一种杜仲组合物、制备方法及其应用与流程

本发明属于治疗心血管领域，具体涉及一种杜仲组合物、制备方法及其应用。
背景技术：
：高血压，也称血压升高，是血管持续受到较高压力时出现的，一种疾病。心脏每一次收缩，会将血液压送进血管，并通过血管将血液输送至全身，心脏压送血液推挤血管壁(动脉)所产生的压力即为血压。血压越高，心脏压送血液所用的力就越大。正常成年人的心脏收缩时，血压值(收缩压)约为120毫米汞柱，心脏舒张时，血压值(舒张压)约为80毫米汞柱。当收缩压持续大于或等于140毫米汞柱、舒张压持续大于或等于90毫米汞柱时，就视为血压升高，即高血压。大多数高血压患者并无明显症状，因此高血压也被称为“无声的杀手”。其主要原因在于高血压并不会直接导致严重的身体不适，主要通过并发症如中风、心梗、肾衰等，对人体健康产生威胁，且血压越高，心脏、大脑及肾脏等主要器官的血管受到损害的风险就越大，严重时还会导致死亡。目前，治疗高血压的药物主要分为利尿剂、β受体阻滞剂、钙拮抗剂、acei、arb、α-受体阻滞剂等，这些药物对高血压的调节具有单一性，仅仅通过个别靶点进行，只能暂时缓解血压升高带来的不适，需长期服药，无法根治高血压，且具有一定的耐药性，导致高血压患者群体仍处于不断扩大的趋势。因此急需寻找一种可以多靶点整体调节机体血液循环系统，达到降血压效果的药物。中医认为：脾胃为后天之本，气血生化之源，气为血之帅，血为气之母，气血运行需要气的推动和血的滋养。中药通过多靶点调节，降压的同时还可改变代谢异常等，具有独特的疗效优势，对防治高血压病有很大潜力。现代药理研究和临床研究均表明，不少中药及中成药如野菊花和牛黄降压丸有明显降压作用，但实际临床应用仍较少，市场占有量小，其主要原因可能是中药治疗高血压的优势及潜能未充分发挥。杜仲(eucommiaulmoidesoliv.)，为落叶乔木，属松科松属植物；花单性，雌雄异株，与叶同时开放，或先叶开放，生于一年生枝基部苞片的腋内，有花柄，无花被；雄花有雄蕊6～10枚，雌花有一裸露而延长的子房，子房1室，顶端有2叉状花柱，内有种子1粒；花期4～5月；果期9月。杜仲中的化学成分主要有黄酮类、木脂素类、环烯醚萜类、酚酸类、萜类和甾体类、多糖类等，具有降压、调节血脂、降血糖、抗炎、肝保护、抗肿瘤等药理作用，杜仲雄花中主要含有黄酮类等活性成分，杜仲籽油富含多种不饱和脂肪酸，主要包括亚油酸、油酸、亚麻酸、棕榈酸和硬脂酸等活性成分，具有增强记忆、镇痛、抗疲劳、抗衰老、抗肿瘤和调节免疫功能等多重功效。杜仲是我国特有药材和木本油料树种，属于国家二级珍贵保护树种，因此需更充分的利用植物资源，本发明通过对原料组分的合理配伍，联合制备方法的创新研究，充分地提取活性成分，用最小的资源发挥其最大的功效。中国发明专利cn103356731b公开一种新型血塞通片，其有效成分包括重量份的杜仲提取物1-10份和三七总皂苷1-30份。所述组合物还包括药学可接受的助剂100-500份，所述助剂包括崩解剂、稳定剂、赋形剂、润滑剂、粘合剂中的一种或多种。该发明治疗高血压、头晕目眩、脑路瘀阻，中风偏瘫，筋骨萎软、心脉瘀阻，胸痹心痛，脑血管病后遗症，冠心病心绞痛等疾病中具有良好的效果。该组合物采用三七总皂苷和杜仲提取物来治疗心血管疾病，对杜仲的利用率较低，且其同时治疗高血压、高血脂和改善机体微循环的效果有待进一步提高。中国发明专利cn103768129b公开了一种预防或治疗高血压的药物组合物，该药物组合物含有杜仲和槲寄生。该药物组合物对自发性高血压大鼠有降压和稳压效果，但是对机体改善微循环的作用并不明显。因此，需要加强对珍贵树种杜仲充分有效地利用开发，研究一种配伍合理，可以整体上改善机体微循环达到治疗心血管疾病的中药组合物。技术实现要素：为克服现有技术的不足，本发明提供一种治疗高血压的杜仲组合物，该组合物可以同时高效治疗高血压和高血脂，改善微循环；其制备方法简单高效、有效成分提取完全，杂质量少。本发明的目的是通过以下技术方案予以实现的：一种治疗高血压高血脂的杜仲组合物，所述组合物的原料包括如下组分：杜仲雄花、杜仲雌花、杜仲皮和杜仲籽油。优选地，所述组合物的原料包括如下重量份数的组分：杜仲雄花5-15份、杜仲雌花5-10份、杜仲皮5-10份和杜仲籽油1-5份。优选地，所述组合物的原料包括如下重量份数的组分：杜仲5-10份、杜仲雌花5-8份、杜仲皮5-8份和杜仲籽油3-5份。本发明的另一目的是上述组合物的制备方法包括如下步骤：(1)将杜仲皮、杜仲雄花和杜仲雌花分别粉碎，过筛，备用；(2)将杜仲皮加水进行水蒸气蒸馏法提取，得挥发油、滤液1和滤渣1，在滤渣1中加入含丙酮的乙醇水溶液中浸提，得滤液2和滤渣2；(3)将杜仲雄花、杜仲雌花和滤渣2混合，加入水中，再加纤维素酶和果胶酶进行酶解，过滤，得滤渣和酶解液；(4)将滤液1、滤液2和酶解液混合，加入果胶酶和菠萝蛋白酶，酶解，95-100℃将酶灭活，浓缩、干燥得干膏粉；(5)将挥发油和杜仲籽油混合，采用β-环糊精包合，得包合物；(6)将干膏粉和包合物混合均匀即得。优选地，步骤(1)中粉碎过筛的目数为10-24目，步骤(2)中所述乙醇溶液中还加入了丙酮，步骤(2)中所述水与杜仲皮的质量比为6-10：1，所述提取时间为2-4h。优选地，所述乙醇、丙酮与水的质量比为30-50:10-20:30-60；所述浸提的温度为40-50℃，所述浸提时间为2-3h；优选地，所述含丙酮的乙醇溶液与滤渣1的质量比为5-8：1。优选地，步骤(3)中所述加入水的质量与杜仲雄花、杜仲雌花和滤渣2总质量的比为6-10:1。优选地，步骤(3)中所述纤维素酶和果胶酶的总质量为杜仲雄花、杜仲雌花和滤渣2总质量的0.2-0.5％；所述纤维素酶和果胶酶的质量比为1:2-5；优选地，步骤(3)中所述加入水的质量与杜仲雄花、杜仲雌花和滤渣2总质量的比为6-10:1。优选地，步骤(3)中所述酶解的温度为40-50℃，所述酶解的时间为1.5-3h；所述酶解的ph为4.0-5.0。优选地，步骤(4)中所述果胶酶和菠萝蛋白酶的总质量为滤液1、滤液2和酶解液总质量的0.5-1％，果胶酶和菠萝蛋白酶的质量比为1:2-3，所述酶解温度为35-45℃，所述酶解的时间为1-2h；所述酶解的ph为5.0-6.0；优选地，步骤(5)中所述挥发油、杜仲籽油的混合物与β-环糊精的质量比为1：4-6，所述包合的时间为1-2h，所述包合的温度为45-55℃。本发明的再一目的是提供上述的组合物在制备抗高血压、高血脂或改善机体微循环方面的产品中的应用。本发明的有益效果(1)本发明采用杜仲雄花、杜仲雌花、杜仲皮和杜仲籽油相配伍，采用科学的配比，达到了对高血压和高血脂均具有明显疗效的作用，且相比化学药，无毒副作用，且有效成分种类多，可通过多靶点整体调节血液系统，不会出现耐药现象。(2)本发明对组合物的制备方法做了进一步研究，通过采用特定的提取溶剂、特定的温度、特定的酶进行提取，可以充分提取活性成分，对与杜仲生长周期长的珍贵植物，可以实现最大化的利用。(3)本发明的采用特定配比的果胶酶和菠萝蛋白酶，不仅可将影响产品溶解性的大分子蛋白质分解槽具有功效作用的小分子肽，还可将影响色泽、溶解性、口感的鞣质、果胶等去除，还可以最大限度的保留具有功效作用的杜仲多糖。本申请还进一步对包合的工艺进行了大量研究，发现β-环糊精与挥发油的比例至关重要，其次是包合温度和包合时间，在β-环糊精与挥发油的比例小于4：1时包合率低，直接影响药效的发挥。附图说明图1-1为实施例1组给药前大鼠右手掌血液灌流激光多普勒体表皮肤线扫图；图1-2为实施例1组给药后大鼠右手掌血液灌流激光多普勒体表皮肤线扫图；图2-1为实施例3组给药前大鼠小肠微循环血液灌流激光多普勒线扫图；图2-2为实施例3组给药后大鼠小肠微循环血液灌流激光多普勒线扫图；图3-1为实施例3组给药前大鼠脾脏、胰脏、肾脏微循环血液灌流激光多普勒线扫图；图3-2为实施例3组给药后大鼠脾脏、胰脏、肾脏微循环血液灌流激光多普勒线扫图；图4-1为实施例3组给药后大鼠睾丸微循环血液灌流激光多普勒线扫图；图4-2为实施例3组给药后大鼠睾丸微循环血液灌流激光多普勒线扫图；图5为实施例3组和对比例1组大鼠小肠、脾脏、胰脏、肾脏、睾丸微血管血流量结果；其中实验组为实施例3组，对照组为对比例1组。具体实施方式下面结合实施例对本发明技术方案作进一步说明。以下实施例杜仲雌花采收杜仲雌花完全开放的成熟雌花。实施例1本实施例治疗高血压高血脂的杜仲组合物，其原料组成为杜仲雄花5份、杜仲雌花5份、杜仲皮5份和杜仲籽油1份。其组合物的制备方法如下：(1)将杜仲雄花、杜仲雌花和杜仲皮分别粉碎，过10目筛，备用；(2)将杜仲皮加6倍量的水进行水蒸气蒸馏法提取2h，得挥发油、滤液1和滤渣1，在滤渣1中加入8倍量含丙酮的乙醇水溶液中40℃下浸提2h，得滤液2和滤渣2；所述乙醇：丙酮：水为30:10:60；(3)将杜仲雄花、杜仲雌花和滤渣2混合，加入6倍量的水中，用纤维素酶和果胶酶以质量比为1:2进行酶解3h，调ph为4.0，酶解的温度为40℃，过滤，得酶解液；其中纤维素酶和果胶酶的总质量为杜仲雄花、杜仲雌花和滤渣2总质量的0.2％；(4)将滤液1、滤液2和酶解液混合，加入果胶酶和菠萝蛋白酶(质量比为1:2)，酶解1h，调ph为5.0，酶解的温度为35℃，100℃将酶灭活，浓缩、干燥得干膏粉；其中果胶酶和菠萝蛋白酶的总质量为滤液1、滤液2和酶解液总质量的0.5％；(5)将β-环糊精加水制成浓度为0.08g/mlβ-环糊精溶液，将挥发油和杜仲籽油混合，加入β-环糊精溶液中，在45℃恒温下200r/min磁力搅拌2h，冷却，抽滤，将沉淀依次用1倍量的水和乙醇洗涤，干燥得包合物；其中β-环糊精与挥发油、杜仲籽油的混合物的质量比为6:1。(6)将干膏粉和包合物混合均匀即得。实施例2本实施例治疗高血压高血脂的杜仲组合物，其原料组成为杜仲雄花15份、杜仲雌花10份、杜仲皮10份和杜仲籽油5份。其组合物的制备方法如下：(1)将杜仲雄花、杜仲雌花和杜仲皮分别粉碎，过10目筛，备用；(2)将杜仲皮加10倍量的水进行水蒸气蒸馏法提取4h，得挥发油、滤液1和滤渣1，在滤渣1中加入5倍量含丙酮的乙醇水溶液中50℃下浸提3h，得滤液2和滤渣2；其中乙醇、丙酮与水的质量比为50:20:30；(3)将杜仲雄花、杜仲雌花和滤渣2混合，加入10倍量的水中，用纤维素酶和果胶酶以质量比为1:5进行酶解1.5h，调ph为5.0，酶解的温度为50℃，过滤，得酶解液；其中纤维素酶和果胶酶的总质量为杜仲雄花、杜仲雌花和滤渣2总质量的0.5％；(4)将滤液1、滤液2和酶解液混合，加入果胶酶和菠萝蛋白酶(质量比为1:3)，酶解2h，调ph为6.0，酶解的温度为45℃，95℃将酶灭活，浓缩、干燥得干膏粉；其中果胶酶和菠萝蛋白酶的总质量为滤液1、滤液2和酶解液总质量的1％；(5)将β-环糊精加水制成浓度为0.08g/mlβ-环糊精溶液，将挥发油和杜仲籽油混合，缓慢加入β-环糊精溶液中，在55℃恒温下200r/min磁力搅拌1h，冷却，抽滤，沉淀依次用1倍量的水、乙醇洗涤，干燥得包合物；其中β-环糊精与挥发油、杜仲籽油的混合物的质量比为4:1。(6)将干膏粉和包合物混合均匀即得。实施例3本实施例治疗高血压高血脂的杜仲组合物，其原料组成为杜仲雄花10份、杜仲雌花8份、杜仲皮8份和杜仲籽油3份。其组合物的制备方法如下：(1)将杜仲雄花、杜仲雌花和杜仲皮分别粉碎，过24目筛，备用；(2)将杜仲皮加8倍量的水进行水蒸气蒸馏法提取3h，得挥发油、滤液1和滤渣1，在滤渣1中加入6倍量含丙酮的乙醇水溶液中45℃浸提2.5h，得滤液2和滤渣2；其中乙醇、丙酮与水的质量比为40:15:45；(3)将杜仲雄花、杜仲雌花和滤渣2混合，加入水中，用纤维素酶和果胶酶以质量比为1:3进行酶解2h，调ph为4.0，酶解的温度为45℃，过滤，得酶解液；其中纤维素酶和果胶酶的总质量为杜仲雄花、杜仲雌花和滤渣2总质量的0.3％；(4)将滤液1、滤液2和酶解液混合，加入果胶酶和菠萝蛋白酶(质量比为1:2.5)，酶解1.5h，调ph为5.5，酶解的温度为45℃，100℃将酶灭活，浓缩、干燥得干膏粉；其中果胶酶和菠萝蛋白酶的总质量为滤液1、滤液2和酶解液总质量的0.8％；(5)将β-环糊精中加水制成浓度为0.08g/mlβ-环糊精溶液，将挥发油和杜仲籽油混合，缓慢加入β-环糊精溶液中，在50℃恒温下200r/min磁力搅拌1.5h，冷却，抽滤，沉淀依次用1倍量的水、乙醇洗涤，干燥得包合物；其中β-环糊精与挥发油和杜仲籽油的混合物的质量比为5:1。(6)将干膏粉和包合物混合均匀即得。对比例1与实施例3相比，其区别在于组合物组分的重量份数不同；本对比例治疗高血压高血脂的杜仲组合物，其原料组成为杜仲雄花16份、杜仲雌花1份、杜仲皮11份和杜仲籽油1份。其余与实施例3保持一致。对比例2与对比例3相比，其区别在于组合物组分的重量份数不同；本实施例治疗高血压高血脂的杜仲组合物，其原料组成为杜仲雄花3份、杜仲雌花12份、杜仲皮4份和杜仲籽油10份。其余与实施例3保持一致。对比例3与实施例3相比，其区别在于制备方法步骤(2)中加入的含丙酮的乙醇溶液中乙醇、丙酮与水体积比为15:40:45，其余与实施例3保持一致。对比例4与实施例3相比，其区别在于制备方法步骤(4)中用木瓜蛋白酶替代菠萝蛋白酶，其余与实施例3保持一致。对比例5与实施例3相比，其区别在于制备方法步骤(5)中，所述挥发油和杜仲籽油的混合物与β-环糊精的质量比为1：3，其余与实施例3保持一致。效果例1本发明杜仲组合物对shr大鼠的降压作用研究1.1目的：检测本发明组合物对shr大鼠的降压、降脂作用，及对皮肤(多部位)和内脏(肝叶、脾皮质、肾皮质、小肠、睾丸及胰腺微循环)的影响，并进行后期数据和图像的动态定量分析，探讨组合物降压恢复血管弹性效应中调控器官微循环的作用途径和有效机制。1.2药物：实施例1-3组、对比例1-5组制备的杜仲组合物；1.3动物分组及给药方式7-8周龄自发性高血压雄性大鼠(shr)90只，均购于北京维通利华实验动物技术有限公司，体重200±20g，标准饲料、自来水喂养于恒温25℃、恒湿55±5％动物实验室一周。将自发性高血压雄性大鼠随机分为模型组、实施例1组-实施例3组，对比例1组-对比例5组共9组，每组10只；1.4本发明组合物对shr大鼠的降血压作用的试验方法除模型组外，其余各组连续灌胃给药3周，一天一次，给药量/kg相当于15g生药量，给药开始前与末次给药后1h分别测定大鼠尾动脉血压(血压为多次测量，取平均值)，并采血测定血清中总甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白的水平。其中生药量为提取杜仲组合物所用原药材的总质量。血压监测使用无创血压仪softronbp2010a；moorvms双通道激光多普勒血流(ldf)检测系统(点扫)，moorldi激光多普勒血流成像系统(线扫)。1.5结果与分析(1)杜仲组合物对shr大鼠尾动脉平均动脉压的影响，结果见表1。表1各组大鼠平均动脉压情变化试验组大鼠数量(只)给药前(mmhg)给药后(mmhg)模型对照组10150.9±5.1158.2±4.3a实施例110149.5±3.6118.2±6.0b实施例210151.3±4.7119.6±5.2b实施例310150.1±7.8117.9±3.3b对比例110151.0±6.0126.5±2.8c对比例210149.3±3.9129.3±6.2c对比例310148.6±5.7133.7±2.1c对比例410150.1±2.4124.8±3.6c对比例510149.2±7.2137.4±3.9c注：同一列不同字母表示相应组之间具有统计学差异，p＜0.05。(2)杜仲组合物对shr大鼠血脂代谢的影响，结果见表2。表2杜仲组合物对shr大鼠血脂代谢的影响注：同一列不同字母表示相应组之间具有统计学差异，p＜0.05。(3)本发明杜仲组合物对大鼠体表皮肤微循环的影响对shr大鼠经末次给药后进行体表皮肤微循环研究，结果发现：1)经激光多普勒体表皮肤线扫测定，实施例1-3组大鼠血液灌流pu值明显增加(耳、手掌和脚掌)，实施例1组给药前后结果见图1-1和1-2。2)经激光多普勒皮肤点扫发现，实施例1-3组血流速度明显增加，而且流动的血细胞浓度下降有差异性；3)激光多普勒皮肤点扫结果小波分析显示，频率为内皮源性的微循环变化最为明显，实施例1-3组药物干预对微血管的自律性具有一定的效应。(4)本发明杜仲组合物对大鼠内脏微循环的影响对shr大鼠经实施例3组的组合物干预后进行内脏微循环研究，结果发现：1)经激光多普勒线扫测定，给药后大鼠小肠、胰脏、脾脏、肾脏和睾丸血液灌流pu值相比给药前均有显著性增加，实施例3组结果见图2-1，2-2，3-1，3-2，4-1和4-2。2)经激光多普勒点扫测定，实施例1-3组大鼠小肠、胰脏、脾脏、肾脏和睾丸微血管血流量较给药前有明显增加。血流速度也明显增加，而微血管中血细胞浓度则明显下降，提示药物干预后可以改善内脏器官微循环，瘀滞的血流变得畅通(以脾脏、肾脏、睾丸为例)。实施例3与对比例1组(对照组)大鼠小肠、胰脏、脾脏、肾脏和睾丸微血管血流量结果见图5。3)经激光多普勒内脏点扫小波分析显示，频率为内皮源性的微循环变化最为明显，药物干预对于内脏(小肠、脾脏、胰脏、肾脏和睾丸)微血管的自律性具有一定的效应。结果分析：本发明制得的杜仲组合物对高血压具有明显的治疗作用，与此同时还可以明显改善机体的脂质代谢；本发明杜仲组合物在有效调控大鼠血压的情况下，可以改善高血压大鼠的微循环，体现在耳、手掌及脚掌皮肤的微血管的流速较给药前明显增加，微血管血细胞浓度下降，微循环瘀滞的血流得以缓解。同自身给药前和对比例组给药后相比，实施例1-3在内脏器官小肠、脾脏、胰脏、肾脏和睾丸上的微血管的流速也明显增加，微血管血细胞浓度下降，微循环瘀滞的血流得以缓解。上述详细说明是针对本发明其中之一可行实施例的具体说明，该实施例并非用以限制本发明的专利范围，凡未脱离本发明所为的等效实施或变更，均应包含于本发明技术方案的范围内。当前第1页12