具有改善的安全性和稳定性的含吡非尼酮的肠溶包衣制剂及其制备方法与流程

1.本发明涉及一种对人体具有改善的安全性和稳定性的包含吡非尼酮作为活性成分的肠溶包衣制剂和其制备方法，该制剂在小肠中特别地释放吡非尼酮，并且具有独特的药代动力性特性。


背景技术：

2.吡非尼酮是一种抗纤维化药物，其可用于治疗特发性肺纤维化，并对各种细胞因子和生长因子具有生产调控功能，例如，显示对炎性细胞因子(tnf-α、il-1、il-6)的生产的抑制和对抗炎细胞因子(il-10)的生产的增强，显示对ifn-γ水平减少的抑制，导致th2型偏转的改善(th1
·
th2平衡的改正)，以及显示对参与纤维化形成的生长因子(tgf-β1、b-fgf、pdgf)的生产的抑制等。此外，吡非尼酮还具有成纤维细胞生长抑制作用或胶原蛋白生产抑制作用，并且基于这些复合作用，吡非尼酮表现出抗纤维化的作用。关于吡非尼酮的各种作用，在日本未审查专利公开h02-215719号中描述了对肺纤维化和动脉硬化病变等的治疗效果，在美国专利3,974,281号、4,042,699号和4,052,509号中公开了对治疗呼吸系统炎症或皮肤炎症的有用性，并且在日本未审查专利公布h11-512699号中公开了其对tnf-α的合成和释放的抑制作用。
3.同时，特发性肺纤维化是一种由于不明原因引起肺壁纤维化进展，逐渐减少肺功能(如肺活动)，最终导致呼吸困难的疾病。其也是一种预后不良的疾病，大约50％的患者在5年内死亡，即使在韩国也被定义为罕见的难治性疾病。
4.据报道，在包含健康成年人和患有特发性肺纤维化的患者(总人数，1650人)的全球临床实验中，上述吡非尼酮引起恶心(32.4％)、皮疹(26.2％)、腹泻(18.8％)、消化不良(16.1％)、厌食(11.4％)、头痛(10.1％)和光敏感(9.3％)。
5.吡非尼酮的初始剂量是餐后口服一片，一日三次。根据患者的反应和耐受性，剂量可以每隔两周增加一片。由于剂量可以增加至一天三次，一次三片(一次600mg，一天1800mg)，服用麻烦且不方便，而且副作用概率很高。因此，需要研发一种可以解决这些问题并且提高药物依从性的安全制剂。此外，在研发安全的吡非尼酮制剂的同时，也需要研发使相关化合物的生成降到最低，并且在制造后至施用都稳定地保持吡非尼酮的安全的吡非尼酮和包含吡非尼酮的制剂(如片剂)。这样，如果该制剂在人体内的安全性和药物的稳定性降低，就会降低片剂研发的预期效果，无法获得理想程度的治疗或预防效果。因此，需要研发可以确保安全性和稳定性的包含吡非尼酮的制剂。


技术实现要素：

6.技术领域
7.本发明的一个用途是提供一种具有改善的安全性和稳定性的包含吡非尼酮的肠溶包衣制剂及其制备方法，更具体地，提供改善吡非尼酮肠溶包衣制剂的安全性和稳定性
的肠溶包衣制剂及其制备方法，所述吡非尼酮肠溶包衣制剂的安全性和稳定性可通过肠溶基质而降低。
8.技术方案
9.为了实现上述用途，根据本发明的一个实施方式，提供了一种包含吡非尼酮作为活性成分的制剂，该制剂对人体具有改善的安全性和药物稳定性。
10.在一个实施方式中，根据本发明的制剂可以是用于口服施用的制剂。
11.在一个实施方式中，根据本发明的制剂可以是肠溶包衣制剂，更具体地，是肠溶包衣片剂。
12.在一个实施方式中，根据本发明的制剂可以是用于预防或治疗特发性肺纤维化的制剂。
13.在一个实施方式中，根据本发明的制剂可以是用于口服施用的制剂，其特征在于作为活性成分的吡非尼酮表现出独特的药代动力学模式。具体而言，该制剂可以是用于预防或治疗特发性纤维化的制剂，其特征在于施用时达到最大血药浓度的时间(t
max
)为施用后1.2至1.4小时。
14.在一个实施方式中，根据本发明的制剂可以是用于口服施用的制剂，其中就药物的稳定性而言，在严苛条件(60
±
2℃)下1个月和加速条件(40
±
2℃，75
±
5％rh)下6个月的稳定性试验中，稳定性得到改善，即相关化合物a小于等于0.1％，相关化合物b小于等于0.1％，各个未知相关化合物小于等于0.05％，总的相关化合物小于等于0.3％。
15.优选地，根据该发明的制剂可以包括：包含吡非尼酮和药学上可接受的添加剂的芯；和位于芯的外侧的两种以上的相互不同的包衣。更优选地，上述两种以上的相互不同的包衣可以是选自以下组中的两种或更多种：包含水溶性或不溶性聚合物的包衣和包含肠溶聚合物的包衣。
16.根据本发明的另一实施方案，本发明提供了一种用于预防或治疗特发性肺纤维化的包含吡非尼酮的制剂的制备方法，所述制剂具有改善的安全性和稳定性，该方法包括：使用吡非尼酮和药学上可接受的添加剂制备芯的步骤；和在制备的芯上用两种或更多的聚合物形成两种或更多的包衣的步骤。优选地，两种或更多的相互不同的包衣可以依次制作，或者可以通过使用水溶性或不溶性聚合物进行一次包衣的步骤和使用肠溶聚合物进行二次包衣的步骤来形成从而进行。
17.有益效果
18.根据本发明的吡非尼酮肠溶包衣制剂采用甲基丙烯酸共聚物作为肠溶包衣基质，这样不仅可以在小肠中特异性地释放吡非尼酮，还可以在出色地保持吡非尼酮的稳定性的同时，具有出独特的药代动力学特性，而且在不影响吡非尼酮的生物利用度的同时，减缓或减少因施用吡非尼酮而引起的胃肠道副作用的发生，并能显著提高患者的药物依从性，这对于研发吡非尼酮的口服制剂非常有用。
附图说明
19.图1是显示根据实施例1至8和比较例1的吡非尼酮制剂在ph值为1.2时的洗脱实验结果的图，其为0至120分钟的累积洗脱率随时间的变化。
20.图2是显示根据实施例1至8和比较例1的吡非尼酮制剂在ph值为6.8时的洗脱实验
结果的图，其为0至120分钟的累积洗脱率随时间的变化。
21.图3是显示吡非尼酮的血药浓度随时间的变化的药代动力学分析实验结果的图，其中根据实施例1和8以及比较例1的吡非尼酮制剂给向比格犬施用后。
22.图4是显示根据实施例9至11和实施例1和3的吡非尼酮制剂在严苛条件(60
±
2℃)下的稳定性测试结果中的总相关化合物的图。
23.图5是显示根据实施例9至11和实施例1和3的吡非尼酮制剂在加速条件(40
±
2℃,75
±
5％rh)的稳定性测试结果中的总相关化合物的图。
具体实施方式
24.下文将对本发明进行更加详细地描述。
25.根据本发明的制剂包含吡非尼酮作为活性成分，因此其是对于预防或治疗特发性肺纤维化有效的制剂。具体而言，根据本发明的用于口服施用的制剂中包含的活性成分(主要成分)的吡非尼酮是由小分子构成的药物，其化学名为5-甲基-1-苯基-2-(1h)-吡啶酮。这是一种合成的非肽分子，分子量为185.23道尔顿。其化学式为c
12h11
no，其结构与以下化学式1所示的相同。
26.[化学式1]
[0027][0028]
目前，吡非尼酮在临床上被评价为广谱抗纤维化药物。已知吡非尼酮具有抗纤维化和抗炎的药理活性，这反映在其降低tgf-β1、tnf-α和pdgf表达，最重要的是，降低不同类型胶原蛋白的表达的活性中。
[0029]
本文中，术语“达到最大血药浓度的时间(t
max
)”意为施用后达到血液中最高浓度(c
max
)的时间。根据本发明的制剂的特征在于，作为活性成分的吡非尼酮达到最大血药浓度的时间(t
max
)为施用后1.2小时、1.4小时或更多、1.6小时或更多、2小时或更多、以及2小时至4小时。此外，根据本发明的预防或治疗特发性肺纤维化的制剂的特征在于，其在施用后的1小时内基本不释放吡非尼酮。当以这种方式施用后1小时内基本不释放吡非尼酮时，施用后1小时内的体内累积血药浓度为最大血药浓度(c
max
)的0至50％、0至30％、优选为0至10％，更优选为0至5％。
[0030]
在优选实施方式中，根据本发明的用于预防或治疗特发性肺纤维化的制剂的特征为血药浓度曲线下面积(auc)与最大血药浓度(c
max
)的比率为2.16至2.18。
[0031]
此外，根据本发明的用于预防或治疗特发性肺纤维化的制剂的特征在于，在酸性条件(ph 1.2)下洗脱时，洗脱后120分钟内的洗脱率在10％以内。
[0032]
众所周知，吡非尼酮有如呕吐、皮炎，以及食欲不振的副作用。具体而言，已知由于吡非尼酮有胃肠道的副作用如呕吐和食欲不振而降低了患者的药物依从性。
[0033]
因为根据本发明的制剂表现出上述独特的药物动力学特性，具有高频次副作用的
吡非尼酮基本不会在胃中释放，而是在小肠中释放，从而大大地减轻或者至少减少了胃相关的副作用的风险，而不影响作为活性成分的吡非尼酮的生物利用度。
[0034]
在具体实施方式中，根据本发明的制剂可以包括：包含吡非尼酮和药学上可接受的添加剂的芯；和位于芯的表面上的两种以上的相互不同的包衣。
[0035]
该芯可以包含1至1000mg，优选为200至600mg的吡非尼酮。具体而言，在根据本发明的制剂中，可以在上述范围内选择吡非尼酮的含量，并将其包含于芯内，从而可以根据目前常用的吡非尼酮的施用频率施用吡非尼酮(即，作为初始剂量，一天三次，一次200mg的一片)
[0036]
根据本发明的制剂中，作为活性成分的吡非尼酮的含量可以根据使用类型和用途、患者的病况、症状类型和病症严重程度等适当调整，并且基于制剂的总重量，其可以为10至99重量％。然而，其可以根据使用者的需要增加或减少，并且根据各种因素，例如饮食、营养状况、病理症状的进展程度等，可以适当增加或减少，但是其不限于上述范围。
[0037]
此外，该芯可以与作为活性成分的吡非尼酮一起包含药学上可接受的添加剂。这种添加剂的例子可以使用载体、赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、增溶剂、悬浮剂、防腐剂和/或疏松剂(bulking agent)等进行配制。
[0038]
赋形剂的例子包括乳糖水合物、甘露糖醇、玉米淀粉、微晶纤维素、蔗糖、葡萄糖和山梨醇，更优选乳糖水合物，但不限于此。优选地，赋形剂的含量可以为制备的芯的总重量的5至80重量％、10至70重量％、或15到60重量％，但不限于此。
[0039]
粘合剂优选包括羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素或聚乙烯吡咯烷酮，更优选为羟丙基纤维素，但不限于此。优选地，粘合剂的含量可以为制备的芯的总重量的0.5至30重量％、1至25重量％、或1.5至20重量％，但不限于此。
[0040]
崩解剂可以包括，优选玉米淀粉、羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钙、羧甲基纤维素钠、低取代羟丙基纤维素、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、羟基乙酸淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮，更优选为交联羧甲基纤维素钠，但不限于此。优选地，崩解剂的含量可以为片剂总重量的0.1至30重量％，0.5至25重量％，或1至20重量％，但不限于此。
[0041]
润滑剂可以包括，优选硬脂酸钙、硬脂酸钠、硬脂酸镁、硬脂富马酸钠、硬脂酸、轻无水硅酸，更优选为硬脂酸镁，但不限于此。优选地，润滑剂的含量可以为制备的芯的总重量的0.1至5重量％，但不限于此。
[0042]
出于本发明的用途，包含吡非尼酮的芯可以优选配制成片剂形式，但不限于此。这种片剂可以通过片剂的一般制备方法(例如，粉碎、混合、组装、干燥、压片和包衣等)制备。具体地，在配制成片剂时，在本发明中，该芯可以通过湿制粒法、干制粒法或直接压片法制备。在湿制粒法中，可以通过例如以下过程制备片剂：称量活性成分(主要成分)、稀释剂、赋形剂和崩解剂并用搅拌器将它们混合至均匀的混合过程，在其中添加和混合粘合剂的的聚并过程(coalescence process)，筛分并挤出以用于制备颗粒的造粒过程，干燥制备好的颗粒的过程，使用小型筛使颗粒一致的整规过程(alignment process)，以及将润滑剂添加到经整规的颗粒中并进行后混合和压片的过程。此外，在干制粒法中，通过以下步骤制备片剂：如称重和混合每种成分的过程，将其填压或压缩的过程，将其制成片剂或颗粒的过程，压碎片剂或颗粒的过程，经过筛选过程和压片过程的填压过程；或混合已称重成分并将它们添加到滚筒中以制备压缩材料的过程，和使压缩材料破碎，使颗粒一致以及润滑和压片
的滚筒压缩过程。此外，直接压缩法是指混合制备片剂所需的成分然后一次性压缩它们的方法。在优选的实施方式中，可以通过湿制粒法将该芯配制成片剂(芯)形式。
[0043]
根据本发明的用于预防或治疗特发性肺纤维化的制剂包括芯上两种以上的相互不同的包衣。上述两种以上的相互不同的包衣可以是选自由以下组成的组中的两种或更多种：包含水溶性或不溶性聚合物的包衣和包含肠溶聚合物的包衣。优选地，根据本发明的制剂可以包括：含有水溶性或不溶性聚合物的包衣作为芯的表面的一次包衣，和含有肠溶聚合物的包衣作为在一次包衣上的二次包衣。包含水溶性或不溶性聚合物的包衣具有可以润滑芯表面的优点，以及通过持久稳定的肠溶包衣表现出有效的肠溶晶体特性。此外，可以将吡非尼酮与由酸性材料制成的肠溶包衣隔开，从而预防其稳定性的劣化，也可以预防由于用于肠溶包衣的有机溶剂而导致的吡非尼酮的稳定性的劣化。
[0044]
包含肠溶聚合物的包衣可以预防吡非尼酮于酸性条件下释放，并且肠溶包衣于小肠的上部溶解，从而将药物释放。
[0045]
上述的包含水溶性或不溶性聚合物的包衣和包含肠溶聚合物的包衣可以特别结合，从而使吡非尼酮在施用到体内时具有本发明的独特的药代动力学特性，因此减少由于吡非尼酮的施用而引起的胃肠道副作用，由此提供了一种含有改善稳定性的吡非尼酮的口服制剂。
[0046]
在优选实施方式中，该水溶性或不溶性聚合物可以选自以下组中的一种或更多种：乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟乙基纤维素和聚乙烯醇，但不限于此。可以考虑以下情况适当地选择这种水溶性或不溶性聚合物：根据本发明的制剂的耐酸性、预防由于有机溶剂而导致的吡非尼酮的稳定性的劣化、以及耐冲击性和薄膜成分的关系。
[0047]
此外，该肠溶聚合物可以是在酸性环境下(如胃)不释放吡非尼酮的ph依赖性聚合物。例如，肠溶性聚合物可以是选自以下组中的一种或更多种：甲基丙烯酸共聚物、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、羟丙甲乙酸纤维素琥珀酸酯、乙酸纤维素、乙酸纤维素邻苯二甲酸酯、乙酸纤维素琥珀酸酯和聚乙酸乙烯邻苯二甲酸酯。在优选实施方式中，该肠溶聚合物可以为甲基丙烯酸共聚物。甲基丙烯酸共聚物之所以是优选的，是因为其在肠溶包衣的过程中，不会损破坏吡非尼酮的稳定性。
[0048]
在优选的实施方式中，含有肠溶聚合物的包衣还可以包括至少一种选自邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸三乙酯、柠檬酸三乙酯、三乙酸甘油酯、癸二酸三丁酯和聚乙二醇的增塑剂；至少一种选自硬脂酸、硬脂酸镁和滑石的润滑剂；和至少一种选自氧化钛和氧化锌的遮光剂。增塑剂的含量可以为基于含有肠溶聚合物的包衣的总重量的0.5至15重量％，润滑剂的含量可以为基于含有肠溶聚合物的包衣的总重量的0.1至15重量％，遮光剂的含量可以为基于含有肠溶聚合物的包衣的总重量的0.1至25重量％。
[0049]
根据本发明的制剂中，水溶性或不溶性聚合物基于吡非尼酮的重量以1:0.005至1:0.15，优选为1:0.01至1:0.1，最优选为1:0.02至0.05的重量比的量使用。《1》当比率为1:0.005以下时，很难赋予芯足够的耐冲击性，以及很难预防稳定性的劣化，以及《2》当比率为1:0.15以上时，存在芯的洗脱延迟的问题。根据本发明的制剂中，肠溶聚合物基于吡非尼酮的重量以1:0.001至1:0.3，优选为1:0.02至1:0.25，最优选为1:0.05至1:0.2的重量比的量使用。《1》当比率为1:0.001以下时，在足够的酸性条件下，很难抑制药物的释放，以及很难
提供充足的延迟时间，《2》当比率为1:0.3以上时，存在药物无法释放或者延迟时间过长的问题。
[0050]
包含水溶性或不溶性聚合物的包衣和包含肠溶聚合物的包衣的重量比可以为1:60至1:1。
[0051]
根据本发明的用于预防或治疗特发性肺纤维化的口服制剂可以通过以下步骤制造：用吡非尼酮和药学上可接受的添加剂制备芯，然后在制备的芯上用两种以上的聚合物形成两种以上的包衣。优选地，两种或更多的相互不同的包衣可以依次制作，或者可以通过使用包含水溶性或不溶性聚合物的一次包衣基质进行一次包衣的步骤和使用包含肠溶聚合物的二次包衣基质进行二次包衣的步骤成型而进行。
[0052]
在一个具体实施方式中，制备根据本发明的用于预防或治疗特发性肺纤维化的口服制剂的步骤可以包括下列步骤：
[0053]
a)将吡非尼酮作为活性成分与赋形剂和崩解剂混合；
[0054]
b)向步骤a)中制备的混合物添加粘合剂以获得颗粒；
[0055]
c)将步骤b)中制备的颗粒与润滑剂混聚并压片，以制备芯；
[0056]
d)用包含水溶性或不溶性的聚合物的一次包衣基质用于步骤c)中制备的芯，制备一次包衣的片剂；
[0057]
e)用包含肠溶性聚合物的肠溶片剂基质对步骤d)中制备的一次包衣片剂进行包衣。
[0058]
制造方法的步骤a)、b)和c)是用于制造包含吡非尼酮和其药学上可接受的添加剂的芯的步骤。除非另有说明，吡非尼酮，关于药学上可接受的添加剂、水溶性或不溶性聚合物和肠溶性聚合物以及它们在上述各步骤中的含量，上述制剂中的所述物质可以按原样使用。步骤a)中将吡非尼酮作为活性成分与赋形剂和崩解剂混合的步骤可选择多种混合设备进行，如已知的混合器，例如，流化床混合器、螺带式混合器等，但不限于此。因为步骤b)是向步骤a)中制备的混合物中添加/混合粘合剂进行聚并，并将所得物筛分并挤出以制备颗粒的步骤，因此可以应用已知的聚并过程、造粒过程和上涂过程(sizing process)。关于步骤b)的制备颗粒的方法，可以应用湿制粒法或干制粒法。步骤c)中，混合步骤b)制备的颗粒和润滑剂以制备芯。该芯优选是片剂(芯)形式。
[0059]
为了增加步骤c)中制备的芯的耐冲击性等，步骤d)中用包含水溶性或不溶性聚合物的一次包衣基质制备具有一次包衣的片剂(即，芯+芯外的一次包衣)。
[0060]
一次包衣基质可以包括选自以下组中的至少一种水溶性或不溶性聚合物：乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素和聚乙烯醇，但不限于此。在本发明的一个实施方式中，使用了clear(colorcon，美国)，即羟丙基甲基纤维素，作为一次包衣基质。
[0061]
步骤e)是如下的步骤：对用含有水溶性或不溶性聚合物的一次包衣基质包衣的一次包衣片剂，用含有甲基丙烯酸共聚物肠溶聚合物(所述聚合物是ph依赖的聚合物)的二次(肠溶性)包衣基质进行包衣，从而在制剂的最外面的部分形成肠溶包衣，最终制造根据本发明的用于预防或治疗特发性肺纤维化的制剂。优选地，该肠溶包衣基质可以包括至少一种选自邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸三乙酯、柠檬酸三乙酯、三乙酸甘油酯、癸二酸三丁酯和聚乙二醇的增塑剂；至少一种选自硬脂酸、硬脂酸镁和滑石的润滑剂；以及至少一种选
自氧化钛和氧化锌的遮光剂，但不限于此。在本发明的一个实施方式中，使用(colorcon，美国)作为一次包衣基质，其为一种甲基丙烯酸共聚物)，或羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯hp 50作为一次包衣基质。
[0062]
形成包衣层的方法可以由本领域技术人员从能够在片剂表面用上述成分形成薄膜状包衣的方法中适当地选择，可以应用如流化床包衣法和锅包衣方法。优选应用锅包衣方法。
[0063]
根据本发明的制造方法可以提供其中芯是通过配制包含吡非尼酮和药学上可接受的添加剂的药物组合物而制备的制剂，其经过设计从而使药物不会在酸性条件下穿过两层以上的包衣基质，例如，穿过包含水溶性或不溶性聚合物的一次包衣基质，以及包含肠溶聚合物的肠溶包衣基质释放，由此在实际施用时，药物在胃中基本不释放，而且可以表现出使药物只有在到达小肠后才会被释放的药物动力学特性。
[0064]
根据本发明的实施方式，提供了一种用于预防或治疗特发性肺纤维化的制剂，该制剂具有改善的安全性，其特征在于，在严苛条件(60
±
2℃)下储存1个月和加速条件(40
±
2℃，75
±
5％rh)下储存6个月的稳定性试验中，相关化合物a小于等于0.1％，相关化合物b小于等于0.1％，各个未知相关化合物小于等于0.05％，总相关化合物小于等于0.3％。
[0065]
实施例
[0066]
下文中将会参考下述的实施例更加详细地描述本发明。然而，这些实施例仅用于说明而非旨在以任何方式限制本发明的范围。
[0067]
实施例1：吡非尼酮200mg肠溶包衣片的制备i
[0068]
将作为活性成分的吡非尼酮与乳糖水合物和交联羧甲基纤维素钠混合。制备浓度为约5(w/w)％的羟丙基纤维素溶液，并使用流化床造粒机喷雾以制备颗粒。将交联羧甲基纤维素钠加入颗粒中并使它们混合，然后用硬脂酸镁润滑。将最终混合物用15kn的力压制，得到含有200mg吡非尼酮的芯(芯重量285mg/片)。制备每片剂约10(w/w)％浓度的opadry clear溶液，并使用锅包衣机喷雾以包衣6mg，然后制备含有羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯hp55作为肠溶包衣基质，含有柠檬酸三乙酯作为增塑剂，含有滑石作为润滑剂的浓度为约10(w/w)％的溶液，并进行喷雾以进行肠溶包衣。
[0069]
吡非尼酮肠溶包衣片剂的成分如下表1所示。
[0070]
表1
[0071][0072]
实施例2：吡非尼酮200mg肠溶包衣片的制备ii
[0073]
将作为活性成分的吡非尼酮与乳糖水合物和交联羧甲基纤维素钠混合。制备浓度为约5(w/w)％的羟丙基纤维素溶液，并使用流化床造粒机喷雾以制备颗粒。将交联羧甲基纤维素钠加入颗粒中并使它们混合，然后用硬脂酸镁润滑。将最终混合物用15kn的力压制，得到含有200mg吡非尼酮的芯(芯重量285mg/片)。制备每片剂约10(w/w)％浓度的opadry clear溶液，并使用锅包衣机喷雾以包衣6mg，然后制备含有羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯hp55作为肠溶包衣基质，含有柠檬酸三乙酯作为增塑剂，含有滑石作为润滑剂的浓度为约10(w/w)％的溶液，并进行喷雾以进行肠溶包衣。
[0074]
吡非尼酮肠溶包衣片剂的成分如下表2所示。
[0075]
表2
[0076][0077]
实施例3：吡非尼酮200mg肠溶包衣片的制备iii
[0078]
将作为活性成分的吡非尼酮与乳糖水合物和交联羧甲基纤维素钠混合。制备浓度
为约5(w/w)％的羟丙基纤维素溶液，并使用流化床造粒机喷雾以制备颗粒。将交联羧甲基纤维素钠加入颗粒中并使它们混合，然后用硬脂酸镁润滑。将最终混合物用15kn的力压制，得到含有200mg吡非尼酮的芯(芯重量285mg/片)。制备每片剂约10(w/w)％浓度的opadry clear溶液，并使用锅包衣机喷雾以包衣6mg，然后制备含有羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯hp50作为肠溶包衣基质，含有柠檬酸三乙酯作为增塑剂，含有滑石作为润滑剂的浓度为约10(w/w)％的溶液，并进行喷雾以进行肠溶包衣。
[0079]
吡非尼酮肠溶包衣片剂的成分如下表3所示。
[0080]
表3
[0081][0082]
实施例4：吡非尼酮200mg肠溶包衣片的制备iv
[0083]
将作为活性成分的吡非尼酮与乳糖水合物和交联羧甲基纤维素钠混合。制备浓度为约5(w/w)％的羟丙基纤维素溶液，并使用流化床造粒机喷雾以制备颗粒。将交联羧甲基纤维素钠加入颗粒中并使它们混合，然后用硬脂酸镁润滑。将最终混合物用15kn的力压制，得到含有200mg吡非尼酮的芯(芯重量285mg/片)。制备每片剂约10(w/w)％浓度的opadry clear溶液，并使用锅包衣机喷雾以包衣6mg，然后制备含有eudragit l100-55作为肠溶包衣基质，含有柠檬酸三乙酯作为增塑剂，含有滑石作为润滑剂的浓度为约10(w/w)％的溶液，并进行喷雾以进行肠溶包衣。
[0084]
吡非尼酮肠溶包衣片剂的成分如下表4所示。
[0085]
表4
[0086][0087]
实施例5：吡非尼酮200mg肠溶包衣片的制备v
[0088]
将作为活性成分的吡非尼酮与乳糖水合物和交联羧甲基纤维素钠混合。制备浓度
为约5(w/w)％的羟丙基纤维素溶液，并使用流化床造粒机喷雾以制备颗粒。将交联羧甲基纤维素钠加入颗粒中并使它们混合，然后用硬脂酸镁润滑。将最终混合物用15kn的力压制，得到含有200mg吡非尼酮的芯(芯重量285mg/片)。制备每片剂约10(w/w)％浓度的opadry clear溶液，并使用锅包衣机喷雾以包衣6mg，然后制备含有羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯hp55作为肠溶包衣基质，含有柠檬酸三乙酯作为增塑剂，含有滑石作为润滑剂的浓度为约10(w/w)％的溶液，并进行喷雾以进行肠溶包衣。
[0089]
吡非尼酮肠溶包衣片剂的成分如下表5所示。
[0090]
表5
[0091][0092]
实施例6：吡非尼酮200mg肠溶包衣片的制备vi
[0093]
将作为活性成分的吡非尼酮与乳糖水合物和交联羧甲基纤维素钠混合。制备浓度为约5(w/w)％的羟丙基纤维素溶液，并使用流化床造粒机喷雾以制备颗粒。将交联羧甲基纤维素钠加入颗粒中并使它们混合，然后用硬脂酸镁润滑。将最终混合物用15kn的力压制，得到含有200mg吡非尼酮的芯(芯重量285mg/片)。制备每片剂约10(w/w)％浓度的opadry clear溶液，并使用锅包衣机喷雾以包衣6mg，然后制备含有羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯hp55作为肠溶包衣基质，含有柠檬酸三乙酯作为增塑剂，含有滑石作为润滑剂的浓度为约10(w/w)％的溶液，并进行喷雾以进行肠溶包衣。
[0094]
吡非尼酮肠溶包衣片剂的成分如下表6所示。
[0095]
表6
[0096][0097]
实施例7：吡非尼酮200mg肠溶包衣片的制备vii
[0098]
将作为活性成分的吡非尼酮与乳糖水合物和交联羧甲基纤维素钠混合。制备浓度
为约5(w/w)％的羟丙基纤维素溶液，并使用流化床造粒机喷雾以制备颗粒。将交联羧甲基纤维素钠加入颗粒中并使它们混合，然后用硬脂酸镁润滑。将最终混合物用15kn的力压制，得到含有200mg吡非尼酮的芯(芯重量285mg/片)。制备每片剂约20(w/w)％浓度的opadry clear溶液，并使用锅包衣机喷雾以包衣6mg，然后用以acryl-eze白为肠溶包衣基质的浓度为约10(w/w)％的溶液进行肠溶包衣。
[0099]
吡非尼酮肠溶包衣片剂的成分如下表7所示。
[0100]
表7
[0101][0102]
实施例8：吡非尼酮200mg肠溶包衣片的制备viii
[0103]
将作为活性成分的吡非尼酮与乳糖水合物和交联羧甲基纤维素钠混合。制备浓度为约5(w/w)％的羟丙基纤维素溶液，并使用流化床造粒机喷雾以制备颗粒。将交联羧甲基纤维素钠加入颗粒中并使它们混合，然后用硬脂酸镁润滑。将最终混合物用15kn的力压制，得到含有200mg吡非尼酮的芯(芯重量285mg/片)。制备每片剂约10(w/w)％浓度的opadry clear溶液，并使用锅包衣机喷雾以包衣6mg，然后用以acryl-eze白为肠溶包衣基质的浓度为约20(w/w)％的溶液进行肠溶包衣。
[0104]
吡非尼酮肠溶包衣片剂的成分如下表8所示。
[0105]
表8
[0106][0107]
对比实施例1：吡非尼酮200mg普通包衣片的制备
[0108]
将作为活性成分的吡非尼酮与乳糖水合物和交联羧甲基纤维素钠混合。制备浓度为约5(w/w)％的羟丙基纤维素溶液，并使用流化床造粒机喷雾以制备颗粒。将交联羧甲基纤维素钠加入颗粒中并使它们混合，然后用硬脂酸镁润滑。将最终混合物用15kn的力压制，得到含有200mg吡非尼酮的芯(芯重量285mg/片)。制备每片剂约10(w/w)％浓度的opadry clear溶液，并使用锅包衣机喷雾以包衣10mg，由此获得所需的吡非尼酮普通包衣片剂。
[0109]
吡非尼酮普通包衣片剂的成分如下表9所示。
[0110]
表9
[0111][0112]
测试例1：酸性条件下溶出的评价
[0113]
在酸性条件下，使用溶出溶液(ph1.2,900ml)对根据本发明的实施例和对比实施例制备的包含吡非尼酮的包衣片剂的进行溶出试验。以erweka dissolution tester进行
溶出试验，并通过agilent 1260 series hplc每小时收集和分析测试溶液。
[0114]
《hplc分析条件》
[0115]
流动相：ph3.0的水溶液
1)
/甲醇/乙腈＝650/130/220(v/v/v)
[0116]
检测器：紫外吸收光谱仪(测量波长220nm)
[0117]
流速：1.0ml/min
[0118]
柱：采用在不锈钢管中(内径4.6mm，长度150mm)填充十八烷基甲硅烷基硅胶的柱
[0119]
柱温度：恒定温度约40℃
[0120]
标准溶液的制备：
[0121]
精密称取吡非尼酮标准品11mg，置于50ml量瓶中，向其中添加35ml的洗脱液，超声提取5分钟，冷却，然后用洗脱液对齐标线从而制成标准溶液。
[0122]
1)ph3.0的水溶液：将0.9ml三乙胺溶解于650ml水中，然而用磷酸调整至ph3.0的溶液。
[0123]
《计算式》
[0124][0125]at
：测试溶液获得的吡非尼酮的峰面积
[0126]as
：标准溶液获得的吡非尼酮的峰面积
[0127]ws
：标准样品的收集量(mg)
[0128]
c：每1片药物中主要成分的指示量
[0129]
p：吡非尼酮标准品的纯度(％)
[0130]
18：测试溶液和标准溶液的稀释因子
[0131]
测试结果如图1和下表10所示。
[0132]
表10
[0133]
时间(min)5101530456090120实施例10.00.00.00.00.00.00.00.0实施例20.00.00.00.00.00.00.00.0实施例30.00.00.00.00.02.44.68.7实施例40.00.00.00.00.00.01.13.9实施例50.00.00.00.00.00.00.00.0实施例60.00.00.00.00.00.00.00.0实施例70.00.00.00.00.00.00.00.0实施例80.00.00.00.00.00.00.00.0对比实施例196.3100.4100.4100.4
‑‑‑‑
[0134]
如图1和表10所示，可以确定就根据本发明的吡非尼酮制剂而言，在全部的实施例1至4中，吡非尼酮于酸性条件下进行溶出后30分钟的溶出度显示为0％，然而不包含肠溶包衣的对比实施例1在进行溶出后立即显示出90％以上的溶出度，并且30分钟内吡非尼酮就全部释放。根据这一结果，可以看出与其他制剂不同，根据本发明的制剂在酸性条件下表现
出优秀的抑制吡非尼酮溶出的效果。
[0135]
测试例2：基本条件下溶出试验的评价
[0136]
在基本条件下，使用溶出介质(ph6.8,900ml)对根据本发明的实施例和对比实施例制备的包含吡非尼酮的包衣片剂进行溶出试验。以erweka dissolution tester进行溶出试验，通过agilent 1260 series hplc每小时收集测试结果，并根据测试例1的分析条件和计算式进行分析。测试结果如图2和下表11所示。
[0137]
表11
[0138]
时间(min)5101530456090120实施例10.038.363.1102.8103.8103.9103.8103.8实施例20.06.746.3102.1103.6103.8103.6103.6实施例35.553.779.8102.1102.3102.8102.8102.7实施例43.032.766.3100.9102.9102.9102.8102.8实施例50.00.013.868.794.1101.3101.4101.8实施例60.00.03.320.874.996.3101.0101.6实施例720.959.888.0100.1100.5101.0101.0101.1实施例814.745.387.199.9102.1102.3102.2102.2对比实施例191.898.3100.6102.1
‑‑‑‑
[0139]
如图2和表11所示，可以确定就根据本发明的吡非尼酮制剂而言，吡非尼酮在基本溶出条件下，进行溶出后10分钟内开始溶出，并且绝大多数吡非尼酮于洗脱后30分钟到2小时内就完全溶出。
[0140]
测试例3：用比格犬的药代动力学测试
[0141]
使用比格犬对根据本发明的实施例和对比实施例制备的包含吡非尼酮的包衣片剂进行药代动力学测试。该组构成包含10只雄性比格犬，每组5只，并分为实施例1组和对比实施例1组。经口施用后洗脱至少7天，并继续进行交叉试验。每个不锈钢制的饲养箱中饲养一只犬，每天供给一次300g的饲料和通过自动供水装置供给反渗透处理的地下水。施用前16小时禁食，自由饮水。药物施用时，施用者一只手轻轻张开比格犬的嘴，然后另一只手将片剂放于比格犬的舌根处。此时，施用约10ml饮用水以顺利施用。该组构成如下表12所示。
[0142]
表12
[0143][0144]
向每组的所有个体施用后，使用一次性注射器于前肢静脉采血约2ml。将收集的血液立即放入包含抗凝剂的血样容器中，然后使用roll-mixer(5roll mixer,hyunil lab-mate)混合血液和抗凝剂。收集血液的30分钟内，通过3000rpm离心15分钟分离血浆。将400μl分离的各个血浆分别加入到备好的管中，并将其储存于低温冰箱中。血液采样时间为0、0.25、0.5、0.75、1、2、3、4、6、8、10、12和24小时，除空白外，共采集12个点。
[0145]
《hplc分析条件》
[0146]
流动相：10mm甲酸铵(0.1％甲酸):甲醇＝4:6(v/v)
[0147]
检测器：4000qtrap mrm模式
[0148]
流速：0.25ml/min
[0149]
柱：采用在不锈钢管中(内径2.1mm，长度50mm)填充3μm的十八烷基甲硅烷基硅胶的柱
[0150]
在药代动力学分析测试中，测量了血浆峰值浓度(c
max
)、血浆峰值浓度时间(t
max
)、以及药物时间曲线下面积(auc)，并观察是否由有呕吐作为临床症状。auc、c
max
和t
max
如图3和下表13所示，施用后个体是否呕吐和呕吐的个体数目如下表14所示。
[0151]
表13
[0152] 对比实施例1实施例1auc(0-24)(ng
·
hr/ml)37157.49
±
7331.3939743.33
±
11555.56c
max
17136.40
±
4959.7518365.58
±
6210.55t
max
1.08
±
0.7552.29
±
1.90t
1/2
0.82
±
0.080.86
±
0.09auc/c
max
比率2.17
±
1.482.16
±
1.86
[0153]
*排除已经呕吐的个体。
[0154]
表14
[0155][0156]
如表13和表14所示，可以确定在施用对比实施例1时，施用后短时间内就达到最大血药浓度(c
max
)，然而在施用本发明的实施例1时，施用后达到最高血浆浓度的时间(t
max
)是施用后2.29
±
1.90小时，这意味着大量的吡非尼酮在到达小肠时释放，而非在通过胃时释放。
[0157]
实施例9：吡非尼酮200mg肠溶包衣片的制备i
[0158]
将作为活性成分的吡非尼酮与乳糖水合物和交联羧甲基纤维素钠混合。制备浓度为约5(w/w)％的羟丙基纤维素溶液，并使用流化床造粒机喷雾以制备颗粒。将交联羧甲基纤维素钠加入颗粒中并使它们混合，然后用硬脂酸镁润滑。将最终混合物用15kn的力压制，得到含有200mg吡非尼酮的芯(芯重量285mg/片)。制备每片剂约10(w/w)％浓度的opadry clear溶液，并使用锅包衣机喷雾以包衣6mg，然后用约20(w/w)％浓度的acryl-eze白的溶液作为肠溶包衣基质进行肠溶包衣。
[0159]
吡非尼酮肠溶包衣片剂的成分如下表15所示。
[0160]
表15
[0161][0162]
实施例10：吡非尼酮200mg肠溶片包衣的制备ii
[0163]
将作为活性成分的吡非尼酮与乳糖水合物和交联羧甲基纤维素钠混合。制备浓度为约5(w/w)％的羟丙基纤维素溶液，并使用流化床造粒机喷雾以制备颗粒。将交联羧甲基纤维素钠加入颗粒中并使它们混合，然后用硬脂酸镁润滑。将最终混合物用15kn的力压制，得到含有200mg吡非尼酮的芯(芯重量285mg/片)。制备每片剂约10(w/w)％浓度的opadry clear溶液，并使用锅包衣机喷雾以包衣6mg，然后，然后用约20(w/w)％浓度的acryl-eze白的溶液作为肠溶包衣基质进行肠溶包衣。
[0164]
吡非尼酮肠溶包衣片剂的成分如下表16所示。
[0165]
表16
[0166][0167]
实施例11：吡非尼酮200mg肠溶包衣片的制备iii
[0168]
将作为活性成分的吡非尼酮与乳糖水合物和交联羧甲基纤维素钠混合。制备浓度为约5(w/w)％的羟丙基纤维素溶液，并使用流化床造粒机喷雾以制备颗粒。将交联羧甲基纤维素钠加入颗粒中并使它们混合，然后用硬脂酸镁润滑。将最终混合物用15kn的力压制，得到含有200mg吡非尼酮的芯(芯重量285mg/片)。制备每片剂约10(w/w)％浓度的opadry clear溶液，并使用锅包衣机喷雾以包衣6mg，然后制备含有eudragit l100-55作为肠溶包衣基质，含有柠檬酸三乙酯作为增塑剂，含有滑石作为润滑剂的浓度为约10(w/w)％的溶液，并进行喷雾以进行肠溶包衣。
[0169]
吡非尼酮肠溶包衣片剂的成分如下表17所示。
[0170]
表17
[0171][0172]
测试例4：相关化合物测试
[0173]
根据本发明的实施例制备的包含吡非尼酮的包衣片剂，在严苛条件(60
±
2℃)下
储存1个月和加速条件(40
±
2℃，75
±
5％rh)下储存6个月，然后收集样品并根据下列条件进行分析。
[0174]
《hplc分析条件》
[0175]
流动相a：将0.9ml三乙胺溶解于650ml水中，然后用磷酸将ph调整至3.0。
[0176]-流动相b：将甲醇和乙腈以130:220的体积比混合。
[0177]-稀释剂：将流动相a和流动相b以650:350的比率混合。
[0178]-标准溶液：称取5mg相关化合物a标准品和5mg相关化合物b标准品，置于50ml量瓶中，向其中添加稀释剂并溶解，并且对齐标线，从而制成相关化合物标准储备溶液。取1.0ml测试溶液，置于100ml量瓶中，然后添加稀释剂以对齐标线。取5.0ml该溶液和1.0ml相关化合物标准储备溶液，置于100ml量瓶中。添加稀释剂精确定容至100ml，将其作为标准溶液(相关化合物a和b：1.0μg/ml，吡非尼酮：0.5μg/ml)。
[0179]-测试溶液：取20片药剂，精准称重制成粉末。精准称重与约100mg的吡非尼酮对应的量，置于100ml的量瓶中，并且添加70ml的稀释剂，超声提取5分钟，然后冷却至室温，然后添加稀释剂以对齐标线。通过0.45μm的膜过滤器过滤该溶液以制成测试溶液(1.0mg/ml)。在下述条件下，根据液相色谱法测量20μl标准溶液和20μl测试溶液。
[0180]-操作条件
[0181]
检测器：紫外吸收光谱仪
[0182]
相关化合物a、b(测量波长：310nm，参考：380nm)
[0183]
未知相关化合物(测量波长：220nm，参考：380nm)
[0184]
柱：采用在不锈钢管中(内径4.6mm，长度250mm)填充5μm的十八烷基甲硅烷基硅胶的柱。
[0185]
柱温度：恒定温度约40℃
[0186]
流动相：使用流动相a和b，并按下表18逐级控制或浓度梯度控制。
[0187]
表18
[0188]
时间(min)流动相a(％)流动相b(％)098239824030704530704698250982
[0189]
流速：1.0ml/min
[0190]
测试时间：50分钟
[0191]-体系相容性：当按照上述条件，重复检测6次20μl标准溶液时，相关化合物a、相关化合物b和吡非尼酮的峰面积的相对标准偏差(％rsd)应该为2.0％以下。当按照上述条件检测20μl标准溶液时，相关化合物a和相关化合物b的分离度应至少为10。
[0192]-相关物质的计算式
[0193]
[0194]at
：测试溶液在310nm处测得的相关化合物的峰面积
[0195]as
：标准溶液在310nm处测得的相关化合物的峰面积
[0196]ws
：标准样品的收集量(mg)
[0197]wt
：测试样品的收集量(mg)
[0198]mn
:每1片药物的平均质量(mg)
[0199]
c：每1片药物主要成分的指示量(200mg)
[0200]
0.02：标准溶液和测试溶液的稀释因子
[0201]
p：相关化合物的标准品的纯度(％)
[0202][0203]at
：测试溶液
附注1)
在220nm处测得的各未知相关化合物的峰面积
[0204]as
：标准溶液在220nm处测得的峰面积
[0205]cs
：标准溶液中吡非尼酮的浓度(mg/ml)
[0206]ct
：测试溶液中吡非尼酮的浓度(mg/ml)
[0207]
所有相关化合物(％)＝相关化合物a的量(％)+相关化合物a的量(％)+各未知相关化合物的量(％)的总和
[0208]
附注1)不包括相关物质a和b在220nm处的峰
[0209]
此外，相应相关化合物的相对保留时间和标准如下所示。
[0210]
表19
[0211]
时间(min)相对保留时间(rrt)标准相关化合物a约0.130.1％以下相关化合物b约0.430.1％以下各未知相关化合物-0.05％以下所有相关化合物-0.3％以下
[0212]
相关化合物的测试结果如下表20至24所示。
[0213]
表20
[0214] 实施例9实施例10实施例11实施例1实施例3相关化合物andndndndnd相关化合物bndndndndnd各未知相关化合物0.030.030.020.030.03所有相关化合物0.030.030.020.030.03
[0215]
表21
[0216] 实施例9实施例10实施例11实施例1实施例3相关化合物andndndndnd相关化合物bndndndndnd各未知相关化合物0.030.030.041.441.61所有相关化合物0.030.030.041.771.90
[0217]
表22
[0218] 实施例9实施例10实施例11实施例1实施例3相关化合物andndndndnd相关化合物bndndndndnd各未知相关化合物0.030.030.030.330.39所有相关化合物0.030.030.030.550.62
[0219]
表23
[0220] 实施例9实施例10实施例11实施例1实施例3相关化合物andndndndnd相关化合物bndndndndnd各未知相关化合物0.030.030.040.700.77所有相关化合物0.030.030.041.031.06
[0221]
表24
[0222] 实施例9实施例10实施例11实施例1实施例3相关化合物andndndndnd相关化合物bndndndndnd各未知相关化合物0.030.030.041.111.16所有相关化合物0.030.030.041.541.49
[0223]
由表20至24的结果可以证实，与使用羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯hp55或羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯hp50作为肠溶包衣基质而非使用甲基丙烯酸共聚物作为肠溶包衣基质制备的实施例1至3的制剂相比，在使用甲基丙烯酸共聚物作为肠溶包衣基质的根据实施例9至11的制剂的情况下，检测出少量的相关物质。