一种炎症修复、抗氧化组合物及应用的制作方法

文档序号:25215197发布日期:2021-05-28 14:12阅读:159来源:国知局
本发明属于化妆品领域,具体涉及一种具有炎症修复、抗氧化功效组合物。
背景技术
:皮肤损伤愈合是机体保持组织完整性的一个有组织的过程,炎症因子即在皮肤受损时产生,愈合过程中炎症细胞的生物化学介质之间产生复杂的作用。其中一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,nos)就是皮肤炎症损伤愈合过程中的一个重要因子,生成的一氧化氮(no)参与损伤愈合的整个过程,在炎症介导细胞的增殖、分化及基质沉淀、损伤修复后组织重构中均有重要的体现(官大威,赵锐,杜宇.皮肤损伤愈合中nos的表达及no的作用[j].法医学杂志,2004,v0(004):244-246.)。以raw246.7小鼠巨噬细胞建立的体外炎症细胞模型常常用来具备抗炎功效的活性物的效果评价。皮肤衰老也常常认为是皮肤细胞慢性炎症之一,随着外界环境及内在因素的原因(生活压力、年龄增长),体内活性氧含量上升,细胞膜受到攻击,影响到细胞原有的功能,导致细胞的损伤。dpph法的抗氧化能力测试,可广泛用于定量定性测定某一物质的抗氧化能力(韦献雅,殷丽琴,钟成,等.dpph法评价抗氧化活性研究进展[j].食品科学,2014,35(009):317-322)。此外在炎症的表征中,有报道指出压疮缺血/再灌注损伤是一个复杂的病理过程,其炎症反应、氧化应激及凋亡参与了其发生、发展,是引起压疮迁延不愈的重要原因。当组织发生缺血/再灌注时,自由基生成增多,使生物膜的脂质过氧化作用增强,造成生物膜的结构和功能损伤(张自珍,罗欣,于小华.黄芪注射液抑制压疮缺血再灌注损伤大鼠的炎症反应并增强其抗氧化损伤能力[j],细胞与分子免疫学杂志(chinjcellmolimmunol),2015,31(4):507-510),因此本研究进行了dpph自由基的相应测试。所选用天然植物原料紫云英,为豆科、黄耆属二年生草本植物。其记载药用价值中,具有明目、利尿消肿、清热解毒等功效(中国科学院中国植物志委员会,张振万.中国植物志:豆科(五)[m].科学出版社,1998)。其花所含谷氨酸、脯氨酸、天冬氨酸等多种氨基酸,并含有一定量的黄酮类活性组分,却鲜有在化妆品原料方向关于皮肤炎症修复、抗氧化功效的应用。其提取物及组合物应具备较广泛的市场。本发明提供一种皮肤炎症修复、抗氧化组合物,用于化妆品中起到抗炎修复、抗氧化用途。技术实现要素:本发明的目的在于提供一种抗炎症、抗氧化功效的组合物,并将其应用在化妆品当中,提高皮肤炎症的修复水平和一定程度的抗氧化能力。为了达到上述目的,本发明提供一以下技术方案:本发明第一方面,提供一种炎症修复、抗氧化组合物,所述组合物包含紫云英提取物:5-20份;增溶剂:2-8份;防腐剂:0.02-0.08份,以上均为质量份;所述紫云英提取物的提取步骤如下:紫云英全株粉碎后采用乙醇溶液提取,去除不溶物得初滤液;将初滤液浓缩过滤得到紫云英提取物。上述乙醇溶液的体积比为65-75%,室温下搅拌提取2.5-4h;所述浓缩采用旋转蒸发仪浓缩至乙醇溶液体积的0.5-1.5倍,5000rpm,4℃,10min离心过滤,得紫云英提取物。上述紫云英全株经干燥后,粉碎到200目,提取时间为2-3h;所述紫云英全株粉碎物与乙醇溶液的重量比为1:20;所述旋转蒸发仪条件为55℃,70rpm,所述乙醇溶液体积浓度为70%。上述组合物的组分为紫云英提取物,8-15份;增溶剂,4-6份;防腐剂,0.04-0.06份。上述组合物的组分为紫云英提取物,10份;增溶剂,5份;防腐剂,0.05份。上述增溶剂为甘油、1,3-丁二醇、1,2-己二醇、戊二醇中的一种及一种以上。上述防腐剂为乙基己基甘油。上述组合物在制备化妆品中的应用。上述化妆品为水剂、乳剂、喷雾、膏霜、凝胶剂或面膜。上述化妆品中组合物的重量百分比为1.5-6%。其中紫云英提取物,所属紫云英(astragalussinicusl.)为豆科、黄耆属二年生草本植物,所属紫云英提取物为紫云英全株提取物,包含其根、茎、叶、花及种子各个部位组成。本发明所述的组合物可用于化妆品。如作为添加剂用于皮肤炎症修复、抗氧化类产品。与现有的技术相比,本发明具有的有益性如下:1,本发明所述的炎症修复组合物,其紫云英提取物为纯天然天然活性成分提取物,其组合物具有皮肤炎症修复、抗氧化作用效果。2,本发明所述的增溶剂能较大程度的促进提取物活性成分的溶解,并协同防腐剂起到防腐功效作用。3,将本发明组合物具有抗炎症因子产生、抗氧化作用功效。应用于化妆品中,可赋予较好的炎症修复功效。具体实施方式以下结合具体实施例对本发明做进一步阐述实施例1炎症修复、抗氧化组合物的制备将30g粉碎后的紫云英植物全株,粉碎到200目以下后,加入到600g,70%乙醇溶液中,室温下搅拌3h后,第一次过滤除去不溶性物质,得初滤液;旋转蒸发仪浓缩至溶液的0.5-1.5倍(55℃\70rpm),离心过滤(5000rpm4℃10min),得紫云英提取物。将质量比的紫云英提取物:10g,增溶剂:5g,防腐剂:0.05g混合均匀后,过0.22μmpes得炎症修复、抗氧化组合物。增溶剂为甘油、1,3-丁二醇、1,2-己二醇、戊二醇中的一种及一种以上,本实施例中采用甘油。防腐剂为乙基己基甘油。实施例2mttassay细胞存活率测试、no抗炎能力测试细胞存活率测试:准确测定活细胞数,并准确计算细胞的增长率或减少率是在生命科学领域中不可缺少实验方法。mttassay是评价该细胞活力的方法中使用最广泛的测试方法。将mtt试剂(噻唑蓝)处理在经样品处理24h后的细胞,活细胞的线粒体将噻唑蓝的环结构破坏并还原为青紫色非水溶性的mttformazan晶体。将还原的晶体使用异丙醇溶解,在570m处测定吸光度,此吸光度代表mtt试剂被活细胞还原的量,也就是能够准确测定还原mtt环结构的细胞量。当活细胞越多的时候mttformazan(四甲基苯丙氨酸甲酯)生成的量越多,吸光度越高。使用该原理,测定样品对细胞活力的影响。测定方法:将raw264.7细胞用含有1%双抗的dmem培养基进行稀释为3×104cells/ml,在96孔板中加入100μl的细胞溶液(每孔),在37℃5%co2条件下培养24h后,将原有培养液吸取,对于实施例1组合物,分别加入其0.75%、1.5%、3%、6%、9%的组合物(使用1%双抗的dmem培养基进行稀释)。空白对照:1%双抗的dmem培养基;阳性对照:2μg/mllps和nos抑制剂10μm、50μml-nmma加入孔中,培养24h后,向每孔加入20μl5mg/mlmtt溶液(溶剂为dpbs),在37℃5%co2条件下反应2h。将每孔中的溶液吸取,加入100μl异丙醇,在暗室100rpm条件下反应30min,在570nm处测定吸光度。表1.实施例1及对照组细胞存活率结果分析:细胞毒性测定是在测定炎症因子的抑制率前不可少的环节。因为样品可能通过杀灭细胞来控制炎症因子的量,所以必须先测定成分对细胞活率的影响。将经培养基处理的空白对照的细胞数看作100%,测得的数据为表1。mttassay的细胞毒性判定标准为,在经样品处理后的细胞存活率若高于80%,则代表对细胞无毒性。通过表1能够看出,实施例1不同添加量对细胞存活率的影响程度,在一定添加量下组合物能够培养细胞成长更良好的环境条件。在抗炎测定中选取了无细胞毒性的0.75%-6%添加量下的数据进行功效分析。抗炎能力测试:将raw264.7细胞使用含有1%双抗的dmem培养基进行稀释配制为7.5×104cells/ml,在24孔板中向每空加入500μl的细胞溶液,在37℃5%co2条件下培养24h后,将原有培养液吸出,对于实施例1组合物,分别加入其0.75%、1.5%、3%、6%的组合物(使用1%双抗的无酚红dmem培养基进行稀释)使用超滤膜过滤后加入96孔板中。空白对照为含有1%双抗的无酚红dmem培养基,作2μg/mllps为阴性对照和10μm、50μml-nmma为阳性对照分别加入孔中,培养24h。将100mmnitritesolution(亚硝酸盐溶液)使用1%双抗的无酚红dmem培养基进行稀释配制100μm、50μm、25μm、12.5μm、6.25μm、3.13μm、1.56μm溶液,分别把50μl的每浓度加入96孔板中(平行3次)。将培养24h后的24孔板的每孔中的溶液300μl在12000rpm,5min,25℃离心。离心后移入96孔板中,向每孔中加入50μlsulfanilamidesolution(磺胺溶液),在暗室反应10min,再向每孔中加入50μlnedsolution在暗处10min。540nm处测定吸光度值。nitritesolution标准曲线=ax+b(计算虚拟线方程)表2.实施例1及对照组no抑制率结果分析:noassay的判定标准为在细胞存活率高于80%的浓度下,对于炎症因子no有50%的抑制率能够说明该成分对炎症因子有抑制作用。阴性对照:作经2μg/mllps处理的细胞的炎症因子引发量为100%,在试剂中均加入2μg/mllps和试剂,计算试剂在2μg/mllps处理条件下通过试剂控制的no量。阳性对照:以l-nmma为总nos抑制剂(一氧化氮合成酶抑制剂)。表1、表2分析出实施例1组合物功效添加范围0.75%-9%,更优添加范围:0.75-6%。实施例3:dpph抗氧化能力测试实验方法:取实施例1所得的功效植物提取物,以溶剂为甲醇,对于实施例1组合物,分别加入其0.75%、1.5%、3%、6%的组合物。溶液均使用超滤膜过滤。阳性对照:10μg/mll-抗坏血酸棕榈酸酯。空白对照:甲醇。以甲醇为溶剂,配制10mmdpph溶液,再稀释至0.2mmdpph溶液,超滤膜过滤。向2个24孔板中加入各配制溶液和空白对照500μl,在一个板中加入500μl甲醇(甲醇+组合物)为空白对照,向另一个板中加入500μl0.2mmdpph溶液(dpph+组合物)为测试组。在暗室反应30min,在517nm处测定吸光度。表3.实施例1及对照组dpph清除率结果分析:组合物在添加一定时,相对于阳性对照组l-抗坏血酸棕榈酸酯有接近等同的dpph自由基清除能力。优选组合物添加范围1.5%-6%。实施例4:炎症修复护肤水的制备材料含量11%透明质酸钠(120万)20.0g2甘油20.0g3去离子水20.0g4edta-2na0.1g5组合物15.05g6苯氧乙醇0.5g7去离子水24.35g表4.护肤水及空白组材料表注:护肤水质量比组合物添加折算原则3%条件下:即每100g加入3%紫云英干物质浓度组合物;每100g的3%组合物所需,即组合物中:紫云英提取物:10g;增溶剂:5g;防腐剂:0.05g,所述成分比组成。制备顺序:护肤水的制备按照表格中所述的成分质量比组成依次加入,搅拌混合均匀,通过0.22μmpes滤膜过滤后即为所得含组合物的护肤水。空白对照:护肤水的制备按照表格中所述的成分质量比(表4中,第5组分以等质量的去离子水代替)组成依次加入,搅拌混合均匀,通过0.22μmpes滤膜过滤后即为所得含组合物的护肤水。实施例5:皮肤损伤炎症修复测试炎症修复验证:通过紫外照射损伤皮肤产生炎症,通过临床测定功效化妆品原料,确定该原料对于皮肤的刺激性和皮肤的炎症恢复能力。其表征一:经皮失水(g/m2h):表示单位体积中挥发皮肤水分的量。皮肤屏障破坏度越高,经皮失水率将升高,导致皮肤原有水分的流失量增高。表征二:肤温,紫外损伤炎症伴随温度的局部升高,肤温恢复对于保持皮肤健康有重要的作用。实验方法:通过直接在皮肤涂铺含实施例1组合物的水剂化妆品,该水剂化妆品的构成参照表格4。测定紫外线照射前的皮肤指标(肤温恢复率、经皮失水率),经20min紫外线照射后再次测定该指标,然后涂铺试剂15min、60min、90min后分别测定该指标,评价涂铺护肤水的指标变化。测定仪器:skincolorcatch与skinvapometer购于delfintechnologies。表5.肤温恢复率表6.经皮失水率恢复率结果分析:如表5,添加所述组合物的护肤水,在肤温恢复方面相对于空白组,有较明显的恢复能力。空白组为不添加组合物的配方。在皮肤受到刺激后,表面温度提升;添加了炎症修复组合物的护肤水,可显著抑制皮肤温度的升高,快速恢复至未受到刺激时的水平,并且根据数据可以发现,涂抹护肤水后皮肤的温度可在较长一段时间内维持略低于未受到刺激的皮肤温度,有利于减轻水分散失进而起到促进炎症修复的功效。如表6,组合物护肤水在紫外照射后,炎症导致经皮失水率的增加,未添加组合物的空白组,在受到刺激后保持皮肤水分能力较弱;使用添加炎症修复组合物的护肤水,对经皮失水率有良好的持水作用,并能够显著抑制皮肤水分散失,更好起到了保持水分、促进修复的效果。以上实施例仅用于说明本发明的实施方案,并没有对本发明有任何形式上的限制;任何从事本专业的技术人员,都有能力利用已揭示的技术内容,对其作出一些更动或修饰,成为等同变化的等效实施例。根据本发明技术实质,对本发明进行简单修改、等同变化与修饰,均属于本发明技术方案的范围内。当前第1页12
当前第1页1 2 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1