一种降低胆固醇的益生菌及其制备方法与流程

1.本发明涉及微生物制剂技术领域，具体涉及一种降低胆固醇的益生菌及其制备方法。


背景技术：

2.冠心病、心肌梗塞、脑梗塞等心脑血管疾病危害中老年人的健康甚至生命，研究发现降低血液中的低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)水平，提高血液中的高密度脂蛋白胆固醇(hdl-c)水平对心脑血管疾病有的防治有着积极作用。
3.目前，对降低胆固醇，尤其是控制低密度脂蛋白胆固醇最常用的药物就是他汀类药物，然而，有些人不能耐受他汀类药物的副作用，或是使用他汀类药物之后，达不到理想的降胆固醇效果，此外，他汀类药物对降低低密度脂蛋白胆固醇时，降低到一定程度时用药量会较大，会对患者造成额外的身体负担。
4.近年来，研究发现，益生菌对降低血脂和胆固醇方面也有一定功效，一些益生菌的保健品被用来预防或缓解心脑血管疾病，然而，存在口服某些品牌益生菌保健品时，进入肠道内的有效益生菌较少，较难起到降低血脂和胆固醇的效果，或者大量益生菌突然进入肠道内，集中释放，胆固醇含量短时间内突然降低，短时间内胆固醇含量反弹性增高，大量益生菌集中释放消耗大量益生菌赖以生存的营养物质，造成其他种类益生菌含量降低，肠道内菌落失衡，产生腹泻等不适症状。


技术实现要素：

5.本发明的目的在于提供一种降低胆固醇的益生菌及其制备方法，制得的益生菌为多层包覆的缓释微球，不仅起到缓释作用，还可以保证益生菌在进入肠道内的活性和营养均衡，充分降低胆固醇的作用，作用温和，不伤肠道。
6.为了达到上述目的，本发明提供如下技术方案：
7.一种降低胆固醇的益生菌，包括以下质量份数的原料：
[0008][0009]
所述降低胆固醇的益生菌的制备方法，包括以下步骤：
[0010]
步骤一：取质量份数的牛血清蛋白加入到20倍牛血清蛋白质量的去离子水中充分溶解，再加入抑制剂，以300～600r/min的速度搅拌，边搅拌边匀速加入质量份数的无水乙醇，持续搅拌3～5h后，然后加入质量份数的壳聚糖，继续搅拌1～2h，冷冻干燥得到抑制剂微球；
[0011]
步骤二：取质量份数的复合益生菌与步骤一中得到的抑制剂微球充分混合均匀，加入质量份数的多甘烷醇，超声分散均匀，然后加入质量份数的海藻酸钠溶液，再次超声分散均匀，得到混合液，转移至静电纺丝设备中，静电喷雾制备得到乳浊液，高速离心，冷冻干燥得到益生菌微球；
[0012]
步骤三：将步骤三中得到的益生菌微球与质量份数的益生元、辅料混合均匀，捏制成型，干燥后得到降低胆固醇的益生菌。
[0013]
所述复合益生菌为嗜酸乳杆菌、长双歧杆菌、罗氏乳杆菌按照质量比为嗜酸乳杆菌：长双歧杆菌：罗氏乳杆菌＝2：1：2～3复配而成。
[0014]
所述益生元为低聚葡萄糖、低聚果糖、山梨醇、水解酪蛋白中的一种或多种。
[0015]
所述抑制剂为依泽替米贝、前蛋白转化酶、枯草杆菌蛋白酶中的一种。
[0016]
所述辅料为纤维素、维生素、食用明胶；质量比为纤维素：维生素：食用明胶＝1：0.5～3：10～30。
[0017]
所述海藻酸钠溶液的质量体积比为2～4％。
[0018]
所述静电纺丝设备中调节推进速率为0.5～1.0ml/h和工作电压为10～15kv。
[0019]
还包括接收溶液，用于步骤二中静电喷雾时，静电纺丝设备中的注射器将混合液推进加入接收液中混合。
[0020]
所述接收溶液为质量体积比为2～4％氯化钙溶液。
[0021]
本发明的有益效果：
[0022]
1、本发明使用复合益生菌，为嗜酸乳杆菌、长双歧杆菌、罗氏乳杆菌；嗜酸乳杆菌
表面具有较好的疏水性质，能够吸附到肠道上，并与上皮细胞紧密接触，同时，能够有效吸附胆固醇，胆固醇透过嗜酸乳杆菌细胞，进入嗜酸乳杆菌细胞内，被嗜酸乳杆菌吸收，从而降低血液中胆固醇的含量；长双歧杆菌具有胆盐水解酶活性,罗氏乳杆菌在肠道内可以产生胆盐水解酶，可以将结合胆盐水解为游离胆盐,在酸性环境下,胆固醇和游离胆盐发生共沉淀,从而降低血清中胆固醇水平；复合益生菌与益生元配合共同作用，以增加益生菌对降低胆固醇的作用效果。
[0023]
2、本发明添加多甘烷醇，多甘烷醇不仅能够润湿益生元和益生菌，而且能够降低低密度脂蛋白胆固醇含量和增加高密度胆固醇含量，对总胆固醇含量的降低有着积极的作用。
[0024]
3、本发明使用牛血清蛋白，牛血清蛋白能减轻酶的变性，同时能减轻环境因素引起的变性，本发明将其作为胆固醇吸收抑制剂的包衣，将胆固醇吸收抑制剂包覆制成微球，起到稳定剂的作用，同时可缓释，制得的益生菌进入肠道，抑制剂在肠道中缓慢释放，增加药效的作用时间，且作用温和，不伤肠道。
[0025]
4、本发明使用牛血清蛋白包覆胆固醇吸收抑制剂时缓慢加入无水乙醇，使得牛血清蛋白包裹在外侧曾献褶皱结构，便于下一步将益生菌吸附到褶皱中。
[0026]
5、益生菌与多甘烷醇混合后，包覆抑制剂微球，然后再使用静电喷雾技术，用海藻酸钠再次包覆，形成多层包覆的缓释微球，不仅起到缓释作用，还可以保证益生菌在进入肠道内的活性和营养均衡，充分降低胆固醇的作用。
[0027]
6、益生菌与纤维素、维生素、食用明胶混合捏制成降低胆固醇的益生菌缓释微球，能够增加肠胃蠕动，提供人体或者动物体内所需要的维生素、微量物质和营养物质，有利于胆固醇的降低和机体的健康。
具体实施方式
[0028]
下面将对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0029]
实施例1
[0030]
一种降低胆固醇的益生菌，包括以下质量份数的原料：复合益生菌20份，益生元20份，多甘烷醇10份，牛血清蛋白5份，无水乙醇5份，壳聚糖0.5份，海藻酸钠溶液100份，抑制剂5份，辅料20份；
[0031]
所述降低胆固醇的益生菌的制备方法，包括以下步骤：
[0032]
步骤一：取质量份数的牛血清蛋白加入到20倍牛血清蛋白质量的去离子水中充分溶解，再加入抑制剂，以300r/min的速度搅拌，边搅拌边匀速加入质量份数的无水乙醇，持续搅拌3h后，然后加入质量份数的壳聚糖，继续搅拌1h，冷冻干燥得到抑制剂微球；
[0033]
步骤二：取质量份数的复合益生菌与步骤一中得到的抑制剂微球充分混合均匀，加入质量份数的多甘烷醇，超声分散均匀，然后加入质量份数的海藻酸钠溶液，再次超声分散均匀，得到混合液，转移至静电纺丝设备中，静电喷雾制备得到乳浊液，高速离心，冷冻干燥得到益生菌微球；
[0034]
步骤三：将步骤三中得到的益生菌微球与质量份数的益生元、辅料混合均匀，捏制
成型，干燥后得到降低胆固醇的益生菌。
[0035]
实施例2
[0036]
一种降低胆固醇的益生菌，包括以下质量份数的原料：复合益生菌40份，益生元50份，多甘烷醇15份，牛血清蛋白20份，无水乙醇20份，壳聚糖2份，海藻酸钠溶液200份，抑制剂10份，辅料50份；
[0037]
所述降低胆固醇的益生菌的制备方法，包括以下步骤：
[0038]
步骤一：取质量份数的牛血清蛋白加入到20倍牛血清蛋白质量的去离子水中充分溶解，再加入抑制剂，以600r/min的速度搅拌，边搅拌边匀速加入质量份数的无水乙醇，持续搅拌5h后，然后加入质量份数的壳聚糖，继续搅拌2h，冷冻干燥得到抑制剂微球；
[0039]
步骤二：取质量份数的复合益生菌与步骤一中得到的抑制剂微球充分混合均匀，加入质量份数的多甘烷醇，超声分散均匀，然后加入质量份数的海藻酸钠溶液，再次超声分散均匀，得到混合液，转移至静电纺丝设备中，静电喷雾制备得到乳浊液，高速离心，冷冻干燥得到益生菌微球；
[0040]
步骤三：将步骤三中得到的益生菌微球与质量份数的益生元、辅料混合均匀，捏制成型，干燥后得到降低胆固醇的益生菌。
[0041]
实施例3
[0042]
一种降低胆固醇的益生菌，包括以下质量份数的原料：复合益生菌30份，益生元45份，多甘烷醇12份，牛血清蛋白15份，无水乙醇10份，壳聚糖1份，海藻酸钠溶液150份，抑制剂7份，辅料40份；
[0043]
所述降低胆固醇的益生菌的制备方法，包括以下步骤：
[0044]
步骤一：取质量份数的牛血清蛋白加入到20倍牛血清蛋白质量的去离子水中充分溶解，再加入抑制剂，以400r/min的速度搅拌，边搅拌边匀速加入质量份数的无水乙醇，持续搅拌4h后，然后加入质量份数的壳聚糖，继续搅拌2h，冷冻干燥得到抑制剂微球；
[0045]
步骤二：取质量份数的复合益生菌与步骤一中得到的抑制剂微球充分混合均匀，加入质量份数的多甘烷醇，超声分散均匀，然后加入质量份数的海藻酸钠溶液，再次超声分散均匀，得到混合液，转移至静电纺丝设备中，静电喷雾制备得到乳浊液，高速离心，冷冻干燥得到益生菌微球；
[0046]
步骤三：将步骤三中得到的益生菌微球与质量份数的益生元、辅料混合均匀，捏制成型，干燥后得到降低胆固醇的益生菌。
[0047]
测试：选取50只年龄相同，体重不超过平均体重5％的成年大鼠，随机分为5组，每组10只，第1组为空白组，第2组为模型对照组，第3～第5组为实施例组，喂食基础饲料适应性饲养7天后，进行造模饲养20天，第1组继续喂食基础饲料，第2～第5组喂食高脂饲料，造模饲养20天后，对每只大鼠采血测定血清总胆固醇(tc)、低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)和高密度脂蛋白胆固醇(hdl-c)水平；开始实验，喂食基础饲料，同时，第3～第5组每日灌胃实施例1～3的益生菌水溶液一次，第1组和第2组每日灌胃等体积的纯净水，30天后，对每只大鼠采血测定血清总胆固醇(tc)、低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)和高密度脂蛋白胆固醇(hdl-c)水平。
[0048][0049]
由上表可知，与空白组和模型对照组相比，喂食实施例制作的益生菌能够限制降低大鼠tc、ldl-c、hdl-c含量，降低血液中胆固醇的含量。
[0050]
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应所述以权利要求的保护范围为准。