一种预防脑胶质瘤术后复发的中药组合物、药物及其制备方法和应用

一种预防脑胶质瘤术后复发的中药组合物、药物及其制备方法和应用
1.本技术是申请日为2017年03月16日、申请号为201710156755.4、发明名称为《一种预防脑胶质瘤术后复发的中药组合物》的分案申请。
技术领域
2.本发明涉及医药，特别是一种预防脑胶质瘤术后复发的中药组合物、药物及其制备方法和应用。


背景技术：

3.脑胶质瘤是由大脑和脊髓胶质细胞癌变引起的原发性肿瘤，是中枢神经系统最为常见的肿瘤之一，约占颅脑肿瘤的30-50％，具有发病率高、复发率高、死亡率高、治愈率低的特点，迄今为止仍不明确其发病病因。中国脑胶质瘤年发病率为3-6人/10万人，近几年发病呈年轻化趋势，发病年龄高峰在30-40岁，另外10岁左右儿童发病亦较多。
4.对脑胶质瘤仍以手术切除为主要治疗手段，放疗、化疗为辅，但是由于脑胶质瘤呈现浸润性无限制增生、缺乏凋亡，且与正常脑组织间无明显界限，侵犯多个脑叶，甚至侵犯脑深部重要功能区，手术难以切除彻底；又因为脑胶质瘤细胞对射线不敏感，化疗药物又难以透过血脑屏障且具有耐药性，导致脑胶质瘤的临床放疗和化疗效果均不理想，因而具有很高的复发率，平均生存期6个月，综合治疗生存期不足2年。中医药治疗本病有独特疗效，特别是预防术后复发。中医学认为本病主要为脾肾不足、风痰凝结、瘀毒内阻、正气亏虚，多以健脾补肾法治疗。但目前手术切除、放疗、化疗均为峻猛攻邪之法，会使患者受损的正气更加衰竭，不利于疾病的恢复和延长患者生存期。
5.现虽有治疗预防脑胶质瘤术后复发的多种药物，但由于种种原因，特别是药物的组成上存在的问题，其使用并不尽人意，因此研制新的治疗预防脑胶质瘤术后复发的药物势在必行。


技术实现要素：

6.针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种预防脑胶质瘤术后复发的中药组合物，可有效解决预防脑胶质瘤术后复发的用药问题。
7.本发明解决的技术方案是，一种预防脑胶质瘤术后复发的中药组合物由以下重量份数计的原料药物制成：党参1-8份，黄芩1-5份，生龙骨1-5份，生牡蛎1-5份，桂枝1-15份，茯苓1-10份，清半夏1-5份，柴胡1-8份，大黄1-15份，炒二丑1-5份，牡丹皮1-7份，生石膏1-15份，寒水石1-5份，干姜1-7份，大贝1-7份，元参1-10份，生甘草1-8份和大枣1-5份，其中，先将除生龙骨、生牡蛎的其他16味原料药物混合在一起，加入其他16味原料药物重量7-10倍的水，浸泡30-60min；将生龙骨、生牡蛎混合在一起，加生龙骨、生牡蛎重量7-10倍的水，浸泡30-60min，煎煮30-40min，倒入浸泡30-60min后的其他16味原料药物中，再煎煮30-40min，过滤，得第一次滤液；药渣再加入原料药物重量7-10倍的水，煎煮30-40min，过滤得
第二次滤液，合并两次滤液，混匀成中药液，待服用。
8.优选的，由以下重量份数计的原料药物制成：党参7份，黄芩4份，生龙骨4份，生牡蛎4份，桂枝8份，茯苓8份，清半夏4份，柴胡6份，大黄9份，炒二丑4份，牡丹皮6份，生石膏9份，寒水石4份，干姜6份，大贝5份，元参8份，生甘草6份和大枣3份；
9.或，党参5份，黄芩6份，生龙骨3份，生牡蛎3份，桂枝5份，茯苓3份，清半夏6份，柴胡4份，大黄5份，炒二丑6份，牡丹皮4份，生石膏5份，寒水石6份，干姜3份，大贝3份，元参6份，生甘草4份和大枣6份；
10.或，党参3份，黄芩4份，生龙骨2份，生牡蛎2份，桂枝4份，茯苓4份，清半夏2份，柴胡3份，大黄4份，炒二丑3份，牡丹皮5份，生石膏7份，寒水石3份，干姜5份，大贝3份，元参2份，生甘草8份和大枣5份；
11.或，党参2份，黄芩3份，生龙骨3份，生牡蛎3份，桂枝2份，茯苓2份，清半夏3份，柴胡3份，大黄2份，炒二丑2份，牡丹皮2份，生石膏6份，寒水石2份，干姜3份，大贝2份，元参3份，生甘草3份和大枣5份。
12.优选的，由以下重量计的原料药物制成：党参100g，黄芩100g，生龙骨300g，生牡蛎300g，桂枝100g，茯苓120g，清半夏100g，柴胡100g，大黄100g，炒二丑60g，牡丹皮100g，生石膏300g，寒水石100g，干姜100g，大贝100g，元参300g，生甘草60g和大枣200g；
13.或，党参200g，黄芩200g，生龙骨100g，生牡蛎100g，桂枝200g，茯苓150g，清半夏200g，柴胡200g，大黄200g，炒二丑100g，牡丹皮200g，生石膏100g，寒水石200g，干姜200g，大贝200g，元参100g，生甘草100g和大枣100g；
14.或，党参50g，黄芩50g，生龙骨150g，生牡蛎150g，桂枝50g，茯苓50g，清半夏60g，柴胡60g，大黄60g，炒二丑30g，牡丹皮50g，生石膏150g，寒水石50g，干姜50g，大贝60g，元参150g，生甘草100g和大枣80g；
15.或，党参30g，黄芩30g，生龙骨80g，生牡蛎80g，桂枝30g，茯苓40g，清半夏40g，柴胡20g，大黄30g，炒二丑20g，牡丹皮30g，生石膏50g，寒水石40g，干姜30g，大贝30g，元参20g，生甘草30g和大枣30g。
16.本发明提供了上述技术方案所述中药组合物在制备预防脑胶质瘤术后复发药物中的应用。
17.本发明提供了上述技术方案所述中药组合物在制备抑制脑胶质瘤细胞细胞增殖药物中的应用。
18.本发明提供了上述技术方案所述中药组合物在制备提高机体免疫功能药物中的应用。
19.本发明提供了一种预防脑胶质瘤术后复发、抑制脑胶质瘤细胞细胞增殖和提高机体免疫功能的药物，所述药物的有效成分包括上述技术方案所述中药组合物。
20.本发明组分科学合理，制备方法简单，易操作，成本低，服用方便，效果好，易生产制备，是预防脑胶质瘤术后复发药物上的创新，有良好的经济和社会效益。
具体实施方式
21.以下结合实施例对本发明的具体实施方式作详细说明。
22.本发明在具体实施中，可由以下实施例实现。
23.实施例1
24.本发明在具体实施中，一种预防脑胶质瘤术后复发的中药组合物由以下重量份数计的原料药物制成：党参7份，黄芩4份，生龙骨4份，生牡蛎4份，桂枝8份，茯苓8份，清半夏4份，柴胡6份，大黄9份，炒二丑4份，牡丹皮6份，生石膏9份，寒水石4份，干姜6份，大贝5份，元参8份，生甘草6份和大枣3份，其中，先将除生龙骨、生牡蛎的其他16味原料药物混合在一起，加入其他16味原料药物重量7-10倍的水，浸泡30-60min；将生龙骨、生牡蛎混合在一起，加生龙骨、生牡蛎重量7-10倍的水，浸泡30-60min，煎煮30-40min，倒入浸泡30-60min后的其他16味原料药物中，再煎煮30-40min，过滤，得第一次滤液；药渣再加入原料药物重量7-10倍的水，煎煮30-40min，过滤得第二次滤液，合并两次滤液，混匀成中药液，待服用。
25.实施例2
26.本发明在具体实施中，一种预防脑胶质瘤术后复发的中药组合物由以下重量份数计的原料药物制成：党参5份，黄芩6份，生龙骨3份，生牡蛎3份，桂枝5份，茯苓3份，清半夏6份，柴胡4份，大黄5份，炒二丑6份，牡丹皮4份，生石膏5份，寒水石6份，干姜3份，大贝3份，元参6份，生甘草4份和大枣6份，制备方法同实施例1。
27.实施例3
28.本发明在具体实施中，一种预防脑胶质瘤术后复发的中药组合物由以下重量份数计的原料药物制成：党参3份，黄芩4份，生龙骨2份，生牡蛎2份，桂枝4份，茯苓4份，清半夏2份，柴胡3份，大黄4份，炒二丑3份，牡丹皮5份，生石膏7份，寒水石3份，干姜5份，大贝3份，元参2份，生甘草8份和大枣5份，制备方法同实施例1。
29.实施例4
30.本发明在具体实施中，一种预防脑胶质瘤术后复发的中药组合物由以下重量份数计的原料药物制成：党参2份，黄芩3份，生龙骨3份，生牡蛎3份，桂枝2份，茯苓2份，清半夏3份，柴胡3份，大黄2份，炒二丑2份，牡丹皮2份，生石膏6份，寒水石2份，干姜3份，大贝2份，元参3份，生甘草3份，大枣5份，制备方法同实施例1。
31.实施例5
32.本发明在具体实施中，一种预防脑胶质瘤术后复发的中药组合物由以下重量计的原料药物制成：党参100g，黄芩100g，生龙骨300g，生牡蛎300g，桂枝100g，茯苓120g，清半夏100g，柴胡100g，大黄100g，炒二丑60g，牡丹皮100g，生石膏300g，寒水石100g，干姜100g，大贝100g，元参300g，生甘草60g和大枣200g，制备方法同实施例1。
33.实施例6
34.本发明在具体实施中，一种预防脑胶质瘤术后复发的中药组合物由以下重量计的原料药物制成：党参200g，黄芩200g，生龙骨100g，生牡蛎100g，桂枝200g，茯苓150g，清半夏200g，柴胡200g，大黄200g，炒二丑100g，牡丹皮200g，生石膏100g，寒水石200g，干姜200g，大贝200g，元参100g，生甘草100g和大枣100g，制备方法同实施例1。
35.实施例7
36.本发明在具体实施中，一种预防脑胶质瘤术后复发的中药组合物由以下重量计的原料药物制成：党参50g，黄芩50g，生龙骨150g，生牡蛎150g，桂枝50g，茯苓50g，清半夏60g，柴胡60g，大黄60g，炒二丑30g，牡丹皮50g，生石膏150g，寒水石50g，干姜50g，大贝60g，元参150g，生甘草100g和大枣80g，制备方法同实施例1。
37.实施例8
38.本发明在具体实施中，一种预防脑胶质瘤术后复发的中药组合物由以下重量计的原料药物制成：党参30g，黄芩30g，生龙骨80g，生牡蛎80g，桂枝30g，茯苓40g，清半夏40g，柴胡20g，大黄30g，炒二丑20g，牡丹皮30g，生石膏50g，寒水石40g，干姜30g，大贝30g，元参20g，生甘草30g和大枣30g，制备方法同实施例1。
39.在上述原料药物中，其中：
40.党参，为桔梗科植物党参的干燥根，味甘、平，归脾、肺经；健脾益肺，养血生津；用于脾肺气虚、食少倦怠、咳嗽虚喘、气血不足、面色萎黄、心悸气短。
41.黄芩，为唇形科植物黄芩的干燥根，味苦、寒，归肺、胆、脾、大肠、小肠经；清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎；用于湿温、暑湿、胸闷呕恶、湿热痞满、泻痢、黄疸、肺热咳嗽、高热烦渴、血热吐衄、痈肿疮毒、胎动不安。
42.生龙骨，为古代哺乳动物如象类、犀牛类、三趾马等的骨骼化石，味甘、涩、平，归心、肝、肾、大肠经；平肝潜阳，镇惊安神，固涩；用于惊痫癫狂、怔忡健忘、失眠多梦、自汗盗汗、遗精淋浊、吐衄便血、崩漏带下、泻痢脱肛、溃疡久不收口。
43.生牡蛎，为牡蛎科动物近江牡蛎、长牡蛎或大连湾牡蛎等的贝壳，味咸、微寒，归肝、胆、肾经；益阴潜阳，软坚散结，固涩；用于惊悸失眠、眩晕耳鸣、瘰疬痰核、癥瘕痞块、自汗盗汗、遗精崩带、胃痛泛酸。
44.桂枝，为樟科植物肉桂的干燥嫩枝，味辛、甘、温，归心、肺、膀胱经；发汗解肌、温通经脉、助阳化气、平冲降气；用于风寒感冒、脘腹冷痛、血塞经闭、关节痹痛、痰饮水肿、心悸奔豚。
45.茯苓，为多孔菌科真菌茯苓的干燥菌核，味甘、淡、平，归心、肺、脾、肾经；利水渗湿、健脾宁心；用于水肿尿少、痰饮眩悸、脾虚食少、便溏泄泻、心神不安、惊悸失眠。
46.清半夏，为天南星科植物清半夏的干燥块茎，味辛、温，归脾、胃、肺经；燥湿化痰、降逆止呕、消痞散结；用于湿痰寒痰、咳喘痰多、痰饮眩悸、风痰眩晕、痰厥头疼、呕吐反胃、胸脘痞闷、梅核气。
47.柴胡，为伞形科植物柴胡或狭叶柴胡的干燥根，味辛、苦、微寒，归肝、胆、肺经；疏散退热、疏肝解郁、升举阳气；用于感冒发热、寒热往来、胸胁胀痛、月经不调、子宫脱垂、脱肛。
48.大黄，为蓼科植物掌叶大黄、唐古特大黄或药用大黄的干燥根和根茎，味苦、寒，归脾、胃、大肠、肝、心包经；泻下攻积、清热泻火、凉血解毒、逐瘀通经、利湿退黄；用于湿热积滞便秘、血热吐衄、目赤咽肿、痈肿疔疮、肠痈腹痛、瘀血经闭、产后瘀阻、跌打损伤、湿热痢疾、黄疸赤尿、淋证水肿。
49.炒二丑，为旋花科植物裂叶牵牛或园叶牵牛的干燥成熟果实，味苦、寒，归肺、肾、大肠经；泻水通便、消痰涤饮、杀虫攻积。用于水肿胀满、二便不通、痰饮积聚、气逆喘咳、虫积腹痛。
50.牡丹皮，为毛茛科植物牡丹的干燥根皮，味辛、微寒，归心、肝、肾经；清热凉血，活血化瘀；用于热入营血、温毒发斑、吐血衄血、夜热早凉、无汗骨蒸、经闭痛经、跌扑伤痛、痈肿疮毒。
51.生石膏，为硫酸盐类矿物硬石膏族石膏，味甘、辛、大寒，归肺、胃经；清热泻火、除
烦止渴；用于外感热病、高热烦渴、肺热喘咳、胃火亢盛、头痛、牙痛。
52.寒水石，为硫酸钙或碳酸钙矿石，味辛、咸、寒，归心、胃、肾经；清热泻火，利窍，消肿；用于热病烦渴，丹毒烫伤。
53.干姜，为姜科植物姜的干燥根茎，味辛、热，归脾、胃、肾、心、肺经；温热散寒、回阳通脉、温肺化饮；用于脘腹冷痛、呕吐泄泻、肢冷脉寒、寒饮喘咳。
54.大贝，为百合科植物平贝母的干燥鳞茎，味苦、甘、微寒，归肺、心经；清热润肺、化痰止咳；用于肺热燥咳、干咳少痰、阴虚劳嗽、咳痰带血。
55.元参，为玄参科植物玄参的干燥根，味甘、苦、咸、微寒，归肺、胃、肾经；清热凉血、滋阴降火、解毒散结；用于热入营血、温毒发斑、热病伤阴、舌绛烦渴、津伤便秘、骨蒸劳嗽、目赤咽痛、白喉、痈肿疮毒。
56.生甘草，为豆科植物甘草、胀果甘草或光果甘草的干燥根和根茎，味甘、平，归心、肺、脾、胃经；补脾益气、清热解毒、祛痰止咳、缓急止痛、调和诸药；用于脾胃虚弱、倦怠乏力、心悸气短、咳嗽痰多、脘腹、四肢痉急疼痛、痈肿疮毒、缓解药物毒性、烈性。
57.大枣，为鼠李科植物枣的干燥成熟果实，味甘、温，归、脾、胃、心经；补中益气，养血安神；用于脾虚食少、乏力便溏、妇人脏躁。
58.上述药物的有效配伍，互相协同，互相支持，具有健脾补肾、化痰祛瘀、扶正祛邪之功效，有利于提高机体免疫功能，是预防脑胶质瘤术后复发药物上的创新，并经临床试验和应用，取得了非常满意的有益技术效果，有关资料如下：
59.中药组合物水煎液对c6(脑胶质瘤细胞)增殖影响研究实验资料
60.1.实验材料
61.1.1实验用细胞
62.c6(脑胶质瘤细胞)，购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心，使用rimp1640培养基和胎牛血清，置于37℃和5％co2浓度培养箱培养。
63.1.2实验药物
64.本发明中药组合物。
65.1.3实验试剂
66.rimp1640(gibco公司)；新生牛血清(杭州四季清生物工程材料有限公司，批号：150928)；0.25％胰蛋白酶(gibco公司)；二甲亚砜(sigma公司)；edta(sigma公司)；细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(上海博谷生物科技有限公司，批号：9368593)；
67.1.4实验仪器
68.sj-cj-2fdq型双人单面洁净工作台(苏州苏洁净化设备有限公司)；esw-8cq型co2培养箱(thermo fisher scientific，美国)；倒置相差显微镜(leica，德国)；精密移液器(eppendof，德国)；低速离心机(安徽中科中佳科学仪器有限公司)；全自动高压灭菌锅(gr60dr，厦门致微)；数显三用恒温水箱(苏州威尔实验用品有限公司)；milli-q超纯水系统(美国默克密理博)；电子天平(xs205，梅特勒-托利多，瑞士)；细胞计数板；96孔培养板；0.2μm虑头等。
69.2.实验方法
70.①
用rimp1640、10％胎牛血清于37℃和5％co2培养箱中培养c6细胞，当细胞生长至对数期时，弃去培养液并用pbs洗3遍，加入胰蛋白酶和edta于37℃消化3分钟，然后加入
培养基，用移液器轻轻吹打贴壁细胞至完全悬浮，转入离心管于1000rpm离心10分钟，调整细胞密度为2
×
104个/ml。
71.②
在96孔板中加入细胞(每孔约2
×
104个细胞)，置于37℃和5％co2培养箱中培养24小时。
72.③
根据细胞生长情况，加入适量实施例1浓缩水煎液，继续在培养箱中孵育适当时间。
73.④
将5
×
mtt稀释成1
×
mtt。
74.⑤
每孔加入50μl 1
×
mtt，在37℃孵育4小时，使mtt还原为甲月赞。
75.⑥
然后吸出上清液，每孔加入200μl dmso使甲月赞充分溶解，用平板摇床摇匀。酶标仪在570nm波长处检测每孔的光密度。
76.⑦
将各测试孔的od值减去本底od值或空白药物孔od值，各重复孔的od值取平均数
±
标准差；以细胞存活率(t/c％)来表示药物对细胞的抑制效果，t为加药细胞的od值，c为对照细胞的od值；细胞存活率％＝(加药细胞od值/对照细胞od值)
×
100％，每组实验重复三次。
77.3.实验结果
78.mtt实验完成后统计结果显示，与空白对照组比较，当药物剂量达到10mg/ml时，对c6细胞增殖抑制有差异(p﹤0.01)，当剂量大于15mg/ml时具有极显著性差异(p﹤0.001)；结果见表1。
79.表1在570nm波长od值及其存活率
[0080][0081]
注：与对照组比较，*p﹤0.01；**p﹤0.001。
[0082]
4.实验结论
[0083]
本发明的中药组合物可以抑制c6(脑胶质瘤细胞)细胞增殖，减少c6细胞的生长数目，且该抑制作用呈现药物剂量依赖性，和阳性对照药替莫唑胺具有同等疗效，但无替莫唑胺的毒副作用，说明本发明的中药组合物很好的抑制了胶质瘤细胞的增殖，在预防脑胶质瘤术后复发具有优势。
[0084]
经临床实际应用，其疗效之好是未曾料到的，有关临床资料如下。
[0085]
1、一般资料：共收治脑胶质瘤患者120例，其中男性73例，女性47例，年龄17-72岁，平均年龄38岁。按who脑胶质瘤4级分类标准，各级例数如下表。
[0086] 1级(who)2级(who)3级(who)4级(who)例数5472345
[0087]
治疗方案：本发明中药组合物水煎服，每日两次，早晚分服，每次200-300ml，一个月为一个疗程，服用2-3个疗程统计疗效。
[0088]
2、疗效判定标准：
[0089]
临床治愈：临床症状消失，影像学检查肿瘤消失，5年内未复发；
[0090]
临床显效：临床症状大部分消失，影像学检查肿瘤缩小；
[0091]
临床有效：临床症状明显缓解，影像学检查肿瘤无明显变化；
[0092]
临床无效：临床症状无变化，影像学检查肿瘤增大。
[0093]
3、统计学处理
[0094]
120例患者中临床治愈43例，显效52例，有效17例，无效8例，总有效率93.3％，疗效确切显著，治疗过程中患者未出现其他不适。
[0095][0096]
由上述结果可以看出，本发明中药组合物具有健脾补肾、化痰祛瘀、扶正祛邪之功效，有利于提高机体免疫功能，控制肿瘤增殖，减毒增效，预防复发，延长生存期，是预防脑胶质瘤术后复发药物上的创新，与现有技术相比，具有以下有益技术优势：
[0097]
(1)本配方具有健脾补肾、化痰祛瘀、扶正祛邪之功效，共同促进人体正气的旺盛，有利于提高机体免疫功能；
[0098]
(2)本发明中的中药均为天然植物来源，安全性好，有实际的经济价值和临床价值，是运用中医药预防脑胶质瘤术后复发上的创新；
[0099]
(3)本发明成本低，原料药物丰富，易生产制备；
[0100]
(4)使用简单方便，效果好，疗效高达93％以上，具有很强的实际应用价值，利于身体健康，利于工业化生产和商业上推广，获得商业成功，有良好的经济和社会效益。
[0101]
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施例对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。