一种抗痘美白的复合益生菌组合物及其制备方法与流程

1.本发明涉及益生菌技术领域，尤其涉及一种抗痘美白的复合益生菌组合物及其制备方法。


背景技术：

2.皮肤表面拥有庞大而复杂的微生物生态系统，以调节皮肤健康，而人体的微生态则是从根源处影响此系统。随着科学研究的深入，越来越多的研究表明，皮肤状况与人体的微生态具有紧密的联系，我们不应该把皮肤出现的各种情况当成是“问题”，而应是身体发出的一种信号，这些信号提示我们身体根源性的问题。当体内的益生菌失去平衡之后，结果可能会出现多种皮肤问题，同时也可能会加速一些衰老迹象的出现。常见的皮肤问题，如痘痘与饮食或压力导致的共生菌株失衡有关；皮肤的异常衰老与肠道微生物的有害氧化代谢相联系，同时与肠道致病菌的毒素积累有关；肤色黯淡是皮肤衰老的表现，与人体肠道内色素的过多累积和转移有关。
3.长期以来，众多研究致力于皮肤暗黄、祛痘等方向。例如论文“皮肤衰老种肤色暗黄的形成机制与对称，谷建梅等，中国美容医学2011年12月第20卷第12期”对肤色暗黄的形成机制进行了研究。论文“痤疮的机理症状及去祛痘型护肤品功效类型，何陵玲等，日用化学工业，第50卷第5期）对痤疮的发病机理进行了研究。市面上也有很多针对暗黄皮肤或祛痘除疮的产品，但是，现有的美白祛痘产品存在以下缺陷：目前市面上具有美白抗痘功效的益生菌产品多为外用产品，菌株单一，效果不明显，人们使用这些外用产品后，人体肠道内的益生菌仍处于失衡状态，皮肤美白效果不佳，痤疮长痘仍不定期复发。


技术实现要素：

4.为了克服现有技术的不足，本发明的目的之一在于提供一种抗痘美白的复合益生菌组合物。
5.本发明的目的之二在于提供一种抗痘美白的复合益生菌组合物的制备方法。
6.本发明的目的之一采用如下技术方案实现：一种抗痘美白的复合益生菌组合物，由质量比为（20~60）：（40~100）：（30~70）的益生菌、益生元和活性复合物组成，所述活性复合物包括活性组分，或，所述活性复合物包括活性组分和辅料；所述益生菌为植物乳杆菌（lactobacillus plantarum）、副干酪乳杆菌（lactobacillus paracasei）、动物双歧杆菌乳亚种（bifidobacterium animalis subsp. lactis）、长双歧杆菌（bifidobacterium longum）、鼠李糖乳杆菌（lactobacillus rhamnosus）和罗伊氏乳杆菌（lactobacillus reuteri ）中一种或任意组合；所述益生元为低聚果糖、菊粉、低聚木糖、低聚半乳糖、低聚麦芽糖、低聚异麦芽糖、抗性糊精、大豆低聚糖、水苏糖、壳聚糖和棉子糖中的一种或任意组合；所述活性组分为柠檬提取物、树莓粉、樱桃粉、芦荟提取物、余甘子提取物和银耳多糖中的一种或任意组合。
7.进一步地，所述益生菌的活菌数≥1
×
10
10 cfu/g。
8.进一步地，所述植物乳杆菌为植物乳杆菌feed8（lactobacillus plantarum feed8）；所述副干酪乳杆菌为副干酪乳杆菌k9（lactobacillus paracasei k9）；所述动物双歧杆菌乳亚种为动物双歧杆菌乳亚种y6（bifidobacterium animalis subsp. lactis y6）；所述长双歧杆菌为长双歧杆菌w68（bifidobacterium longum w68）；所述鼠李糖乳杆菌为鼠李糖乳杆菌ygg （lactobacillus rhamnosus ygg）；所述罗伊氏乳杆菌为罗伊氏乳杆菌k07（lactobacillus reuteri k07）。
9.进一步地，所述所述益生菌至少包括植物乳杆菌（lactobacillus plantarum）和长双歧杆菌（bifidobacterium longum）。
10.进一步地，所述益生菌至少包括植物乳杆菌（lactobacillus plantarum）、副干酪乳杆菌（lactobacillus paracasei）、动物双歧杆菌乳亚种（bifidobacterium animalis subsp. lactis）和长双歧杆菌（bifidobacterium longum）。
11.进一步地，所述植物乳杆菌（lactobacillus plantarum）、副干酪乳杆菌（lactobacillus paracasei）、动物双歧杆菌乳亚种（bifidobacterium animalis subsp. lactis）和长双歧杆菌（bifidobacterium longum）的质量比为（1~16）：（1：~2）：（1~4）：（1~3）。
12.进一步地，所述益生元至少包括质量比为（15~30）：10：（1~5）：（3~5）：（2~4）的低聚果糖、低聚半乳糖、抗性糊精、大豆低聚糖和水苏糖。
13.进一步地，所述活性组分至少包括质量比为（1~8）：（5~10）：（4~10）的余甘子提取物、银耳多糖和树莓粉。
14.进一步地，所述辅料为麦芽糊精、乳糖、维生素c、维生素e、木糖醇、赤藓糖醇、山梨醇、柠檬酸、苹果酸和乳酸等一种或任意组合。
15.进一步地，所述益生菌由质量比为16:2:1:1的植物乳杆菌（lactobacillus plantarum）、副干酪乳杆菌（lactobacillus paracasei）、动物双歧杆菌乳亚种（bifidobacterium animalis subsp. lactis）和长双歧杆菌（bifidobacterium longum）组成；所述益生元由质量比为15:10:1:3:4的抗性糊精、低聚果糖、低聚半乳糖、大豆低聚糖和水苏糖组成；所述活性复合物由质量比为30:30:8:1:8:10:1:1的赤藓糖醇、木糖醇、余甘子提取物、柠檬酸、银耳多糖、树莓粉、维生素c和维生素e组成。
16.本发明的目的之二采用如下技术方案实现：一种抗痘美白的复合益生菌组合物的制备方法，包括以下步骤：称取配方量的益生菌、益生元和活性复合物，混合均匀。
17.相比现有技术，本发明的有益效果在于：（1）本发明所提供的抗痘美白的复合益生菌组合物，有别于常规的外用产品，其是一种专门针对暗黄皮肤、痘痘复杂发病机理而设计的内服产品，能够调节人体内益生菌的平衡，通过多种途径由内而外、从根源处对痘痘、皮肤暗黄进行有效治疗，且效果显著，疗效稳定不易复发，同时无毒副作用和皮肤刺激性。
18.（2）本发明所提供的抗痘美白的复合益生菌组合物的制备方法，工艺简单，操作简便，容易实现工业化生产。
19.生物材料保藏信息：本发明所提供的菌株，植物乳杆菌feed8，保藏编号为cgmcc no.15029，分类命名
为：植物乳杆菌lactobacillus plantarum，已于2017年12月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心 (地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101)，保藏单位的缩写为cgmcc；副干酪乳杆菌k9，保 藏 编 号 为cgmcc no.15025，分类命名为：副干酪乳杆菌lactobacillus paracasei ，已于2017年12月01日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心 (地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101)，保藏单位的缩写为cgmcc；动物双歧杆菌乳亚种y6，保藏编号为cgmcc no .15026，分类命名为：动物双歧杆菌乳亚种bifidobacterium animalis subsp. lactis，已于2017年12月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心 (地址：北京市朝阳区北辰西路1号院 3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101)，保藏单位的缩写为cgmcc；长双歧杆菌w68，保 藏 编 号 为cgmcc no.15028，分类命名为：长双歧杆菌bifidobacterium longum ，已于2017年12月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心 (地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101)，保藏单位的缩写为cgmcc；鼠李糖乳杆菌ygg，保 藏 编 号 为cgmcc no.15027，分类命名为：鼠李糖乳杆菌lactobacillus rhamnosus，已于2017年12月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心 (地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101)，保藏单位的缩写为cgmcc；罗伊氏乳杆菌k07，保 藏 编 号 为cgmcc no.15703，分类命名为：罗伊氏乳杆菌lactobacillus reuteri ，已于2018年04月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心 (地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101)，保藏单位的缩写为cgmcc。
具体实施方式
20.下面，结合具体实施方式，对本发明做进一步描述，需要说明的是，在不相冲突的前提下，以下描述的各实施例之间或各技术特征之间可以任意组合形成新的实施例。在下述实施例中所采用的原材料、设备等除特殊限定外均可以通过商业渠道购买获得。
21.本发明专门针对暗黄皮肤、痘痘复杂发病机理设计了一种抗痘美白的复合益生菌组合物，通过多种途径由内而外、从根源处对痘痘、皮肤暗黄进行有效治疗，且效果显著，疗效稳定不易复发，同时无毒副作用和皮肤刺激性。按照下表1的组分和用量形成9个配方进行试验，每个配方中所用的益生菌均为益生菌冻干粉，配方中益生菌冻干粉的活菌数≥1
×
10
10 cfu/g。
22.表1 验证配方表
对于上述9个配方，分别按照配方量称取各组分，然后混合均匀，即得。
23.效果评价一、人体试验受试对象：110位健康青年（男性：55名；女性：55名），年龄为15-45岁，皮肤特征为
油性皮肤、轻度和中度青春痘肌肤，均为亚洲人且在广东省学习和工作。
24.试验方法：将测试人群分为11组，每组10人，测试周期为3个月。其中10个组别分别使用配方1~9的样品和市售产品，另外1个组别不使用任何祛痘产品（空白组）。测试者午餐、晚餐饭后半小时服用该组合物各1袋。测试者需自我评估皮肤美白情况、痘痘消除效果、痘痘反复发生情况、抗炎舒缓效果等使用感受。评估分数为0~10分（详见表2），测试结果如表3所示。
25.其中，市售产品为rohto rohtomelano-cc精华液，其是一款日本的热门产品，含有维生素c、维生素e、甘草酸二钾、异丙基甲基酚等非天然抗氧化、消炎成分，以外用涂抹方式实现美白祛痘。
26.表2 志愿者评估分数与感受情况的评判标准表3 美白抗痘益生菌组合物人群功效验证从表3中的记录可得，配方1-9的美白祛痘效果均优于市售产品，服用3个月后，受试者在美白、祛痘、减少痘痘复发以及抗炎舒缓这几个方面均有较好的体验感，美白祛痘的
总有效率达到90%以上。其中配方7减少痘痘复发的分值高达9.5分，表明了受试者的痘痘治愈后基本不复发，祛痘效果不反弹。
27.本发明所提供的抗痘美白的复合益生菌组合物采用复合多联益生菌进行组合，并且合理规划各益生菌的比例，再附以益生元及其他活性组分、辅料，能够强化组合物的美白抗痘功效。人体通过内服具有美白抗痘功效的复合益生菌组合物，让美白祛痘活性益生菌高效定殖于肠道，改善了肠道微环境，抑制肠道有害菌的生长繁殖，肠道内毒素水平降低，有效减少了炎症与应激反应，修复敏感肌，从根源处实现祛痘。此外，组合物具有出色的抗氧化能力，可以延缓了机体衰老，减少色素的体内转移，解决过氧化导致的色斑、皮肤暗黄等问题，促进肌肤白皙透亮。下面，对益生菌、益生元、活性复合物进行进一步分析：首先，本发明所提供的抗痘美白的复合益生菌组合物，“植物乳杆菌feed8”为具有美白抗痘功效的复合益生菌冻干粉的核心菌株，且随着用量、比例的增加，效果更为显著（通过配方1、2、4和8可得）。活性植物乳杆菌feed8定殖于于肠道，可以在生命体中源源不断地产生活性氧（reactive oxygen species，ros），包括 dpph自由基、羟基自由基（
•
oh）、超氧阴离子（o2
•‑
）等，可以巩固自身的抗氧化防御系统及修复系统维持体内 ros 处于平衡状态。由于其出色的抗氧化能力，可以有效解决过氧化导致的色斑、皱纹、衰老问题。
[0028]“动物双歧杆菌乳亚种y6”和“副干酪乳杆菌k9”有协调互补的作用，两者结合可作为美白抗痘的优势菌株组合。其中，动物双歧杆菌乳亚种y6可以高效定殖于肠道，改善肠道微环境，减少炎症与应激反应，修复敏感肌。副干酪乳杆菌k9能减少肠道中细菌移位，改善肠道菌群失调状况，修护肠道粘膜，恢复肠道屏障功能，缓解由blg引起的过敏反应，并且缓解效果优于同属其它菌株，同时增加血清中tgf-β水平，纠正过敏机体中淋巴细胞th1/th2的失衡，缓解皮肤过敏症状。两者协同作用，强化皮肤免疫屏障，亮白皮肤。
[0029]“长双歧杆菌w68”、“鼠李糖乳杆菌ygg”可以作为具有美白抗痘功效的复合益生菌冻干粉的辅助菌株。且“长双歧杆菌w68”的辅助作用较强，因此选择为优势辅助菌株。长双歧杆菌w68耐酸、耐胆盐、耐氧，能在肠道定殖抑制病原菌，并能分泌细胞因子调节肠道免疫，可以抑制肠道有害菌，延缓机体衰老，促进肌肤年轻态。而“鼠李糖乳杆菌ygg”的辅助作用较弱，可以不选其作为益生菌冻干粉的菌株之一。
[0030]“罗伊氏乳杆菌k07”对具有美白抗痘功效的复合益生菌冻干粉的功效有一定的抑制作用，不宜作为益生菌冻干粉的菌株之一。
[0031]
本发明所提供的具有美白抗痘功效的复合益生菌冻干粉的最佳组合为“植物乳杆菌feed8：副干酪乳杆菌k9：动物双歧杆菌乳亚种y6：长双歧杆菌w68=16:2:1:1”。
[0032]
其次，“低聚果糖”为抗痘美白的复合益生菌组合物的核心益生元，其且在益生元中的占比为40%-45%为最佳。低聚果糖作为一种益生元，具有结合金属离子的作用，其在胃肠中可形成fos-矿物质络合物，该络合物到达大肠后，矿物质被释放出来。低聚果糖被肠道益生菌发酵，产生乙酸、丙酸、丁酸等短链脂肪酸及乳酸等，降低肠道环境ph，抑制有害细菌和病源菌的生长繁殖，减少肠内毒素和腐败物质的产生和积累，保持皮肤健康，降低痘痘复发的风险。肠道环境ph的降低，也有利于钙、镁等矿物质盐的溶解，从而促进机体对钙、镁等矿质元素的吸收。低聚果糖可增殖益生菌，强化益生菌的益生功效。低聚果糖还可促进维生素 b1、b2、b3、b6、b12与叶酸的合成，进而提高人体新陈代谢水平，保持肌肤年轻态。
[0033]
本发明所提供的具有美白抗痘功效的复合益生菌组合物，益生元的最佳组合为“抗性糊精：低聚果糖：低聚半乳糖：大豆低聚糖：水苏糖=15:10:1:3:4”。
[0034]
最后，“余甘子提取物、银耳多糖、树莓粉”为具有美白抗痘功效的复合益生菌组合物的核心功效辅料，三者之间按照4：4：5的比例对复合益生菌组合物的美白祛痘功效有明显的强化作用。
[0035]
其中，余甘子果中含有12种维生素、16种微量元素、18种氨基酸、有机酸、蛋白质及糖等。余甘子果中的维生素c含量很高且比较稳定，平均含量是柑橘的100倍，苹果的160倍，猕猴桃的5倍。此外，余甘子提取物能抑制病原微生物的dna和转录因子（nf-kb/dna）的交互作用，从而抑制病原微生物的转录，余甘子提取物中含有大量的油柑酸，对葡萄球菌、伤寒杆菌、大肠杆菌及痢疾杆菌均有明显的抑制作用，有利于降低肠道内毒素水平，保持皮肤健康。
[0036]
银耳，又称雪耳、白木耳，属于担子菌纲银耳科，是我国的传统药食用菌，是治疗虚弱和衰老的滋补药。银耳中含有多糖、黄酮及氨基酸等多种成分，有美白焕肤的作用，其中银耳多糖为其重要的活性物质。研究表明，银耳多糖是通过调控细胞周期负调控因子p21的转录和表达、抗氧化及增强免疫功能而发挥抗衰老作用的，可以有效保持皮肤年轻态，因此银耳多糖可作为一种潜在的与氧化应激相关的皮肤疾病和衰老的治疗剂，防治痘痘复发。
[0037]
树莓，又名山莓、三月泡、四月泡、山抛子、刺葫芦、悬钩子、馒头菠、高脚菠、龙船泡、牛奶泡、泡儿刺，系蔷薇科悬钩子属多年生落叶小灌木，有750种以上，因其果型、色、味与草莓相似但长在树上，故名树莓。其中的维生素e含量居各类水果之首，富含超氧化物歧化酶、维生素c。天然超氧化物歧化酶和维生素e是极好的人体清道夫，能够消除人体产生的大量有害代谢物质，提高人体免疫力，从根本上改善人体的内在环境，达到美容、养颜、延年益寿的目的。
[0038]
综上所述，配方7为本发明的最佳实施例，本发明所提供的具有美白抗痘功效的复合益生菌组合物的最佳组合为“复合益生菌冻干粉：益生元：活性复合物=3：4：3”，其中，复合益生菌冻干粉的最佳组合为“植物乳杆菌feed8：副干酪乳杆菌k9：动物双歧杆菌乳亚种y6：长双歧杆菌w68=16:2:1:1”，最佳益生元组合为“抗性糊精：低聚果糖：低聚半乳糖：大豆低聚糖：水苏糖=15:10:1:3:4”，核心活性组分为“余甘子提取物：银耳多糖：树莓粉=4：4：5”。
[0039]
二、动物毒理学试验受试对象：成年健康荷兰种豚鼠40只，动物级别ⅰ级，体重200-300g，雌雄各半。实验时以随机数字排列表法分组，分笼饲养。
[0040]
试验方法：各批实验按随机数字排列表法分为两组，空白对照组（赋形剂）、样品组（配方7），每组10只豚鼠。采用随机双盲对照实验，两种组合物均使用统一包装，仅在其外包装上标明a、b字样。给药24h前将动物背部脊柱两侧毛发用剃刀剃除，每侧去毛范围4
×
4cm2。每只豚鼠右侧脱毛皮肤设为完整皮肤实验区，左侧脱毛皮肤设为破损皮肤实验区（用无菌注射针头划破角质层而不损伤真皮，使有类似趾甲刮抓所产生的擦伤，但不得发生出血）。观察指标：给药后每日观察动物全身情况，包括动物皮肤、毛发、眼睛和粘膜的变化，呼吸、四肢活动等变化。若有死亡动物则需进行尸检和病理检查，实验结束后对所有动物用药部位皮肤进行组织病理学检查。
[0041]
急性毒性实验：动物剃毛后24h将a、b两种受试物分别喂食赋形剂、配方7组合物，
每次0.1g，每日2次，连续给药1周。
[0042]
长期毒性实验：动物剃毛后24h将a、b两种受试物分别喂食赋形剂、配方7组合物，每次0.1g，每日2次，连续给药4周。并于停药后继续观察2周， 以便确定受试物是否具有毒性反应及毒性反应的可逆程度。
[0043]
实验结果：急性毒性实验：空白对照组（赋形剂）、样品组（配方7）给药后7d内，动物完整皮肤及破损皮肤无红斑、水肿，豚鼠的行为活动、饮食、皮毛光泽、体重、精神状态、粪便、肤色、呼吸及分泌物、眼和粘膜均正常，全部动物均健康存活。充分表明配方7无任何毒副作用和皮肤刺激性。
[0044]
长期毒性实验：空白对照组（赋形剂）、样品组（配方7）给药后4周，所有豚鼠的行为活动、饮食、体重、精神状态、粪便、呼吸及分泌物、眼和粘膜均正常，全部动物均健康存活。充分表明配方7无任何毒副作用和皮肤刺激性。
[0045]
综上所述，本发明以皮肤衰老暗黄、痘痘发病机理以及临床表现为研究基础，以美白祛痘为宗旨，以科学复配活性多联益生菌冻干粉为主要功效添加剂，辅以天然药食同源的植体成分调配而成。本发明与市售美白祛痘产品截然不同，由于皮肤问题外显于形，常规的治疗方式多为直接在患处治疗，因此市场产品多为外用药，由于没有从根源处进行治疗，因此常常存在疗效不明显、痘痘复发等问题。
[0046]
本发明开创性地由内而外从根源处进行美白祛痘，在市面上是首例效果明显的创新产品。本发明提供的具有美白抗痘功效的复合益生菌组合物具有抗炎舒缓的功效，还具有减少痘痘复发、抗衰老、抗氧化、减少色素在体内转移等功效，通过多种途径实现对皮肤衰老暗黄、痘痘的有效治疗，且无毒副作用和皮肤刺激性，其配方中含有美白祛痘活性多联益生菌组合物，专门针对皮肤衰老暗黄、痘痘复杂发病机理而设计，由内而外调节人体微生态，从根源处实现美白焕肤以及祛痘，安全有效且不反弹。同时由于组合物方便食用，因此可在人群中大为推广食用。
[0047]
上述实施方式仅为本发明的优选实施方式，不能以此来限定本发明保护的范围，本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。