1.本发明涉及中药保健品技术领域，更具体地说，本发明涉及一种桑叶中药酵素饮料及其制备方法。
背景技术：
2.桑叶是药食同源植物资源，具有疏散风热，清肺润燥，清肝明目、降血压、降血脂和抗炎等功效。已有研究表明，桑叶含有黄酮、植物甾醇、氨基酸、多糖、生物碱、氨基酸等多种化学成分，其中黄酮对桑叶的功效至关重要。桑叶可制备成眼膜或眼膏，具有滋养肌肤，消除眼部疲劳和黑眼圈等保健功效；也可制成茶品酒品等饮料，具有改善视力，缓解眼花目赤，降火的效用。现有技术已尝试使用桑叶作为原料制备酵素，所得的酵素可以充分保留桑叶的有效成分，但桑叶中含有的很多药性成分对发酵微生物的生长具有很强的抑制作用，影响桑叶的发酵。
技术实现要素：
3.本发明的一个目的是克服现有技术的缺陷，提供一种桑叶中药酵素饮料，该饮料的原料中，使用桑叶作为主料，夏枯草、菊花、决明子作为副料，生地和麦冬作为佐料，岗梅作为辅料，这些原料制得的饮料能够带来清肝明目和降火的功效。
4.本发明的另一个目的是提供一种桑叶中药酵素饮料的制备方法，该方法对原料进行分别发酵，降低原料中黄酮等杀菌成分协同对发酵的拮抗作用，使得发酵快速高效进行，且每4～5天就将发酵液排出一半，并补入新的发酵菌营养液，降低发酵液中杀菌成分的浓度，减轻对发酵菌的拮抗作用，且发酵液中始终保持部分繁殖期以上的菌体，部分繁殖期及以下的菌体，不但保证发酵的稳定，且能够保证发酵的活性，促使原料发酵分解更彻底，总黄酮得率更高。
5.为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种桑叶中药酵素饮料，包括以下重量份的原料：
6.桑叶14500～15500、岗梅1400～1600、夏枯草900～1100、菊花900～1100、决明子1400～1600、生地1400～1600、麦冬1400～1600、槐花1400～1600。
7.上述技术方案中，以具有清肝明目、抗炎降火，疏散风热的桑叶作为主料，大剂量的桑叶保证饮料清肝明目降火的效用，提高饮料的效果。
8.同时使用夏枯草、菊花、决明子作为副料进行药效补充，夏枯草有清火明目之功效，能治目赤肿痛、头痛等，清热去肝火；菊花散风清热，平肝明目，清热解毒；决明子清肝明目，用于目赤涩痛，羞明多泪，头痛眩晕，目暗不明；这些副料形成对桑叶药效的补充和增强，清肝明目和降火的效果极佳。
9.使用生地和麦冬作为佐料，生地性凉，味甘苦，具有滋阴补肾、养血补血、强心利尿的功效；麦冬养阴生津；两者合用能够减轻主料和副料对心肾造成的伤害，同时利尿加速体液废物排出，调节体液平衡。
10.使用岗梅作为辅料，岗梅有扩张管状血管、增加冠脉流量和加强心收缩力的作用，加快血液循环，药效成分迅速送达相应位置，加快饮料发挥效用。
11.桑叶中药酵素饮料的制备方法，使用上述原料，包括：
12.步骤一、将原料消毒；
13.步骤二、将消毒原料分别与发酵菌初始混合后进行独立发酵，发酵持续25天以上，发酵过程中，每4～5天将发酵液排出二分之一并回注同等体积的发酵菌营养液，收集每次排出的发酵液；
14.步骤三、将收集的发酵液进行过滤和净化后，混合调节口感和添加辅料得到所述桑叶中药酵素饮料。
15.上述技术方案对原料进行分别发酵，降低原料中杀菌成分协同对发酵的拮抗作用，使得发酵快速高效进行，且每4～5天就将发酵液排出一半，并补入新的发酵菌营养液，降低发酵液中杀菌成分的浓度，减轻对发酵菌的拮抗作用，且发酵液中始终保持部分繁殖期以上的菌体，部分繁殖期及以下的菌体，不但保证发酵的稳定，且能够保证发酵的活性，促使原料发酵分解更彻底，提高了有效成分黄酮的溶出率。
16.优选的是，所述的桑叶中药酵素饮料的制备方法中，消毒原料与发酵菌初始混合时，加入4％蛋白胨，4％葡萄糖，发酵菌接种量2
×
107cfu/ml以上；发酵营养液中葡萄糖含量为2～3％，发酵菌接种量在1
×
107cfu/ml以上。
17.上述技术方案中，初始混合时加入大剂量的蛋白胨、葡萄糖和发酵菌，保证发酵菌充足的能量供给，发酵启动迅速，在后续发酵过程中补入葡萄糖和发酵菌保证发酵持续性。
18.优选的是，所述的桑叶中药酵素饮料的制备方法中，所述发酵菌为植物乳杆菌和酵母菌，两种菌种保证原料发酵彻底。
19.优选的是，所述的桑叶中药酵素饮料的制备方法中，新摘的桑叶24小时内清洗干净，减少桑叶内部水分丧失，使用微波加热技术对桑叶进行加热处理，使得桑叶内部水分快速暴沸而破坏桑叶结构，然后再进行消毒处理。
20.具体来说，将新鲜的桑叶内部包含汁液水分，置于高功率微波加热器内，高功率微波加热器的功率设置在3000w以上，在高功率微波作用下，桑叶内部汁液被快速加热而爆沸，汁液汽化或膨胀而破坏桑叶的纤维结构，便于成分释放，以及后面发酵菌进入发酵。为保证能够快速加热，可以尽量将桑叶摊薄，也可以在加热过程中不断振动，保证加热均匀。
21.优选的是，所述的桑叶中药酵素饮料的制备方法中，原料的消毒方法为高温灭菌或消毒液灭菌。
22.优选的是，所述的桑叶中药酵素饮料的制备方法中，微波加热处理过程产生的液体和高温灭菌过程产生的液体一同与桑叶进行发酵。
23.优选的是，所述的桑叶中药酵素饮料的制备方法中，各原料的发酵温度为28℃，ph为5。
24.优选的是，所述的桑叶中药酵素饮料的制备方法中，将第二次排出的发酵液进行滤菌膜过滤，收集过滤出来的菌体，将菌种接种至培养基中进行扩大培养，再用滤菌膜过滤得到优培菌种，将优培菌种加入至发酵菌营养液中。
25.第二次排出的发酵液中有效成分含量位于较高水平，且菌种已经经历10天左右的培育，对有效成分抗菌抵抗能够较高，因此选择该批次的发酵液提取进行扩大培养，得到的
菌体对桑叶和原料发酵作用较好。
26.本发明至少包括以下有益效果：
27.本发明的饮料以具有清肝明目、抗炎降火，疏散风热的桑叶作为主料，大剂量的桑叶保证饮料清肝明目降火的效用，提高饮料的效果。同时使用夏枯草、菊花、决明子作为辅料进行药效补充，夏枯草有清火明目之功效，能治目赤肿痛、头痛等，清热去肝火；菊花散风清热，平肝明目，清热解毒；决明子清肝明目，用于目赤涩痛，羞明多泪，头痛眩晕，目暗不明；这些副料形成对桑叶药效的补充和增强，清肝明目和降火的效果极佳。使用生地和麦冬作为佐料，生地性凉，味甘苦，具有滋阴补肾、养血补血、强心利尿的功效；麦冬养阴生津；两者合用能够减轻主料和副料对心肾造成的伤害，同时利尿加速体液废物排出，调节体液平衡。使用岗梅作为辅药，岗梅有扩张管状血管、增加冠脉流量和加强心收缩力的作用，加快血液循环，药效成分迅速送达相应位置，加快饮料发挥效用。
28.本发明的制备方法对原料进行分别发酵，降低原料中杀菌成分协同对发酵的拮抗作用，使得发酵快速高效进行，且每4～5天就将发酵液排出一半，并补入新的发酵菌营养液，降低发酵液中杀菌成分的浓度，减轻对发酵菌的拮抗作用，且发酵液中始终保持部分繁殖期以上的菌体，部分繁殖期及以下的菌体，不但保证发酵的稳定，且能够保证发酵的活性，促使原料发酵分解更彻底，有效成分黄酮的溶出率提高。
29.本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
具体实施方式
30.下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
31.需要说明的是，下述实施方案中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
32.实施例1
33.一种桑叶中药酵素饮料，包括以下重量份的原料：
34.桑叶15000g、岗梅1500g、夏枯草1000g、菊花1000g、决明子1500g、生地1500g、麦冬1500g、槐花1500g。
35.实施例2
36.一种桑叶中药酵素饮料，包括以下重量份的原料：
37.桑叶14500g、岗梅1400g、夏枯草900g、菊花900g、决明子1400g、生地1400g、麦冬1400g、槐花1400g。
38.实施例3
39.一种桑叶中药酵素饮料，包括以下重量份的原料：
40.桑叶15500g、岗梅1600g、夏枯草1100g、菊花1100g、决明子1600g、生地1600g、麦冬1600g、槐花1600g。
41.实施4
42.一种桑叶中药酵素饮料的制备方法，使用实施例1的原料，包括：
43.步骤一、将桑叶、岗梅、夏枯草、菊花、决明子、生地、麦冬、槐花分别清洗干净后，经
120℃高温快速灭菌消毒10分钟得到消毒原料，消毒过程流出的药液一同收集为消毒原料。
44.步骤二、将消毒原料分别与发酵菌初始混合后，加入原料重量4％的蛋白胨，原料重量4％的葡萄糖，以及加入与原料等量的蒸馏水，然后进行独立发酵，发酵持续25天，发酵过程中，每5天将发酵液排出二分之一并回注同等体积的发酵菌营养液，收集每次排出的发酵液；发酵菌选用酵母膏，酵母膏的加入量为原料重量的1％，发酵温度为28℃，发酵初始ph为5；发酵菌营养液中，酵母膏含量1％，葡萄糖含量为2％，余量为蒸馏水。
45.步骤三、发酵25天后，发酵原料中液体挤出，然后将收集到的所有发酵液进行杂质过滤和净化后，混合，调节口感和添加防腐辅料得到所述桑叶中药酵素饮料。
46.实施例5
47.一种桑叶中药酵素饮料的制备方法，使用实施例1的原料，包括：
48.步骤一、将桑叶、岗梅、夏枯草、菊花、决明子、生地、麦冬、槐花分别清洗干净后，经120℃高温快速灭菌消毒10分钟得到消毒原料，消毒过程流出的药液一同收集为消毒原料。
49.步骤二、将消毒原料分别与发酵菌初始混合后，加入原料重量4％的蛋白胨，原料重量4％的葡萄糖，以及加入与原料等量的蒸馏水，然后进行独立发酵，发酵持续25天，发酵过程中，每5天将发酵液排出二分之一并回注同等体积的发酵菌营养液，收集每次排出的发酵液；发酵菌选用植物乳杆菌，植物乳杆菌的接种量为2
×
107cfu/ml，发酵温度为28℃，发酵初始ph为5；发酵菌营养液中，葡萄糖含量为2％，发酵菌接种量为1
×
107cfu/ml，余量为蒸馏水。
50.步骤三、发酵25天后，发酵原料中液体挤出，然后将收集到的所有发酵液进行杂质过滤和净化后，混合，调节口感和添加防腐辅料得到所述桑叶中药酵素饮料。
51.实施例6
52.一种桑叶中药酵素饮料的制备方法，使用实施例1的原料，包括：
53.步骤一、将桑叶、岗梅、夏枯草、菊花、决明子、生地、麦冬、槐花分别清洗干净后，经120℃高温快速灭菌消毒10分钟得到消毒原料，消毒过程流出的药液一同收集为消毒原料。
54.步骤二、将消毒原料分别与发酵菌初始混合后，加入原料重量4％的蛋白胨，原料重量4％的葡萄糖，以及加入与原料等量的蒸馏水，然后进行独立发酵，发酵持续25天，发酵过程中，每5天将发酵液排出二分之一并回注同等体积的发酵菌营养液，收集每次排出的发酵液；发酵菌选用酵母膏和植物乳杆菌，酵母膏的加入量为原料重量的1％，植物乳杆菌的接种量为2
×
107cfu/ml，发酵温度为28℃，发酵初始ph为5；发酵菌营养液中，葡萄糖含量为2％，酵母膏含量1％，酵母膏的发酵菌接种量为1
×
107cfu/ml，余量为蒸馏水。
55.步骤三、发酵25天后，发酵原料中液体挤出，然后将收集到的所有发酵液进行杂质过滤和净化后，混合，调节口感和添加防腐辅料得到所述桑叶中药酵素饮料。
56.实施例7
57.一种桑叶中药酵素饮料的制备方法，使用实施例1的原料，包括：
58.步骤一、将桑叶新摘的桑叶24小时内清洗干净，置于高功率微波加热器内处理90秒，高功率微波加热器的功率设置在3000w，得到桑叶原料。
59.将夏枯草、菊花、决明子、生地、麦冬、槐花分别清洗干净后，经120℃高温快速灭菌消毒10分钟得到消毒原料，桑叶原料也经120℃高温快速消毒得到消毒原料，消毒过程流出的药液一同收集为消毒原料。
60.步骤二、将消毒原料分别与发酵菌初始混合后，加入原料重量4％的蛋白胨，原料重量4％的葡萄糖，以及加入与原料等量的蒸馏水，然后进行独立发酵，发酵持续25天，发酵过程中，每5天将发酵液排出二分之一并回注同等体积的发酵菌营养液，收集每次排出的发酵液；发酵菌选用酵母膏和植物乳杆菌，酵母膏的加入量为原料重量的1％，植物乳杆菌的接种量为2
×
107cfu/ml，发酵温度为28℃，发酵初始ph为5；发酵菌营养液中，葡萄糖含量为2％，酵母膏含量1％，酵母膏的发酵菌接种量为1
×
107cfu/ml，余量为蒸馏水。
61.步骤三、发酵25天后，发酵原料中液体挤出，然后将收集到的所有发酵液进行杂质过滤和净化后，混合，调节口感和添加防腐辅料得到所述桑叶中药酵素饮料。
62.实施例8
63.一种桑叶中药酵素饮料的制备方法，使用实施例1的原料，包括：
64.步骤一、将桑叶新摘的桑叶24小时内清洗干净，置于高功率微波加热器内处理90秒，高功率微波加热器的功率设置在3000w，得到桑叶原料。
65.将夏枯草、菊花、决明子、生地、麦冬、槐花分别清洗干净后，经120℃高温快速灭菌消毒10分钟得到消毒原料，桑叶原料也经120℃高温快速消毒得到消毒原料，消毒过程流出的药液一同收集为消毒原料。
66.步骤二、将消毒原料分别与发酵菌初始混合后，加入原料重量4％的蛋白胨，原料重量4％的葡萄糖，以及加入与原料等量的蒸馏水，然后进行独立发酵，发酵持续25天，发酵过程中，每5天将发酵液排出二分之一并回注同等体积的发酵菌营养液，收集每次排出的发酵液；发酵菌选用酵母膏和植物乳杆菌，酵母膏的加入量为原料重量的1％，植物乳杆菌的接种量为2
×
107cfu/ml，发酵温度为28℃，发酵初始ph为5。
67.发酵菌营养液中，葡萄糖含量为2％，酵母膏含量1％，酵母膏的发酵菌接种量为1
×
107cfu/ml，余量为蒸馏水。
68.将第二次排出的发酵液进行滤菌膜过滤，收集过滤出来的菌体，将菌种接种至培养基中进行扩大培养5天，再用滤菌膜过滤得到优培菌种，将优培菌种分成3等份，3份优培菌种分别加入后续的发酵菌营养液中，每一份优培菌种对应一份发酵营养液；培养基的原料配比是去离子水：蛋白胨：葡萄糖：氯化钠＝1000ml:10g:10g:10g。
69.步骤三、发酵25天后，发酵原料中液体挤出，然后将收集到的所有发酵液进行杂质过滤和净化后，混合，调节口感和添加防腐辅料得到所述桑叶中药酵素饮料。
70.对比例1
71.使用实施例1的原料，将原料清洗干净，所有原料和等量的水一同加入至煎药锅炉中进行常规熬制12小时，得到药液作为饮料。
72.对比例2
73.使用实施例1的原料。
74.将桑叶、岗梅、夏枯草、菊花、决明子、生地、麦冬、槐花清洗干净后，一同经120℃高温快速灭菌消毒10分钟得到消毒原料，消毒过程流出的药液一同收集为消毒原料。
75.将所有消毒原料一同与发酵菌初始混合后，加入原料重量4％的蛋白胨，原料重量4％的葡萄糖，以及加入与原料等量的蒸馏水，然后进行共同发酵，发酵持续25天；发酵菌选用酵母膏和植物乳杆菌，酵母膏的加入量为原料重量的1％，植物乳杆菌的接种量为2
×
107cfu/ml，发酵温度为28℃，发酵初始ph为5。
76.发酵25天后，发酵原料中液体挤出，然后将收集到的发酵液进行杂质过滤和净化后，调节口感和添加防腐辅料得到桑叶饮料。
77.对实施例1～5和对比例1～2所得的饮料分别旋转蒸发定容至500毫升，以芦丁为对照品，hplc法进行黄酮量的测定，结果如下表：
78.表1
79.样品黄酮量(mg/毫升)实施例410.78实施例510.69实施例611.05实施例711.63实施例811.82对比例110.05对比例210.21
80.从上表1可以看到，实施例4～8和对比例1～2的样品测得的黄酮量均在10mg/毫升以上，表明本案的原料无论使用常规的煎煮还是本案的改进方法，制得的饮料中有效成分黄酮均在较高水平，效果有保障。
81.实施例4～8均使用了分开发酵、发酵液排出和回注的技术手段，相比对比例1和2的传统的煎煮和混合发酵，提取效果提升明显。
82.实施例4和6数据对比可以看到，无论是使用酵母菌还是植物乳杆菌，提取效果都很好。
83.尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的实施例。