一种含植物愈伤组织提取物的组合物及其应用的制作方法

1.本发明属于天然功效成份技术领域，尤其涉及一种含植物愈伤组织提取物的组合物及其应用。


背景技术：

2.愈伤组织原指植物体的局部受到创伤刺激后，在伤口表面新生的组织。泛指植物中由薄壁细胞组成且未形成特定结构的组织，通常出现于植物的伤口处。现代研究发现，植物愈伤组织中含有多种活性功能性成分，且由于其安全性和可靠性较好，因而已在医药和化妆品等领域都得到较好的接受和应用。例如，烟草愈伤组织提取物具有抗痤疮、治疗青光眼的功效，天山雪莲愈伤组织提取物具有抗肿瘤的功效，苍耳愈伤组织提取物具有抑菌的功效，高山红景天愈伤组织具有抗氧化的功效。
3.然而当前对于愈伤组织提取物的研究程度还较为有限，尚未有愈伤组织提取物与其他组分联用以起到增效作用的相关报道。因此，本发明希望提供一种含植物愈伤组织提取物，且性能更优的组合物。


技术实现要素：

4.本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种含植物愈伤组织提取物的组合物及其应用。所述组合物通过植物愈伤组织提取物与其他组分间的配合，产生一定协同增效作用，取得了显著的皮肤抗氧化、抗衰老功效。
5.本发明提供一种含植物愈伤组织提取物的组合物，包括以下组分：
6.抗氧化剂、紫茉莉提取物和巴尔干苣苔叶提取物；所述抗氧化剂包括高山火绒草愈伤组织提取物、滨海剌芹愈伤组织培养物滤液中的至少一种。
7.本发明以高山火绒草愈伤组织提取物、滨海剌芹愈伤组织培养物滤液这两种植物愈伤组织提取物中的至少一种作为主要抗氧化组分，并发现与传统上作为润肤剂的巴尔干苣苔叶提取物，以及作为抗菌抗炎剂的紫茉莉提取物进行配合，由此所得到的组合物具备更为优良的抗氧化和抗衰护肤性能。
8.优选的，所述抗氧化剂为高山火绒草愈伤组织提取物和滨海剌芹愈伤组织培养物滤液。
9.优选的，所述组合物包括以下重量份数的组分：
[0010][0011]
优选的，所述高山火绒草愈伤组织提取物的制备方法为：
[0012]
(1)以高山火绒草的叶片作为诱导愈伤组织的外植体，并使用含0.2-0.3mg/l naa
和0.5-0.8mg/l 2,4-d的ms基础培养基进行诱导；
[0013]
(2)将诱导得到的愈伤组织经溶剂回流提取、浓缩，制得高山火绒草愈伤组织提取物。
[0014]
其中，2,4-d(2,4-二氯苯氧乙酸)和naa(萘乙酸)均为植物生长调节剂，起诱导产生愈伤组织的作用。本发明发现，以高山火绒草的叶片作为外植体，并采用上述组成的培养基进行诱导，所制得高山火绒草愈伤组织提取物具有比市售产品更好的抗氧化性能。
[0015]
更优选的，步骤(2)中所述溶剂选自乙醇或丙酮。
[0016]
本发明还提供了上述组合物的制备方法，包括以下步骤：
[0017]
将所述抗氧化剂、紫茉莉提取物和巴尔干苣苔叶提取物混合，得到所述组合物。
[0018]
本发明还提供了上述组合物在制备化妆品中的应用。
[0019]
本发明还提供了一种抗衰精华液，包括上述组合物。
[0020]
优选的，所述组合物在所述抗衰精华液中的用量为1.5-3.5wt％。
[0021]
优选的，所述抗衰精华液中还包括保湿剂、美白成分、润肤剂、增稠剂或水中的至少一种。
[0022]
相对于现有技术，本发明的有益效果如下：
[0023]
本发明通过将具有抗氧化功效的特定植物愈伤组织提取物(高山火绒草愈伤组织提取物、滨海剌芹愈伤组织培养物滤液)与巴尔干苣苔叶提取物(润肤剂)、紫茉莉提取物(抗菌抗炎剂)进行配合，结果发现所制得组合物的抗氧化、抗衰老效果得到显著的提升。除此之外，相比于市售的高山火绒草愈伤组织提取物，采用本发明所提供的制备方法所制得的高山火绒草愈伤组织提取物的性能更好、抗氧化活性更高。
具体实施方式
[0024]
为了让本领域技术人员更加清楚明白本发明所述技术方案，现列举以下实施例进行说明。需要指出的是，以下实施例仅为本发明的优选实施例，对本发明要求的保护范围不构成限制作用，任何未违背本发明的精神实质和原理下所做出的修改、替代、组合，均包含在本发明的保护范围内。
[0025]
以下实施例中所用的原料、试剂或装置如无特殊说明，均可从常规商业途径得到，或者可以通过现有已知方法得到。
[0026]
实施例1
[0027]
本实施例提供一种含植物愈伤组织提取物的组合物，该组合物包括以下重量份数的组分：
[0028][0029]
其中，高山火绒草愈伤组织提取物购自天津艾赛博生物技术有限公司；滨海剌芹愈伤组织培养物滤液为法国biotech marine公司生产；紫茉莉提取物购自西安优硕生物科
技有限公司；巴尔干苣苔叶提取物购自croda(禾大)公司。
[0030]
本实施例中组合物的制备方法，包括以下步骤：
[0031]
将高山火绒草愈伤组织提取物、滨海剌芹愈伤组织培养物滤液、紫茉莉提取物和巴尔干苣苔叶提取物混合，以80r/min的转速分散约3min，制得组合物。
[0032]
实施例2
[0033]
本实施例提供一种含植物愈伤组织提取物的组合物，该组合物包括以下重量份数的组分：
[0034][0035]
其中，滨海剌芹愈伤组织培养物滤液为法国biotech marine公司生产；紫茉莉提取物购自西安优硕生物科技有限公司；巴尔干苣苔叶提取物购自croda(禾大)公司。
[0036]
高山火绒草愈伤组织提取物为自行制备得到，具体制备方法包括：
[0037]
(1)以高山火绒草的叶片作为诱导愈伤组织的外植体，并使用含0.2mg/l naa和0.5mg/l2,4-d的ms基础培养基进行诱导；
[0038]
(2)将诱导得到的愈伤组织制为干品，采用75％乙醇回流提取3次，合并回流后的药液，减压旋转蒸发浓缩，制得高山火绒草愈伤组织提取物。
[0039]
本实施例中组合物的制备方法，包括以下步骤：
[0040]
将高山火绒草愈伤组织提取物、滨海剌芹愈伤组织培养物滤液、紫茉莉提取物和巴尔干苣苔叶提取物混合，以80r/min的转速分散约3min，制得组合物。
[0041]
实施例3
[0042]
本实施例提供一种抗衰精华液，包括以下重量百分数的组分：实施例2中组合物3％，透明质酸钠5％，甘油8％，丁二醇4％，β-熊果苷3％、维生素c 2％，水余量。
[0043]
对比例1
[0044]
本对比例提供一种含植物愈伤组织提取物的组合物，该组合物包括以下重量份数的组分：
[0045]
高山火绒草愈伤组织提取物
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6份，
[0046]
滨海剌芹愈伤组织培养物滤液
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3份。
[0047]
其中，高山火绒草愈伤组织提取物购自天津艾赛博生物技术有限公司；滨海剌芹愈伤组织培养物滤液为法国biotech marine公司生产。
[0048]
本对比例中组合物的制备方法，包括以下步骤：
[0049]
将高山火绒草愈伤组织提取物和滨海剌芹愈伤组织培养物滤液混合，以80r/min的转速分散约3min，制得组合物。
[0050]
对比例2
[0051]
本对比例提供一种含植物愈伤组织提取物的组合物，该组合物包括以下重量份数的组分：
[0052]
高山火绒草愈伤组织提取物
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6份，
[0053]
滨海剌芹愈伤组织培养物滤液
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3份，
[0054]
紫茉莉提取物
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8份。
[0055]
其中，高山火绒草愈伤组织提取物购自天津艾赛博生物技术有限公司；滨海剌芹愈伤组织培养物滤液为法国biotech marine公司生产；紫茉莉提取物购自西安优硕生物科技有限公司。
[0056]
本对比例中组合物的制备方法，包括以下步骤：
[0057]
将高山火绒草愈伤组织提取物、滨海剌芹愈伤组织培养物滤液和紫茉莉提取物混合，以80r/min的转速分散约3min，制得组合物。
[0058]
对比例3
[0059]
本对比例提供一种含植物愈伤组织提取物的组合物，该组合物包括以下重量份数的组分：
[0060]
高山火绒草愈伤组织提取物
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6份，
[0061]
滨海剌芹愈伤组织培养物滤液
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3份，
[0062]
巴尔干苣苔叶提取物
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8份。
[0063]
其中，高山火绒草愈伤组织提取物购自天津艾赛博生物技术有限公司；滨海剌芹愈伤组织培养物滤液为法国biotech marine公司生产；巴尔干苣苔叶提取物购自croda(禾大)公司。
[0064]
本对比例中组合物的制备方法，包括以下步骤：
[0065]
将高山火绒草愈伤组织提取物、滨海剌芹愈伤组织培养物滤液和巴尔干苣苔叶提取物混合，以80r/min的转速分散约3min，制得组合物。
[0066]
产品效果测试
[0067]
1.急性皮肤刺激性测试
[0068]
选用5只spf级大白兔作为试验动物(购自四川大学实验动物中心)，将试验动物的背部毛发剪掉，去毛范围3厘米
×
3厘米。取实施例1-2、对比例1-3所制得组合物各0.5g，分别涂抹至试验动物的已去毛皮肤处，用无刺激性胶布固定2小时。去除试验动物皮肤上的受试组合物，持续观察试验动物与组合物接触部位的皮肤反应情况。测试结果表明，72小时后各试验动物的皮肤均仍未出现红斑和红肿现象，初步判定在本试验条件下，实施例1-2和对比例1-3所制得组合物按皮肤刺激强度分级均为无刺激性。
[0069]
2.抗氧化、抗衰老测试
[0070]
在本领域中，通常评价抗衰老性能的优劣是用清除dpph自由基能力测试来进行表征的，清除dpph自由基能力测试原理为：1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(dpph)是一种稳定的氮中心有机自由基，由于dpph自由基有单电子，在517nm处有一强吸收，其醇溶液呈紫色的特性。当有自由基清除剂存在时，由于与其单电子配对而使其吸收逐渐消失，其褪色程度与其接受的电子数量成定量关系，因而可用分光光度计进行快速的定量分析，来检测自由基清除情况，从而评价样品的抗衰老能力。其能力用清除率来表示，清除率越大，则表明其抗氧化、抗衰老能力越强。
[0071]
具体测试方法为：
[0072]
1.准确称取20mg dpph，用无水乙醇定容至250ml容量瓶中，作为dpph标准试剂；
[0073]
2.取实施例1-2、对比例1-3中组合物分别溶于无水乙醇中，设置得到相应的待测样品(待测样品设置多个浓度梯度)；
[0074]
3.设置空白对照组(2ml dpph标准试剂+1ml无水乙醇)和试验组(2ml dpph标准试剂+1ml待测样品)。
[0075]
4.在室温下反应10min后，测定517nm下的吸光度值，并根据以下公式计算清除率：
[0076]
清除率(％)＝(1-a/a0)
×
100％。
[0077]
其中，a0：空白对照组在517nm下的吸光度值；
[0078]
a：待测样品在517nm下的吸光度值。
[0079]
以清除dpph自由基50％的活性物浓度(ic
50
)来表征实施例1-2、对比例1-3中组合物对自由基的清除功效，具体检测结果如表1所示。
[0080]
表1抗dpph自由基活性检测结果
[0081][0082]
根据表1中检测结果可知：相比于对比例1，对比例3的组合物中还包括有巴尔干苣苔叶提取物，但由于巴尔干苣苔叶提取物本身并不具备明显抗氧化和抗衰老性能，因此对比例3中巴尔干苣苔叶提取物实际是对高山火绒草愈伤组织提取物、滨海剌芹愈伤组织培养物滤液进行了稀释，使得组合物的抗氧化和抗衰性能有所降低。而相比于对比例1，对比例2的组合物中还包括有紫茉莉提取物，可能是紫茉莉提取物本身也具有一定的抗氧化性能，或者其能对高山火绒草愈伤组织提取物、滨海剌芹愈伤组织培养物滤液的抗氧化性能产生促进作用，因而对比例2的抗氧化性能略优于对比例1。而根据实施例1的测试结果可知，正是由于紫茉莉提取物与巴尔干苣苔叶提取物的共同作用，才使得高山火绒草愈伤组织提取物、滨海剌芹愈伤组织培养物滤液的抗氧化、抗衰老功效得到显著的提高。将实施例1和实施例2进行比较可知，相比于市售的高山火绒草愈伤组织提取物，采用本发明中制备方法所制得的高山火绒草愈伤组织提取物具备更好的抗氧化性能。
[0083]
上面对本技术实施例作了详细说明，但是本技术不限于上述实施例，在所属技术领域普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本技术宗旨的前提下作出各种变化。此外，在不冲突的情况下，本技术的实施例及实施例中的特征可以相互组合。