一种颠茄流浸膏的生产工艺的制作方法

1.本发明属于中药浸膏生产技术领域，具体地，涉及一种颠茄流浸膏的生产工艺。


背景技术：

2.颠茄(atropa belladonna)为茄科，属多年生草本植物，原产欧洲，20世纪30年代引入中国，颠茄属无限生长型，多年生草本植物。
3.颠茄提取物化学成分为莨菪碱、山莨菪碱、东莨菪碱、樟柳碱，总称为颠茄生物碱，在制药工业中，颠茄供制备颠茄流浸膏、颠茄浸膏及颠茄酊等用。莨菪碱受热会转变为阿托品，山莨菪碱、东莨菪碱、樟柳碱不会发生改变。其中山莨菪碱也具有扩张小动脉、改善微循环的良好作用，且其不易通过血脑屏障，故很少表现为中枢作用。除此之外山莨菪碱作用选择性高，毒副作用轻，排泄也比阿托品快。而樟柳碱解痉作用与山莨菪碱相似，毒性却远比山莨菪碱和阿托品小。东莨菪碱具有较强的亲水性，这是一般生物碱所没有的。目前药用颠茄为人工栽培品，为一年生。颠茄流浸膏为《中国药典》收载产品，主要药效成分为托品烷类生物碱，具有抗胆碱药，解除平滑肌痉挛，抑制腺体分泌的功效，可用于胃及十二指肠溃疡，胃肠道，肾，胆绞痛等。
4.一般采用渗漉法提取药材的有效成分，渗漉法系动态浸出，浓度梯度大，置换作用强，扩散作用好，较浸渍法用时短，浸出完全，且免于分离浸液和药渣，省时省工，但是现有技术中利用渗漉法提取颠茄生物碱有效成分含量低，并且叶绿素难以去除彻底，难以得到纯度高、品质好的颠茄流浸膏，叶绿素是一种色价较高的镁卟啉化合物，不溶于水，易溶于乙醇、丙酮、氯仿等溶剂，在传统渗漉过程中采用溶剂浸提法很难有效去除叶绿素，因此，提供一种纯度高、品质好的颠茄流浸膏的生产工艺是目前需要解决的技术问题。


技术实现要素：

5.本发明的目的在于提供一种颠茄流浸膏的生产工艺，以解决背景技术中的问题。
6.本发明的目的可以通过以下技术方案实现：
7.一种颠茄流浸膏的生产工艺，包括以下步骤：
8.第一步、预处理：在颠茄草开花至结果期进行采挖，洗净后于日光下晾晒至恒重，然后粉碎至40
‑
50目，得到颠茄草粗粉；
9.第二步、醇酶渗漉：按照比例将0.8
‑
1kg颠茄草粗粉加入30l质量分数85％的乙醇溶液中，浸渍18
‑
24h后，补加15
‑
20l质量分数85％的乙醇溶液，在功率1000w、频率20
‑
25khz下超声搅拌20
‑
30min，然后浸渍15
‑
20h，以1
‑
3ml/min速率收集初漉液，将颠茄草药渣收集置于玻璃渗漉筒内，保持温度35
‑
38℃，加入酸性胃蛋白酶溶液使液面高于颠茄草药渣3
‑
5cm，封闭浸渍48h，自出口收集液体并用0.45um的微孔膜过滤得到次漉液，合并初漉液和次漉液得到渗漉液；
10.第三步、纯化处理：将渗漉液置于外循环蒸发器中回收乙醇，残留物用质量分数40％乙醇溶液溶解得到预处理液，将预处理液以流速1.5
‑
1.8ml/min送入hp2mgl树脂柱中，
温度32℃下进行脱除叶绿素处理，过柱后的产物收集得到纯化液；
11.第四步、浓缩醇沉：将纯化液置于浓缩器中，减压浓缩至相对密度1.2
‑
1.3kg/m3(60
‑
70℃)的稠膏，将稠膏用其质量10倍的无水乙醇搅拌稀释，在温度40
‑
45℃、频率50khz下超声提取30
‑
35min后，静置36
‑
48h，收集上清液，上清液浓缩至体积的1/10，得到提取膏；
12.第五步、调配：将质量分数85％的乙醇溶液和纯化水加入提取膏中，直至硫酸天仙子胺(c
34
h
46
n2o6·
h2so4)含量为6.4
‑
8.0mg/ml，东莨菪内酯(c
10
h8o4)含量≥0.43mg/ml，含醇量为52
‑
66％，搅拌30
‑
60min，用100目筛过滤，装入洁净的容器中密闭，得到颠茄流浸膏。
13.进一步地，酸性胃蛋白酶溶液由以下步骤制成：
14.将去离子水置于容器中，加入质量分数10％的盐酸溶液调节ph值为1.5
‑
2，然后加入酶活力为1200u/g的胃蛋白酶，静置3h，待胃蛋白酶充分溶胀后，转速60
‑
80r/min条件下搅拌1h，得到酸性胃蛋白酶溶液。
15.进一步地，纯化处理过程中压力为0.1
‑
0.15mpa，温度为55
‑
65℃。
16.进一步地，第二步乙醇回收过程中残留物与质量分数40％乙醇溶液的用量比为3
‑
5g：10ml。
17.进一步地，浓缩醇沉过程中浓缩器的压力为0.1
‑
0.15mpa，温度为60
‑
70℃。
18.进一步地，hp2mgl树脂柱由以下步骤制成：
19.步骤s1、用洗脱溶剂将hp2mgl树脂洗涤一次后用蒸馏水洗涤一次，重复操作2
‑
3次，将树脂中的残留物洗脱除去得到纯化树脂，洗脱溶剂和水用量均为树脂体积的2
‑
3倍；
20.步骤s2、将长径比为90：1的柱子用正己烷进行润湿，将纯化树脂和正己烷加入柱子中，在装柱过程中保证树脂浸泡在液面以下，放出正己烷，得到hp2mgl树脂柱。
21.进一步地，洗脱溶剂为甲醇或乙醇。
22.本发明的有益效果：
23.本发明提供一种颠茄流浸膏的生产工艺，首先对颠茄草进行预处理得到颠茄草粗粉，然后进行醇酶渗漉，醇渗漉过程中途采用超声辅助渗漉，使颠茄草粗粉的生物碱更快地溶出，并且本发明对醇渗漉的颠茄草药渣进行酶渗漉，利用酶解提取方法，通过模拟人体温度、酶蛋白酶活力环境、ph条件，在提取过程中，胃蛋白酶通过对颠茄草药渣组织结构的侵蚀与攻击，破坏其致密结构，使其膨胀，进而变得疏松、崩溃、突破细胞间质与细胞壁的双重阻力，减少传递屏障对活性成分从胞内向溶媒扩散的阻力，使植物细胞原生质中活性成分向提取溶媒扩散，从而提高颠茄生物碱的提取效率，并且本发明对渗漉液进行纯化处理，利用树脂柱对渗漉液中的叶绿素进行吸附，提高渗漉液纯度和品质，最后通过浓缩回收乙醇，进行调配得到颠茄流浸膏，本发明提供的生产工艺颠茄生物碱的提取效率较高，并且纯度高。
附图说明
24.下面结合附图对本发明作进一步的说明。
25.图1是本发明一种颠茄流浸膏的生产工艺的流程图。
具体实施方式
26.下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，
显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
27.实施例1
28.请参阅图1所示，一种颠茄流浸膏的生产工艺，包括以下步骤：
29.第一步、预处理：在颠茄草开花至结果期进行采挖，洗净后于日光下晾晒至恒重，然后粉碎至40目，得到颠茄草粗粉；
30.第二步、醇酶渗漉：将0.8kg颠茄草粗粉加入30l质量分数85％的乙醇溶液中，浸渍18h后，补加15l质量分数85％的乙醇溶液，在功率1000w、频率20khz下超声搅拌20min，然后浸渍15h，以1ml/min速率收集初漉液，将颠茄草药渣收集置于玻璃渗漉筒内，保持温度35℃，加入酸性胃蛋白酶溶液使液面高于颠茄草药渣3cm，封闭浸渍48h，自出口收集液体并用0.45um的微孔膜过滤得到次漉液，合并初漉液和次漉液得到渗漉液；
31.第三步、纯化处理：将渗漉液置于外循环蒸发器中回收乙醇，残留物用质量分数40％乙醇溶液溶解得到预处理液，将预处理液以流速1.5ml/min送入hp2mgl树脂柱中，温度32℃下进行脱除叶绿素处理，过柱后的产物收集得到纯化液；
32.第四步、浓缩醇沉：将纯化液置于浓缩器中，减压浓缩至相对密度1.2kg/m3(60℃)的稠膏，将稠膏用其质量10倍的无水乙醇搅拌稀释，在温度40℃、频率50khz下超声提取30min后，静置36h，收集上清液，上清液浓缩至体积的1/10，得到提取膏；
33.第五步、调配：将质量分数85％的乙醇溶液和纯化水加入提取膏中，直至硫酸天仙子胺(c
34
h
46
n2o6·
h2so4)含量为6.4mg/ml，东莨菪内酯(c
10
h8o4)含量0.43mg/ml，含醇量为52％，搅拌30min，用100目筛过滤，装入洁净的容器中密闭，得到颠茄流浸膏。
34.其中，酸性胃蛋白酶溶液由以下步骤制成：
35.将去离子水置于容器中，加入质量分数10％的盐酸溶液调节ph值为1.5，然后加入酶活力为1200u/g的胃蛋白酶，静置3h，待胃蛋白酶充分溶胀后，转速60r/min条件下搅拌1h，得到酸性胃蛋白酶溶液。
36.其中，纯化处理过程中压力为0.1mpa，温度为55℃，残留物与质量分数40％乙醇溶液的用量比为3g：10ml。
37.其中，浓缩醇沉过程中浓缩器的压力为0.1mpa，温度为60℃。
38.其中，hp2mgl树脂柱由以下步骤制成：
39.步骤s1、用乙醇将hp2mgl树脂洗涤一次后用蒸馏水洗涤一次，重复操作2次，将树脂中的残留物洗脱除去得到纯化树脂，洗脱溶剂和水用量均为树脂体积的2倍；
40.步骤s2、将长径比为90：1的柱子用正己烷进行润湿，将纯化树脂和正己烷加入柱子中，在装柱过程中保证树脂浸泡在液面以下，放出正己烷，得到hp2mgl树脂柱。
41.实施例2
42.一种颠茄流浸膏的生产工艺，包括以下步骤：
43.第一步、预处理：在颠茄草开花至结果期进行采挖，洗净后于日光下晾晒至恒重，然后粉碎至45目，得到颠茄草粗粉；
44.第二步、醇酶渗漉：将0.9kg颠茄草粗粉加入30l质量分数85％的乙醇溶液中，浸渍20h后，补加18l质量分数85％的乙醇溶液，在功率1000w、频率22khz下超声搅拌25min，然后
浸渍18h，以2ml/min速率收集初漉液，将颠茄草药渣收集置于玻璃渗漉筒内，保持温度37℃，加入酸性胃蛋白酶溶液使液面高于颠茄草药渣4cm，封闭浸渍48h，自出口收集液体并用0.45um的微孔膜过滤得到次漉液，合并初漉液和次漉液得到渗漉液；
45.第三步、纯化处理：将渗漉液置于外循环蒸发器中回收乙醇，残留物用质量分数40％乙醇溶液溶解得到预处理液，将预处理液以流速1.7ml/min送入hp2mgl树脂柱中，温度32℃下进行脱除叶绿素处理，过柱后的产物收集得到纯化液；
46.第四步、浓缩醇沉：将纯化液置于浓缩器中，减压浓缩至相对密度1.2kg/m3(65℃)的稠膏，将稠膏用其质量10倍的无水乙醇搅拌稀释，在温度43℃、频率50khz下超声提取32min后，静置42h，收集上清液，上清液浓缩至体积的1/10，得到提取膏；
47.第五步、调配：将质量分数85％的乙醇溶液和纯化水加入提取膏中，直至硫酸天仙子胺(c
34
h
46
n2o6·
h2so4)含量为6.8mg/ml，东莨菪内酯(c
10
h8o4)含量0.47mg/ml，含醇量为58％，搅拌40min，用100目筛过滤，装入洁净的容器中密闭，得到颠茄流浸膏。
48.其中，酸性胃蛋白酶溶液由以下步骤制成：
49.将去离子水置于容器中，加入质量分数10％的盐酸溶液调节ph值为1.5，然后加入酶活力为1200u/g的胃蛋白酶，静置3h，待胃蛋白酶充分溶胀后，转速70r/min条件下搅拌1h，得到酸性胃蛋白酶溶液。
50.其中，纯化处理过程中压力为0.12mpa，温度为58℃，残留物与质量分数40％乙醇溶液的用量比为4g：10ml。
51.其中，浓缩醇沉过程中浓缩器的压力为0.3mpa，温度为68℃。
52.其中，hp2mgl树脂柱由以下步骤制成：
53.步骤s1、用甲醇将hp2mgl树脂洗涤一次后用蒸馏水洗涤一次，重复操作2次，将树脂中的残留物洗脱除去得到纯化树脂，洗脱溶剂和水用量均为树脂体积的3倍；
54.步骤s2、将长径比为90：1的柱子用正己烷进行润湿，将纯化树脂和正己烷加入柱子中，在装柱过程中保证树脂浸泡在液面以下，放出正己烷，得到hp2mgl树脂柱。
55.实施例3
56.一种颠茄流浸膏的生产工艺，包括以下步骤：
57.第一步、预处理：在颠茄草开花至结果期进行采挖，洗净后于日光下晾晒至恒重，然后粉碎至50目，得到颠茄草粗粉；
58.第二步、醇酶渗漉：将1kg颠茄草粗粉加入30l质量分数85％的乙醇溶液中，浸渍24h后，补加20l质量分数85％的乙醇溶液，在功率1000w、频率25khz下超声搅拌30min，然后浸渍20h，以3ml/min速率收集初漉液，将颠茄草药渣收集置于玻璃渗漉筒内，保持温度8℃，加入酸性胃蛋白酶溶液使液面高于颠茄草药渣5cm，封闭浸渍48h，自出口收集液体并用0.45um的微孔膜过滤得到次漉液，合并初漉液和次漉液得到渗漉液；
59.第三步、纯化处理：将渗漉液置于外循环蒸发器中回收乙醇，残留物用质量分数40％乙醇溶液溶解得到预处理液，将预处理液以流速1.8ml/min送入hp2mgl树脂柱中，温度32℃下进行脱除叶绿素处理，过柱后的产物收集得到纯化液；
60.第四步、浓缩醇沉：将纯化液置于浓缩器中，减压浓缩至相对密度1.3kg/m3(70℃)的稠膏，将稠膏用其质量10倍的无水乙醇搅拌稀释，在温度45℃、频率50khz下超声提取35min后，静置48h，收集上清液，上清液浓缩至体积的1/10，得到提取膏；
61.第五步、调配：将质量分数85％的乙醇溶液和纯化水加入提取膏中，直至硫酸天仙子胺(c
34
h
46
n2o6·
h2so4)含量为8mg/ml，东莨菪内酯(c
10
h8o4)含量0.43mg/ml，含醇量为66％，搅拌60min，用100目筛过滤，装入洁净的容器中密闭，得到颠茄流浸膏。
62.其中，酸性胃蛋白酶溶液由以下步骤制成：
63.将去离子水置于容器中，加入质量分数10％的盐酸溶液调节ph值为2，然后加入酶活力为1200u/g的胃蛋白酶，静置3h，待胃蛋白酶充分溶胀后，转速80r/min条件下搅拌1h，得到酸性胃蛋白酶溶液。
64.其中，纯化处理过程中压力为0.15mpa，温度为65℃，残留物与质量分数40％乙醇溶液的用量比为5g：10ml。
65.其中，浓缩醇沉过程中浓缩器的压力为0.15mpa，温度为70℃。
66.其中，hp2mgl树脂柱由以下步骤制成：
67.步骤s1、用甲醇将hp2mgl树脂洗涤一次后用蒸馏水洗涤一次，重复操作3次，将树脂中的残留物洗脱除去得到纯化树脂，洗脱溶剂和水用量均为树脂体积的3倍；
68.步骤s2、将长径比为90：1的柱子用正己烷进行润湿，将纯化树脂和正己烷加入柱子中，在装柱过程中保证树脂浸泡在液面以下，放出正己烷，得到hp2mgl树脂柱。
69.对比例1
70.将实施1中的醇酶渗漉步骤进行更改，更改为：
71.将1kg颠茄草粗粉加入30l质量分数85％的乙醇溶液中，浸渍24h后，补加20l质量分数85％的乙醇溶液，在功率1000w、频率25khz下超声搅拌30min，然后浸渍20h，以3ml/min速率收集渗漉液；其余步骤均不变。
72.对比例2
73.将实施例2中的醇酶渗漉步骤进行更改，更改为：
74.将1kg颠茄草粗粉加入30l质量分数85％的乙醇溶液中，浸渍24h后，以3ml/min速率收集初漉液，将颠茄草药渣收集置于玻璃渗漉筒内，保持温度8℃，加入酸性胃蛋白酶溶液使液面高于颠茄草药渣5cm，封闭浸渍48h，自出口收集液体并用0.45um的微孔膜过滤得到次漉液，合并初漉液和次漉液得到渗漉液，其余步骤均不变。
75.对比例3
76.将实施例3中的纯化处理步骤进行更改，更改为：
77.纯化处理：将渗漉液置于外循环蒸发器中回收乙醇，残留物用质量分数40％乙醇溶液溶解得到纯化液；其余步骤均不变。
78.将实施例1
‑
3和对比例1
‑
3所得的颠茄流浸膏生产过程中步骤产物进行检测：
79.(一)将各组试样中的纯化液通过液相色谱仪测定生物碱含量；
80.(二)叶绿素脱出率，将各组试样中的产物在645nm下测定其吸光度，根据叶绿素脱出率(w)的计算公式得出其叶绿素脱出率，公式如下
81.w＝(a0
‑
a1)/a0
×
100％，式中：a1
‑
流浸膏的吸光度，a0
‑
预处理液的吸光度，w
‑
渗漉液的吸光度；测试结果如表1所示：
82.表1
[0083][0084][0085]
由表1可以看出，实施例1
‑
3所述的生产工艺所得颠茄流浸膏纯度较高，并且生物碱含量高，因此，本发明的颠茄流浸膏生产工艺较为高效。
[0086]
需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。
[0087]
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。