醇、和水，其中包括以重量计至多20％的偏差，更优选以重量计至多10％的偏差，因此优选以重量计(1:2:(0.6-3.3):4:(7-9):(2-3.5))
±
20％或以重量计(1:2:(0.6-3.3):4:(7-9):(2-3.5))
±
10％。
37.油溶性物质优选以如下比例被包含在moiw微乳液中：油与油溶性物质以重量计的比例为1:(0.05-0.4)，优选油与油溶性物质以重量计的比例为1:(0.1-0.3)，其中包括以重量计至多10％的偏差，更优选以重量计至多5％的偏差，因此优选以重量计(1:(0.05-0.3))
±
10％或以重量计(1:(0.05-0.3))
±
5％。
38.图3表示制备包含油溶性物质311的moiw微乳液336的方法300。除了油溶性物质311，微乳液336可包含可溶于水或油的额外的可递送物。
39.在310中，将油溶性物质311合并到醇-脂质混合物312中，该醇-脂质混合物包含聚乙二醇衍生物、磷脂、油和醇。在320中，将包含油溶性物质311的醇-脂质混合物312与包含
糖或糖醇和水的经改性的极性连续相322合并。包含油溶性物质311的醇-脂质混合物312可以被认为是分散在经改性的极性连续相322中的经改性的油相，该经改性的极性连续相可以被认为是经改性的水相。
40.在330中，通过在大气压下进行混合，形成包含油溶性物质311的微乳液336。与纳米乳液不同，微乳液336可以在大气压下形成，而不需要升高的压力和/或剪切力的能量来形成。尽管微乳液336可以如形成纳米乳液中所使用的那样使用升高的压力和/或剪切力来形成，但结果最终将是微乳液336，这是因为与在形成后开始解离过程(即使解离非常缓慢)的纳米乳液中不同，微乳液336在形成后在室温和室压下是热稳定的。因此，微乳液336的形成避免了在形成过程中不期望使用的升高的压力和/或剪切力，并且在形成后是贮存稳定的。
41.虽然方法300表示油溶性物质311首先与醇-脂质混合物312合并，但醇-脂质混合物312和极性连续相322可以首先合并，然后加入油溶性物质311以形成微乳液336(未示出)。这一步骤的重新排列是可能的，因为经改性的油和经改性的极性连续相会在大气压下对包含油溶性物质的液滴进行“自组装”，以形成微乳液336。
42.油溶性物质311在室温和室压下是液体，然而在高纯度下，例如以重量计高于55％的纯度，油溶性物质311可以是结晶固体或可以包含结晶固体。一旦溶解在油中，油溶性物质311将在室温和室压下保持溶解在油中。油溶性物质311优选包括大麻提取物和/或萜烯。
43.油溶性物质311溶解在微乳液336的液滴中，因此溶解在醇-脂质混合物312中。醇-脂质混合物312优选地被配置为使得油溶性物质311在醇-脂质混合物312中比在微乳液336的单独的油中更易溶解。
44.优选地，油溶性物质311以重量计占微乳液336的1％-6％。然而，为了提供具有最宽范围的油溶性物质的视觉上澄清的乳液，优选油溶性物质311的重量百分比为1％-4％，更优选重量百分比为1％-3％。与油溶性物质基本上是大麻提取物时相比，当油溶性物质311基本上是萜烯时，可以使用在1％-6％范围内的更高的重量百分比，并保持视觉上澄清的乳液。油溶性物质311的这些所述重量百分比是在油溶性物质311溶解在微乳液336的液滴中、而非悬浮在乳液中或以其它方式从液滴中解离的情况下。在下面实施例3的上下文中讨论了这种情况的实例，其中，商业购买的产品在标签上的油溶性物质含量不正确，或者产品中约70％的油溶性物质已从乳液中解离。
45.大麻提取物是来自大麻属植物的油性提取物。优选的大麻提取物包括大麻二酚(cbd)、四氢大麻酚(thc)和其它大麻素，包括大麻酚(cbn)、大麻萜酚(cannabigerol，cbg)、四氢大麻素(tetrahydrocannabivarin，thcv)、次大麻二酚(cannabidivarin，cbdv)和大麻环萜酚(cannabichromene，cbc)。优选的大麻提取物包含以重量计至少30％的cbd和/或thc，而更优选的大麻提取物包含以重量计至少60％的cbd和/或thc。最优选的大麻提取物包含以重量计至少80％的cbd和/或thc。
46.优选的萜烯包括单萜(包含两个异戊二烯单元并具有分子式c
10h16
)、单萜类物质(monoterpenoids)、二萜(包含四个异戊二烯单元并通常具有分子式c
20h32
)和二萜类物质(diterpenoids)。包含在微乳液336中的优选的萜烯包括柠檬烯、蒎烯、芳樟醇、β-石竹烯、视黄醇、植醇、月桂烯、蛇麻烯、罗勒烯、异松油烯、香叶醇和香叶基香叶醇。
47.醇-脂质混合物312可任选地包含在室温和室压下为固体的醇溶性可递送物。因
此，与在室温和室压下是液体或如先前所述被加热并溶解在油中的油溶性物质311不同，醇溶性可递送物在室温和室压是固体。优选地，醇溶性可递送物在油中的溶解性比油溶性物质311小。此种醇溶性可递送物溶解在微乳液的经改性的油相液滴中，因此溶解在具有油溶性物质311的醇-脂质混合物312中。
48.醇溶性可递送物包括一些植物甾醇、一些多酚和一些抗菌素。优选的植物甾醇包括刺蒺藜(tribulus terrestris)和育亨宾(yohimbe)。优选的多酚包括白藜芦醇、紫檀芪(pterostilbene)、姜黄素、乳香脂(boswellia)和槲皮素。优选的抗菌素包括青蒿素、甘油单月桂酸酯(monolaurin)和穿心莲。优选地，将这些醇溶性可递送物作为粉末形式的固体掺入微乳液336的醇-脂质混合物312中。
49.经改性的极性连续相322可包含水溶性可递送物质，或比油溶性物质311更易溶于水的物质。此种水溶性可递送物质溶解在微乳液336的经改性的极性连续相322中。因此，在微乳液336的载液中。
50.磷脂和聚乙二醇衍生物组合形成微乳液336的经改性的极性连续相和经改性的油相液滴内部之间的边界。为了在液滴内保持期望的醇浓度，从而减少醇损失到经改性的极性连续相中的可能性，以及油溶性物质从液滴中的相关解离，如前面所讨论的，磷脂、聚乙二醇衍生物和两者之间的比例是重要的。
51.醇-脂质混合物312的磷脂是优选从卵磷脂中分离的甘油磷脂。由于磷脂优选为卵磷脂分离物，命名的分离物优选包括80％(w/w)的指定磷脂，其余成分为从卵磷脂或其它卵磷脂分离物中分离的一种或多种额外的磷脂。优选的磷脂卵磷脂分离物包括磷脂酰胆碱(pc)、磷脂酰乙醇胺(pe)、磷脂酰肌醇(pi)、神经酰胺磷酰乙醇胺(cer-pe)、神经酰胺磷酰胆碱(sph)以及它们的组合，其中，pc、pe以及它们的组合是更优选的。然而，所有磷脂卵磷脂分离物在形成贮存稳定且视觉上澄清的moiw微乳液方面是出乎意料地不可互换的，因为当同时期望贮存稳定且视觉上澄清的moiw微乳液时，磷脂酰丝氨酸(ps)和磷脂酸(pa)分离物并不是有用的。当油溶性物质311为大麻提取物时，磷脂优选为pc。
52.磷脂以重量基准计可占微乳液336的2％-10％。优选地，磷脂以重量基准计占微乳液336的4％-10％。当油溶性物质为大麻提取物时，磷脂以重量基准计占微乳液336的4％-8％。
53.醇-脂质混合物312的聚乙二醇衍生物可以是聚乙二醇改性的维生素e，例如生育酚聚乙二醇琥珀酸酯1000(tpgs)、聚山梨酸酯40、聚山梨酸酯60或聚山梨酸酯80。优选地，聚乙二醇衍生物是tpgs、聚山梨酸酯60或聚山梨酸酯80。更优选地，聚乙二醇衍生物是tpgs或聚山梨酯80。当油溶性物质为大麻提取物时，优选的聚乙二醇衍生物是tpgs。
54.聚乙二醇衍生物以重量基准计可占微乳液336的5％-15％。优选地，聚乙二醇衍生物以重量基准计占微乳液336的6％-12％。当油溶性物质为大麻提取物时，聚乙二醇衍生物以重量基准计占微乳液336的9％-11％。
55.tpgs、聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60和聚山梨醇酯80通常被认为是可互换的表面活性剂。经确定，当需要贮存稳定且视觉上澄清的微乳液时，在所述微乳液336的形成中的情况并非如此。
56.当与磷脂一起使用时，tpgs在磷脂与tpgs以重量计比例为约1:0.4至1:4时产生了贮存稳定且视觉上澄清的微乳液，以重量计比例为1:1.6至1:4时形成了优选的贮存稳定的
moiw微乳液。当与磷脂一起使用时，聚山梨醇酯20未形成贮存稳定且视觉上澄清的微乳液。当与磷脂组合使用时，聚山梨醇酯40在pc与聚山梨醇酯40以重量计比例为约1:2至1:3时产生了贮存稳定且视觉上澄清的微乳液，以重量计比例为约1:3时形成了优选的贮存稳定的moiw微乳液。当与磷脂组合使用时，聚山梨醇酯60在磷脂与聚山梨醇酯60以重量计比例为约1:2至1:4时产生了贮存稳定且视觉上澄清的微乳液，以重量计比例为1:2至1:3时形成了优选的贮存稳定的moiw微乳液。当与磷脂组合使用时，聚山梨醇酯80在磷脂与聚山梨醇酯80以重量计比例为约1:0.4至1:4时产生了贮存稳定且视觉上澄清的微乳液，以重量计比例为1:0.6至1:4时形成了优选的贮存稳定的moiw微乳液。
57.这些结果证实，多聚乙二醇衍生物在形成贮存稳定且视觉上澄清的moiw微乳液方面是出乎意料地不可互换的。事实上，聚山梨醇酯20不是有用的。此外，tpgs和聚山梨醇酯80是与磷脂相组合的优选的聚乙二醇衍生物，它们在最宽的油溶性物质浓度范围内提供期望的贮存稳定且视觉上澄清的微乳液。
58.醇-脂质混合物312优选地包含保持在磷脂/聚乙二醇衍生物单层内的至少一种油。所述油可以是mct油、柑橘油以及它们的组合。mct油是甘油三酯，其脂肪酸具有6-12个碳原子的脂肪族尾部。优选的mct油包括己酸(caproic acid，hexanoic acid)、辛酸(caprylic acid，octanoic acid)、癸酸(capric acid，decanoic acid)、月桂酸(十二烷酸)以及它们的组合。更优选的mct油包括羊脂酸、羊蜡酸以及它们的组合。优选的柑橘油包括橙油、柠檬油以及它们的组合。当油溶性物质为大麻提取物时，油优选为羊脂酸和羊蜡酸的组合。
59.油以重量基准计可占微乳液336的5％-15％。优选地，油以重量基准计占微乳液336的7％-13％。当油溶性物质为大麻提取物时，油以重量基准计占微乳液336的9％-11％。
60.微乳液336包含至少一种醇。优选的醇是食品级的，因为微乳液336优选是可食用的。优选地，醇为乙醇，更优选usp食品级190度(proof)(95％乙醇，5％水)乙醇。如下文进一步讨论的，醇水含量超过10％是不优选的，因为此时应考虑相对于微乳液336的总水含量的额外的水，以防止油溶性物质从经改性的油相液滴中的解离。
61.醇以重量基准计可占微乳液336的5％-25％。优选地，醇以重量基准计占微乳液336的10％-23％。当油溶性物质为大麻提取物时，醇以重量基准计占微乳液336的16％-22％。
62.微乳液336的经改性的油相液滴可被认为具有高醇含量，因此具有重量比为1:1.5至1:4、优选以重量计为1:1.5至1:3的油和醇。
63.经改性的极性连续相322包含糖或糖醇和水。所谓“糖或糖醇”是指在室温下为液体或在室温下可溶于水的糖或糖醇，优选包含3至12个碳原子。优选的糖包括蔗糖(sucrose)、甘蔗糖(cane sugar)和纯枫糖浆(pure maple syrup)，纯枫糖浆因含有树脂(tree resin)而优选。优选的糖醇具有3至6个碳原子并包括丙三醇(甘油)。
64.虽然可以预期额外的糖醇(包括木糖醇、赤藓糖醇、甘露醇和山梨糖醇)在形成微乳液336方面是有用的，但所有糖醇在形成贮存稳定且视觉上澄清的moiw微乳液方面是出乎意料地不可互换的，因为当同时期望贮存稳定且视觉上澄清的微乳液时，木糖醇、赤藓糖醇、甘露醇和山梨糖醇并不是有用的。因此，优选的糖或糖醇包括蔗糖、甘蔗糖、纯枫糖浆、甘油以及它们的组合。更优选的糖或糖醇包括纯枫糖浆、甘油以及它们的组合。目前，最优
选的糖或糖醇是甘油。
65.当糖或糖醇为甘油时，甘油与水以重量计的比例为2:1至4.5:1，优选以重量计的比例为3:1至4.5:1。当糖或糖醇是纯枫糖浆、蔗糖或甘蔗糖并且水存在于糖浆中或用于溶解蔗糖或甘蔗糖时，该额外的水成为微乳液336的水成分的一部分，并因此作为水被包括在糖或糖醇与水的重量比中。
66.当糖或糖醇为甘油并且微乳液336中的总水含量》10％至25％时，以重量基准计，甘油在微乳液336中以30％-55％、优选30％-50％存在。当微乳液336中的总水含量》10％至20％时，以重量基准计，甘油在微乳液336中以30％-50％、优选30％-45％存在。当油溶性物质为大麻提取物时，甘油以重量基准计占微乳液336的35％-45％。
67.极性连续相332的水在微乳液336中以重量基准计以》10％至25％存在。优选地，水在微乳液336中以重量基准计以》10％至20％存在。更优选地，水在微乳液336中以重量基准计以11％-16％存在。当油溶性物质为大麻提取物时，水在微乳液336中以重量基准计以12％-15％存在。微乳液336中以重量基准计10％以下的水含量可能导致油溶性物质从液滴中解离，因此，得到非贮存稳定的moiw微乳液。
68.微乳液336可任选地包含其它成分或“佐剂”，它们与油溶性物质在化学上相容，且基本上不干扰微乳液的经改性的油相和水相之间的分离。此类佐剂可包括亲水性或亲脂性胶凝剂、增稠剂、防腐剂、抗氧化剂、电解质、香料、填料和颜料。可在微乳液中使用其它佐剂。
69.提供以下实施例以对本发明的一个或多个优选实施方式进行描述。在本发明的范围内，可对以下实施例进行许多变化。
70.实施例
71.实施例1：包含大麻提取物作为油溶性物质的moiw微乳液的组分。
72.制备了总体积为1ml的moiw微乳液。moiw微乳液含有约10mg的大麻提取物(以重量计包含约80％的cbd)。moiw微乳液还包含30mg-100mg的pc、150mg-250mg的乙醇、300mg-550mg的甘油和50mg-150mg的中链甘油三酯。使tpgs包含在内在moiw微乳液中提供了期望的物理结构。除这些成分外，moiw微乳液还包含足够的水，以提供1ml的总乳液体积。
73.实施例2：制备包含大麻提取物的moiw微乳液的方法。
74.将来自大麻提取物(以重量计包含约80％的cbd)的约10mg的cbd合并到mct油中，然后在水中与tpgs、pc、甘油和乙醇合并。然后将该组合物混合以形成包含大麻提取物的moiw微乳液。
75.实施例3：口内递送大麻提取物cbd的血液摄取速率的比较。
76.分别对三种口内大麻提取物载体体系的cbd血液摄取速率进行比较。虽然cbd由于易于获得而在本实施例中用作油溶性物质，但其它油溶性物质(例如thc、其它大麻素和萜烯)的血液摄取速率数据被认为是相似的。第一载体体系是与实施例1和实施例2一致的moiw微乳液。第二载体体系是常规的油混合物。第三载体体系是常规oiw乳液。
77.通过将以重量计约1.5％的大麻提取物(以重量计包含约80％的cbd)与以重量计约98.5％的大麻籽油合并以提供常规纯油产品，来制备油混合物第二载体体系。虽然在本实施例中使用了大麻籽油，但其它油(包括向日葵油、橄榄油和mct油)预计也提供类似的血液摄取速率。
78.常规oiw乳液第三载体体系包括其标签中声称包含约17mg/ml的cbd的大麻提取物，乳液成分为水、甘油、mct油、天然脂质、多糖黄原胶和阿拉伯胶、甜叶菊和山梨酸钾。由于oiw乳液是商业上获得的，oiw乳液成分的百分比并不清楚；然而，oiw乳液已知是常规的非视觉上澄清的oiw乳液。独立测试显示，商业上获得的oiw乳液实际上含有4.8mg/ml的cbd，而非声称的约17mg/ml。
79.在空腹时，人类受试者将包含大麻提取物的1.2ml的moiw微乳液、1ml的常规油混合物或2.14ml的oiw乳液置于舌下。使用了略有不同的体积，以便使所有剂量均包含约10mg的cbd。对于商业上获得的oiw乳液，考虑到乳液的实际浓度为4.8mg/ml，使用了2.14ml以提供所需的10mg的cbd剂量。受试者在吞咽前将液体保持在舌下约30秒到2分钟。
80.在给予载体体系液体之前以及在口内给予载体体系液体后约20-180min之间的不同时间间隔从受试者收集血液样品。采用lcms对收集的血液样品进行cbd浓度分析。
81.图4以图表形式提供了cbd血液摄取速率和浓度分析的结果。在x轴上表示向受试者给予载体体系液体后收集血液样品时的时间，而在y轴上表示每毫升(ml)测定的血液样品中的平均纳克(ng)的cbd。
82.moiw微乳液线表示用根据实施例1和实施例2的moiw微乳液获得的血液摄取浓度。油混合物线表示油混合物获得的血液浓度。oiw乳液线表示常规oiw乳液获得的血液浓度。
83.图5以图表形式提供了由血流浓度分析确定的曲线下累积面积(auc)值，单位为μg*(min/ml)。auc值提供了血流中cbd累积量的度量，因此是一段时间内的总暴露量。
84.从血液摄取的角度来看，相对于油混合物，moiw微乳液在将cbd快速递送到血液方面的优越性是显而易见的。口内引入后不同时间的总cbd暴露量通过以下来确定：将直至所选时间点的auc乘以所选大麻提取物载体体系中的cbd量并除以以同样方式计算的对照值，因此在所选时间为(auc1*载体体系1)/(auc对照*载体体系对照)——从而作为血流中cbd的累积量计算auc。由于该计算将分子载体体系液体递送的cbd总量除以分母载体体系液体递送的cbd总量，所得到的值与分子载体体系液体递送的cbd比分母载体体系多多少倍相关。
85.以下在表1中提供了以moiw微乳液为分子并以油混合物为分母的auc计算的结果，其中，由于血液样品的提取时间的轻微变化而存在估值。
[0086][0087]
表1
[0088]
在口内引入后20min，由于引入油混合物导致血液中测得的cbd低于lcms仪器的灵敏度，因此不能确定有效的递送比较值。由于moiw微乳液在引入后达到约1.2ng/ml的血液浓度，而油混合物达到基本上为0的血液浓度，因此确定了在20min的时间时moiw微乳液提供与油混合物相比显著增强的血液摄取速率的能力。因此，通过口内引入1ml剂量的moiw微
乳液，moiw微乳液可在20min内向人类受试者提供0.3ng/ml-1.5ng/ml、优选0.6ng/ml-1.5ng/ml、更优选0.8ng/ml-1.5ng/ml的血液cbd浓度。
[0089]
moiw微乳液20min快速递送的显著性可见于60min的时间点，其中，moiw微乳液向血流累积递送的cbd比油混合物多约22倍(moiw微乳液的峰值浓度为2.9ng/ml，而油混合物的峰值浓度为约0.16ng/ml)。事实上，直到90min的时间点才观察到moiw微乳液提供的增加的累积递送速率相对于油混合物变慢。累积提供是指从液体载体体系引入人类受试者直到所选时间，总的血流可用cbd。直到约180min标记处，油混合物才以与moiw微乳液相当的速率将cbd递送至血流。
[0090]
对于油混合物，从血液摄取的角度来看，相较于常规oiw乳液，moiw微乳液在将cbd快速递送至血流方面的优越性也是明显的。以下在表2中提供了以moiw微乳液为分子并以oiw乳液为分母的auc计算的结果，其中，由于血液样品的提取时间的轻微变化而存在估值。
[0091][0092]
表2
[0093]
在口内引入后20min，由于引入oiw乳液导致血液中测得的cbd低于lcms仪器的灵敏度，因此不能确定有效的递送比较值。由于moiw微乳液在引入后达到约1.2ng/ml的血液浓度，而oiw乳液达到基本上为0的血液浓度，因此确定了在20min的时间时moiw微乳液提供与oiw乳液相比显著提高的血液摄取速率的能力。
[0094]
moiw微乳液20min快速递送的显著性可清楚地见于60min的时间点，其中，moiw微乳液向血流累积递送的cbd比oiw乳液多几乎7倍(moiw微乳液的峰值浓度为2.9ng/ml，而油混合物的峰值浓度为约0.43ng/ml)。与油混合物一样，直到约180min标记处，oiw乳液才以与moiw微乳液相当的速率将cbd递送至血流。
[0095]
有趣的是，在60min-90min的时间点之间，moiw微乳液的增加的累积递送速率降低，而oiw乳液继续以近似线性增加。这被认为是说明了moiw微乳液的经口内向血流的增强的递送能力与oiw乳液偏好的胃肠道血流递送途径之间的差异。与oiw乳液相比，moiw微乳液提供的明显更快的血液摄取(20min时间)表明了moiw微乳液基本上“绕过”肠道的能力。油混合物和oiw乳液都被认为基本上通过肠道递送油溶性物质，而moiw微乳液被认为基本上通过口腔和食道递送油溶性物质。
[0096]
实施例4：口内递送的大麻提取物cbd的总暴露量。
[0097]
还从cbd总暴露量的角度，对来自实施例3的三种口内大麻提取物载体体系进行了比较。在每个提取物载体体系中，向受试者引入约10mg的cbd。因此，通过在所选时间段内对三个提取物载体体系中的每一个的auc值进行比较，可以比较向受试者暴露的大麻提取物的总量。
[0098]
在60min的时间时，moiw微乳液的auc为94ng*min/ml，常规oiw乳液的auc为14ng*
min/ml，油混合物的auc为4.2ng*min/ml。因此，在60min的时间点，在受试者消耗的约10mg的cbd中，moiw微乳液使受试者暴露于常规oiw乳液的近7倍的cbd和油混合物的约22倍的cbd。在60min后，moiw微乳液能够向人类受试者的血流中递送比oiw乳液多5-9倍、优选6-8倍的cbd。在60min后，moiw微乳液能够向人类受试者的血流中递送比油混合物多18-24倍、优选20-22倍的cbd。
[0099]
在180min的时间时，moiw微乳液的auc为273ng*min/ml，常规oiw乳液的auc为122ng*min/ml，混合油的auc为58ng*min/ml。在180min标记处，moiw微乳液和oiw乳液载体体系以相似的速率向血流递送cbd，然而，从累积以及由此的总递送的角度来看，moiw微乳液向血流递送的cbd比oiw乳液多两倍以上。在180min标记处，油混合物载体体系以比moiw微乳液更快的速率向血流递送cbd，然而，从累积以及由此的总递送的角度来看，moiw微乳液向血流递送的cbd是油混合物的近5倍。
[0100]
在180min的时间时，在受试者消耗的约10mg的cbd中，moiw微乳液使受试者暴露于常规oiw乳液的两倍以上的cbd和油混合物的几乎5倍的cbd。因此，在180min的时间段内，moiw微乳液向血流递送的cbd比oiw乳液多至少80％、优选至少100％，并且向血流递送的cbd至少是油混合物的4倍、优选至少5倍。
[0101]
数据表明，为了使受试者在3小时时间段内获得与约1ml的moiw微乳液提供的类似的大麻提取物暴露量，受试者将不得不消耗近5ml的常规oiw乳液，或近5ml的油混合物。即使在这些“大剂量”的情况下，常规oiw乳液和油混合物也不太可能提供与moiw微乳液所提供的相同的20min快速起效血流浓度。因此，确定了moiw微乳液以显著更小的剂量体积将大麻提取物有效地递送至血流中的能力。
[0102]
实施例5：口内递送大麻提取物cbd的血液摄取稳定性。
[0103]
从cbd血流摄取稳定性的角度，针对10位人类受试者对来自实施例3的moiw微乳液和油混合物大麻提取物载体体系进行了比较。在口内给予载体体系液体后约20min-180min之间的不同时间间隔从受试者收集血液样品。使用lcms对收集的血液样品进行cbd浓度分析。在每个时间点测定收集的样品的cbd血液浓度之间的标准差。然后将计算的标准差除以在每个时间点测定的平均cbd血液浓度，以提供cbd血液浓度的标准差百分比。以下表3中提供了测定的数值。
[0104][0105]
表3
[0106]
当对moiw微乳液的标准偏差百分比进行平均时，确定平均标准偏差百分比为65％。当对油混合物的标准偏差百分比进行平均时，确定平均标准偏差百分比为135％。因此，相较于油混合物提供的血液摄取，moiw微乳液提供的血液摄取的变化幅度不到一半。相较于油混合物，moiw微乳液提供的剂量可重复性的这种显著增加被认为归因于，相对于油
混合物提供的依赖于gi吸收的不稳定的血液摄取，moiw微乳液的提供相对稳定的口内递送的能力。
[0107]
我们认为，常规递送体系提供的低的且不稳定的摄取以及不同受试者不同的吸收能力是使用常规口服大麻素递送体系的受试者获得不稳定的疗效报告的因素。
[0108]
为了提供对本技术的说明书和权利要求的清晰和更一致的理解，提供以下定义。
[0109]
口内递送是指进入血流的大部分递送(其在口服给予含有可递送物的液体时发生)是在液体到达胃之前通过口腔、喉咙和食道经粘膜吸收而发生的。对于认为适合口内递送的液滴，平均液滴直径为至多125nm。认为口内递送随着平均液滴直径的减小而增加，优选平均液滴直径为约50nm。
[0110]
油溶性物质是不溶于水的物质，而以50mg/ml以上、优选100mg/ml以上溶于中链甘油三酯(mct)油。油溶性物质通常在室温下可溶于mct油，在70摄氏度以上的温度下可自由溶于mct油或非常易溶于mct油。使用术语“通常在室温下可溶于mct油”是因为一些高纯度的油溶性物质在室温下难溶于mct油，但在超过70摄氏度时可自由溶于mct油或非常易溶于mct油，一旦在升高的温度下溶于mct油，在室温下将仍保持溶于mct油。油溶性物质优选具有药理活性，更优选是药物或补充剂，既不包含水也不是水。因此，可能存在技术上可溶于油的液体和固体，但由于它们也可溶于水或不能充分溶于mct油而不是“油溶性物质”。
[0111]
磷脂酰胆碱(pc)分子是磷脂的较大集合的一个子集，通常用于在水中形成脂质体。当置于没有其它组分的水中时，pc形成脂质体。在油的存在下，对水中的pc脂质体施加足够的剪切力可产生单层结构，包括胶束。pc具有水溶性头部和相对于头部水溶性差得多的尾部。pc是中性脂质，但头部和尾部之间具有约10d的电偶极矩，使分子本身具有极性。
[0112]
生育酚聚乙二醇琥珀酸酯1000(tpgs)通常被认为是一种表面活性剂，具有非极性的油溶性“维生素e”尾部和极性的水溶性聚乙二醇头部。tpgs是聚乙二醇衍生物(其还包括聚山梨醇酯20、40、60和80)的成员。
[0113]
室温和室压是指20-28摄氏度，约100kpa。
[0114]
固体是指在室温和室压下不是液体或气体的物质。固体物质可具有多种形式中的一种，包括整块式固体、粉末、凝胶或糊状物。
[0115]
液体是指在室温和室压下不是固体或气体的物质。液体是不可压缩的物质，它会流动以呈现其容器的形状。
[0116]
溶液在溶解的分子和溶剂之间没有可识别的界面。在溶液中，溶解的分子与溶剂直接接触。
[0117]
溶解是指待递送的油溶性物质处于液滴的溶液中。如通过dls所测定的和下文所进一步讨论的，当溶解时，油溶性物质的解离(由此液体分离或固体形成)不会导致液滴平均颗粒直径超过200nm，或形成肉眼可见的油溶性物质的沉淀晶体。因此，如果平均颗粒直径超过200nm或肉眼可见的沉淀晶体形成，则油溶性物质不溶于液滴的溶液中。如果油溶性物质在溶液中不溶解，则它不溶于溶液。在许多方面，溶解度可被认为是依赖于浓度的连续体。例如，下列描述性术语可用于表示25摄氏度时溶质在溶剂中的溶解度(g固体/ml溶剂)：
[0118]
描述性水平每1份溶质的溶剂份数极易溶小于1易溶1-10
可溶10-30难溶30-100微溶100-1000极微溶1000-10,000不可溶大于10,000
[0119]
当先前溶解的固体或液体离开溶液且不再与溶液的溶剂直接接触时，会发生解离。固体从溶剂中的解离是通过重结晶、沉淀等而发生的。液体从溶剂中的解离是通过分离和在溶剂与解离的液体之间形成可见的弯液面而发生的。
[0120]
贮存稳定的微乳液可用两种方法中的一种来测定。确定储存在基本上排除空气和水分的密封容器中的微乳液贮存稳定的一种方法是，在至少3个月至2年的时间段内，优选至少6个月至2年的时间段内，更优选至少1年至2年的时间段内，在约25℃下固体不发生解离，并且水中的油相液滴的平均直径变化不超过+/-20％。确定微乳液贮存稳定的另一种方法是，当储存在基本上排除空气和水分的密封容器中时，在至少6个月至2年的时间段内，更优选至少1年至2年的时间段内，在约25℃下固体不发生解离，并且水中的油相液滴不会分离成具有可见弯液面的明显不同的相。任何一种类型的解离都意味着微乳液不是贮存稳定的。
[0121]
视觉上澄清的微乳液的平均颗粒直径为200nm以下，无肉眼可见的沉淀固体晶体。
[0122]
乳液是两种以上不溶解的液体的混合物。因此，其中一种液体携带第二液体的液滴。第二液体的液滴可以说分散在第一液体的连续相中。在载液(连续相)和第二液体的液滴之间存在界面、分离或边界层。乳液可以是粗乳液、假乳液、微乳液或纳米乳液。粗乳液、微乳液和纳米乳液之间的主要区别是分散在连续相中的液滴的平均直径和乳液随时间的稳定性。假乳液因乳液中存在固体而不同。
[0123]
液滴或液体颗粒由微乳液的疏水性“油”相形成，并由亲水性连续相携带。液滴的外部由围绕每个液滴体积的边界层界定。液滴的边界层界定了形成微乳液的分散油相的液滴的外表面。微乳液的连续相驻留在液滴边界层的外部，因此携带液滴。
[0124]
粗乳液是油在水中的热力学不稳定但动力学稳定的分散体，油被定义为任何不溶于水的液体。所谓热力学不稳定是指一旦产生，粗乳液总是恢复到油和水组分的最初的不混溶状态(破乳)，但这种分解足够慢(因此，动力学“稳定”)以至于从预期用途实用性的角度来看，可认为粗乳液是稳定的。粗乳液有效地散射光，因此呈现乳白色，因为它们的液滴直径大于可见光的波长。粗乳液液滴的平均液滴直径通常为10微米-50微米。粗乳液的iupac定义是“分散相的颗粒的直径为约1微米-100微米的乳液”。粗乳液包含大液滴，因此在液滴沉降或漂浮的意义上是“不稳定的”，这取决于分散相和分散介质的密度。
[0125]
假乳液是油在水中的分散体，油被定义为任何不溶于水的液体，包括未完全溶解在油滴中的微小(微粉化)固体颗粒。由于固体颗粒没有完全溶解到液滴中，使用术语“假乳液”是因为这些混合物不是真正的乳液。假乳液液滴的平均液滴直径为1微米-20微米，因此，是“固体颗粒改性的粗乳液”。
[0126]
微乳液是油在水中的热力学稳定的分散体，油被定义为任何不溶于水的液体。微乳液是通过组分的简单混合而制成的。因此，微乳液自发形成，不需要高剪切力。与粗乳液不同，微乳液基本上不散射光。微乳液的iupac定义是“由水、油和表面活性剂组成的分散
体，是一种各向同性且热力学稳定的体系，分散域的直径约为1nm-100nm不等，通常为10nm-50nm”。因此，微乳液的液滴比粗乳液的液滴小约3个数量级，并且热力学稳定。
[0127]
纳米乳液的平均液滴直径为10nm-125nm，因此平均液滴直径至少比粗乳液和假乳液小一个数量级。透明纳米乳液的平均液滴直径为10nm-100nm。纳米乳液是用机械的高剪切力制成的。虽然纳米乳液和微乳液的平均液滴直径在形式上是重叠的，但在实践中，纳米乳液的平均液滴直径等于或变得大于微乳液的平均液滴直径，这是由于缺乏微乳液的热力学稳定性，纳米乳液的平均液滴直径一直在增大。
[0128]
连续相是指携带了含有待递送物质的液滴的微乳液的部分。例如，本文涉及的经改性的水包油型微乳液(非极性液滴处于极性连续相中)具有油滴，其包含以极性“水”连续相携带的待递送的油溶性物质。虽然使用了词语“水”和“油”，但“水”可以是极性大于“油”(例如极性油)的任何液体，而且“油”可以是极性小于“水”的任何液体。因此，除非水作为微乳液组分中的一种而被专门讨论，术语“极性连续相”和“水连续相”是同义词。
[0129]
平均液滴直径是由动态光散射法(有时称为光子相关光谱法)测定的。测定是在20-25摄氏度之间进行的。适用于平均液滴直径测定的仪器的一个实例是nicomp 380zls粒度仪，其可从particle sizing systems,port richey,fl获得。dls可通过测量随时间从液滴散射到检测器的光的强度来测定液体中液滴的直径。当液滴由于布朗运动而移动时，从两个以上液滴散射的光在检测器处相长或相消干涉。通过计算光强的自相关函数并假定液滴的分布，可测定1nm至5μm的液滴的尺寸。该仪器还能够测量液滴的zeta电位。
[0130]
可摄取是指能被活的哺乳动物经口摄入，而可食用是指适合食用，因此与难吃或有毒形成对比。可食用还意味着组合物含有低于允许量的活的好氧微生物，并符合美国草药产品协会(ahpa)关于金属、掺杂物、毒素、残留溶剂和杀虫剂的指南。
[0131]
在提供数值范围的情况下，应当理解，除非上下文另有明确规定，否则介于该范围的上限和下限之间的每个中间值、到下限单位的十分之一、以及在该所述范围内的任何其它所述值或中间值都包括在本发明中。这些较小范围的上限和下限可以独立地包括在较小范围中，并且也包括在本发明中，但受所述范围中任何特别排除的极限值的约束。在所述范围包括一个或两个极限值的情况下，将那些所包括的极限值中的一个或两个排除在外的范围也包括在本发明中。
[0132]
虽然对本发明的各个方面进行了描述，但对于本领域的普通技术人员来说显而易见的是，在本发明的范围内，其它方面和实施方式是可能的。因此，除非是根据所附权利要求及其等同物，否则本发明不受限制。