一种具有改善亚健康功效的雄花虫草茯苓药物组合物的制作方法

1.本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种具有改善亚健康功效的雄花虫草茯苓药物组合物及其应用。


背景技术：

2.现代社会中，由于环境的变化、工作的压力、饮食习惯、缺少锻炼等，导致人们的身体免疫力下降，易疲劳、抗病能力差、人体成亚健康状态，急需提升人们的健康水平。
3.茯苓为多孔菌目茯苓属菌类，具有利水渗湿、健脾、宁心安神等功效，广泛用于防治水肿尿少、痰饮眩悸、脾虚食少、便溏泄泻、心神不安、惊悸失眠等症。从茯苓中提取制备的羧甲基茯苓多糖具有优良的药理作用：1)依赖宿主的免疫系统，增强机体免疫力(特异性与非特异性)，抑制与杀伤肿瘤细胞。通过激活补体，诱生多种淋巴细胞活性因子，增强巨噬细胞、nk细胞、t淋巴细胞与b淋巴细胞的活性，多途径协同增效发挥抗肿瘤、抗病毒作用；2)抑制肿瘤细胞dna、rna合成，直接杀死杀伤肿瘤细胞；3)提高肿瘤细胞膜上的唾液酸(sa)含量、抑制pi转换、降低花生四烯酸(c
20
)的含量，多途径抑制肿瘤细胞的分裂与增殖；
4.4)增强肝脏sod活性，清除氧自由基，化解致癌物质，防止正常细胞dna变异。
5.杜仲雄花自古就有很高的药用价值。经研究证明，杜仲雄花的天然活性成分有安神、镇静及镇痛作用，长期服用可明显改善睡眠。此外，杜仲雄花含有的人体必需的胶原蛋白，具有促进肌肉发达强健的功效，其活性成分木脂素类具有的抗疲劳作用十分明显，对于长期从事室内工作而缺乏运动量的人群有显著效果。常饮有益健康，睡前喝一杯保健价值极髙，无副作用，饮用方便。
6.蛹虫草也是中医中的名贵药材。中医认为，蛹虫草既能补肺阴，又能补肾阳，主治肾虚，阳痿遗精，腰膝酸痛，病后虚弱，久咳虚弱，劳咳痰血，自汗盗汗等，是一种能同时平衡、调节阴阳的中药。


技术实现要素：

7.本发明的目的在于提供一种具有改善亚健康功效的雄花虫草茯苓药物组合物，所述组合物含有下述重量份的组分：茯苓1-3份，人参1-3份，短梗五加3-5份，杜仲雄花1-2份，蛹虫草1-3份，覆盆子1-5份，枸杞子1-3份，肉桂1-2份，黄精1-3份，龙眼肉1-2份，丁香1-2份，玛咖粉1-4份，肉苁蓉0-5份、芡实0-5份。
8.本发明的优选技术方案中，组合物中茯苓的含量为1-2.5份，优选为1.5-2份。
9.本发明的优选技术方案中，组合物中的茯苓为茯苓粗粉、茯苓多糖碱化提取液、茯苓多糖、高取代度羧甲基茯苓多糖(cmp)的任一种。
10.本发明的优选技术方案中，所述茯苓粗粉为茯苓过100-200目筛制得。
11.本发明的优选技术方案中，所述高取代度羧甲基茯苓多糖的制备方法包括如下步骤：1)茯苓多糖加入到水或水醇混合液中，搅拌均匀后，加入茯苓多糖质量1-8％的碱性溶液，搅拌至完全溶解，得茯苓多糖碱化液；2)1.0-10mol/l氯乙酸与适当过量的2.0-10mol/l
碱性溶液充分反应后，加入到1)步所得的茯苓多糖碱化液中，进行取代反应，分离，纯化，即得，所述适当过量是指碱性溶液中碱性物质的实际用量比其与氯乙酸发生中和反应所需理论用量过量0.5-40％。
12.本发明的优选技术方案中，1)步所述茯苓多糖选自碱化提取法制得的茯苓多糖碱化提取液或碱提取酸沉淀法制得的茯苓多糖粗品。
13.本发明的优选技术方案中，所述茯苓多糖碱化提取液的制备方法包括下述步骤，茯苓粉加入浓度为1.0-4.0mol/l的碱性溶液进行碱化提取，离心分离，取上清液，即得。
14.本发明的优选技术方案中，所述茯苓多糖的制备方法包括下述步骤，茯苓粉用浓度为1.0-4.0mol/l的碱性溶液搅拌提取，离心分离，取上清液；上清液加酸，所得酸沉淀物经离心、水洗，即得茯苓多糖，其中，所述的酸选自醋酸、盐酸、硫酸、硝酸的任一种。
15.本发明的优选技术方案中，所述碱性溶液的浓度为2.0-3.0mol/l。
16.本发明的优选技术方案中，所述水醇混合液为醇溶剂加水制得的溶液，所述醇溶剂选自甲醇、乙醇、丙二醇、乙酸乙酯、丙酮、二甲基亚砜、乙醚、异丙醇、二甲基甲酰胺的任一种或其组合。
17.本发明的优选技术方案中，1)步加入的碱性溶液为茯苓多糖质量的2-6％，优选1)步加入的碱性溶液为茯苓多糖质量的3-5％。
18.本发明的优选技术方案中，所述碱性溶液由碱性物质加水溶解制得，所述碱性物质选自氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾的任一种或其组合。
19.本发明的优选技术方案中，所述碱性物质选自氢氧化钠或氢氧化钾的任一种或其组合。
20.本发明的优选技术方案中，所述氯乙酸溶液的浓度为2.0-9.0mol/l，优选为3.0-8.0mol/l，更优选为4.0-7.0mol/l，还优选为4.5-6.0mol/l。
21.本发明的优选技术方案中，2)步所述碱性溶液的浓度为3.0-9.0mol/l，优选为4.0-8.0mol/l，更优选为5.0-7.0mol/l，还优选为5.5-6.5mol/l。
22.本发明的优选技术方案中，所述适当过量是指碱性溶液中碱性物质的实际用量比其与氯乙酸发生中和反应所需理论用量过量5-30％，优选为10-25％，更优选为15-20％。
23.本发明的优选技术方案中，2)步所述反应液在30-100℃条件下取代反应1-5h。
24.本发明的优选技术方案中，2)步所述反应时间为2-4h，优选为2.5-3.5h。
25.本发明的优选技术方案中，2)步所述反应温度为40-90℃，优选为50-85℃，更优选为60-82℃，还优选为75-80℃。
26.本发明的优选技术方案中，所述分离包括下述步骤，在2)步反应生成液中加入1.0-10mol/l的酸性溶液，调其ph5.0-7.0后，加入3-5倍体积的醇溶剂，析出cmp粗品，所述醇溶剂选自甲醇、乙醇、丙二醇、乙酸乙酯、异丙醇、乙醚、丙酮的任一种或其组合。
27.本发明的优选技术方案中，所述酸性溶液由酸性物质加水溶解制得，所述酸性物质选自醋酸、盐酸、硫酸或硝酸的任一种或其组合。
28.本发明的优选技术方案中，所述纯化包括下述步骤，将待纯化的cmp加水配成1.0-6.0％的水溶液，加入1.0-10mol/l的碱性溶液调ph9.0-12.0，搅拌至cmp完全溶解；加入30％h2o2溶液，其用量为溶解液总容积0.1
‰‑
2.0
‰
，进行脱色反应；加入1.0-10mol/l的酸性溶液调ph5.0—7.0，超滤去除分子量小于0.7
×
104道尔顿的cmp及其他小分子杂质。
29.本发明的优选技术方案中，待纯化的cmp水溶液浓度为2.0-5.0％，优选为3-4％。
30.本发明的优选技术方案中，纯化步骤所用碱性溶液的浓度为2.0-9.0mol/l，优选为3.0-8.0mol/l，更优选为4.0-7.0mol/l，还优选为5.0-6.0mol/l。
31.本发明的优选技术方案中，所述30％h2o2溶液的用量为溶解液总容积的0.5
‰‑
1.0
‰
。
32.本发明的优选技术方案中，所述脱色反应温度为10℃-70℃，优选为15℃-60℃，更优选为20℃-50℃。
33.本发明的优选技术方案中，所述脱色反应的时间为2-48h，优选为5-40h，更优选为10-30h，还优选为15-25h。
34.本发明的优选技术方案中，所述酸性溶液的浓度为1.0-9.0mol/l，优选为2.0-8.0mol/l，更优选为3.0-7.0mol/l，优选为4.0-6.0mol/l。
35.本发明的优选技术方案中，所述超滤介质为dh—uf中空纤维超滤器。
36.本发明的优选技术方案中，所述的分离纯化为多次分离纯化。
37.本发明的优选技术方案中，cmp的取代度不低于1.05，优选不低于1.10，更优选不低于1.2。
38.本发明的优选技术方案中，所述cmp的分子量为0.7
×
10
4-1.0
×
106道尔顿，优选为3.0
×
10
4-8
×
105道尔顿，更优选为6.0
×
10
4-5.0
×
105道尔顿，还优选为8.0
×
10
4-3.0
×
105道尔顿。
39.本发明的优选技术方案中，所述cmp的聚合度为32《n《4545，优选为136《n《3636，更优选为272《n《2272，还优选为363《n《1363。
40.本发明的优选技术方案中，所述组合物包括以下成分：茯苓1-2份，人参1-3份，短梗五加2-4份，杜仲雄花1-2份，蛹虫草1-3份，覆盆子2-5份，枸杞子2-3份，肉桂1-2份，黄精1-3份，龙眼肉1-2份，丁香1-2份，玛咖粉2-4份。
41.本发明的优选技术方案中，所述组合物包括以下成分：茯苓1份，人参1份，短梗五加2份，杜仲雄花1份，蛹虫草1份，覆盆子2份，枸杞子2份，肉桂1份，黄精1份，龙眼肉1份，丁香1份，玛咖粉2份。
42.本发明的优选技术方案中，所述组合物包括以下成分：茯苓2份，人参3份，短梗五加4份，杜仲雄花2份，蛹虫草3份，覆盆子5份，枸杞子3份，肉桂2份，黄精3份，龙眼肉2份，丁香2份，玛咖粉4份。
43.本发明的优选技术方案中，所述组合物包括以下成分：茯苓2份，人参3份，短梗五加3份，杜仲雄花2份，蛹虫草3份，覆盆子3份，枸杞子3份，肉桂1份，黄精1份，龙眼肉1份，丁香1份，玛咖粉3份。
44.本发明的优选技术方案中，所述组合物包括以下成分：茯苓1-3份，人参1-3份，短梗五加3-5份，杜仲雄花1-2份，蛹虫草1-2份，覆盆子1-4份，枸杞子1-3份，肉桂1-2份，黄精1-3份，龙眼肉1-3份，丁香1-3份，玛咖粉1-3份、肉苁蓉3-5份、芡实2-5份。
45.本发明的优选技术方案中，所述组合物包括以下成分：茯苓1份，人参1份，短梗五加3份，杜仲雄花1份，蛹虫草1份，覆盆子1份，枸杞子1份，肉桂1份，黄精1份，龙眼肉1份，丁香1份，玛咖粉1份、2肉苁蓉3份、芡实2份。
46.本发明的优选技术方案中，所述组合物包括以下成分：茯苓3份，人参3份，短梗五
加5份，杜仲雄花2份，蛹虫草2份，覆盆子4份，枸杞子3份，肉桂2份，黄精3份，龙眼肉3份，丁香3份，玛咖粉3份、肉苁蓉5份、芡实5份。
47.本发明的优选技术方案中，所述组合物包括以下成分：茯苓2份，人参1份，短梗五加4份，杜仲雄花1份，蛹虫草1份，覆盆子2份，枸杞子2份，肉桂1份，黄精2份，龙眼肉1份，丁香1份，玛咖粉2份、肉苁蓉4份、芡实3份。
48.本发明的优选技术方案中，组合物中还含有所需量的药学上可接受的载体。
49.本发明的优选技术方案中，所述药学上可接受的载体选自填充剂(又称稀释剂)、润滑剂(又称助流剂或抗粘着剂)、分散剂、湿润剂、粘合剂、调节剂、增溶剂(又称稳定剂)、抗氧剂、乳化剂、矫味剂、赋香剂的任一种或其组合。
50.本发明的优选技术方案中，所述的粘合剂选自糖浆、阿拉伯胶、明胶、山梨醇、黄芪胶、纤维素、微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、羟丙甲基纤维素、明胶浆、糖浆、淀粉、羧甲基淀粉钠、淀粉乙醇酸钠、预胶化淀粉、改良淀粉、羟丙基淀粉、玉米淀粉、淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮的任一种或其组合。
51.本发明的优选技术方案中，所述的填充剂选自乳糖、糖粉、糊精、淀粉或其衍生物、纤维素、微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、羟丙甲基纤维素、硫酸钙、磷酸钙、磷酸氢钙、沉降碳酸钙、山梨醇、甘氨酸、羧甲基淀粉钠、淀粉乙醇酸钠、预胶化淀粉、改良淀粉、羟丙基淀粉、玉米淀粉的任一种或其组合。
52.本发明的优选技术方案中，所述的润滑剂选自微粉硅胶、硬脂酸镁、滑石粉、氢氧化铝、硼酸、氢化植物油、聚乙二醇的任一种或其组合。
53.本发明的优选技术方案中，所述的崩解剂选自淀粉、羧甲基淀粉钠、淀粉乙醇酸钠、预胶化淀粉、改良淀粉、羟丙基淀粉、玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、交联聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素的任一种或其组合。
54.本发明的优选技术方案中，所述的湿润剂选自十二烷基硫酸钠、水、醇的任一种或其组合。
55.本发明的优选技术方案中，所述的乳化剂选自聚山梨酯-80、没酸山梨坦、普流罗尼克f-68，卵磷酯、豆磷脂的任一种或其组合。
56.本发明的优选技术方案中，所述的酸碱调节剂选自无机酸、有机酸的任一种或其组合，优选选自柠檬酸、柠檬酸钠、苹果酸、苹果酸钠、盐酸、醋酸、醋酸钠、磷酸、磷酸氢钠、磷酸二氢钠、碳酸、碳酸钠、磺酸、磺酸钠、谷氨酸、酒石酸、酒石酸钠、乳酸、乳酸钠、富马酸、富马酸钠、衣康酸、抗坏血酸、抗坏血酸钠、烟酸、烟酸钠、延胡索酸、α-酮戊二酸、果酸、果酸钠、乙酸、草酸、琥珀酸、二氧化碳、枸橼酸、枸橼酸钠的任一种或其组合。
57.本发明的优选技术方案中，所述的酸碱调节剂的浓度为0.5-8mol/l，优选为0.8-6mol/l，更优选为1-5mol/l，还优选为2-4mol/l。
58.本发明的优选技术方案中，所述的稳定剂(增溶剂)选自甘油、吐温-80的任一种或其组合。
59.本发明的优选技术方案中，所述的抗氧剂选自山梨酸钾、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、二丁基苯酸的任一种或其组合。
60.本发明的优选技术方案中，所述的赋香剂选自香料、食用香料、食用香精的任一种或其组合。
61.本发明的组合物可为本领域熟知的各种剂型，并可采用本领域常规的制剂技术制备得到。
62.本发明的优选技术方案中，所述组合物为口服制剂。
63.本发明的优选技术方案中，所述的口服制剂选自口服液(液体制剂)、糖浆剂、混悬液、片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、散剂、滴丸、合剂、露剂、泡腾剂、糊剂、乳剂、茶剂的任一种。
64.本发明的优选技术方案中，还可将活性成分与药学上可接受的缓控释载体按其制备要求加以混合，再按照本领域熟知的缓控释制剂的制备方法，如加入阻滞剂包衣或将活性成分微囊化后制成缓释微丸或控释微丸；所述的缓控释载体包括但不仅限于油脂性掺入剂、亲水胶体或包衣阻滞剂等，所述的油脂性掺入剂选自单硬脂酸甘油酯、氢化蓖麻油、矿油、聚硅氧烷、二甲基硅氧烷的任一种或其组合；所述的亲水胶体选自羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、pvp、阿拉伯胶、西黄耆胶、卡波普的任一种或其组合；所述的包衣阻滞剂选自乙基纤维素(ec)、羟丙甲基纤维素(hmpc)、聚乙烯吡咯烷酮(pvp)、邻苯二甲酸乙酸纤维素(cap)、丙烯酸类树脂的任一种或其组合。
65.本发明的目的在于提供一种具有改善亚健康功效的雄花虫草茯苓药物组合物的制备方法，所述组合物含有下述重量份的组分：茯苓1-3份，人参1-3份，短梗五加3-5份，杜仲雄花1-2份，蛹虫草1-3份，覆盆子1-5份，枸杞子1-3份，肉桂1-2份，黄精1-3份，龙眼肉1-2份，丁香1-2份，玛咖粉1-4份，肉苁蓉0-5份、芡实0-5份，具体包括下述步骤：将药材加入100-160份水浸泡30-100分钟，沸腾加热30-60min，过滤得提取液；提取液过200目筛网获取滤液，加热滤液使其浓缩即得。
66.本发明的优选技术方案中，提取次数为1-5次，优选为2-3次。
67.本发明的优选技术方案中，所述加热滤液使其浓缩步骤后还包括：将滤液中加入甜蜜素、阿斯巴甜和柠檬酸进行调味并分装。
68.本发明的优选技术方案中，所述加热滤液使其浓缩步骤后还包括：将滤液中加入白砂糖或蔗糖进行调味并分装。
69.本发明的优选技术方案中，调味后的干膏粉再次添加混合糊精获得混合物，取20份混合物和60％～80％纯度的乙醇溶液，采用湿法混合制粒机制粒。
70.本发明的优选技术方案中，所述混合糊精包括麦芽糊精或可溶性淀粉中至少一种。
71.本发明的优选技术方案中，使用喷雾干燥法或烘干法干燥。
72.本发明的优选技术方案中，所述糖类包括白砂糖、蔗糖或混合糖份中的至少一种。
73.本发明的优选技术方案中，所述添加剂包括1.6份阿斯巴甜、0.5份甜菊糖苷以及0.11份柠檬酸。
74.本发明的另一目的在于提供本发明提供一种具有改善亚健康功效的雄花虫草茯苓药物组合物用于制备改善亚健康功效的制品中的应用。
75.本发明的优选技术方案中，所述改善亚健康功能选自强筋壮骨、活血化淤、温经通络、补中益气、补肾壮阳、提高免疫力的任一种。
76.本发明的优选技术方案中，组合物的用量与患者的年龄、性别、健康状况、治疗现状、合并用药等因素相关，推荐用量为5-10g/次，2-3次/日。
77.除非另有说明，本发明涉及液体与液体之间的百分比时，所述的百分比为体积/体
积百分比；本发明涉及液体与固体之间的百分比时，所述百分比为体积/重量百分比；本发明涉及固体与液体之间的百分比时，所述百分比为重量/体积百分比；其余为重量/重量百分比。
78.与现有技术相比，本发明具有下述有益技术效果：
79.1、本发明的组合物科学筛选原料的组成及配比，茯苓具备利水渗湿，健脾宁心的功效；短梗五加具备驱风化湿，健胃利尿的功效；蛹虫草具备眩晕耳鸣，健忘不寐，腰膝酸软，阳痿早泄，久咳虚喘的功效；覆盆子具备益肾，固精，缩尿。用于肾虚遗尿，小便频数，阳痿早泄，遗精滑精的功效；枸杞子具备滋补肝肾，益精明目；肉桂具备补火助阳，引火归源，散寒止痛，活血通经。用于阳痿，宫冷，腰膝冷痛，肾虚作喘，阳虚眩晕，目赤咽痛，心腹冷痛，虚寒吐泻，寒疝，奔豚，经闭，痛经的功效；黄精具备补益心脾，养血安神的功效；龙眼肉具备滋补肝肾，益精明目；丁香具备温中降逆，补肾助阳的功效；玛咖粉具备补火助阳，引火归源，散寒止痛，活血通经的功效。本发明采用以上述天然植物原料，经合理配伍，具有强筋壮骨、活血化淤、温经通络、补中益气、补肾壮阳、提高免疫力的功效。
80.2、本发明组合物的制备方法具有操作简便，成本效益显著，适合工业化大生产。
具体实施方式
81.以下参照实施例说明本发明。但本发明不局限于实施例。
82.实施例1
83.本发明的组合物由下述重量份的组分制得：
[0084][0085]
本发明的组合物的制备方法，包括下述步骤：
[0086]
s1、将上述原料用中药破碎机进行粗粉碎至10-200目；
[0087]
s2、加入160份水，将粉碎后的原料全部浸入水中，充分搅拌，浸泡60分钟。加热提取，保持沸腾加热1h，过滤得提取液，将滤渣中继续加120份水量，保持加热50分钟，过滤得提取液，继续加入100份水，保持100℃沸腾状态下加热40分钟，过滤残渣，取其提取液(共提取三次),过滤200目筛网。
[0088]
s3:利用加热至沸腾挥发，浓缩至40份水量。加入2.4％甜蜜素，0.4％阿斯巴甜，0.24％柠檬酸，最终分装成20份。
[0089]
实施例2
[0090]
本发明的组合物由下述重量份的组分制得：
[0091][0092]
本发明的组合物的制备方法，包括下述步骤：
[0093]
s1、将茯苓粉碎，过60目筛，加入160份水，将茯苓和其他药材全部浸入水中，充分搅拌，浸泡60分钟。加热提取，保持沸腾加热1h，过滤得提取液，将滤渣中继续加120份水量，保持加热50分钟，过滤得提取液，继续加入100份水，保持100℃沸腾状态下加热40分钟，过滤残渣，取其提取液(共提取三次),过滤200目筛网。
[0094]
s2、将提取液继续浓缩至30份后，加入8份混合糊精，干燥成干膏后粉碎；
[0095]
s3、添加干膏粉重量3倍的葡萄糖搅拌混匀，与干膏粉搅拌混匀；
[0096]
s4、调味后的干膏粉再次添加8份混合糊精获得混合物，取20份混合物和60％～80％纯度的乙醇溶液，采用湿法混合制粒机制粒；按每袋10g规格分袋包装。
[0097]
实施例3
[0098]
本发明的组合物由下述重量份的组分制得：
[0099][0100][0101]
本发明的组合物的制备方法，包括下述步骤：
[0102]
s1、将茯苓75kg用中药破碎机进行粗粉碎至10-200目，得到茯苓粗粉，称取所需量的茯苓粗粉；
[0103]
1)茯苓粗粉投入到浸泡罐中，泵入400l水，搅拌均匀，浸泡12h；
[0104]
2)将400l浓度为2.25mol/l的氢氧化钠溶液缓慢泵入浸泡罐中，搅拌反应1h，过滤，取滤液；
[0105]
3)在中和罐中投入向300l浓度为5.3mol/l的氯乙酸溶液后，再缓慢加入300l浓度为6.25mol/l的氢氧化钠溶液，搅拌至反应充分，冷却至室温；
[0106]
4)将3)步反应液泵入2)步所得滤液中，充分混匀后，缓缓升温至75℃，恒温反应2.5h；
[0107]
5)用6mol/l的盐酸溶液调4)步所得反应液的ph值5.0-7.0，加入相当于反应液3倍体积的95％乙醇，搅拌均匀，过滤、洗涤，取cmp醇析物；
[0108]
6)cmp醇析物在60℃干燥4h后，105℃干燥2h，得cmp粗制品37.5kg；
[0109]
7)将7.5kgcmp粗制品分散于250l双蒸水，加入6mol/l的氢氧化钠溶液调ph至10.0-13.0；加入1.25l浓度为30％的h2o2溶液，15℃脱色反应36h，去除有色杂质；加入6mol/l的盐酸溶液调ph值6.0，3000转/分离心分离30min，取滤液，滤液用dh-uf中空纤维超滤器滤除分子量0.7
×
104以下的cmp，以及微量的氯化钠、氯乙酸钠与羟乙酸钠等杂质后，滤液中加入3倍滤液体积的95％乙醇，进行醇析，过滤或离心，取cmp醇析物在60℃干燥4h后，105℃干燥2h，粉碎，得6.0kg羧甲基取代度1.0的cmp纯品：
[0110]
s2、将cmp纯品粉碎，过60目筛，加入160份水，将cmp和其他药材全部浸入水中，充分搅拌，浸泡60分钟。加热提取，保持沸腾加热1h，过滤得提取液，将滤渣中继续加120份水量，保持加热50分钟，过滤得提取液，继续加入100份水，保持100℃沸腾状态下加热40分钟，过滤残渣，取其提取液(共提取三次),过滤200目筛网。
[0111]
s3、利用加热至沸腾挥发，浓缩至40份水量。加入2.4％甜蜜素，0.4％阿斯巴甜，0.24％柠檬酸，最终分装成20份。
[0112]
实施例4
[0113]
本发明的组合物由下述重量份的组分制得：
[0114][0115][0116]
本发明的组合物的制备方法，包括下述步骤：
[0117]
s1、将茯苓75kg用中药破碎机进行粗粉碎至10-200目，得到茯苓粗粉，称取所需量的茯苓粗粉；
[0118]
1)茯苓粗粉投入到浸泡罐中，泵入400l水，搅拌均匀，浸泡12h；
[0119]
2)将400l浓度为2.25mol/l的氢氧化钠溶液缓慢泵入浸泡罐中，搅拌反应1h，过滤，取滤液；
[0120]
3)在中和罐中投入向300l浓度为5.3mol/l的氯乙酸溶液后，再缓慢加入300l浓度
为6.25mol/l的氢氧化钠溶液，搅拌至反应充分，冷却至室温；
[0121]
4)将3)步反应液泵入2)步所得滤液中，充分混匀后，缓缓升温至75℃，恒温反应2.5h；
[0122]
5)用6mol/l的盐酸溶液调4)步所得反应液的ph值5.0-7.0，加入相当于反应液3倍体积的95％乙醇，搅拌均匀，过滤、洗涤，取cmp醇析物；
[0123]
6)cmp醇析物在60℃干燥4h后，105℃干燥2h，得cmp粗制品37.5kg；
[0124]
7)将7.5kgcmp粗制品分散于250l双蒸水，加入6mol/l的氢氧化钠溶液调ph至10.0-13.0；加入1.25l浓度为30％的h2o2溶液，15℃脱色反应36h，去除有色杂质；加入6mol/l的盐酸溶液调ph值6.0，3000转/分离心分离30min，取滤液，滤液用dh-uf中空纤维超滤器滤除分子量0.7
×
104以下的cmp，以及微量的氯化钠、氯乙酸钠与羟乙酸钠等杂质后，滤液中加入3倍滤液体积的95％乙醇，进行醇析，过滤或离心，取cmp醇析物在60℃干燥4h后，105℃干燥2h，粉碎，得6.0kg羧甲基取代度1.0的cmp纯品：
[0125]
s2、将cmp纯品粉碎，过60目筛，加入160份水，将cmp和其他药材全部浸入水中，充分搅拌，浸泡60分钟。加热提取，保持沸腾加热1h，过滤得提取液，将滤渣中继续加120份水量，保持加热50分钟，过滤得提取液，继续加入100份水，保持100℃沸腾状态下加热40分钟，过滤残渣，取其提取液(共提取三次),过滤200目筛网。
[0126]
s3、将提取液继续浓缩至30份后，加入8份混合糊精，干燥成干膏后粉碎；
[0127]
s4、添加干膏粉重量3倍的葡萄糖搅拌混匀，与干膏粉搅拌混匀；
[0128]
s5、调味后的干膏粉再次添加8份混合糊精获得混合物，取20份混合物和60％～80％纯度的乙醇溶液，采用湿法混合制粒机制粒；按每袋10g规格分袋包装。
[0129]
试验例1功效对比试验
[0130]
1、试验样本
[0131]
选取年龄40-60岁的亚健康志愿者40例，受试患者1个月内未服用抗生素、微生态饮品或保健药者。将40例患者随机分为试验组1(20例)和试验组2(20例)。实验组和对照组在年龄、性别、病程及病情等方面无显著性差异(p》0.05)。
[0132]
2、实验方法
[0133]
试验组1每日服用实施例2的组合物，试验组2每日服用本发明实施例4的组合物，用量为2次/日，每次10g。连续服用14天。试验期间，受试患者正常饮食。于试验开始前6天和服用组合物14天后分别检测受试者的临床症状。
[0134]
3、实验结果
[0135]
疗效标准。显效：大部分症状消失，生活质量基本维持，主要检查指标复查基本正常；有效：各种症状和阳性体征与治疗前比较有好转，主要检查指标复查有改善；无效：和治疗前比较各方面均无进步。
[0136]
数据以均数
±
标准差(x
±
s)表示，计数资料采用x2检验，等级资料采用ridit分析，计量资料采用t检验。结果见表1。
[0137]
表1
[0138][0139]
注：*p《0.01
[0140]
具体典型病例如下：
[0141]
1、中方县谢某某，男45岁，亚症状腰酸易疲劳，服用十五天后皆有好转。
[0142]
2、怀化市张某，女32岁，症状腰酸，易疲劳，精力不足，服用十日后皆有好转。
[0143]
3、溆浦县邓某某，30岁，症状腰酸，久站易疲劳，精神不振，服用十四日后皆有好转。
[0144]
4、芷江县钟某，50岁，症状腰酸，夜尿频多，易健忘，有时四肢无力，服用二十日后皆有好转。
[0145]
5、中方县王某，28岁，症状腰酸少精，易疲劳，易健忘，体力不足，服用八日后以上皆有好转。
[0146]
以上对本发明具体实施方式的描述并不限制本发明，本领域技术人员可以根据本发明作出各种改变或变形，只要不脱离本发明的精神，均应属于本发明权利要求保护的范围。