至少包含速效胰岛素类似物和具有餐时作用的胰高血糖素抑制剂的可注射水溶液形式的药物组合物的制作方法

至少包含速效胰岛素类似物和具有餐时作用的胰高血糖素抑制剂的可注射水溶液形式的药物组合物
1.本发明涉及通过注射至少包含具有快速餐时作用的人胰岛素类似物和特别是具有餐时作用的胰高血糖素抑制剂的组合物来治疗糖尿病并允许改善对餐后高血糖之控制的治疗。
2.迄今为止，1型糖尿病患者使用两种类型的胰岛素：用于在进餐时控制血糖的短效餐时胰岛素，以及用于在整个白天和黑夜控制血糖的长效基础胰岛素。存在数种类型的短效胰岛素，其特征在于其起效。例如，与所谓的速效胰岛素类似物例如赖脯胰岛素(人胰岛素b28k、b29p，)或门冬胰岛素(人胰岛素b28d，)或谷赖胰岛素(人胰岛素b3k、b29e，)相比，被称为常规胰岛素的人胰岛素具有延迟的作用。因此，人胰岛素必须在餐前平均30分钟施用，而胰岛素类似物可在餐前15分钟或进餐时施用。此外，胰岛素类似物被认为比人胰岛素能更好地控制餐后血糖，这解释了为什么当今欧洲和美国的绝大多数患者使用作用比人胰岛素短的速效胰岛素类似物。特别是用于人工胰腺设置，其中通过由算法控制并与连续葡萄糖测量连接的泵来施用胰岛素。
3.在另一种情况下，已经描述了酸性ph的人胰岛素和胰岛素类似物的制剂。pct申请wo2007/104786描述了ph 3.5的包含速效胰岛素类似物a21g、b28d、desb30和a21g、b28e、desb30以及普兰林肽的组合物。该申请还描述了中性ph的且在表面活性剂并且特别是甘油磷酸衍生物，更特别是二豆蔻酰磷脂酰甘油(dimyristoyl glycerophosphoglycerol，dmpg)的存在下的快速胰岛素组合物，特别是b28d(门冬胰岛素)，这导致通过tht测量的稳定性远大于酸性ph的速效胰岛素类似物a21g、b28d、desb30和a21g、b28e、desb30的组合物的稳定性。此外，该申请没有显示胰岛素和普兰林肽的任何pkpd结果，并且在其实施例中公开了酸性ph的desb30胰岛素。
4.申请人的专利申请wo2019/020820描述了使用含或不含锌的ph 4的与普兰林肽组合的人胰岛素a21g，以获得在猪模型中具有常规胰岛素吸收曲线和较慢普兰林肽吸收曲线的稳定组合物。该申请没有公开速效胰岛素和胰高血糖素抑制剂制剂。
5.专利申请cn102199206描述了组合赖脯胰岛素a21g(人胰岛素a21g、b28k、b29p)和甘精胰岛素(包含锌)，以获得胰岛素的混合的快速和缓慢吸收。然而，与单独赖脯胰岛素相比，胰岛素的速效吸收较慢。
6.仍需要稳定的速效胰岛素和胰高血糖素抑制剂制剂，即用于在进餐时更好地控制葡萄糖，以及也用于人工胰腺应用。该制剂还应符合在2至8℃下至少2年、在30℃下2周的稳定性要求以及用于胰岛素泵的相容性。
7.然而，即使在速效胰岛素类似物的情况下，在进餐后通过这些外源餐时胰岛素确保对血糖的控制也不是最佳的。这部分地与以下事实相关：与健康人相比，这些患者在进餐后会产生胰高血糖素，其导致除去了储存在肝脏中的一些葡萄糖。这种由胰高血糖素介导的葡萄糖产生使这些患者的餐后高血糖问题恶化，并导致胰岛素的过度使用。
8.这种调节餐后血糖的问题与用胰岛素治疗的2型糖尿病患者相当类似，在这种情
况下，其疾病已导致其产生胰岛素和胰淀素之能力的非常显著的损失。
9.已经示出，胰高血糖素抑制剂(特别是肽和/或激素)能够抑制进餐后胰高血糖素的产生，这导致对餐后血糖控制的显著改善。
10.此外，特别令人感兴趣的是，胰岛素的吸收速率加快，特别是用于泵或人工胰腺。
11.出乎意料的是，申请人已表明，与不含普兰林肽的胰岛素a21g、b28d的吸收相比，在3.0至4.0的ph范围下制备的包含具有a21替换的速效胰岛素类似物以及胰高血糖素抑制剂，特别是胰淀素激动剂或胰淀素受体激动剂并且更特别是普兰林肽的组合物在与普兰林肽组合时导致门冬胰岛素a21g(人胰岛素a21g、b28d)的吸收加速。稳定性研究显示了物理稳定性和化学稳定性二者，并且获得了满足美国和欧洲对通过注射器或通过泵进行皮下注射的液体胰岛素产品的要求。
12.为了获得化学和物理稳定的液体制剂，需要在最佳ph下制备制剂。发现该ph范围为3.0至4.0，并且更具体地约3.5。甘精胰岛素在ph 4时可溶，但在中性ph时沉淀，这导致注射之后吸收缓慢。
13.申请人示出了在水溶液中，ph为3.0至4.0的包含具有餐时作用的胰高血糖素抑制剂的组合使得能够获得比胰岛素不与胰高血糖素抑制剂组合时更快的胰岛素吸收曲线。
14.与现有技术中描述的那些相比，表现出在这些酸性ph下这样的性质并且仍保持良好的物理和化学稳定性质的可注射水溶液形式的药物组合物的获得是非凡的。如上所述，文献教导远离所要求保护的组合物。
15.根据一个实施方案，可注射水溶液形式的药物组合物不含锌或镁。
[0016]“不含锌”意指按重量/重量比计小于200ppm并且优选小于100ppm的锌的量。
[0017]“不含镁”意指按重量/重量比计小于200ppm并且优选小于100ppm的镁的量。
[0018]
本发明涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.0至4.0，至少包含在a21位置上具有残基替换的速效胰岛素类似物和至少一种具有餐时作用的胰高血糖素抑制剂。
[0019]
本发明涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.0至4.0，包含至少一种具有餐时作用的胰高血糖素抑制剂和至少速效胰岛素类似物，所述速效胰岛素类似物具有至少一个在a21位置上的替换以及另一个替换的人胰岛素序列。这意味着速效胰岛素类似物的序列包含至少2个人胰岛素序列差异，一个差异在a21位置。
[0020]
在一个实施方案中，与包含a21替换的人胰岛素的序列相比，“具有至少一个在a21位置上的替换的人胰岛素序列的速效胰岛素类似物”具有包含至多5个修饰的序列。
[0021]“修饰”意指替换、添加或缺失。
[0022]
在一个实施方案中，修饰是缺失或替换。
[0023]
替换意指在人胰岛素序列中，氨基酸被天然或合成的氨基酸例如2-氨基异丁酸替换。
[0024]
添加意指在人胰岛素序列中添加天然或合成的氨基酸，例如2-氨基异丁酸。
[0025]
在一个实施方案中，具有a21替换的速效胰岛素类似物包含至多2个替换。
[0026]
在一个实施方案中，具有a21替换的速效胰岛素类似物包含至多2个修饰。
[0027]
本发明还涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.0至4.0，并且包含至少一种具有餐时作用的胰高血糖素抑制剂和至少速效胰岛素类似物，所述速效胰岛素类似物具有含有至少以下替换的人胰岛素序列：
[0028]-b28d，和
[0029]-a21。
[0030]
a21位置上的替换意指在该位置上，残基不是天冬酰胺(n)。
[0031]
根据一个实施方案，a21处的替换是甘氨酸、丙氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸或丝氨酸。
[0032]
根据另一个实施方案，a21位置上的替换是甘氨酸。该替换也被写成“a21g”。
[0033]
在一个实施方案中，速效胰岛素是具有在a21位置处的替换的人胰岛素b28d。人胰岛素b28d也称为门冬胰岛素。
[0034]
根据一个优选实施方案，速效胰岛素类似物是门冬胰岛素a21g，也称为人胰岛素a21g、b28d。与人胰岛素相比，这种门冬胰岛素a21g仅包含这两种替换。
[0035]
根据另一个实施方案，胰岛素类似物是门冬胰岛素a21g、desb30，也称为人胰岛素a21g、b28d、desb30。与人胰岛素相比，该门冬胰岛素a21g、desb30仅包含这2种替换和1种缺失。
[0036]
根据另一个实施方案，组合物不包含所述门冬胰岛素a21g、desb30，也称为人胰岛素a21g、b28d、desb30。
[0037]
在一个实施方案中，当胰岛素包含b28d替换时，组合物的ph为3.0至4.0。
[0038]
在一个实施方案中，当胰岛素包含b28d替换时，组合物的ph为3.2至3.8。
[0039]
在一个实施方案中，当胰岛素包含b28d替换时，组合物的ph为3.3至3.7。
[0040]
在一个实施方案中，当胰岛素包含b28d替换时，组合物的ph为3.5。
[0041]
在一个实施方案中，当胰岛素包含b28d替换时，组合物的ph为3.4。
[0042]
根据一个实施方案，具有餐时作用的胰高血糖素抑制剂是胰淀素类似物或胰淀素受体激动剂、glp-1类似物或glp-1受体激动剂(也称为glp-1ra)。
[0043]
申请人已经观察到，根据本发明的ph为3.0至4.0的制剂具有有利的药动学性质和稳定性，特别是与用于输注的泵的使用相容。这样的输注可以是皮下输注。
[0044]
在另一个实施方案中，ph为3.2至3.8。
[0045]
在另一个实施方案中，ph为3.3至3.7。
[0046]
在另一个实施方案中，ph为3.5。
[0047]
在另一个实施方案中，ph为3.4
[0048]
申请人已经观察到，根据本发明的ph为3.0至4.0的药物组合物具有与在进餐时使用相容的药动学性质，并且使得能够更好地控制餐后血糖。
[0049]
能够获得用于糖尿病治疗的可注射水溶液形式的药物组合物的要求特别地是：
[0050]-显示出良好的物理和化学稳定性，例如在5℃下稳定至少一年或甚至2年并且在30℃(多次使用)下稳定至少两周的水性液体制剂，
[0051]-与抗微生物防腐剂的相容性。
[0052]
同样，ph为3.0至4.0的具有a21替换的速效胰岛素类似物与胰淀素类似物或胰淀素受体激动剂(例如普兰林肽)、glp-1类似物或glp-1受体激动剂(也称为glp-1 ra，例如艾塞那肽或利司那肽)的药物组合物具有物理和化学稳定性，使得能够开发在5℃下稳定至少一年或甚至2年并且在30℃下稳定至少两周的液体制剂。
[0053]
在一个实施方案中，本发明涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.0至4.0，至少包含门冬胰岛素a21g和至少一种具有餐时作用的胰高血糖素抑制剂。在一个实施
方案中，该组合物不含锌。
[0054]
在另一个实施方案中，可注射水溶液形式的药物组合物的ph为3.2至3.8。
[0055]
在另一个实施方案中，可注射水溶液形式的药物组合物的ph为3.3至3.7。
[0056]
在另一个实施方案中，可注射水溶液形式的药物组合物的ph为3.5。
[0057]
在另一个实施方案中，药物组合物是可注射水溶液的形式，其ph为3.4。
[0058]
根据本发明的可注射水溶液形式的药物组合物是澄清溶液。“澄清溶液”应理解为意指满足美国药典和欧洲药典中关于可注射溶液描述的标准的组合物。在美国药典中，溶液在《1151》部分中进行了定义，是指注射剂(《1》)(参照根据usp 35的《788》，并且在根据usp 35的《788》中规定，以及在根据usp 38的《787》、《788》和《790》usp 38(自2014年8月1日起)中规定)。在欧洲药典中，可注射溶液必须符合2.9.19和2.9.20节中给出的标准。
[0059]
在一个实施方案中，本发明涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.0至4.0，至少包含门冬胰岛素a21g和普兰林肽。在一个实施方案中，该组合物不含锌。
[0060]
在一个实施方案中，本发明涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.0至4.0，至少包含门冬胰岛素a21g、glp-1 ra，例如艾塞那肽或利司那肽。在一个实施方案中，该组合物不含锌。
[0061]
在一个实施方案中，本发明涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.2至3.8，至少包含门冬胰岛素a21g和普兰林肽。在一个实施方案中，该组合物不含锌。
[0062]
在一个实施方案中，本发明涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.2至3.8，至少包含门冬胰岛素a21g、glp-1 ra，例如艾塞那肽或利司那肽。在一个实施方案中，该组合物不含锌。
[0063]
在一个实施方案中，本发明涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.3至3.7，至少包含门冬胰岛素a21g和普兰林肽。在一个实施方案中，该组合物不含锌。
[0064]
在一个实施方案中，本发明涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.3至3.7，至少包含门冬胰岛素a21g、glp-1 ra，例如艾塞那肽或利司那肽。在一个实施方案中，该组合物不含锌。
[0065]
在一个实施方案中，本发明涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.5，至少包含门冬胰岛素a21g和普兰林肽。在一个实施方案中，该组合物不含锌。
[0066]
在一个实施方案中，本发明涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.5，至少包含门冬胰岛素a21g、glp-1 ra，例如艾塞那肽或利司那肽。在一个实施方案中，该组合物不含锌。
[0067]
在一个实施方案中，本发明涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.4，至少包含门冬胰岛素a21g和普兰林肽。在一个实施方案中，该组合物不含锌。
[0068]
在一个实施方案中，本发明涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.4，至少包含门冬胰岛素a21g、glp-1 ra，例如艾塞那肽或利司那肽。在一个实施方案中，该组合物不含锌。
[0069]
在一个实施方案中，具有a21替换的速效胰岛素类似物的浓度为600至3000μm或100至500u/ml。
[0070]
在一个实施方案中，具有a21替换的速效胰岛素类似物的浓度为600至1200μm或100至200u/ml。
[0071]
在一个实施方案中，具有a21替换的速效胰岛素类似物的浓度为600μm或100u/ml。
[0072]
在一个实施方案中，具有a21替换的速效胰岛素类似物的浓度为1200μm或200u/ml。
[0073]
在本说明书中，3.5mg的胰岛素a21被认为是100u的胰岛素a21。
[0074]
在一个实施方案中，具有a21替换的速效胰岛素类似物的浓度为2至20mg/ml。
[0075]
在一个实施方案中，具有a21替换的速效胰岛素类似物的浓度为3.5至10.5mg/ml。
[0076]
在一个实施方案中，具有a21替换的速效胰岛素类似物的浓度为3.5mg/ml。
[0077]
在一个实施方案中，本发明涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.0至4.0，至少包含具有a21替换的速效胰岛素类似物和至少一种具有餐时作用的胰高血糖素抑制剂，并且不含鱼精蛋白盐。
[0078]
在一个实施方案中，本发明涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.0至4.0，至少包含门冬胰岛素a21g和至少一种具有餐时作用的胰高血糖素抑制剂，并且不含鱼精蛋白盐。
[0079]
在另一个实施方案中，本发明涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.0至4.0，至少包含具有a21替换的速效胰岛素类似物和至少一种具有餐时作用的胰高血糖素抑制剂，并且不含鱼精蛋白盐或其他带正电荷的肽，所述肽包含大于或等于40％的百分比的带正电荷的氨基酸。
[0080]
在另一个实施方案中，本发明涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.0至4.0，至少包含门冬胰岛素a21g和至少一种具有餐时作用的胰高血糖素抑制剂，并且不含鱼精蛋白盐或其他带正电荷的肽，所述肽包含大于或等于40％的百分比的带正电荷的氨基酸。
[0081]
在一个实施方案中，本发明涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.0至4.0，至少包含门冬胰岛素a21g和至少一种具有餐时作用的胰高血糖素抑制剂并且不含甘精胰岛素。
[0082]
在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物不包含长效胰岛素。
[0083]
在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物不包含移植的胰岛素。
[0084]
在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物不包含酰化的胰岛素。
[0085]
在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物不包含聚乙二醇化胰岛素。
[0086]
在一个实施方案中，本发明涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.0至4.0，至少包含具有a21替换的胰岛素类似物以及胰淀素受体激动剂或胰岛素类似物。根据一个实施方案，所述胰淀素受体激动剂或胰岛素类似物是普兰林肽。
[0087]
在一个实施方案中，本发明涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.2至3.8，至少包含具有a21替换的胰岛素类似物以及胰淀素受体激动剂或胰岛素类似物。根据一个实施方案，所述胰淀素受体激动剂或胰岛素类似物是普兰林肽。
[0088]
在一个实施方案中，本发明涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.3至3.7，至少包含具有a21替换的胰岛素类似物以及胰淀素受体激动剂或胰岛素类似物。根据一个实施方案，所述胰淀素受体激动剂或胰岛素类似物是普兰林肽。
[0089]
在一个实施方案中，本发明涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.5，至少包含具有a21替换的胰岛素类似物以及胰淀素受体激动剂或和胰岛素类似物。根据一个
实施方案，所述胰淀素受体激动剂或胰岛素类似物是普兰林肽。
[0090]
在一个实施方案中，本发明涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.4，至少包含具有a21替换的胰岛素类似物以及胰淀素受体激动剂或和胰岛素类似物。根据一个实施方案，所述胰淀素受体激动剂或胰岛素类似物是普兰林肽。
[0091]
在本技术中，如上所述，胰淀素是指专利us 5,124,314和us 5,234,906中描述的化合物。当使用术语“类似物”时，其是指其中一级序列的一个或更多个组成氨基酸残基已被其他氨基酸残基替换和/或其中一个或更多个组成氨基酸残基已被消除和/或其中已添加一个或更多个组成氨基酸残基的肽或蛋白质。本类似物定义所接受的同源性百分比为50％。在胰淀素的情况下，类似物可例如通过替换一个或更多个天然或非天然或拟肽氨基酸而来自于胰淀素的一级氨基酸序列。
[0092]
在一个实施方案中，本发明涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.0至4.0，至少包含具有a21替换的速效胰岛素类似物和glp-1受体激动剂或glp-1类似物。根据一个实施方案，所述glp-1受体激动剂是艾塞那肽。根据另一个实施方案，所述glp-1受体激动剂是利司那肽。
[0093]
在一个实施方案中，本发明涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.2至3.8，至少包含具有a21替换的速效胰岛素类似物和glp-1受体激动剂或glp-1类似物。根据一个实施方案，所述glp-1受体激动剂是艾塞那肽。根据另一个实施方案，所述glp-1受体激动剂是利司那肽。
[0094]
在一个实施方案中，本发明涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.3至3.7，至少包含具有a21替换的速效胰岛素类似物和glp-1受体激动剂或glp-1类似物。根据一个实施方案，所述glp-1受体激动剂是艾塞那肽。根据另一个实施方案，所述glp-1受体激动剂是利司那肽。
[0095]
在一个实施方案中，本发明涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.5，至少包含具有a21替换的速效胰岛素类似物和glp-1受体激动剂或glp-1类似物。根据一个实施方案，所述glp-1受体激动剂是艾塞那肽。根据另一个实施方案，所述glp-1受体激动剂是利司那肽；
[0096]
在一个实施方案中，本发明涉及可注射水溶液形式的药物组合物，其ph为3.4，至少包含具有a21替换的速效胰岛素类似物和glp-1受体激动剂或glp-1类似物。根据一个实施方案，所述glp-1受体激动剂是艾塞那肽。根据另一个实施方案，所述glp-1受体激动剂是利司那肽；
[0097]
分别在申请us2004/0023871和wo0104156中描述的艾塞那肽和利司那肽通常被认为是glp-1受体激动剂。在一个实施方案中，具有餐时作用的胰高血糖素抑制剂是普兰林肽
[0098]
在一个实施方案中，glp-1、glp-1类似物或glp-1 ra被称为“短效”或“餐时”。“短效”或“餐时”应理解为意指在人中皮下注射之后表观消除半衰期小于8小时、特别是小于5小时、优选小于4小时、或者小于3小时的glp-1、glp-1类似物或glp-1 ra，例如艾塞那肽或利司那肽。
[0099]
在一个实施方案中，glp-1、glp-1类似物或glp-1 ra选自艾塞那肽利
司那肽其类似物或衍生物及其可药用盐。
[0100]
在一个实施方案中，glp-1、glp-1类似物或glp-1 ra是艾塞那肽或其类似物或衍生物及其可药用盐。
[0101]
在一个实施方案中，glp-1、glp-1类似物或glp-1 ra是利司那肽或其类似物或衍生物及其可药用盐。
[0102]
在一个实施方案中，普兰林肽的浓度为0.32至5mg/ml。
[0103]
在一个实施方案中，普兰林肽的浓度为0.5至1.5mg/ml。
[0104]
在一个实施方案中，普兰林肽的浓度为0.6至1.2mg/ml。
[0105]
在一个实施方案中，普兰林肽的浓度为0.6至1mg/ml。
[0106]
在一个实施方案中，普兰林肽的浓度为1.0mg/ml。
[0107]
在一个实施方案中，普兰林肽的浓度为0.6mg/ml。
[0108]
在一个实施方案中，艾塞那肽的浓度为30至2000μg/ml。
[0109]
在一个实施方案中，艾塞那肽的浓度为50至1500μg/ml。
[0110]
在一个实施方案中，艾塞那肽的浓度为10至1000μg/ml。
[0111]
在一个实施方案中，艾塞那肽的浓度为100至1000μg/ml。
[0112]
在一个实施方案中，艾塞那肽的浓度为40至150μg/ml。
[0113]
在一个实施方案中，艾塞那肽的浓度为40至80μg/ml。
[0114]
在一个实施方案中，艾塞那肽的浓度为50μg/ml。
[0115]
在一个实施方案中，利司那肽的浓度为80至3000μg/ml。
[0116]
在一个实施方案中，利司那肽的浓度为100至2000μg/ml。
[0117]
在一个实施方案中，利司那肽的浓度为150至1500μg/ml。
[0118]
在一个实施方案中，利司那肽的浓度为20至1000μg/ml。
[0119]
在一个实施方案中，利司那肽的浓度为80至160μg/ml。
[0120]
在一个实施方案中，利司那肽的浓度为100μg/ml。
[0121]
在一个实施方案中，对于100u/ml的具有a21替换的速效胰岛素，普兰林肽的浓度为0.4至3mg/ml。
[0122]
在一个实施方案中，对于100u/ml的具有a21替换的速效胰岛素，普兰林肽的浓度为0.5至1.5mg/ml。
[0123]
在一个实施方案中，对于100u/ml的具有a21替换的速效胰岛素，普兰林肽的浓度为0.6至1.2mg/ml。
[0124]
在一个实施方案中，对于100u/ml的具有a21替换的速效胰岛素，普兰林肽的浓度为0.6至1mg/ml。
[0125]
在一个实施方案中，对于100u/ml的具有a21替换的速效胰岛素，普兰林肽的浓度为1.0mg/ml。
[0126]
在一个实施方案中，对于100u/ml的具有a21替换的速效胰岛素，普兰林肽的浓度为0.6mg/ml。
[0127]
在一个实施方案中，对于100u/ml的具有a21替换的速效胰岛素，艾塞那肽的浓度为10至1000μg/ml。
[0128]
在一个实施方案中，对于100u/ml的具有a21替换的速效胰岛素，艾塞那肽的浓度为30至1000μg/ml。
[0129]
在一个实施方案中，对于100u/ml的具有a21替换的速效胰岛素，艾塞那肽的浓度为50至750μg/ml。
[0130]
在一个实施方案中，对于100u/ml的具有a21替换的速效胰岛素，艾塞那肽的浓度为50至500μg/ml。
[0131]
在一个实施方案中，对于100u/ml的具有a21替换的速效胰岛素，艾塞那肽的浓度为40至150μg/ml。
[0132]
在一个实施方案中，对于100u/ml的具有a21替换的速效胰岛素，艾塞那肽的浓度为40至80μg/ml。
[0133]
在一个实施方案中，对于100u/ml的具有a21替换的速效胰岛素，艾塞那肽的浓度为50μg/ml。
[0134]
在一个实施方案中，对于100u/ml的具有a21替换的速效胰岛素，利司那肽的浓度为80至1500μg/ml。
[0135]
在一个实施方案中，对于100u/ml的具有a21替换的速效胰岛素，利司那肽的浓度为100至1400μg/ml。
[0136]
在一个实施方案中，对于100u/ml的具有a21替换的速效胰岛素，利司那肽的浓度为120至1200μg/ml。
[0137]
在一个实施方案中，对于100u/ml的具有a21替换的速效胰岛素，利司那肽的浓度为20至1000μg/ml。
[0138]
在一个实施方案中，对于100u/ml的具有a21替换的速效胰岛素，利司那肽的浓度为80至160μg/ml。
[0139]
在一个实施方案中，对于100u/ml的具有a21替换的速效胰岛素，利司那肽的浓度为100μg/ml。
[0140]
在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物还包含缓冲剂。
[0141]
在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物包含选自乙酸钠缓冲剂和tris的缓冲剂。
[0142]
在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物还包含防腐剂。
[0143]
在一个实施方案中，防腐剂选自单独的或混合物中的间甲酚和苯酚。
[0144]
在一个实施方案中，防腐剂是间甲酚。
[0145]
在一个实施方案中，间甲酚的浓度为10至50mm。
[0146]
在一个实施方案中，间甲酚的浓度为10至40mm
[0147]
在一个实施方案中，防腐剂是苯酚。
[0148]
在一个实施方案中，苯酚的浓度为10至60mm。
[0149]
在一个实施方案中，苯酚的浓度为20至50mm。
[0150]
在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物包含表面活性剂。
[0151]
在一个实施方案中，表面活性剂选自泊洛沙姆188、20(也称为聚山梨酯20)和80(也称为聚山梨酯80)。
[0152]
在一个实施方案中，20的浓度为5至50μg/ml而不等。
[0153]
在一个实施方案中，20的浓度为5至25μg/ml而不等。
[0154]
在一个实施方案中，20的浓度为10μg/ml。
[0155]
在一个实施方案中，20的浓度为10μm。
[0156]
根据本发明的药物组合物还可包含添加剂，例如张度剂。
[0157]
在一个实施方案中，张度剂选自甘油、氯化钠、甘露醇和甘氨酸。
[0158]
在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物还包含抗氧化剂。
[0159]
在一个实施方案中，抗氧化剂是甲硫氨酸。
[0160]
在一个实施方案中，药物组合物还包含至少一种吸收促进剂，其选自单独或组合的吸收促进剂、扩散促进剂或血管扩张剂。
[0161]
吸收促进剂包括但不限于单独或组合的：表面活性剂，例如胆盐、脂肪酸盐或磷脂；烟碱试剂，例如烟酰胺(nicotinamide)、烟酸(nicotinic acid)、烟酸(niacin)、烟酰胺(niacin amide)、维生素b3及其盐；胰腺胰蛋白酶抑制剂；镁盐；多不饱和脂肪酸；磷脂酰胆碱二癸酰基；氨基聚羧酸盐；托美汀(tolmetin)；癸酸钠；水杨酸；油酸；亚油酸；二十碳五烯酸(epa)；二十二碳六烯酸(dha)；苯甲酸；一氧化氮供体，例如3-(2-羟基-1-(1-甲基乙基)-2-亚硝基肼基)-1-丙胺、n-乙基-2-(1-乙基羟基-2-1-亚硝基肼基)乙胺、或s-亚硝基-n-乙酰青霉胺；胆汁酸，胆汁酸结合形式的甘氨酸；抗坏血酸钠、抗坏血酸钾；水杨酸钠、水杨酸钾、乙酰水杨酸、水杨酰水杨酸、乙酰水杨酸铝、水杨酸胆碱、水杨酰胺、赖氨酸乙酰水杨酸；依沙酰胺；二氟尼柳；乙水杨胺；edta。
[0162]
在一个实施方案中，药物组合物还包含至少一种扩散促进剂。扩散促进剂的实例包括但不限于糖胺聚糖酶，例如透明质酸酶。
[0163]
在一个实施方案中，药物组合物还包含至少一种血管扩张剂。
[0164]
在一个实施方案中，药物组合物还包含至少一种通过阻断钙离子通道引起超极化的血管扩张剂。
[0165]
在一个实施方案中，通过阻断钙离子通道引起超极化的血管扩张剂是腺苷、从内皮获得的超极化剂、5型磷酸二酯酶(pde5)抑制剂、钾通道开放剂或这些药剂的任意组合。
[0166]
在一个实施方案中，药物组合物还包含至少一种camp介导的血管扩张剂。
[0167]
在一个实施方案中，药物组合物还包含至少一种cgmp介导的血管扩张剂。
[0168]
在一个实施方案中，药物组合物还包含至少一种血管扩张剂，其选自通过阻断钙离子通道引起超极化而反应的血管扩张剂、camp介导的血管扩张剂和cgmp介导的血管扩张剂。
[0169]
至少一种血管扩张剂选自单独或组合的：一氧化氮供体，例如硝化甘油、二硝酸异山梨酯、单硝酸异山梨酯、硝酸戊酯、赤藓醇、四硝酸酯和硝普盐(nitroprusside)；前列环素及其类似物，例如依前列醇钠、伊洛前列素、依前列醇、曲前列环素或赛乐西帕；组胺、2-甲基组胺、4-甲基组胺；2-(2-吡啶基)乙胺、2-(2-噻唑基)乙胺；罂粟碱、盐酸罂粟碱；米诺地尔；双嘧达莫；肼屈嗪；腺苷、腺苷三磷酸；尿苷三磷酸；gplc；l-肉碱；精氨酸；前列腺素d2；钾盐；以及在一些情况下，α1和α2受体拮抗剂，例如哌唑嗪、酚苄明、苯妥拉明、双苄胺、盐酸莫西赛利和妥拉唑啉)；倍他唑、达美酮(dimaprit)；β2受体激动剂，例如异丙肾上腺素、多巴酚丁胺、沙丁胺醇、特布他林、氨茶碱、茶碱、咖啡因；前列地尔、安贝生坦；卡麦角
林；二氮嗪；甲磺酸双肼屈嗪；盐酸地尔硫依洛昔酮；盐酸氟桂利嗪；银杏叶提取物(ginkgo biloba extract)；左西孟旦；吗多明；尼可地尔、己酮可可碱、萘呋胺的酸性草酸盐；苯盐酸酚苄明；吡贝地尔碱；甲磺酸吡贝地尔；瑞加德松一水合物；利奥西呱(riociguat)；枸橼酸西地那非、他达拉非、盐酸伐地那非三水合物；盐酸曲美他嗪；三硝酸甘油酯(trinitrine)；盐酸维拉帕米；内皮素受体拮抗剂，例如阿伐那非(avanafil)和波生坦一水合物(bosentran monohydrate)；以及钙通道阻断剂，例如氨氯地平、阿雷地平、阿折地平、巴尼地平、贝尼地平、西尼地平、氯维地平、伊拉地平、依福地平、非洛地平、拉西地平、乐卡地平、马尼地平、尼卡地平、硝苯地平、尼伐地平、尼莫地平、尼索地平、尼群地平、普拉地平。
[0170]
根据一个实施方案，血管扩张剂为曲前列环素。
[0171]
在一个实施方案中，组合物包含烟碱化合物或其衍生物之一。
[0172]
在一个实施方案中，组合物包含烟酰胺。
[0173]
在一个实施方案中，烟酰胺的浓度为10至210mm。
[0174]
在一个实施方案中，烟酰胺的浓度为10至160mm。
[0175]
在一个实施方案中，烟酰胺的浓度为20至150mm。
[0176]
在一个实施方案中，烟酰胺的浓度为40至120mm。
[0177]
在一个实施方案中，烟酰胺的浓度为60至100mm。
[0178]
在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物包含3.5mg/ml至10.5mg/ml的门冬胰岛素a21g、0.4mg/ml至3mg/ml的普兰林肽、25mm的间甲酚、184mm的甘油，ph为3.5。该组合物还可以包含聚山梨酯20，特别是8至10μm，并且最特别是8μm。该组合物还可以包含烟酰胺，特别是10至210mm。
[0179]
在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物包含3.5mg/ml的门冬胰岛素a21g、0.6mg/ml的普兰林肽、25mm的间甲酚、184mm的甘油，ph为3.5。该组合物还可以包含聚山梨酯20，特别是8μm。该组合物还可以包含烟酰胺，特别是10至210mm。
[0180]
在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物包含3.5mg/ml至10.5mg/ml的门冬胰岛素a21g、0.4mg/ml至3mg/ml的普兰林肽、25mm的间甲酚、184mm的甘油，ph为3.4。该组合物还可以包含聚山梨酯20，特别是8至10μm，并且最特别是8μm。该组合物还可以包含烟酰胺，特别是10至210mm。
[0181]
在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物包含3.5mg/ml的门冬胰岛素a21g、0.6mg/ml的普兰林肽、25mm的间甲酚、184mm的甘油，ph为3.4。该组合物还可以包含聚山梨酯20，特别是8μm。该组合物还可以包含烟酰胺，特别是10至210mm。
[0182]
根据本发明的药物组合物还可以包含符合药典(特别是ep和/或us药典)并且与以通常浓度使用的胰岛素相容的赋形剂。
[0183]
根据一个实施方案，药物组合物可以由固体或冻干形式重构。
[0184]
考虑的施用方法是静脉内、皮下、皮内或肌内途径。
[0185]
根据一个具体实施方案，施用方法是皮下途径。
[0186]
在一个实施方案中，药物组合物在进餐时以一次或数次推注施用。
[0187]
在一个实施方案中，药物组合物在进餐时以两次推注施用。
[0188]
在一个实施方案中，药物组合物在进餐时以三次推注施用。
[0189]“进餐时”意指进餐开始之前20分钟至进餐开始之后30分钟的时间。特别是从进餐开始之前10分钟至进餐开始之后30分钟。更特别是在进餐开始之前5分钟至进餐开始之后30分钟。甚至更特别是在进餐开始之前5分钟至进餐开始之后20分钟。
[0190]
在一个实施方案中，施用旨在用于糖尿病治疗方法的药物组合物以改善对餐后血糖的控制并降低普兰林肽的不良作用。
[0191]
在一个实施方案中，旨在用于糖尿病治疗方法的药物组合物使得能够降低由胰岛素诱导的摄食。
[0192]
还考虑了经皮、经口、经鼻、经阴道、经眼、口含、经肺的施用途径。
[0193]
本发明还涉及包含根据本发明的药物组合物的可植入或可运输泵。
[0194]
本发明还涉及旨在放置在可植入或可运输泵中的根据本发明的药物组合物的用途。
[0195]
本发明还涉及旨在放置在与闭环系统一起工作的泵中的根据本发明的药物组合物的用途。
[0196]
本发明还涉及旨在放置在贴片泵(patch pump)中的根据本发明的药物组合物的用途。
[0197]
本发明还涉及包含药物组合物的筒。
[0198]
本发明还涉及包含药物组合物的小瓶。
[0199]
根据本发明的药物组合物的制备具有以下优点：其可通过在水中简单溶解具有a21替换的速效胰岛素类似物和一种具有餐时作用的胰高血糖素抑制剂来实现。
[0200]
根据本发明的药物组合物的制备具有以下优点：其可通过简单溶解胰淀素类似物或胰淀素受体激动剂和具有a21替换的速效胰岛素类似物来实现。
[0201]
如果必要的话，在赋形剂(例如甘油、间甲酚和聚山梨酯20(20))方面调整药物组合物的组成。该添加可通过添加所述赋形剂的浓溶液来进行。
[0202]
具有a21替换的速效胰岛素类似物可通过重组dna技术方法使用细菌(例如大肠杆菌(escherichia coli))和酵母(例如酿酒酵母(saccharomyces cerevisiae))来获得(参见，例如，g.walsh appl.microbiol.biotechnol.2005,67,151-159和kohn et al.,in peptides 2007,28,935-948)。
[0203]
通常来说，产生胰岛素原，然后将其用酶(例如胰蛋白酶和羧肽酶b)消化以获得期望的序列。速效胰岛素也可通过化学合成来产生(参见例如liu et al.,in org.lett.2013,15,960-963)。
[0204]
根据本发明的可注射水溶液形式的药物组合物具有物理和化学稳定性，使得能够开发在5℃下稳定至少一年或甚至2年并且在30℃下稳定至少2周的液体制剂。该稳定性根据ep和/或us药典定义。
[0205]
实施例1
[0206]
3.5的酸性ph的含有间甲酚(25mm)、甘油(184mm)和乙酸/乙酸钠缓冲剂(18mm)的包含门冬胰岛素a21g 100u/ml(3.5mg/ml)和普兰林肽0.6mg/ml的药物组合物的制备。
[0207]
将赋形剂(间甲酚、甘油)的浓溶液添加至门冬胰岛素a21g在乙酸/乙酸钠缓冲液中的浓溶液(ph 3.5)。将普兰林肽的浓溶液(ph 3.5下的10mg/ml)添加至该门冬胰岛素a21g和赋形剂的浓溶液，以获得预期的最终药物组合物。通过添加naoh的水溶液获得最终
的ph 3.5。所获得的溶液是澄清且均匀的；对其进行0.22μm过滤，并储存在玻璃筒中(每3ml筒1ml溶液)。该组合物详述于表1中。
[0208]
实施例2
[0209]
3.5的酸性ph的含有间甲酚(25mm)、甘油(184mm)、乙酸/乙酸钠缓冲剂(18mm)和tween 20(10μg/ml)的包含门冬胰岛素a21g100u/ml(3.5mg/ml)和普兰林肽0.6mg/ml的药物组合物的制备。
[0210]
将赋形剂(间甲酚、甘油)的浓溶液添加至门冬胰岛素a21g在乙酸/乙酸钠缓冲液中的浓溶液(ph 3.5)。将普兰林肽的浓溶液(ph 3.5下的10mg/ml)和tween 20的浓溶液添加至该赖脯胰岛素a21g和赋形剂的浓溶液，以获得预期的最终药物组合物。通过添加naoh的水溶液获得最终的ph 3.5。所获得的溶液是澄清且均匀的；对其进行0.22μm过滤，并储存在玻璃小瓶中(每2ml小瓶1.2ml溶液)。该组合物详述于表1中。
[0211]
实施例3
[0212]
3.4的酸性ph的包含门冬胰岛素a21g和普兰林肽或glp-1 ra的药物组合物的制备。
[0213]
任选地将赋形剂(间甲酚、甘油)的浓溶液添加至ph为2至3.5的门冬胰岛素a21g的浓溶液。将普兰林肽的浓溶液(ph 2至3.5下的10mg/ml)或glp-1 ra的浓溶液(5mg/ml)和任选地tween 20的浓溶液添加至该赖脯胰岛素a21g和赋形剂的浓溶液，以获得预期的最终药物组合物。通过添加naoh的水溶液获得最终的ph 3.4。所获得的溶液是澄清且均匀的；对每一种进行0.22μm过滤，并储存在玻璃筒中(每3ml筒1ml溶液)。该组合物详述于表1中。
[0214]
表1：酸性ph的包含门冬胰岛素a21g和胰高血糖素抑制剂的组合物
[0215]
[0216]
[0217][0218]
[0219]
[0220]
[0221][0222]
实施例4：猪中的药动学和药效学研究
[0223]
由单独的门冬胰岛素a21g(3.5mg/ml，相当于100u/ml的胰岛素)组成的组合物ca3-4或者组合物ca3-1(100u/ml)(与普兰林肽(0.6mg/ml)组合的组合物)在猪中的药动学和药效学研究。
[0224]
在实验开始之前，将称重为约50kg的在颈静脉中预先插入导管的家猪禁食2.5小时。在注射胰岛素之前的那个小时期间，抽取3个血液样品以确定葡萄糖和胰岛素的基线水平。
[0225]
借助于装配有31g针的胰岛素笔(novo,sanofi或eli lilly)，在动物的胁部皮下进行0.125u/kg胰岛素和0.75μg/kg普兰林肽的剂量的门冬胰岛素a21g的制剂(ca3-4)或与普兰林肽组合的门冬胰岛素a21g的制剂(ca3-1)的注射。
[0226]
为了确定血浆中的胰岛素和血液中的葡萄糖的浓度，在以下时间抽取血液样品：0、10、20、30、45、60、90、120、180和240分钟。每次抽取之后，用稀肝素溶液冲洗导管。
[0227]
门冬胰岛素溶液ca3-4和门冬胰岛素a21g与普兰林肽的溶液ca3-1在猪中的药动学结果
[0228]
基于血浆中经基线调整的胰岛素浓度评估制剂ca3-4和ca3-1的药动学参数。借助软件phoenix winnonlin(版本8，certara)进行标准的非房室分析。参数值(平均值
±
标准偏差)报告于表2中。
[0229]
表2：组合物ca3-4和ca3-1的胰岛素的药动学参数
[0230]
[0231][0232]
其中
[0233]-t
最大
＝观察到最大血浆浓度所必需的时间；
[0234]-auc
0至30分钟
＝0至注射之后30分钟血浆浓度对时间曲线下面积；
[0235]-auc
0至最后
＝0至注射之后最后可量化浓度之间的血浆浓度对时间曲线下面积。
[0236]
参数分析表明，与单独门冬胰岛素a21g(制剂ca3-4)相比，门冬胰岛素a21g与普兰林肽的组合(制剂ca3-1)导致胰岛素的吸收更快。与制剂ca3-4相比，制剂ca3-1导致达到血浆峰的时间(t
最大
)更早(约10分钟)，并且导致0至30分钟内的血浆胰岛素暴露分数(auc0至
30分钟
/auc
0至最后
)显著提高(约63％，p《0.05)。
[0237]
门冬胰岛素溶液ca3-4和门冬胰岛素a21g与普兰林肽的溶液ca3-1在猪中的药效学结果
[0238]
基于血液中经基线调整(相对于基线的％)的葡萄糖浓度评估制剂ca3-4和ca3-1的药效学参数。借助软件phoenix winnonlin(版本8，certara)进行标准的非房室分析。参数值(平均值
±
标准偏差)报告于表3中。
[0239]
表3：组合物ca3-4和ca3-1的葡萄糖的药效学参数
[0240][0241][0242]
其中
[0243]-t
分钟
＝观察到最小血液浓度所必需的时间。
[0244]-auc
0至60分钟
＝0至注射之后60分钟基线与血浆浓度对时间曲线之间的面积。
[0245]
参数分析表明，与单独门冬胰岛素a21g(制剂ca3-4)相比，门冬胰岛素a21g与普兰林肽的组合(制剂ca3-1)导致更快的降血糖作用。与制剂ca3-4相比，制剂ca3-1导致达到最大降血糖作用的时间(t
分钟
)更早(约8分钟)，并且导致早期降血糖作用(auc
0至60分钟
)提高(约32％)。