技术特征：
1.一种在离体唾液样品中保存病毒核酸的方法，所述方法包括：获得包含病毒核酸的离体唾液样品；和使所述离体唾液样品与核酸保存组合物接触，所述组合物包括：20-50％离散剂，w/w；1-5％缓冲剂，w/w；0.05-2.5％螯合剂，w/w；0.05-2.5％表面活性剂，w/w；5-25％醇，w/w；0.005-0.25％黏液溶解剂，w/w；任选的视觉指示剂；载体qs至100％；以及ph 7.1-9.5。2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述组合物具有ph 7.2-9.0，优选ph 7.2-8.8，优选ph 7.5-8.5，更优选7.8-8.4，仍更优选ph 7.9-8.3，仍更优选ph 8.0-8.2。3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中：所述离散剂包括硫氰酸胍；所述缓冲剂包括三(羟甲基)氨基甲烷(tris)；所述螯合剂包括乙二胺四乙酸(edta)，优选edta二钠盐，更优选edta二钠盐二水合物；所述表面活性剂包括月桂酰肌氨酸钠(sls)；所述醇包括乙醇和第二化学品的混合物，其中，所述第二化学品优选为异丙醇；所述黏液溶解剂包括n-乙酰基-l-半胱氨酸；所述视觉指示剂包括着色剂，更优选有色染料，仍更优选蓝色染料，仍更优选fd&c blue no.1；和/或所述载体是水性载体，优选包括过滤水、纯化水、蒸馏水和/或去离子水，所述组合物优选包括：43.92％，w/w，
±
10％的所述离散剂；2.65％，w/w，
±
10％的所述缓冲剂；1.029％，w/w，
±
10％的所述螯合剂；0.279％，w/w，
±
10％的所述表面活性剂；17.73％，w/w，
±
10％的所述醇；和/或0.093％，w/w，
±
10％的所述黏液溶解剂。4.根据权利要求3所述的方法，其中，所述组合物的各组分的量在
±
10％下进一步是
±
9％，优选
±
8％，更优选
±
7％，仍更优选
±
6％，仍更优选
±
5％，仍更优选
±
4％，仍更优选
±
3％，仍更优选
±
2％，仍更优选
±
1％。5.根据权利要求1所述的方法，其中，所述离体唾液样品包括咳出的人唾液。6.根据权利要求1所述的方法，进一步包括分析所述离体唾液样品和所述核酸保存组合物的混合物以检测病毒核酸的存在。7.根据权利要求6所述的方法，其中，所述分析包括病毒rna的逆转录以产生dna和/或dna的聚合酶链反应。
8.根据权利要求1所述的方法，其中，所述组合物：(i)基本上不含或没有除了n-乙酰基-l-半胱氨酸或除n-乙酰基-l-半胱氨酸以外的一种、额外的或任何黏液溶解剂；(ii)基本上不含或没有除了以下项或者除以下项以外的额外的或者任何一种或多种抗微生物剂、一种或多种杀菌剂和/或一种或多种抑菌剂：一种或多种醇、一种或多种离散剂、一种或多种表面活性剂/一种或多种洗涤剂和/或一种或多种黏液溶解剂；(iii)基本上不含或没有除了一种或多种离散剂或者除一种或多种离散剂以外的额外的或者任何一种或多种核糖核酸酶抑制剂或者核糖核酸酶的一种或多种抑制剂，所述组合物优选基本上没有肝素、硫酸乙酰肝素、低聚(乙烯基磺酸)、聚(乙烯基磺酸)、低聚(乙烯基膦酸)和/或聚(乙烯基磺酸)或者其一种或多种盐；(iv)基本上不含或没有一种或者任何一种或多种蛋白酶；(v)基本上不含或没有抗坏血酸、连二亚硫酸盐、异抗坏血酸盐、二硫苏糖醇、2-巯基乙醇、二赤藓糖醇、树脂负载的硫醇、树脂负载的膦、维生素e和/或trolox，或其一种或多种盐；(vi)基本上不含或没有一种或多种微生物和/或微生物污染；和/或(vii)具有小于或等于每克所述组合物约100、99、98、97、96、95、90、85、80、75、70、65、60、55、50、45、40、35、30、25、20、15、10或5个菌落形成单位(cfu)的一种或多种微生物(cfu/g)。9.一种试剂盒，所述试剂盒用于以美国食品药品监督管理局(fda)授权的方式保存离体唾液样品中的病毒核酸，所述试剂盒包括：样品采集装置；和核酸保存组合物，所述核酸保存组合物设置在样品采集装置的一部分中，所述核酸保存组合物包括：20-50％离散剂，w/w；1-5％缓冲剂，w/w；0.05-2.5％螯合剂，w/w；0.05-2.5％表面活性剂，w/w；5-25％醇，w/w；0.005-0.25％黏液溶解剂，w/w；任选的视觉指示剂；载体qs至100％；以及ph 7.2-9.5。10.根据权利要求9所述的试剂盒，其中，所述组合物具有ph 7.2-9.0，优选ph 7.2-8.8，优选ph 7.5-8.5，更优选7.8-8.4，仍更优选ph 7.9-8.3，仍更优选ph 8.0-8.2。11.根据权利要求9或权利要求10所述的试剂盒，其中：所述离散剂包括硫氰酸胍；所述缓冲剂包括三(羟甲基)氨基甲烷(tris)；所述螯合剂包括乙二胺四乙酸(edta)，优选edta二钠盐，更优选edta二钠盐二水合物；所述表面活性剂包括月桂酰肌氨酸钠(sls)；
所述醇包括乙醇和第二化学品的混合物，其中，所述第二化学品优选为异丙醇；所述黏液溶解剂包括n-乙酰基-l-半胱氨酸；所述视觉指示剂包括着色剂，更优选有色染料，仍更优选蓝色染料，仍更优选fd&c blue no.1；和/或所述载体是水性载体，优选包括过滤水、纯化水、蒸馏水和/或去离子水，所述组合物优选包括：43.92％，w/w，
±
10％的所述离散剂；2.65％，w/w，
±
10％的所述缓冲剂；1.029％，w/w，
±
10％的所述螯合剂；0.279％，w/w，
±
10％的所述表面活性剂；17.73％，w/w，
±
10％的所述醇；和/或0.093％，w/w，
±
10％的所述黏液溶解剂。12.根据权利要求11所述的试剂盒，其中，所述组合物的各组分的量在
±
10％下进一步是
±
9％，优选
±
8％，更优选
±
7％，仍更优选
±
6％，仍更优选
±
5％，仍更优选
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4％，仍更优选
±
3％，仍更优选
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2％，仍更优选
±
1％。13.根据权利要求9所述的试剂盒，其中，所述组合物：(i)基本上不含或没有除了n-乙酰基-l-半胱氨酸或除n-乙酰基-l-半胱氨酸以外的一种、额外的或任何黏液溶解剂；(ii)基本上不含或没有除了以下项或者除以下项以外的额外的或者任何一种或多种抗微生物剂、一种或多种杀菌剂和/或一种或多种抑菌剂：一种或多种醇、一种或多种离散剂、一种或多种表面活性剂/一种或多种洗涤剂和/或一种或多种黏液溶解剂；(iii)基本上不含或没有除了一种或多种离散剂或者除一种或多种离散剂以外的额外的或者任何一种或多种核糖核酸酶抑制剂或者核糖核酸酶的一种或多种抑制剂，所述组合物优选基本上没有肝素、硫酸乙酰肝素、低聚(乙烯基磺酸)、聚(乙烯基磺酸)、低聚(乙烯基膦酸)和/或聚(乙烯基磺酸)或者其一种或多种盐；(iv)基本上不含或没有一种或者任何一种或多种蛋白酶；(v)基本上不含或没有抗坏血酸、连二亚硫酸盐、异抗坏血酸盐、二硫苏糖醇、2-巯基乙醇、二赤藓糖醇、树脂负载的硫醇、树脂负载的膦、维生素e和/或trolox，或其一种或多种盐；(vi)基本上不含或没有一种或多种微生物和/或微生物污染；和/或(vii)具有小于或等于每克所述组合物约100、99、98、97、96、95、90、85、80、75、70、65、60、55、50、45、40、35、30、25、20、15、10或5个菌落形成单位(cfu)的一种或多种微生物(cfu/g)。14.一种检测离体唾液样品中病毒存在的方法，其中，所述病毒优选是冠状病毒，更优选严重急性呼吸综合征(sars)相关冠状病毒(sars-cov)，仍更优选sars-cov-2，所述方法包括：获得包含病毒核酸的离体唾液样品；使所述离体唾液样品与核酸保存组合物接触，所述组合物包括：20-50％离散剂，w/w；
1-5％缓冲剂，w/w；0.05-2.5％螯合剂，w/w；0.05-2.5％表面活性剂，w/w；5-25％醇，w/w；0.005-0.25％黏液溶解剂，w/w；任选的视觉指示剂；载体qs至100％；以及ph 7.1-9.5；以及分析所述离体唾液样品和所述核酸保存组合物的混合物以检测病毒核酸的存在，其中，所述分析任选地包括病毒rna的逆转录以产生dna和/或dna的聚合酶链反应。15.根据权利要求14所述的方法，其中，所述组合物具有ph 7.2-9.0，优选ph 7.2-8.8，优选ph 7.5-8.5，更优选7.8-8.4，仍更优选ph 7.9-8.3，仍更优选ph 8.0-8.2。16.根据权利要求14或权利要求15所述的方法，其中：所述离散剂包括硫氰酸胍；所述缓冲剂包括三(羟甲基)氨基甲烷(tris)；所述螯合剂包括乙二胺四乙酸(edta)，优选edta二钠盐，更优选edta二钠盐二水合物；所述表面活性剂包括月桂酰肌氨酸钠(sls)；所述醇包括乙醇和第二化学品的混合物，其中，所述第二化学品优选为异丙醇；所述黏液溶解剂包括n-乙酰基-l-半胱氨酸；所述视觉指示剂包括着色剂，更优选有色染料，仍更优选蓝色染料，仍更优选fd&c blue no.1；和/或所述载体是水性载体，优选包括过滤水、纯化水、蒸馏水和/或去离子水，所述组合物优选包括：43.92％，w/w，
±
10％的所述离散剂；2.65％，w/w，
±
10％的所述缓冲剂；1.029％，w/w，
±
10％的所述螯合剂；0.279％，w/w，
±
10％的所述表面活性剂；17.73％，w/w，
±
10％的所述醇；和/或0.093％，w/w，
±
10％的所述黏液溶解剂。17.根据权利要求16所述的方法，其中，所述组合物的各组分的量在
±
10％下进一步是
±
9％，优选
±
8％，更优选
±
7％，仍更优选
±
6％，仍更优选
±
5％，仍更优选
±
4％，仍更优选
±
3％，仍更优选
±
2％，仍更优选
±
1％。18.根据权利要求14所述的方法，其中，所述离体唾液样品包括咳出的人唾液。19.根据权利要求14所述的方法，其中，所述组合物：(i)基本上不含或没有除了n-乙酰基-l-半胱氨酸或除n-乙酰基-l-半胱氨酸以外的一种、额外的或任何黏液溶解剂；(ii)基本上不含或没有除了以下项或者除以下项以外的额外的或者任何一种或多种抗微生物剂、一种或多种杀菌剂和/或一种或多种抑菌剂：一种或多种醇、一种或多种离散剂、一种或多种表面活性剂/一种或多种洗涤剂和/或一种或多种黏液溶解剂；
(iii)基本上不含或没有除了一种或多种离散剂或者除一种或多种离散剂以外的额外的或者任何一种或多种核糖核酸酶抑制剂或者核糖核酸酶的一种或多种抑制剂，所述组合物优选基本上没有肝素、硫酸乙酰肝素、低聚(乙烯基磺酸)、聚(乙烯基磺酸)、低聚(乙烯基膦酸)和/或聚(乙烯基磺酸)或者其一种或多种盐；(iv)基本上不含或没有一种或者任何一种或多种蛋白酶；(v)基本上不含或没有抗坏血酸、连二亚硫酸盐、异抗坏血酸盐、二硫苏糖醇、2-巯基乙醇、二赤藓糖醇、树脂负载的硫醇、树脂负载的膦、维生素e和/或trolox，或其一种或多种盐；(vi)基本上不含或没有一种或多种微生物和/或微生物污染；和/或(vii)具有小于或等于每克所述组合物约100、99、98、97、96、95、90、85、80、75、70、65、60、55、50、45、40、35、30、25、20、15、10或5个菌落形成单位(cfu)的一种或多种微生物(cfu/g)。
技术总结
公开了核酸保存组合物及其制造和使用方法，特别是用于检测COVID-19病毒。组合物包括载体、离散剂、缓冲剂、螯合剂、表面活性剂、醇、酸和黏液溶解剂。作为水性溶液的组合物可以包括水作为载体。优选的实施方式包括水、硫氰酸胍、Tris、EDTA、SLS、SDA 3C、HCl和N-乙酰基-L-半胱氨酸。一些实施方式包括有色染料作为视觉指示剂。试剂盒包括布置在生物样品采集装置的一部分中的组合物。制造方法包括将组分组合成混合物，诸如水性溶液。使用方法包括提供包括核酸的生物样品并使生物样品与组合物接触。证明了对COVID-19病毒的检测。组合物还保存并稳定化人核酸用于后续分析。定化人核酸用于后续分析。定化人核酸用于后续分析。
技术研发人员：F.C.A.加埃塔 W.菲利普斯
受保护的技术使用者：光谱解决方案有限责任公司
技术研发日：2021.04.14
技术公布日：2022/11/25