利用共价有机骨架材料和聚合物的用于透皮递送的复合物的制作方法

1.本发明涉及一种包含基于环糊精的共价有机骨架材料(cyclodextrin-based covalent organic framework)和聚合物的用于透皮递送的复合物。
2.此外，本发明涉及一种包含所述用于透皮递送的复合物的化妆品组合物。
3.此外，本发明涉及一种制备所述用于透皮递送的复合物的方法。


背景技术：

4.化妆品的活性(有效)物质不易渗透到皮肤中。为此，为了稳定活性成分并增加透皮效率，正在努力并积极地研究将透皮递送系统(transdermal delivery system，tds)用于功能性化妆品。由于功能性材料的开发，正在广泛地研究可以赋予这种材料更高的稳定性的各种功能化方法。
5.皮肤经常暴露在外部环境中，并且作为保护身体的重要的器官，皮肤是防止体液的流失并保护身体免受有害环境的侵害的最重要的第一道防线。即，皮肤抑制水分和电解质的流失，并且提供正常的生化代谢环境，而且起到保护人体免受机械刺激、紫外线和各种微生物的侵害的屏障功能。皮肤主要分为真皮和表皮，真皮与其下面的皮下脂肪紧密接触。表皮是上皮组织的一部分，由5个细胞层组成，即由基底细胞层、棘细胞层、颗粒层、透明层和角质层组成。存在于皮肤的最外侧的角质层是起到屏障功能的主要屏障。elias等提出了灰泥(角质细胞间脂质)和砖(角质细胞)的两室模型后，对角质层和皮肤屏障的关注度大幅提升。即，角质层具有角质细胞像堆砖一样堆叠的形状，角质细胞间脂质起到支撑这些角质细胞的像灰泥一样的作用。角质层由约40％的蛋白质、40％的水分和10-20％的脂质组成，其结构由富含蛋白质的角质细胞和填充其间隙的脂质组成，其中，特别是脂质起到屏障的主要作用。角质层中存在称为天然保湿因子(natural moisturizing factor，nmf)的亲水性吸湿物质，对皮肤保湿起到重要的作用。nmf的组成包括氨基酸类、吡咯烷酮羧酸、尿素、氨、尿酸、葡糖胺、肌酸酐、柠檬酸盐、钠、钾、钙、氯、镁、糖、有机酸、肽等。为了使活性成分的效果极大化，制成小于或接近于皮肤细胞间脂质之间的100-200nm的尺寸时，才可以容易渗透到皮肤深处。
6.共价有机骨架材料(covalent organic framework，cof)是具有扩展的结构的二维或三维的有机固体，构建单元(building blocks)通过强共价键连接。与金属-有机骨架材料(metal-organic framework，mof)类似，共价有机骨架材料的合成也可以通过美国的omar m.yaghi教授开发的网状化学(reticular chemistry)的原理设计。cof和mof的设计的基本的关注内容都是多孔性(porosity)和结构规律性(structural regularity)。另外，与利用共价键制备结晶cof相比，用于形成利用配位键的结晶mof的构建单元(building unit)的组装相对容易。用于合成无机物沸石(zeolite)的设计原则也可以为cof设计提供进一步的灵感。
7.与其它多孔有机聚合物一样，为了制备cof，应注意多孔性，利用共价键形成多孔固体的设计策略主要可以分为以下两种。第一种是模板法(templating method)，模板法是
合成多孔沸石和介孔有机二氧化硅(organosilica)的方法。为了形成构建单元，利用结构导向剂(structural-directing agents)进行合成。在合成后去除模板(template)，从而可以制备最终的多孔聚合物。第二种是为了制备多孔结构而利用刚性的构建单元(building units)的方法。利用偶联反应(coupling reaction)，由刚性的单体成功合成各种形式的多孔聚合物复合物。大部分多孔cof的合成利用第二种方法。另外，使用的构建单元的分子的长度决定形成的cof的孔(pore)尺寸，并且构建单元的形状(shape)决定多孔结构的拓扑(topology)。大部分键合基团是诸如环硼氧烷(boroxines)、三嗪(triazines)、亚胺(imines)、腙(hydrazones)等的刚性且扁平的结构。在许多情况下，优选坚硬的芳香族物质作为构建单元，这是因为坚硬的芳香族物质可以有效地形成多孔结构。
8.作为利用这种共价有机骨架材料的实例，韩国公开专利公报第10-2018-0069242号中公开了将具有通过腈三聚形成的三嗪基的有机骨架材料用作气体收集器。


技术实现要素：

要解决的技术问题
9.因此，本发明要解决的技术问题是提供一种新型的用于透皮递送的复合物，所述复合物可以将活性成分以稳定的状态有效地递送至皮肤中。
10.此外，本发明要解决的另一个技术问题是提供一种包含所述用于透皮递送的复合物的化妆品组合物。
11.此外，本发明要解决的另一个技术问题是提供一种制备所述用于透皮递送的复合物的制备方法。技术方案
12.为了解决上述技术问题，本发明提供一种包含基于环糊精的共价有机骨架材料(cyclodextrin-based covalent organic framework，cd-cof)和聚合物的用于透皮递送的复合物。
13.此外，本发明提供一种包含所述用于透皮递送的复合物的化妆品(cosmetic)组合物。
14.此外，本发明提供一种制备用于透皮递送的复合物的方法，所述方法包括以下步骤：i)将环糊精、钾碱和聚合物溶解在溶剂中；ii)利用气体扩散结晶装置，将所述步骤(i)中获得的溶液在结晶溶剂中形成晶体；iii)将所述步骤(ii)中形成的晶体进行洗涤后干燥。
15.以下，对本发明进行详细说明。
16.根据本发明的一个方面，提供一种包含基于环糊精的共价有机骨架材料和聚合物的用于透皮递送的复合物。
17.本发明中，作为用于透皮递送的复合物的一种成分，包含基于环糊精的共价有机骨架材料(cd-cof)。
18.本发明中，基于环糊精制备共价有机骨架材料。环糊精是环状的低聚糖(oligosaccharide)，由淀粉通过酶转化(enzymatic conversion)生产，5个以上的d-吡喃葡萄糖苷(d-glucopyranoside)单元通过1
→
4键连接。具有6个、7个和8个葡萄糖亚单元(subunits)的环糊精分别称为α-环糊精、β-环糊精和γ-环糊精。
19.本发明的一个具体实施方案中，环糊精为α-环糊精、β-环糊精或γ-环糊精。本发明的另一个具体实施方案中，环糊精为γ-环糊精。
20.本发明的另一个具体实施方案中，基于环糊精的共价有机骨架材料由环糊精和钾盐(salt)制备。本发明的另一个具体实施方案中，所述钾盐是氢氧化钾(koh)。
21.本发明中，作为用于透皮递送的复合物的一种成分，包含聚合物。
22.本发明的另一个具体实施方案中，所述聚合物是生物降解性聚合物。本发明的另一个具体实施方案中，所述聚合物选自壳聚糖、普鲁兰多糖(pullulan)、聚乳酸、琥珀酰化壳聚糖(succinylated chitosan)、普鲁兰多糖聚l-乳酸、聚乙二醇(peg)-聚己内酯(pcl)-聚乙二醇(peg)的三嵌段共聚物(triblock copolymer)及它们的混合物。本发明的另一个具体实施方案中，所述聚合物选自琥珀酰化壳聚糖、普鲁兰多糖聚l-乳酸、聚乙二醇(peg)-聚己内酯(pcl)-聚乙二醇(peg)的三嵌段共聚物及它们的混合物。
23.本发明中，琥珀酰化壳聚糖可以根据本领域中公知的方法合成，例如可以通过使琥珀酸酐(succinyl anhydride)与壳聚糖反应来获得。
24.本发明中，普鲁兰多糖聚l-乳酸可以根据本领域中公知的方法合成，例如可以通过将三乙胺(tea)作为催化剂使普鲁兰多糖与丙交酯反应来获得。
25.本发明中，聚乙二醇(peg)-聚己内酯(pcl)-聚乙二醇(peg)的三嵌段共聚物可以根据本领域中公知的方法合成，例如可以通过用甲氧基聚(乙二醇)(methoxypoly(ethylene glycol)，mpeg)和ε-己内酯(ε-caprolactone)形成peg-pcl的二嵌段共聚物后将它们连接来合成peg-pcl-peg的三嵌段共聚物。
26.本发明中，聚合物通过与基于环糊精的共价有机骨架材料形成复合物来提高透皮递送效果。
27.本发明的另一个具体实施方案中，相对于10重量份的基于环糊精的共价有机骨架材料，0.01-10重量份的聚合物形成用于透皮递送的复合物。
28.本发明的另一个具体实施方案中，所述用于透皮递送的复合物进一步包含活性成分。本发明中，对活性成分不作具体限制。本发明中，活性成分可以是例如选自保湿剂、美白剂、皱纹改善剂、紫外线阻断剂、毛发生长促进剂、维生素或其衍生物、氨基酸或肽、抗炎剂、痤疮治疗剂、杀菌剂、女性激素、角质松解剂和天然产物中的一种以上，但并不限定于此。
29.保湿剂的实例包括肌酸、聚谷氨酸、乳酸钠、羟脯氨酸、2-吡咯烷酮-5-羧酸钠、透明质酸、透明质酸钠、神经酰胺、植物甾醇、胆固醇、谷甾醇、蛋白多糖等，但并不限定于此。美白剂的实例包括熊果苷和熊果苷衍生物、曲酸、红没药醇、烟酰胺、维生素c和维生素c衍生物、胎盘、尿囊素等，但并不限定于此。皱纹改善剂的实例包括视黄醇、视黄醇衍生物、腺苷、甘草提取物、红参提取物、人参提取物等，但并不限定于此。紫外线阻断剂的实例包括二苯甲酮衍生物、对氨基苯甲酸衍生物、甲氧基肉桂酸衍生物、水杨酸衍生物等，但并不限定于此。对毛发生长促进剂不作特别限制，但优选为血液循环促进剂和/或毛囊刺激剂，血液循环促进剂的实例包括日本当药提取物、千金藤素、维生素e及其衍生物、γ-谷维素等，但并不限定于此，毛囊刺激剂的实例包括辣椒酊、姜酊、斑蝥酊、烟酸苄酯等，但并不限定于此。维生素或其衍生物的实例包括维生素a(视黄醇)及其衍生物、维生素b1、维生素b2、维生素b6、维生素e及其衍生物、维生素d、维生素h、维生素k、泛酸及其衍生物、生物素、泛醇、辅酶q
10
、艾地苯醌等，但并不限定于此。氨基酸或肽的实例包括胱氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、丝
氨酸、赖氨酸、色氨酸、氨基酸提取物、表皮细胞生长因子(egf)、胰岛素样生长因子(igf)、成纤维细胞生长因子(fgf)、三肽-1铜、三肽-29、三肽-1、乙酰基六肽-8、烟酰三肽-35、六肽-12、六肽-9、棕榈酰五肽-4、棕榈酰五肽-3、棕榈酰四肽-7、棕榈酰三肽-29、棕榈酰三肽-1、九肽-7、三肽-10瓜氨酸(citrulline)、sh-多肽-15、棕榈酰三肽-5、二氨基丙酰基三肽-33、r-蜘蛛(spider)多肽-1等，但并不限定于此。抗炎剂的实例包括β-甘草次酸、甘草次酸衍生物、氨基己酸、氢化可的松、β-葡聚糖、madecaside、甘草等，但并不限定于此。痤疮治疗剂的实例包括雌二醇、雌激素、乙炔雌二醇、三氯生、壬二酸等，但并不限定于此。杀菌剂的实例包括苯扎氯铵、苄索氯铵(benzethonium chloride)、卤卡班等，但并不限定于此。对女性激素不作特别限制，但优选为雌激素，雌激素优选为雌二醇、乙炔雌二醇、作为植物雌激素的异黄酮等。角质松解剂的实例包括硫、水杨酸、aha、bha、间苯二酚等，但并不限定于此。天然产物的提取物或由它们获得的成分的实例包括日本金缕梅、野芝麻、白花蛇舌草、掌叶大黄、甘草、芦荟、甘菊、玫瑰果、马栗树、人参、丝瓜、黄瓜、紫菜、裙带菜、薯蓣、蜗牛、零余子、绿茶等的提取物或姜黄素(curcumin)、扁柏酚、β-胡萝卜素等，但并不限定于此。
30.此外，活性成分还可以使用油、蜡、油脂(butter)、石蜡、诸如硬脂酸等的高级脂肪酸、诸如鲸蜡醇乙基己酸酯等的酯、诸如硅酮等的美容成分。油的实例包括橄榄油、山茶籽油、鳄梨油、澳洲坚果油、蓖麻油、葵花油、荷荷芭油、扁桃仁油、杏仁油、绿茶油、白池花籽(meadowfoam seed)油或摩洛哥坚果油等，但并不限定于此。蜡的实例包括巴西棕榈蜡、小烛树(candelilla)蜡、荷荷芭油、蜂蜡、羊毛脂、大豆蜡、米蜡、硅酮蜡等，但并不限定于此。油脂的实例包括牛油树脂、芒果脂、绿茶脂或大豆(soy)脂等，但并不限定于此。烃的实例包括液体石蜡、石蜡、凡士林油(petrolatum)、地蜡、微晶蜡(microcrystalline wax)或角鲨烷等，但并不限定于此。高级脂肪酸的实例包括月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、异硬脂酸、油酸、亚油酸或亚麻酸等，但并不限定于此。高级醇的实例包括月桂醇、肉豆蔻醇、鲸蜡醇、硬脂醇、油醇或山嵛醇等，但并不限定于此。酯类的实例包括2-辛基十二醇肉豆蔻酸酯、十六烷基2-己酸乙酯、二异硬脂醇苹果酸酯或鲸蜡醇乙基己酸酯等，但并不限定于此。硅酮的实例包括聚二甲基硅氧烷类、环聚二甲基硅氧烷类、硅酮聚合物类或硅油等，但并不限定于此。
31.除此之外，还有酵母提取物、胶原蛋白、弹性蛋白、蔗糖八硫酸酯铝、dha、epa、香料成分等。
32.根据本发明的另一个方面，提供一种包含本发明的用于透皮递送的复合物的化妆品组合物。本发明中，化妆品组合物例如可以配制成爽肤水、乳液、润肤露、面霜、精华素等，但并不限定于此。
33.化妆品组合物中优选包含1-60重量％的本发明的用于透皮递送的复合物，更优选包含2-50重量％的本发明的用于透皮递送的复合物。本发明中，当化妆品组合物中包含小于1重量％的用于透皮递送的复合物时，活性成分带来的效果可能甚微，并且即使化妆品组合物中包含超过60重量％的用于透皮递送的复合物，也难以期待活性成分带来的效果与其添加量成比例地增加，因此在经济上不优选。
34.根据本发明的另一个方面，提供一种制备用于透皮递送的复合物的方法，所述方法包括以下步骤：i)将环糊精、钾碱和聚合物溶解在溶剂中；ii)利用气体扩散结晶装置，将所述步骤(i)中获得的溶液在结晶溶剂中形成晶体；iii)将所述步骤(ii)中形成的晶体进
行洗涤后干燥。
35.本发明的另一个具体实施方案中，所述环糊精为α-环糊精、β-环糊精或γ-环糊精。本发明的另一个具体实施方案中，环糊精为γ-环糊精。
36.本发明的另一个具体实施方案中，所述钾碱为氢氧化钾(koh)。
37.本发明的另一个具体实施方案中，所述聚合物是生物降解性聚合物。本发明的另一个具体实施方案中，所述聚合物选自壳聚糖、普鲁兰多糖、聚乳酸、琥珀酰化壳聚糖、普鲁兰多糖聚l-乳酸、聚乙二醇(peg)-聚己内酯(pcl)-聚乙二醇(peg)的三嵌段共聚物及它们的混合物。本发明的另一个具体实施方案中，所述聚合物选自琥珀酰化壳聚糖、普鲁兰多糖聚l-乳酸、聚乙二醇(peg)-聚己内酯(pcl)-聚乙二醇(peg)的三嵌段共聚物及它们的混合物。
38.本发明的另一个具体实施方案中，所述步骤(i)的溶剂选自水、丙二醇及它们的混合物。
39.本发明的另一个具体实施方案中，所述步骤(i)中，相对于100重量份的溶剂，溶解10-200重量份的环糊精、1-100重量份的钾碱和0.01-50重量份的聚合物。
40.本发明中，所述步骤(ii)通过利用气体扩散结晶装置将步骤(i)中获得的溶液在结晶溶剂中形成晶体来进行。
41.本发明中，利用气体扩散结晶装置形成晶体时，在气体扩散结晶装置的中心竖立柱，然后加入步骤(i)中获得的溶液，不盖盖子，在柱周围加入结晶溶剂，然后密封气体扩散结晶装置以使空气不通过后放置时，随着结晶溶剂扩散，在柱中形成晶体。
42.本发明的一个具体实施方案中，步骤(ii)的结晶溶剂选自甲醇、乙醇及它们的混合物。
43.本发明的一个具体实施方案中，所述步骤(i)中可以将活性成分进一步溶解在溶剂中。
44.本发明的一个具体实施方案中，所述活性成分可以是选自保湿剂、美白剂、皱纹改善剂、紫外线阻断剂、毛发生长促进剂、维生素或其衍生物、氨基酸或肽、抗炎剂、痤疮治疗剂、杀菌剂、女性激素、角质松解剂、天然产物、油、蜡、油脂、石蜡、高级脂肪酸、酯和硅酮中的一种以上。有益效果
45.本发明的用于透皮递送的复合物将活性成分以非常稳定的形式有效地递送至皮肤中，因此以少量的活性成分也可以长时间显示出非常优异的效果。
附图说明
46.图1是示出基于环糊精的共价有机骨架材料的结构的示意图。
47.图2是(a)琥珀酰化壳聚糖和(b)普鲁兰多糖聚l-乳酸的化学结构式。
48.图3是示出peg-pcl-peg三嵌段共聚物的合成过程的示意图。
49.图4是示出气体扩散结晶装置的示意图。
50.图5是示出利用气体扩散结晶装置形成晶体的示意图。
51.图6是使用photal els-z测量含有视黄醇的基于环糊精的共价有机骨架材料和琥珀酰化壳聚糖的复合物的颗粒直径尺寸的结果。
52.图7是为了测量含有视黄醇的基于环糊精的共价有机骨架材料和琥珀酰化壳聚糖的复合物的稳定性而利用photal els-z测量zeta电位的结果。
53.图8是利用turbiscan测量含有视黄醇的基于环糊精的共价有机骨架材料和琥珀酰化壳聚糖的复合物的稳定性的结果。
54.图9是进行x射线粉末衍射试验(xrd)的结果(γ-cd：γ-环糊精，cof：共价有机骨架材料，peg-pcl-peg：peg-pcl-peg三嵌段共聚物，sc：琥珀酰化壳聚糖，pl：普鲁兰多糖聚l-乳酸)。
55.图10是通过傅里叶变换红外光谱法测量实施例3中制备的含有姜黄素的基于环糊精的共价有机骨架材料和聚合物的复合物的结果。
56.图11是使用冷冻电子显微镜放大拍摄制备例和实施例中制备的基于环糊精的共价有机骨架材料和复合物的照片(γ-cd：γ-环糊精，cof：共价有机骨架材料，peg-pcl-peg：peg-pcl-peg三嵌段共聚物，sc：琥珀酰化壳聚糖，pl：普鲁兰多糖聚l-乳酸)。
具体实施方式
57.以下，通过实施例对本发明进行更具体的说明。但是，以下实施例仅仅是有助于理解本发明的示例，本发明的范围并不限定于此。
58.制备例1：琥珀酰化壳聚糖的制备
59.在40ml的乳酸水溶液(5％v/v)中添加160ml的甲醇，然后在搅拌下溶解0.5g的壳聚糖。向其中添加1.0g的琥珀酸酐后获得溶液，在室温下搅拌该溶液的同时放置24小时。通过用5n的naoh将ph调节为7.4，以使琥珀酰化壳聚糖沉淀，并且在37℃下以5000rpm离心分离5分钟。将离心分离物重新悬浮在蒸馏水中，然后对蒸馏水进行72小时透析(透析管纤维素(dialysis tubing cellulose)，截留分子量(molecular weight cut-off)为14000)，然后冷冻干燥3天。
60.制备例2：普鲁兰多糖聚l-乳酸的制备
61.在干燥氮气下的室温下，通过搅拌将0.2g的精制的普鲁兰多糖溶解在11ml的dmso中。在获得的普鲁兰多糖溶液中添加1g的l-丙交酯后在预热至70-75℃的油浴(oil bath)中进行搅拌，当混合物完全溶解时，引入0.17ml的作为催化剂的三乙胺(tea)。在反应12小时后，用0.5μm的针头式过滤器将反应溶液进行过滤。对于过滤物，使用透析膜(mwco：10000)，对蒸馏水透析2天，在前12小时每2小时更换蒸馏水。将产物冷冻干燥3天，然后在-20℃下储存直至使用。
62.制备例3：peg-pcl-peg三嵌段共聚物的制备
63.分两步制备聚乙二醇(peg)-聚己内酯(pcl)-聚乙二醇(peg)三嵌段共聚物。第一步骤是形成甲氧基聚(乙二醇)(mpeg)和ε-己内酯(ε-cl)的二嵌段(diblock)共聚物，第二步骤是使用六亚甲基二异氰酸酯(hexamethylene diisocyanate，hmdi)来连接2个二嵌段共聚物分子。
64.首先，使用迪安-斯塔克分水器(dean stark trap)去除残留水分，然后将8.06g的mpeg完全溶解在80ml的无水甲苯中25分钟，然后真空干燥3小时。之后，分别添加4.03g的作为单体的ε-cl和1.61g的作为催化剂的snoct2，然后在140℃下反应14小时。之后，将hmdi添加到反应混合物中，并在60℃下反应8小时。在二乙醚中分离产物，并在真空下去除残留溶
剂后获得peg-pcl-peg三嵌段共聚物。所有反应在氮气气氛下进行。图3中示出合成peg-pcl-peg三嵌段共聚物的示意图。合成的peg-pcl-peg三嵌段共聚物的重均分子量设定为10000。
65.制备例4：基于环糊精的共价有机骨架材料(以下称为“cd-cof”)的制备
66.将390g的环糊精(α、β或γ)和135g的koh溶解在600g的蒸馏水中。准备如图4所示的气体扩散结晶装置后在中心竖立柱，向其中加入在蒸馏水中溶解环糊精和koh的溶液，不盖盖子，在柱周围加入结晶溶剂(乙醇或甲醇)，然后密封气体扩散结晶装置以使空气不通过后放置时，随着结晶溶剂扩散，在室温下经过12小时左右时，在柱中开始形成晶体(图5)。在24小时后终止实验，将形成的晶体进行洗涤后干燥24小时。
67.实施例1：cd-cof和聚合物的复合物的制备
68.将390g的环糊精(α、β或γ)、135g的koh和5g的聚合物(琥珀酰化壳聚糖、普鲁兰多糖聚l-乳酸或peg-pcl-peg的三嵌段共聚物)溶解在600g的蒸馏水中。准备气体扩散结晶装置后在中心竖立柱，向其中加入在蒸馏水中溶解环糊精、koh和聚合物的溶液，不盖盖子，在柱周围加入结晶溶剂(乙醇或甲醇)，然后密封气体扩散结晶装置以使空气不通过后放置时，随着结晶溶剂扩散，在室温下经过12小时左右时，在柱中开始形成晶体。在24小时后终止实验，将形成的晶体进行洗涤后干燥24小时。
69.实施例2：含有视黄醇的cd-cof和聚合物的复合物的制备
70.将390g的环糊精(α、β或γ)、135g的koh、10g的聚合物(琥珀酰化壳聚糖、普鲁兰多糖聚l-乳酸或peg-pcl-peg的三嵌段共聚物)和20g的视黄醇溶解在700g的蒸馏水中。准备气体扩散结晶装置后在中心竖立柱，向其中加入在蒸馏水中溶解环糊精、koh、聚合物和视黄醇的溶液，不盖盖子，在柱周围加入结晶溶剂(乙醇或甲醇)，然后密封气体扩散结晶装置以使空气不通过后放置时，随着结晶溶剂扩散，在室温下经过12小时左右时，在柱中开始形成晶体。在24小时后终止实验，将形成的晶体进行洗涤后干燥24小时。
71.实施例3：含有姜黄素的cd-cof和聚合物的复合物的制备
72.将390g的环糊精(α、β或γ)、135g的koh、10g的聚合物(琥珀酰化壳聚糖、普鲁兰多糖聚l-乳酸或peg-pcl-peg的三嵌段共聚物)和20g的姜黄素溶解在700g的蒸馏水中。准备气体扩散结晶装置后在中心竖立柱，向其中加入在蒸馏水中溶解环糊精、koh、聚合物和姜黄素的溶液，不盖盖子，在柱周围加入结晶溶剂(乙醇或甲醇)，然后密封气体扩散结晶装置以使空气不通过后放置时，随着结晶溶剂扩散，在室温下经过12小时左右时，在柱中开始形成晶体。在24小时后终止实验，将形成的晶体进行洗涤后干燥24小时。
73.实施例4：含有植物天然产物的cd-cof和聚合物的复合物的制备
74.根据下表1的组成，通过与实施例2相同的方法进行制备。
75.[表1]
[0076]
实施例5：含有海洋天然产物的cd-cof和聚合物的复合物的制备
[0077]
根据下表2的组成，通过与实施例2相同的方法进行制备。
[0078]
[表2]
[0079]
实施例6：含有油的cd-cof和聚合物的复合物的制备
[0080]
根据下表3的组成，通过与实施例2相同的方法进行制备。
[0081]
[表3][表3]
[0082]
实施例7：含有蜡的cd-cof和聚合物的复合物的制备
[0083]
根据下表4的组成，通过与实施例2相同的方法进行制备。
[0084]
[表4]
[0085]
实施例8：含有油脂的cd-cof和聚合物的复合物的制备
[0086]
根据下表5的组成，通过与实施例2相同的方法进行制备。
[0087]
[表5][表5]
[0088]
实施例9：含有石蜡的cd-cof和聚合物的复合物的制备
[0089]
根据下表6的组成，通过与实施例2相同的方法进行制备。
[0090]
[表6]
[0091]
实施例10：含有高级脂肪酸的cd-cof和聚合物的复合物的制备
[0092]
根据下表7的组成，通过与实施例2相同的方法进行制备。
[0093]
[表7]
[0094]
实施例11：含有酯的cd-cof和聚合物的复合物的制备
[0095]
根据下表8的组成，通过与实施例2相同的方法进行制备。
[0096]
[表8]
[0097]
实施例12：含有硅酮的cd-cof和聚合物的复合物的制备
[0098]
根据下表9的组成，通过与实施例2相同的方法进行制备。
[0099]
[表9]
[0100]
实施例13：含有保湿剂的cd-cof和聚合物的复合物的制备
[0101]
根据下表10的组成，通过与实施例2相同的方法进行制备。
[0102]
[表10]
[0103]
实施例14：含有美白剂的cd-cof和聚合物的复合物的制备
[0104]
根据下表11的组成，通过与实施例2相同的方法进行制备。
[0105]
[表11]
[0106]
实施例15：含有紫外线阻断剂的cd-cof和聚合物的复合物的制备
[0107]
根据下表12的组成，通过与实施例2相同的方法进行制备。
[0108]
[表12][表12]
[0109]
实施例16：含有维生素的cd-cof和聚合物的复合物的制备
[0110]
根据下表13的组成，通过与实施例2相同的方法进行制备。
[0111]
[表13]
[0112]
实施例17：含有氨基酸的cd-cof和聚合物的复合物的制备
[0113]
根据下表14的组成，通过与实施例2相同的方法进行制备。
[0114]
[表14]
[0115]
实施例18：含有肽的cd-cof和聚合物的复合物的制备
[0116]
根据下表15的组成，通过与实施例2相同的方法进行制备。
[0117]
[表15][表15]
[0118]
实施例19：含有抗炎剂的cd-cof和聚合物的复合物的制备
[0119]
根据下表16的组成，通过与实施例2相同的方法进行制备。
[0120]
[表16]
[0121]
实施例20：含有痤疮治疗剂的cd-cof和聚合物的复合物的制备
[0122]
根据下表17的组成，通过与实施例2相同的方法进行制备。
[0123]
[表17]
[0124]
实施例21：含有杀菌剂的cd-cof和聚合物的复合物的制备
[0125]
根据下表18的组成，通过与实施例2相同的方法进行制备。
[0126]
[表18][表18]
[0127]
实验例1：颗粒分布的测量
[0128]
使用photal els-z测量实施例2中制备的含有视黄醇的cd-cof和琥珀酰化壳聚糖的复合物的颗粒分布，并示于图6中。根据测量结果可以知道，复合物的平均颗粒尺寸为408.8nm。
[0129]
实验例2：含有视黄醇的cd-cof和聚合物的复合物的稳定性的测量
[0130]
为了测量实施例2中制备的含有视黄醇的cd-cof和琥珀酰化壳聚糖的复合物的稳定性，利用photal els-z测量zeta电位，并将结果示于图7中。根据测量结果可以知道，颗粒的电位为-60.55mv，该复合物是稳定的。
[0131]
实验例3：含有视黄醇的cd-cof和聚合物的复合物的稳定性的测量
[0132]
为了测量实施例2中制备的含有视黄醇的cd-cof和琥珀酰化壳聚糖的复合物的稳定性，使用turbiscan进行了测量，根据测量结果可以知道随着时间的经过，
△
t、
△
bs几乎没有变化，因此复合物是稳定的(图8)。
[0133]
实验例4：x射线粉末衍射试验
[0134]
对实施例2中制备的含有视黄醇的cd-cof和聚合物的复合物以及实施例3中制备的含有姜黄素的cd-cof和聚合物的复合物进行x射线粉末衍射试验(xrd)，并将结果示于图9中。从图9的结果可以看出，显示出恒定的峰，因此可以知道很好地合成了各个复合物。
[0135]
实验例5：傅里叶变换红外光谱法(fourier-transform infrared spectroscopy，ftir)试验
[0136]
将通过傅里叶变换红外光谱法(ftir)测量实施例3中制备的含有姜黄素的cd-cof和聚合物的复合物的结果示于图10中。
[0137]
实验例6：冷冻电子显微镜的拍摄
[0138]
对制备例和实施例中制备的cd-cof和复合物进行了拍摄。由于颗粒尺寸非常微小，不能用普通的光学显微镜进行测量，因此利用冷冻电子显微镜(jem 1010，jeol公司，日本)进行了拍摄(图11)。可以知道很好地形成了cd-cof和聚合物的复合物，并且视黄醇很好地附着在该复合物上。
[0139]
实验例7：促进透皮吸收的效果的实验
[0140]
根据下表19的组成，分别制备具有含有10％的视黄醇的cd-cof和琥珀酰化壳聚糖的复合物的脂质体(脂质体a)和普通脂质体(脂质体b)。
[0141]
[表19](单位：重量％)
[0142]
将人造皮肤neoderm(tego science公司)安装到弗兰兹型扩散池(franz-type diffusion cell)(lab fine instruments公司，韩国)并进行实验。在弗兰兹型扩散池的接收(receptor)池(5ml)中加入50mm的磷酸盐缓冲液(ph为7.4，0.1m nacl)，然后在32℃下，将扩散池(diffusion cell)以600rpm进行混合并分散，并将50μl的脂质体a和脂质体b分别加入供给(donor)池中。按照预定的时间进行吸收和扩散，并且使发生吸收和扩散的皮肤为0.64cm2。有效成分的吸收和扩散结束后，利用干燥的低尘擦拭纸(kimwipes)或10ml的乙醇洗掉未被吸收并残留在皮肤上的残留物，并使用尖端型均质机(homogenizer)，将吸收并扩散有有效成分的皮肤进行磨碎，然后使用4ml的二氯甲烷提取被吸收到皮肤内部的视黄醇。之后，利用0.45μm的尼龙膜(nylon membrane)滤膜对提取液进行过滤，并通过高效液相色谱(hplc)法在以下条件下测量视黄醇的含量，然后将结果示于表20中。
[0143]
[表20]
[0144]
从所述表20可以看出，在本发明中视黄醇被包封在cd-cof和聚合物的复合物中并
有效地被递送到皮肤中。