乌拉尔醇的新应用

1.本发明涉及医药技术领域，具体涉及乌拉尔醇的新应用。


背景技术：

2.乌拉尔醇（uralenol）是传统中药的的一种黄酮类化合物，目前已有报道发现，乌拉尔醇可从构树（broussonetia papyrifera）、甘草（glycyrrhiza uralensis）分离提取，其首次被发现是在1990年从甘草叶中被提取，但目前尚无对其生物学功能的报道，更未见其作为抑制肿瘤药物的报道。


技术实现要素：

3.本发明的目的是提供乌拉尔醇用于抑制肿瘤的新应用。
4.乌拉尔醇用于抑制肿瘤的新应用之一，本发明公开了乌拉尔醇在改变肿瘤细胞形态中的新应用。
5.乌拉尔醇用于抑制肿瘤的新应用之二，本发明公开了乌拉尔醇在抑制肿瘤细胞增殖活性中的新应用。
6.乌拉尔醇用于抑制肿瘤的新应用之三，本发明公开了乌拉尔醇在抑制肿瘤细胞迁移能力中的新应用。
7.乌拉尔醇用于抑制肿瘤的新应用之四，本发明公开了乌拉尔醇在促进肿瘤细胞凋亡中的新应用。
8.本发明的有益效果为：本发明发现乌拉尔醇能够使肿瘤细胞的细胞质、核固缩，抑制肿瘤细胞增殖活性和迁移能力，并促进肿瘤细胞凋亡，能够起到较好的抗肿瘤作用。乌拉尔醇作为天然产物抑制肿瘤细胞效果显著，其作为抗肿瘤药物进行开发及应用具有十分好的前景。
附图说明
9.图1为不同浓度乌拉尔醇干预12h后hcg-27细胞的形态变化；图2为不同浓度乌拉尔醇干预24h后hcg-27细胞的形态变化；图3为不同浓度乌拉尔醇干预12h后mkn-45细胞的形态变化；图4为不同浓度乌拉尔醇干预24h后mkn-45细胞的形态变化；图5为乌拉尔醇对mkn-28和mkn-45细胞形态影响的he染色；图6为乌拉尔醇对mkn-45和hgc-27细胞增殖活性的影响；图7为乌拉尔醇对mkn-45和hgc-27细胞的ic50值；图8为乌拉尔醇对mkn-45、hgc-27和nci-n87细胞克隆形成的影响；图9为乌拉尔醇对mkn-45细胞周期的影响；图10为乌拉尔醇对hgc-27细胞周期的影响；图11为乌拉尔醇对nci-n87细胞周期的影响；
图12为乌拉尔醇对mkn-45细胞迁移能力的影响；图13为乌拉尔醇对mkn-45细胞凋亡率的影响；图14为乌拉尔醇对mkn-28细胞凋亡率的影响。
具体实施方式
10.下面结合附图和具体实施方式对本发明做进一步说明。
11.实验例1、乌拉尔醇在改变肿瘤细胞形态中的新应用：1、显微镜下观察乌拉尔醇引起肿瘤细胞形态变化，结果显示乌拉尔醇干预后（12h和24h），hgc-27和mkn-45细胞长梭形不规则形态消失，整体变圆变亮，细胞体积变小，细胞质中出现大量空泡，其中25μmol/l、50μmol/l和100μmol/l浓度干预后形态变化最明显，且随着乌拉尔醇干预浓度的升高，细胞形态变化越明显（见图1-4）。
12.2、通过细胞he染色观察乌拉尔醇引起肿瘤细胞形态变化，结果显示乌拉尔醇干预（24h）后，mkn-28和mkn-45细胞整体变圆，细胞体积变小，大量细胞细胞质、核发生固缩（见图5）。
13.由上可见，当乌拉尔醇干预浓度大于25μmol/l、干预时间长于12h时，能够使肿瘤细胞原有轮廓消失，发生变圆、变亮、细胞质中出现大量空泡等异常改变。乌拉尔醇致使肿瘤细胞的形态改变提示其能够有效地促使肿瘤细胞正常结构发生异常变化，正常的生理结构是肿瘤细胞发挥生理功能的前提，当肿瘤细胞结构发生轮廓消失、变圆、变亮、细胞质大量空泡等均提示其原生理功能受到影响，甚至被诱导发生死亡。
14.实验例2、乌拉尔醇在抑制肿瘤细胞增殖活性中的新应用：1、通过cck8法检测乌拉尔醇干预后引起肿瘤细胞增殖活性的变化，结果显示浓度等于或高于25μmol/l的乌拉尔醇干预（24h）后能够明显抑制mkn-45和hgc-27细胞的增殖活性，且成浓度依赖性，差异有统计学意义（p《0.05或0.01）（见图6）。乌拉尔醇对mkn-45和hgc-27细胞的ic50值分别为87.66μmol/l和31.13μmol/l（见图7）。
15.2、通过克隆形成实验检测乌拉尔醇干预后引起肿瘤细胞克隆形成情况，进一步评估细胞增殖活性。结果显示乌拉尔醇干预（24h）后能够明显抑制mkn-45、hgc-27和nci-n87细胞的克隆形成（见图8）。
16.3、通过流式细胞术检测乌拉尔醇干预后引起肿瘤细胞周期的变化，结果显示乌拉尔醇干预（24h）后，mkn-45细胞s期和g2/m期比例降低，g0/g1期细胞比例增加，差异具有统计学意义（p《0.05）（见图9）；hgc-27细胞s期和g2/m期比例降低，g0/g1期细胞比例增加，差异具有统计学意义（p《0.05）（见图10）；nci-n87细胞s期比例降低，g0/g1期细胞比例增加，差异具有统计学意义（p《0.05）（见图11），以上结果均提示乌拉尔醇能够抑制mkn-45、hgc-27和nci-n87细胞增殖。
17.由上可见，肿瘤细胞细胞周期失控引起的异常增殖是肿瘤快速发展的主要原因，当乌拉尔醇干预浓度大于或等于25μmol/l，24h后乌肿瘤细胞的增殖能力受到明显抑制；25μmol/l浓度的乌拉尔醇能够抑制肿瘤细胞的克隆形成，同时能够使肿瘤细胞g0/g1期比例增加，s期和g2/m期比例降低，显著抑制肿瘤细胞的增殖活性。
18.实验例3、乌拉尔醇在抑制肿瘤细胞迁移能力中的新应用：通过划痕实验检测乌拉尔醇干预后引起肿瘤细胞迁移能力的变化，结果显示乌拉
尔醇干预后，kmkn-45细胞迁移能力明显减慢（见图12）。
19.由上可见，迁移性是肿瘤细胞的主要特征，肿瘤细胞的迁移能力是肿瘤发生转移的关键。实验数据提示，25μmol/l浓度的乌拉尔醇能够能够显著抑制肿瘤细胞的迁移能力。
20.实验例4、乌拉尔醇在促进肿瘤细胞凋亡中的新应用：通过流式细胞术检测乌拉尔醇干预后引起肿瘤细胞凋亡率的变化，结果显示乌拉尔醇干预后，mkn-45细胞和mkn-28细胞凋亡率明显上调，提示乌拉尔醇能够抑制促进mkn-45、mkn-28肿瘤细胞发生凋亡，差异具有统计学意义（p《0.05）（见图13-14）。
21.由上可见，肿瘤细胞的凋亡抑制是肿瘤快速发展的重要原因之一，实验数据显示，25μmol/l浓度的乌拉尔醇能够显著促进肿瘤细胞发生凋亡。


技术特征：
1.乌拉尔醇的新应用，其特征在于：乌拉尔醇可以用于抑制肿瘤。2.如权利要求1所述的乌拉尔醇的新应用，其特征在于：乌拉尔醇在改变肿瘤细胞形态中的新应用。3.如权利要求1所述的乌拉尔醇的新应用，其特征在于：乌拉尔醇在抑制肿瘤细胞增殖活性中的新应用。4.如权利要求1所述的乌拉尔醇的新应用，其特征在于：乌拉尔醇在抑制肿瘤细胞迁移能力中的新应用。5.如权利要求1所述的乌拉尔醇的新应用，其特征在于：乌拉尔醇在促进肿瘤细胞凋亡中的新应用。6.如权利要求2-5中任一所述的乌拉尔醇的新应用，其特征在于：所述乌拉尔醇的摩尔浓度不小于25μmol/l，作用时间大于12h。

技术总结
本发明公开了乌拉尔醇用于抑制肿瘤的新应用，属于医药技术领域，本发明公开了乌拉尔醇能够使肿瘤细胞的细胞质、核固缩，抑制肿瘤细胞增殖活性和迁移能力，并促进肿瘤细胞凋亡，能够起到较好的抗肿瘤作用。乌拉尔醇作为天然产物抑制肿瘤细胞效果显著，其作为抗肿瘤药物进行开发及应用具有十分好的前景。药物进行开发及应用具有十分好的前景。


技术研发人员：刘永琦 李程豪 李佳蔚 靳晓杰 李研
受保护的技术使用者：甘肃中医药大学
技术研发日：2021.11.10
技术公布日：2022/4/26