一种邻羟基苯甲酸苄酯及其药物组合物与用途

本发明涉及生物医药领域，具体涉及从天然药物一枝黄花中分离得到的新结构化合物 fn或其药学上可接受的盐的制备方法，及含有该化合物或其医学上可接受的盐的药用组合物，及其在炎症、纤维化及急性肺损伤相关疾病中的应用。

背景技术：

1、天然药物是现代药用化合物的重要来源。一枝黄花(solidago decurren)系菊科一枝黄花属植物，主产于我国的华东、中南、西南及陕西、台湾等地区。一枝黄花作为药用植物，应用十分广泛，具有疏风清热、解毒消肿的功效，主要应用于风热感冒、头痛、咽喉肿痛及肺热咳嗽等疾病的治疗。现代药理学研究表明，一枝黄花具有抗菌、利尿、祛痰平喘等作用。迄今为止，对一枝黄花的化学成分和药理活性研究报道较少，文献报道其主要化学成分有黄酮、皂苷、苯甲酸苄酯、苯丙酸等。fn(式i)为本研究组在一枝黄花化学成分研究中发现的新结构苯甲酸苄酯类天然产物。药理实验结果显示，fn具有显著的抗炎、抗纤维化和治疗急性肺损伤的作用，是一个具有深入研究价值的活性天然产物。相关文献检索显示：该化合物的结构及相关的药理活性研究迄今未见报道。

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技术实现思路

1、本发明要解决的技术问题是，提供一类邻羟基苯甲酸苄酯类化合物，及其药物组合物与用途。

2、为解决本发明的技术问题，本发明提供如下技术方案：

3、本发明技术方案的第一方面在于提供一种如式(i)所示的天然产物fn及其药学上可接受的盐。

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5、本研究首次从药用植物一枝黄花中分离获得了新结构的苯甲酸苄酯类天然产物fn，并通过光谱解析的方法确定了其结构式为式(i)。

6、本发明所述化合物包括式(i)所示化合物及其药学上可接受的盐。

7、本发明技术方案的第二方面是提供一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包含式(i)所示化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体或辅料。

8、本发明所述药物组合物，其特征在于该组合物包含通式(i)所示化合物、及其药学上可接受的盐及药用载体和/或赋形剂。

9、本发明化合物的药物组合物可根据本领域公知的方法制备。用于此目的时，如果需要，可将本发明化合物与一种或多种固体或液体药物赋形剂和/或辅剂结合，制成可作为药物使用的适当的施用形式或剂量形式。

10、本发明化合物或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药，给药途径可为肠道或非肠道，如口服、静脉注射、皮下注射、腹腔注射、鼻腔、口腔黏膜、眼、肺和呼吸道、皮肤、阴道、直肠等，优选口服给药。

11、给药剂型可以是液体剂型、固体剂型或半固体剂型。液体剂型可以是溶液剂(包括真溶液和胶体溶液)、乳剂(包括o/w型、w/o型和复乳)、混悬剂、注射剂(包括水针剂、粉针剂和输液)、滴眼剂、滴鼻剂、洗剂和搽剂等。固体剂型可以是片剂(包括普通片、肠溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡腾片、口腔崩解片)、胶囊剂(包括硬胶囊、软胶囊、肠溶胶囊)、颗粒剂、散剂、微丸、滴丸、栓剂、膜剂、贴片、气(粉)雾剂、喷雾剂等；半固体剂型可以是软膏剂、凝胶剂、糊剂等。

12、本发明化合物可以制成普通制剂，也可以是缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药系统。

13、为了将单位给药剂型制成片剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子是，例如稀释剂与吸收剂，如淀粉、糊精、硫酸钙、乳糖、甘露醇、蔗糖、氯化纳、葡萄糖、尿素、碳酸钙、白陶土、微晶纤维素、硅酸铝等；湿润剂与粘合剂，如水、甘泊、聚乙二醇、乙醇、丙醇、淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素纳、紫胶、甲基纤维素、磷酸钾、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解剂，例如干燥淀粉、海藻酸盐、琼脂粉、褐藻淀粉、碳酸氢纳与枸橼酸、碳酸钙、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等；崩解抑制剂，例如蔗糖、三硬脂酸甘油酯、可可脂、氢化油等；吸收促进剂，例如季铵盐、十二烷基硫酸纳等；润滑剂，例如滑石粉、二氧化硅、玉米淀粉、硬脂酸盐、硼酸、液体石蜡、聚乙二醇等。还可以将片剂进一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片和多层片。

14、为了将给药单元制成丸剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子是，例如稀释剂与吸收剂，如葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、氢化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、gelucire、高岭土、滑石粉等；粘合剂，如阿拉伯胶、黄蓍胶、明胶、乙醇、蜂蜜、液糖、米糊或面糊等；崩解剂，如琼脂粉、干燥淀粉、海藻酸盐、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等。

15、为了将给药单元制成栓剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子是，例如聚乙二醇、卵磷脂、可可脂、高级醇、高级醇的酶、明胶、半合成甘油酶等。

16、为了将给药单元制成胶囊，将有效成分与上述的各种载体混合，并将由此得到的混合物置于硬的明胶胶囊或软胶囊中。也可将有效成分制成微囊剂，混悬于水性介质中形成混悬剂，亦可装入硬胶囊中或制成注射剂应用。

17、例如，将本发明的组合物制成注射用制剂，如溶液剂、混悬剂溶液剂、乳剂、冻干粉针剂，这种制剂可以是含水或非水的，可含一种和/或多种药效学上可接受的载体、稀释剂、粘合剂、润滑剂、防腐剂、表面活性剂或分散剂。如稀释剂可选自水、乙醇、聚乙二醇、1， 3一丙二醇、乙氧基化的异硬脂醇、多氧化的异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酶等。另外，为了制备等渗注射液，可以向注射用制剂中添加适量的氯化钠、葡萄糖或甘油，此外，还可以添加常规的助溶剂、缓冲剂、ph调节剂等。这些辅料是本领域常用的。

18、此外，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂、甜味剂或其它材料。

19、为达到用药目的，增强治疗效果，本发明的药物或药物组合物可用任何公知的给药方法给药。

20、本发明药用组合物的给药剂量取决于许多因素，例如所要预防或治疗疾病的性质和严重程度，患者或动物的性别、年龄、体重、性格及个体反应，给药途径、给药次数等，因此本发明的治疗剂量可以有大范围的变化。一般来讲，本发明化合物使用剂量是本领域技术人员公知的。可以根据本发明药用组合物中最后的制剂中所含有的实际有效药物数量，加以适当的调整，以达到其治疗有效量的要求，完成本发明的预防和治疗炎症、纤维化相关疾病和急性肺损伤的目的。

21、通常对体重约75公斤患者，所给本发明化合物的日剂量为0.001mg/kg体重～400mg/kg体重，优选1mg/kg体重～200mg/kg体重。上述剂量可以单一剂量形式或分成几个，例如二、三或四个剂量形式给药，这受限于给药医生的临床经验以及给药方案。本发明的化合物或组合物可单独服用，或与其它治疗药物或对症药物合并使用。

22、本发明技术方案的第三方面是提供式(i)所述化合物fn及其药效学上可接受的盐及其药物组合物在制备治疗和/或预防炎症、纤维化相关疾病和急性肺损伤药物中的应用。

23、所述炎症性疾病包括关节炎、肾炎、气管炎、鼻炎、咽炎。所述纤维化性疾病包括肺纤维化、肝纤维化。

24、为了完成本发明的目的，本发明涉及邻羟基苯甲酸苄酯fn及其药效学上可接受盐及其药用盐、药用载体和/或赋形剂、及其药物组合物在炎症、纤维化性疾病和急性肺损伤中的应用。

25、炎症是关节炎、肾炎、气管炎、鼻炎、咽炎等炎症性疾病的基本病症，抗炎治疗是其临床治疗的必要手段。fn对巴豆油诱导小鼠耳炎具有显著的抑制作用，25、50、100、200mg/kg 体重剂量给药抑制率分别为44.0％、49.6％、55.4％和72.0％，等剂量(50mg/kg)下抑制率明优于阳性对照药(26.0％)。

26、抗纤维化能有效减缓肺纤维化、肝纤维化等的疾病进展。采用tgf-β1诱导的小鼠肺成纤维细胞(nih3t3)中羟脯氨酸生成，体外模拟组织纤维化时，组织内胶原纤维增加情况，反映其纤维化程度。fn在10μm和20μm剂量下均可显著降低tgf-β1诱导的nih3t3细胞中羟脯氨酸生成升高，展示出明显的抗纤维化作用。

27、急性肺损伤是由直接或间接因素导致的肺泡上皮细胞及毛细血管内皮细胞损伤，导致急性低氧性呼吸功能不全。本发明以lps气管滴注诱导制备小鼠急性肺损伤(ali)模型，fn在 7.5、15.0、30mg/kg剂量下，可显著降低了ali小鼠balf中总白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞计数水平；在12.5、25.0、50和100mg/kg剂量下，可显著提升了ali小鼠腹主动脉血po2、 sao2和ph值水平、降低了血pco2水平。fn各剂量给药后小鼠未表现出毒副作用，而阳性药吲哚美辛(15.0mg/kg)组出现4只小鼠死亡，地塞米松组(12.5和15.0mg/kg)小鼠体型瘦弱、精神萎靡，表现出明显的毒副作用。

28、本发明技术方案的第四方面是提供式(i)所示天然产物的制备方法。

29、为实现本发明的上述目的，本发明从药用植物一枝黄花中分离制备获得新结构天然产物 fn，分子式为c16h16o5，命名为2-羟基苯甲酸-2,6-二甲氧基苯基甲基酯。其特征在于，分离制备步骤如下：

30、步骤一、一枝黄花全草，粉碎，热水浸泡1小时，趁热过滤，去除滤液，剩余残渣继续以75％乙醇回流提取2次，每次2-3小时，合并提取液，减压浓缩得乙醇浸膏。

31、步骤二、乙醇浸膏加水适量制成混悬液，以等体积二氯甲烷萃取3次，合并萃取液，减压浓缩，得二氯甲烷浸膏。

32、步骤三、二氯甲烷浸膏以硅胶柱层析分离，石油醚/乙酸乙酯4:1，2:1，1:2梯度洗脱，收集4:1洗脱液，减压浓缩得富含fn的分离段。

33、步骤四、富含fn的分离段进一步进行硅胶柱层析，二氯甲烷洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，干燥，得天然产物fn样品(式(ⅰ)结构的化合物)。

34、与现有技术相比，本发明有益的技术效果为：(1)本发明首次从药用植物一枝黄花中分离鉴定获得新结构的邻羟基苯甲酸苄酯类天然产物fn；(2)本发明首次发现并证实所述化合物具有较强的抗炎、抗纤维化和抗急性肺损伤活性，且显示相对较小的毒副作用；(3) 本发明所述化合物在植物中含量较高，原料易得，提取、分离方法简单易行，具有良好的经济价值和应用前景。