南酸枣果皮提取物在制备抗过敏化妆品中的应用的制作方法

1.本发明属于化妆品技术领域，具体涉及南酸枣果皮提取物在制备抗过敏化妆品中的应用。


背景技术：

2.随着人们生活节奏的加快、工作压力的增大以及饮食结构的变化，过敏性人群快速增长。据不完全统计，过敏病患已占世界人口五分之二，在全球范围内，自我感觉为过敏性肌肤的人群越来越多，皮肤过敏已经成为影响人类健康的社会问题，具有抗敏功效的化妆品日益受到人们的重视，也是学者们研究的热点问题。
3.目前，敏感肌没有统一判断标准，常见的主观表现有：皮肤干燥、灼烧感、刺痛、麻刺痛、骚痒、紧绷感、红疹、红斑等。形成的原因有内在和外在两部分，内在原因是遗传、免疫力下降、新陈代谢紊乱等；外在原因是环境因素、饮食习惯、护理方式等。其主要表现如下：1.皮肤屏障功能受损，皮肤脆、薄、干、脱皮；2.炎症反应加剧，皮肤发炎，泛红；3.神经末梢反应性高，皮肤骚痒、刺痛。常见的有效抗敏产品用的功效成分都为合成产品，且有限用领域，如：地塞米松，传统的抗敏物质副作用较大，对使用者的身体健康影响较大。
4.天然抗敏剂是从天然植物中提取，在安全性方面远远好于其它化学合成剂，尤其受到学者和市场的青睐。开发含有独特功效的天然抗敏活性物质，并将其添加到化妆品中，研制天然抗敏化妆品，已成为化妆品产业发展最活跃的主题之一。
5.南酸枣为漆树科南酸枣属植物，又名五眼果，是蒙药习用药材，主要应用于临床治疗与心脏相关的疾病。研究发现，南酸枣果实中含有丰富的黄酮、多酚、皂苷、单宁等生物活性成分。近年，对南酸枣的综合开发利用主要集中在食品方面，以南酸枣果肉为原料制备南酸枣糕、南酸枣果酱等，市场销量非常大，而在大量生产南酸枣食品的过程中南酸枣果皮作为废弃物被大量抛弃，造成南酸枣资源的极大浪费，同时也极其不环保。目前并未有关于南酸枣果皮提取物抗敏功能的相关报道。


技术实现要素：

6.本发明的目的在于提供南酸枣果皮提取物在制备抗过敏化妆品中的应用，提高南酸枣的附加值，为天然抗敏剂的研发奠定基础。
7.本发明提供了南酸枣果皮提取物在制备抗过敏化妆品中的应用。
8.优选的，所述抗过敏化妆品中南酸枣果皮提取物的质量百分含量为1％～5％。
9.优选的，所述南酸枣果皮提取物的制备方法包括：将南酸枣果皮、乙醇水溶液和表面活性剂混合，在20～80℃下提取，过滤，得南酸枣果皮提取液；所述南酸枣果皮提取液中含有所述南酸枣果皮提取物。
10.优选的，所述提取包括在20～80℃下提取10～60min，重复提取2～5次，合并每次提取所得提取液。
11.优选的，所述提取包括超声提取；所述超声提取的功率为600w～1000w。
12.优选的，所述南酸枣果皮与乙醇水溶液的质量比为1：10～30；所述乙醇水溶液中乙醇的质量浓度为30％～90％。
13.优选的，所述南酸枣果皮与表面活性剂的质量比为1：0.5～5；所述表面活性剂包括十二烷基硫酸钠、单硬脂酸甘油酯、吐温和司盘中的一种或多种组合。
14.优选的，得南酸枣果皮提取液后，还包括利用大孔吸附树脂纯化所述南酸枣果皮提取液，得南酸枣果皮提取纯化液；
15.所述纯化的方式包括：利用大孔吸附树脂吸附所述南酸枣果皮提取液后，依次进行除杂和洗脱，得到的洗脱液即为所述南酸枣果皮纯化液；
16.所述除杂使用质量浓度30％的乙醇水溶液，所述洗脱使用质量浓度50％～70％的乙醇水溶液。
17.优选的，所述大孔吸附树脂的型号包括d101、ab-8、x-5或nka-2。
18.优选的，南酸枣果皮提取纯化液经冷冻干燥后即为所述南酸枣果皮提取物。
19.本发明还提供了一种抗敏精华乳，按照质量百分含量计，包括1％～5％南酸枣果皮提取物和余量辅料。
20.本发明提供了南酸枣果皮提取物在制备抗过敏化妆品中的应用。在本发明中，所述南酸枣果皮提取物能够抑制透明质酸酶的活性，从而产生抗敏作用。实施例结果表明，当本发明所述南酸枣果皮提取物质量浓度为5％时，对透明质酸酶的抑制率可达到90％。本发明所述南酸枣果皮提取物为天然活性成分，可用作化妆品功效原料，安全性高且副作用低。
具体实施方式
21.本发明提供了南酸枣果皮提取物在制备抗过敏化妆品中的应用。
22.本发明在利用南酸枣果皮提取物制备抗过敏化妆品时，所述南酸枣果皮提取物的添加量优选为抗过敏化妆品质量的1％～5％，进一步优选为2％～4％，更优选为3％。本发明对所述抗过敏化妆品的剂型没有严格要求，任意一种剂型的化妆品中均可添加本发明所述南酸枣果皮提取物，例如水、精华、凝胶、乳液、膏或霜。
23.本发明在制备水、精华、凝胶、乳液、膏或霜时，按照质量百分含量计，包括1％～5％南酸枣果皮提取物和余量辅料。本发明对辅料的具体种类和用量不作限定，根据需要常规选择即可。
24.本发明还提供了一种抗敏精华乳，按照质量百分含量计，包括1％～5％南酸枣果皮提取物和余量辅料。所述辅料优选包括环戊硅氧烷、环己硅氧烷、辛酸癸酸三甘油酯、生育酚醋酸酯、甘油、1,3-丁二醇、d-泛醇、乙二胺四乙酸二钠、汉生胶、尿囊素、十六烷基磷酸酯钾、聚丙烯酰胺、c13-14异链烷烃、月桂醇醚-7、香精、二羟基二甲基乙内酰脲和3-碘-2-丙炔基丁基氨基甲酸酯中的一种或多种。本发明对所述抗敏精华乳中每种辅料的添加量没有严格要求，满足质量百分百的需求即可。本发明实施例结果表明，利用本发明提供的南酸枣果皮提取物制备的抗敏精华乳具有显著的镇静皮肤和减轻皮肤红肿的功效。
25.在本发明中，所述南酸枣果皮提取物的制备方法，优选包括如下步骤：将南酸枣果皮、乙醇水溶液和表面活性剂混合，在20～80℃下提取10～60min，重复提取2～5次，合并每次提取所得提取液，过滤浓缩，得南酸枣果皮提取液；所述南酸枣果皮提取液中含有所述南酸枣果皮提取物。
26.本发明将南酸枣果皮、乙醇水溶液和表面活性剂混合，得南酸枣果皮混合物。本发明所述南酸枣果皮与乙醇水溶液的质量比优选为1:10～30，进一步优选为1:15～25，更优选为1:18～20。本发明所述乙醇水溶液中乙醇的体积浓度优选为30％～90％，进一步优选为40％～80％，更优选为50～60％。
27.在本发明中，涉及到的乙醇水溶液的浓度均为体积百分含量。
28.本发明所述表面活性剂优选包括十二烷基硫酸钠、单硬脂酸甘油酯、吐温和司盘中的一种或多种组合，进一步优选为十二烷基硫酸钠、单硬脂酸甘油酯或吐温。本发明所述表面活性剂可显著降低固-液相的界面张力，增加活性物质的溶解渗出能力，在天然产物提取过程中具有缩短提取时间，降低溶剂用量，提高提取率等优点。
29.得南酸枣果皮混合物后，本发明对南酸枣果皮混合物进行提取，分离，得南酸枣果皮提取液。本发明所述提取的温度优选为20～80℃，进一步优选为30～60℃，更优选为40～50℃；所述提取时间优选为10～60min，进一步优选为20～50min，更优选为30～40min。本发明所述提取优选包括超声提取；所述超声提取的功率优选为600w～1000w，进一步优选为650w～850w，更优选为700w～800w。本发明优选进行多次提取，合并提取液。本发明所述多次提取的次数优选为2～5次，进一步优选为3～4次。本发明在具体实施过程中，优选根据提取的次数确定提取的时间，具体的，当本发明所述提取的次数为2次，2次提取的总时间优选为20min；当本发明所述提取的次数为3次，3次提取的总时间优选为30min；当本发明所述提取的次数为4次，4次提取的总时间优选为50min。本发明将上述多次提取的提取液进行合并后，过滤，得南酸枣果皮提取液。本发明所述南酸枣果皮提取液中含有所述南酸枣果皮提取物。
30.得南酸枣果皮提取液后，本发明优选利用大孔吸附树脂对所述南酸枣果皮的提取液进行纯化，得南酸枣果皮提取纯化液。本发明所述纯化的方式优选包括：利用大孔吸附树脂吸附所述南酸枣果皮提取液后，依次进行除杂和洗脱，得到的洗脱液即为所述南酸枣果皮纯化液。本发明所述除杂优选使用质量浓度30％的乙醇水溶液；所述洗脱优选使用质量浓度50％～70％的乙醇水溶液，进一步优选为55％～65％的乙醇水溶液。本发明使用质量浓度较低的乙醇水溶液除杂后增大乙醇水溶液的质量浓度进行洗脱，能够更好地去除南酸枣果皮提取液中水溶性杂质，提高南酸枣果皮提取纯化液中有效成分的浓度，提高南酸枣果皮的利用率。
31.在本发明中，所述大孔吸附树脂的型号优选包括d101、ab-8、x-5或nka-2，进一步优选为d101。本发明利用大孔吸附树脂吸附所述南酸枣果皮提取液，能够有效去除南酸枣果皮提取液中的色素、糖、蛋白等小分子杂质。
32.得南酸枣果皮提取纯化液后，本发明优选对所述南酸枣果皮提取纯化液进行减压浓缩处理，得减压浓缩液。本发明对所述减压浓缩的方式没有严格要求，采用本领域熟知的方式即可。
33.得减压浓缩液后，本发明优选对所述减压浓缩液进行干燥处理，得到固体南酸枣果皮提取物。本发明所述干燥处理优选包括真空干燥或冷冻干燥。本发明对真空干燥或冷冻干燥的条件没有严格要求，保证固体南酸枣果皮提取物的含水量低于5％即可。本发明得到的固体南酸枣果皮提取物为淡黄色干燥粉末，可溶于水或乙醇溶液，无毒、无刺激性，属于绿色、安全、环保的日化用功效原料。
34.利用本发明上述方法得到的南酸枣果皮提取物中黄酮含量为65.9％～73.6％，对透明质酸酶有着良好的抑制作用，当南酸枣果皮提取物质量浓度为5％时，对透明质酸酶的抑制率可达到90％，可将其作为原料添加到化妆品中，制备具有抗敏功效的化妆品，安全性更高且副作用低。
35.为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
36.实施例1
37.南酸枣果皮提取物的制备：取100g干燥粉碎后的南酸枣果皮粉末，加入2000g 50％乙醇水溶液，以及100g十二烷基硫酸钠辅助超声提取，超声功率600w，超声温度40℃，提取2次，每次超声时间20min，过滤，合并滤液，滤液减压回收去除溶剂中的乙醇，得到南酸枣果皮的粗提液。粗提液经d101型大孔吸附树脂纯化，用30％乙醇水溶液洗脱去除水溶性杂质后，收集50％浓度的乙醇水洗脱液，洗脱液减压浓缩后干燥得到南酸枣果皮提取物。
38.实施例2
39.南酸枣果皮提取物的制备：取100g干燥粉碎后的南酸枣果皮粉末，加入1000g 70％乙醇水溶液，以及150g吐温辅助超声提取，超声功率800w，超声温度60℃，提取3次，每次超声时间10min，共计超声时间30min，过滤，合并滤液，滤液减压回收去除溶剂中的乙醇，得到南酸枣果皮的粗提液。粗提液经d101型大孔吸附树脂纯化，先用30％乙醇水溶液洗脱去除水溶性杂质后，收集60％浓度的乙醇水洗脱液，洗脱液减压浓缩后干燥得到南酸枣果皮提取物。
40.实施例3
41.南酸枣果皮提取物的制备：取100g干燥粉碎后的南酸枣果皮粉末，加入30份3000g 90％乙醇水溶液，以及300g单硬脂酸甘油酯辅助超声提取，超声功率1000w，超声温度80℃，提取4次，每次超声时间12.5min，共计超声时间50min，过滤，合并滤液，滤液减压回收去除溶剂中的乙醇，得到南酸枣果皮的粗提液。粗提液经d101型大孔吸附树脂纯化，先用30％乙醇水溶液洗脱去除水溶性杂质后，收集70％浓度的乙醇水洗脱液，洗脱液减压浓缩后干燥得到南酸枣果皮提取物。
42.测试例1
43.采用分光光度法测定实施例1～3南酸枣果皮提取物中的黄酮含量，具体的：用乙醇配制浓度为0.2mg/ml的芦丁(北京普天同创生物科技有限公司)标准液，在510nm下测得的标准曲线为y＝0.4352x-0.0046，根据标准曲线对应得出实施例1～3南酸枣果皮提取物中的黄酮含量，测定结果如下表1。
44.表1 实施例1～3南酸枣果皮提取物中的黄酮含量
45.处理方式黄酮含量(％)实施例173.6实施例265.9实施例370.3
46.由表1可以看出，本发明制备得到的南酸枣果皮提取物中黄酮较高，达65.9％～73.6％。
47.实施例4
48.南酸枣果皮提取物的透明质酸酶抑制活性
49.样品液制备：分别将0.5g实施例1～3的南酸枣果皮提取物与10ml水混合，得样品液(5％质量分数)。
50.取4份0.1ml 0.25mmol/l cacl2溶液和4份0.5ml透明质酸酶液，分别设置实验组和阳性对照组，实验组1(记为1号样品)将1份cacl2溶液和1份0.5ml透明质酸酶液混合，37℃保温培养20min，加入0.5ml上述含有实施例1南酸枣果皮提取物的样品液；
51.实验组2(记为2号样品)将1份cacl2溶液和1份0.5ml透明质酸酶液混合，37℃保温培养20min，加入0.5ml上述含有实施例2南酸枣果皮提取物的样品液；
52.实验组3(记为3号样品)将1份cacl2溶液和1份0.5ml透明质酸酶液混合，37℃保温培养20min，加入0.5ml上述含有实施例3南酸枣果皮提取物的样品液；
53.阳性对照组将1份cacl2溶液和1份0.5ml透明质酸酶液混合，37℃保温培养20min，加入0.5ml扑尔敏(上海阿拉丁生化科技股份有限公司)阳性对照溶液(用去离子水配制浓度为1.28
×
10-3
mol/l的溶液)；
54.1～3号样品和对照组继续37℃保温培养20min；加入0.5ml透明质酸钠液37℃保温30min，常温放置5min；加入0.1ml 0.4mol/lnaoh溶液和0.5ml乙酰丙酮溶液，置于沸水浴中加热15min后立即用冰水进行冷却5min；加入埃尔利希试剂1.0ml并用3.0ml无水乙醇进行稀释，放置20min显色，用分光光度计分别测定1～3号样品和对照组样品530nm吸光度值，并计算透明质酸酶抑制率，结果如表2所示。
[0055][0056]
其中，a为对照品溶液吸光度(用去离子水代替样品溶液)，b为对照空白溶液吸光度(用去离子水代替样品溶液及酶液)，c为试样溶液吸光度值，d为试样空白溶液吸光度(用去离子水代替酶液)。
[0057]
表2 不同样品透明质酸酶抑制率
[0058]
样品abcd透明质酸酶抑制率(％)阳性对照组0.2720.0890.1300.06966.671号样品0.2720.0890.1450.13192.352号样品0.2720.0890.1630.14791.263号样品0.2720.0890.1340.11991.80
[0059]
根据表2可知，5％浓度的南酸枣果皮提取物对透明质酸酶有着极其显著的抑制活性，达到90％以上，本发明提供的南酸枣果皮提取物具有优异的抗过敏活性。
[0060]
实施例5
[0061]
抗敏精华乳的制备：
[0062]
按质量百分含量备料：5％环戊硅氧烷，3％辛酸癸酸三甘油酯和0.3％生育酚醋酸酯、2％甘油，3％1,3-丁二醇，0.5％d-泛醇，0.1％乙二胺四乙酸二钠，0.3％汉生胶，0.1％尿囊素、0.5％十六烷基磷酸酯钾、78.32％去离子水、1.5％聚丙烯酰胺、5％实施例1南酸枣果皮提取物，0.08％香精和0.3％二羟基二甲基乙内酰脲。
[0063]
具体的：5.00g环戊硅氧烷，3.00g辛酸癸酸三甘油酯和0.30g生育酚醋酸酯、2.00g甘油，3.00g 1,3-丁二醇，0.50g d-泛醇，0.10g乙二胺四乙酸二钠，0.30g汉生胶，0.10g尿
囊素、0.50g十六烷基磷酸酯钾、78.32g水、1.50g聚丙烯酰胺、5.00g实施例1南酸枣果皮提取物，0.08g香精和0.30g二羟基甲基乙内酰脲。
[0064]
将环戊硅氧烷，辛酸癸酸三甘油酯和生育酚醋酸酯混合，得第一混合物；
[0065]
将甘油，1,3-丁二醇，d-泛醇，乙二胺四乙酸二钠，汉生胶，尿囊素、十六烷基磷酸酯钾和去离子水在85℃条件下，搅拌均匀，得第二混合物；
[0066]
将第一混合物相倒入第二混合物，均质，倒入聚丙烯酰胺搅拌均匀，依次加入实施例1南酸枣果皮提取物，香精，二羟基二甲基乙内酰脲搅拌均匀，静置，冷却，灌装。
[0067]
实施例6
[0068]
同实施例5，区别在于南酸枣果皮提取物添加量为2％，水的添加量为81.32％，其它都相同。
[0069]
实施例7
[0070]
同实施例5，区别在于南酸枣果皮提取物添加量为1％，水的添加量为82.32％，其它都相同。
[0071]
对比例1
[0072]
空白精华乳的制备：同实施例5，区别在于不含南酸枣果皮提取物，水的添加量为83.32％，其它都相同。
[0073]
测试例3
[0074]
人体抗敏功效评价
[0075]
1.镇静皮肤效果
[0076]
实验选择按gb17149-1997(化妆品皮肤病诊断标准及处理原则)诊断无相关化妆品皮肤病志愿者30名。通过10％十二烷基硫酸钠(sds)溶液贴片(面积：2cm
×
2cm)刺激上臂内侧皮肤，结果判断依据见表4。在sds刺激皮肤后，立即涂用实施例5～7抗敏精华乳和对比例1空白精华乳30min后观察皮肤症状，结果见表5。
[0077]
表4 结果判断依据
[0078]
反应程度评分皮肤反应临床表现－0阴性反应
±
1微弱红斑、皮肤干燥、皱褶+2红斑、水肿、丘疹、风团、脱屑、裂隙++3明显红斑、水肿、水疱+++4重度红斑、水肿、大疱、糜烂、色素沉着或色素减退、痤疮样改变
[0079]
表5 不同抗敏精华乳对皮肤刺激的影响
[0080]
[0081][0082]
由表5可以看出，通过sds刺激皮肤后，分别涂用3款抗敏精华乳以及空白抗敏精华乳，30min后皮肤不适症状的消除率具有显著区别。其中涂抹抗敏精华乳1的30名志愿者中有28名皮肤不适的临床表现完全消失，仅有2名还有微弱红斑的现象；抗敏精华乳2的试用志愿者中有19名皮肤不适的临床表现完全消失；抗敏精华乳3的试用志愿者中有13名皮肤不适的临床表现完全消失；而空白精华乳的试用志愿者中仅有9名皮肤不适的临床表现完全消失。由试验结果可判断，本发明制备的含有南酸枣果皮提取物的抗敏精华乳具有显著的皮肤镇静效果，且和南酸枣果皮提取物的添加量呈现正相关。
[0083]
2.减轻皮肤红肿效果
[0084]
实验选择按gb17149-1997(化妆品皮肤病诊断标准及处理原则)诊断无相关化妆品皮肤病志愿者30名。实验采用1.0％的辣椒素刺激皮肤红肿，在1.0％的辣椒素刺激皮肤后，立即涂用实施例5～7抗敏精华乳和对比例1空白精华乳，通过肤色测量仪(delfin skincolorcatch)测试30名志愿者皮肤在不同时期的红斑值e的平均值，反映皮肤红肿现象的变化，结果见表6。
[0085]
表6 不同抗敏精华乳减轻红肿结果
[0086][0087]
注：皮肤红斑相对消退率＝(初始红斑值e-测量红斑值e)/(初始红斑值e-作用240min后红斑值e)
×
100％，其中初始红斑值e表示辣椒素刺激皮肤后红斑值e；测量红斑值e表示涂用实施例5～7抗敏精华乳或对比例1空白精华乳一定时间后的红斑值e。
[0088]
由表6可以看出，辣椒素刺激后皮肤会发生明显红肿。涂抹含不同剂量南酸枣果皮提取物的抗敏精华乳后，皮肤的红肿现象消退明显，在60min左右，实施例5抗敏精华乳对皮肤红斑相对消退率达到85.92％，实施例6抗敏精华乳对皮肤红斑相对消退率达到76.12％，
实施例7对皮肤红斑相对消退率达到59.46％；而作为对照的空白精华乳，其红肿120min左右红斑消退率相对才达到42.86％。上述数据说明含有南酸枣果皮提取物的抗敏精华乳可以有效消除因外界刺激造成的肤表泛红现象。
[0089]
本发明所述南酸枣果皮提取物含有65.9％～73.6％黄酮，能够抑制透明质酸酶的活性。人体抗敏功效评价结果表明，南酸枣果皮提取物可用作化妆品功效原料，添加1％～5％的南酸枣果皮提取物，即可具有显著的皮肤镇静效果，可以有效消除因外界刺激造成的肤表泛红现象。
[0090]
尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述，但它仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部实施例，人们还可以根据本实施例在不经创造性前提下获得其他实施例，这些实施例都属于本发明保护范围。