用于治疗急性呼吸窘迫综合征的微乳剂药物递送体系的制作方法

本发明涉及一种用于治疗或抑制病毒性急性呼吸窘迫综合征(ards)的药物或抗病毒化合物的聚合物-脂质微乳剂递送体系、一种用于生产微乳剂递送体系的方法以及用于治疗ards的微乳剂递送体系的应用方法。

背景技术：

1、2019新型冠状病毒(covid-19)已使整个全球共同体瘫痪，并威胁到所有人的健康和全球的经济稳定。它是一种由严重急性呼吸综合征冠状病毒2(sars-cov-2)引起的可致死的传染性疾病。

2、然而，sars-cov-2只是导致呼吸道疾病的一系列病原体中最新的一种，所述导致呼吸道疾病的一系列病原体包括其他严重急性呼吸综合征冠状病毒(sars-cov)例如中东呼吸综合征冠状病毒(mers-cov)和流感病毒。

3、全球许多机构都在对sars-cov-2疫苗的研发过程中，但研发疫苗是一个漫长的过程，成本高昂。

4、然而，有一些药物目前正在用于治疗其他综合征和感染，并已被证明在体外和体内对sars-cov-2有效或部分有效。这些药物包括瑞德西韦、洛匹那韦和恩曲他滨。然而，瑞德西韦和洛匹那韦具有高度疏水性，在极性介质中的溶解度非常差(分别为0.339mg/ml和0.00192mg/ml)。另一方面，恩曲他滨是一种酸性亲水性分子，这使得与这些药物的任何可能的共同递送方式复杂化。此外，脂肪似乎会干扰恩曲他滨的溶解，并且当在进食后服用时，在胃ph值降低的情况下，这可能进一步延迟口服配置药物的溶解，导致恩曲他宾的生物利用度降低。这些药物的半衰期很短，很快被代谢并被从体内迅速排泄出去，导致需要高剂量和高频率的给药(每日)。经认可的药物瑞德西韦也是价格昂贵且供应短缺，需要由经过培训的人员通过静脉内注射(iv注射)进行递送。

5、已知有一小部分用于肺部递送药物的体系。例如，wo 2016/030524描述了一种藻酸盐低聚物的可吸入粉末制剂，用于形成用于针对呼吸道病症的抗病毒药物的喷雾干燥可吸入制剂；cn111202722a公开了一种用于吸入的洛匹那韦干粉药物组合物；us2020/0179287a1描述了将含有抗菌药物或抗病毒药物(例如洛匹那韦)的阴离子溶液电喷雾到阳离子溶液中，然后冷冻干燥以产生可吸入剂量；us7,629,331公开了一种称为captisol的聚结β环糊精磺丁基醚钠盐产品，用于递送包含瑞德西韦的活性药物成分。

6、然而，这些体系使用粉末制剂，并且只能将一种药物掺入递送体系中。基于粉末的体系需要时间溶解成液体形式以用于液体施用，并降解包封基质以释放药物。可替代的，在将干粉递送体系引入呼吸道中的情况下，这些体系到达深肺(包括肺泡)的机会很低，因为它们类似于灰尘，因此会因呼吸道刺激而通过免疫反应被迅速清除。此外，这些递送体系在用所选药物制备和配制时也是复杂的，并且需要使用昂贵的设备。

7、一种不需要侵入式递送、易于使用且价格低廉的将可有效地治疗和抑制sars-cov-2的抗病毒药物递送至感染部位的安全、有效、靶向性的方法是非常有益的(例如通过吸入进行肺部递送)。特别地当要联合施用的药物是疏水性药物和亲水性药物的混合物时，如果此类递送体系能够同时共同递送多种药物，则将是有用的。此类递送体系还可能用于治疗其他呼吸道综合征和疾病的药物，其他呼吸道综合征和疾病包括由诸如流感病毒和其他sars-cov的病毒感染(包括mers)引起的那些呼吸道综合征和疾病。

8、氯喹和大麻二酚是已被认为可用于治疗或抑制ards的免疫调节药物。氯喹是一种抗疟疾的免疫调节化合物，已知用于破坏细胞内进程，例如限制膜结合细胞器的酸化，然后使环境碱化，这导致跨膜受体的功能和敏感性降低。大麻二酚用作竞争性结合受体和/或负变构调节剂，通过改变受体对某些配体或刺激物的亲和力来限制病毒与宿主细胞膜的融合。

9、抗病毒凝集素已被证明通过与病毒的表面蛋白上的富含甘露糖的聚糖结合从而抑制病毒与宿主细胞膜的融合来抑制多种包膜病毒，包括慢病毒，例如人类免疫缺陷病毒(hiv)、流感病毒和sars-cov。这些抗病毒凝集素包括格瑞弗森(grft)、蓝藻抗病毒蛋白-n(cv-n)和scytovirin(svn)，更优选地grft和cv-n。尽管有包括静脉内、动脉内、鞘内、脑池内、经颊、经直肠、经鼻、经肺、经皮、经阴道、经眼等的其他途径，但这些凝集素通常已开发用于通过以凝胶剂、乳膏剂、润滑剂或栓剂的制剂进行粘膜递送。

10、在病毒性ards的情况下，如果此类免疫调节化合物和融合抑制剂能够通过肺部施用被特异性地递送到感染的主要部位，则将是有用的。特别地，一种易于使用且价格低廉的将可有效地治疗和抑制sars-cov-2的此类免疫调节化合物递送至感染部位的安全、有效、靶向性的方法是非常有益的(例如通过吸入进行肺部递送)。特别地当要共同施用的药物是疏水性药物和亲水性药物的混合物时，如果此类递送体系能够同时共同递送一种或多种免疫调节化合物、融合抑制剂和/或抗病毒药物，则将是有用的。此类递送体系还可能用于治疗和抑制由诸如流感病毒和其他sars-cov的病毒感染(包括mers)引起的其他呼吸道综合征和疾病。

技术实现思路

1、根据本发明的第一方面，提供了一种用于治疗或抑制病毒性急性呼吸窘迫综合征(ards)的聚合物-脂质微乳剂药物递送体系，所述体系包含以下或由以下组成：

2、i.内部微乳剂基质，包含表面活性剂与溶解在极性非质子溶剂中的至少一种脂肪酸，或由表面活性剂与溶解在极性非质子溶剂中的至少一种脂肪酸组成；

3、ii.外壳，包含一种或多种亲水性聚合物或由一种或多种亲水性聚合物组成；和

4、iii.一种或多种药物，选自由以下药物组成的组：

5、a.抗病毒药物；

6、b.免疫调节化合物；和

7、c.抗病毒凝集素，

8、其中所述一种或多种药物中是疏水性药物的，该疏水性药物被包含在所述内部微乳剂基质中，而所述药物中是亲水性药物的，这些抗病毒药物被包含在所述外壳中。

9、所述一种或多种抗病毒药物可以选自疏水性抗病毒药物瑞德西韦和洛匹那韦，以及亲水性抗病毒药物恩曲他滨。

10、所述一种或多种疏水性免疫调节化合物可以是大麻二酚(cbd)，并且亲水性免疫调节化合物可以是氯喹或二磷酸氯喹。

11、所述一种或多种抗病毒凝集素可以选自亲水性抗病毒凝集素格瑞弗森(grft)、蓝藻抗病毒蛋白-n(cv-n)和scytovirin(svn)。优选地，所述抗病毒凝集素可以是grft和cv-n。

12、所述外壳特别地可以包含诸如聚乙烯醇(pva)和聚乙二醇(peg)(例如peg 4000)的亲水性聚合物的水性混合物的水溶液，或特别地可以由诸如聚乙烯醇(pva)和聚乙二醇(peg)(例如peg 4000)的亲水性聚合物的水性混合物的水溶液组成。

13、所述内部微乳剂基质还可以包含至少一种有机羧酸。所述至少一种有机羧酸可以是弱酸，包括批准用于人类消费的包括乙酸、乳酸、柠檬酸或磷酸的那些有机羧酸，优选地是乙酸。

14、此外，所述内部微乳剂基质可以包含至少一种共聚物、聚(乳酸-共-乙醇酸)或plga，或可替代地，任意适用于活性化合物或药物递送的生物相容的且可生物降解的聚合物，包括聚乳酸、聚乙醇酸或聚ε-己内酯。

15、优选地，所述至少一种脂肪酸包括硬脂酸、棕榈酸和月桂酸中的任意一种或多种，或由硬脂酸、棕榈酸和月桂酸中的任意一种或多种组成，优选硬脂酸。

16、所述极性非质子溶剂可以包括乙醇或丙酮，或者可以是乙醇和丙酮的混合物。优选地，所述极性非质子溶剂是丙酮。

17、所述表面活性剂可以包括亲水-亲脂平衡(hlb)值大于10的任意表面活性剂。优选地，所述表面活性剂是聚山梨醇酯80，也被称为吐温

18、微乳剂被定义为由表面活性剂与助表面活性剂的混合物稳定的、热力学稳定的油包水或水包油乳剂，所述微乳剂输入最小的机械能自发地形成。这与其他类型的乳剂(所谓的动态稳定乳剂，对于它们来说需要高剪切输入才会形成)形成对比。

19、由于分散相的液滴尺寸小低于约150nm，所以本发明的微乳剂通常是各向同性且半透明的。

20、所述病毒性ards可以是sars-cov(包括sars-cov-2)，mers-cov或流感。优选地，所述病毒性ards是sars-cov-2。

21、根据本发明的另一方面，提供了一种用于生产聚合物-脂质微乳剂药物递送体系的方法，所述聚合物-脂质微乳剂药物递送体系包含选自由抗病毒药物；免疫调节化合物；和抗病毒凝集素组成的组中的一种或多种药物；所述方法包括以下步骤或基本上由以下步骤组成：

22、a.i.将至少一种疏水性药物、溶解在极性非质子溶剂中的脂肪酸与表面活性剂混合以形成有机相；

23、a.ii.任选地加热所述有机相；

24、a.iii.将所述有机相分配到包含至少一种亲水性聚合物的水性混合物中以形成微乳剂；和

25、a.iv.在约0℃下、在磷酸盐缓冲液中稳定所述微乳剂以形成聚合物-脂质微乳剂，或

26、b.i.将溶解在极性非质子溶剂中的脂肪酸与表面活性剂混合以形成有机相；

27、b.ii.任选地加热所述有机相；

28、b.iii.将所述有机相分配到包含至少一种亲水性聚合物和至少一种疏水性药物的水性混合物中以形成微乳剂；和

29、b.iv.在约0℃下、在磷酸盐缓冲液中稳定所述微乳剂以形成所述聚合物-脂质微乳剂，或

30、c.i.将至少一种疏水性药物、溶解在极性非质子溶剂中的脂肪酸与表面活性剂混合以形成有机相；

31、c.ii.任选地加热所述有机相；

32、c.iii.将所述有机相分配到包含至少一种亲水性聚合物和至少一种疏水性药物的水性混合物中以形成微乳剂；和

33、c.iv.在约0℃至约10℃下、在磷酸盐缓冲液中稳定所述微乳剂形成所述聚合物-脂质微乳剂。

34、所述一种或多种抗病毒药物可以选自疏水性抗病毒药物瑞德西韦和洛匹那韦以及亲水性抗病毒药物恩曲他滨。

35、所述一种或多种疏水性免疫调节化合物可以是大麻二酚(cbd)，并且亲水性免疫调节化合物可以是氯喹或二磷酸氯喹。

36、所述一种或多种抗病毒凝集素可以选自亲水性抗病毒凝集素格瑞弗森(grft)、蓝藻抗病毒蛋白-n(cv-n)和scytovirin(svn)。优选地，所述抗病毒凝集素可以是grft和cv-n。

37、所述聚合物-脂质微乳剂递送体系可以是液体，并且可以被雾化用于通过吸入递送，包括用于肺部递送。

38、所述方法可以任选地还包括通过冷冻干燥或通过喷雾干燥来干燥所述经稳定的聚合物-脂质微乳剂以产生自由流动的聚合物-脂质微乳剂粉末的最后步骤。所述自由流动的聚合物-脂质微乳剂递送体系可以被配制用于口服或静脉内递送。

39、所述方法还可以包括将有机羧酸与所述有机相混合。

40、所述方法可以还包括将至少一种适用于活性化合物递送的生物相容的且可生物降解的聚合物或共聚物(聚(乳酸-共-乙醇酸)或plga、或聚乳酸、聚乙醇酸或聚ε-己内酯)与所述脂肪酸一起溶解在极性非质子溶剂中以形成有机相。

41、所述至少一种脂肪酸可以包括硬脂酸、棕榈酸和月桂酸中的任意一种或多种，或由硬脂酸、棕榈酸和月桂酸中的任意一种或多种组成，优选地是硬脂酸。

42、所述极性非质子溶剂可以包括乙醇或丙酮，或者可以是乙醇和丙酮的混合物。优选地，所述极性非质子溶剂是丙酮。

43、所述有机羧酸可以包括至少一种弱酸。例如，所述弱酸可以包括被批准用于人类消费的包括乙酸、乳酸、柠檬酸或磷酸的那些弱酸中任意一种或多种。优选地，所述弱酸是乙酸。

44、所述表面活性剂可以包括亲水-亲脂平衡(hlb)值大于10的任意表面活性剂。优选地，所述表面活性剂是聚山梨醇酯80，也被称为吐温

45、特别地，所述方法可以包括以下步骤或由以下步骤组成：

46、a.a)将至少一种脂肪酸溶解在极性非质子溶剂中以形成脂肪酸溶液；

47、a.b)将一种或多种疏水性药物溶解在所述脂肪酸溶液中；

48、a.c)滴加表面活性剂以形成有机相；

49、a.d)任选地加热所述有机相；

50、a.e)在搅拌的同时将所述有机相分配到包含至少一种亲水性聚合物和任选的一种或多种亲水性药物的水性混合物中，以形成微乳剂；和

51、a.f)在0℃下、在搅拌的同时通过加入磷酸盐缓冲液来稳定聚合物-脂质微乳剂，或

52、b.a)将至少一种脂肪酸溶解在极性非质子溶剂中以形成脂肪酸溶液；

53、b.b)任选地将一种或多种疏水性药物溶解在所述脂肪酸溶液中；

54、b.c)滴加表面活性剂以形成有机相；

55、b.d)任选地加热所述有机相；

56、b.e)在搅拌的同时将所述有机相分配到包含至少一种亲水性聚合物和一种或多种亲水性药物的水性混合物中，以形成微乳剂；和

57、b.f)在0℃下、在搅拌的同时通过加入磷酸盐缓冲液来稳定所述聚合物-脂质微乳剂，或

58、c.a)将至少一种脂肪酸溶解在极性非质子溶剂中以形成脂肪酸溶液；

59、c.b)将一种或多种疏水性药物溶解在所述脂肪酸溶液中；

60、c.c)滴加表面活性剂以形成有机相；

61、c.d)任选地加热所述有机相；

62、c.e)在搅拌的同时将所述有机相分配到包含至少一种亲水性聚合物和一种或多种亲水性药物的水性混合物中，以形成微乳剂；和

63、c.f)在0℃下、在搅拌的同时通过加入磷酸盐缓冲液来稳定所述聚合物-脂质微乳剂。

64、所述方法还可以包括通过冷冻干燥或通过喷雾干燥来干燥经稳定的聚合物-脂质微乳剂以产生自由流动的聚合物-脂质纳米复合物粉末的附加步骤。

65、所述方法还可以包括，在步骤a)中，将plga，或可替代地，将适用于活性化合物递送的任意生物相容的且可生物降解的聚合物与脂肪酸一起溶解在所述极性非质子溶剂中，所述生物相容的且可生物降解的聚合物包括聚乳酸、聚乙醇酸或聚乳酸ε-己内酯。

66、所述方法还可以包括在步骤c)中，滴加有机羧酸与表面活性剂。

67、所述方法还可以包括在步骤e)中，在搅拌的同时加热以形成所述微乳剂。所述加热步骤可以在约40℃至50℃下，优选地40℃进行。

68、所述磷酸盐缓冲液在0℃的ph可以为约7.2至约7.6，更优选地为约7.4。

69、可以通过以约1:1的比例将所述微乳剂添加到所述磷酸盐缓冲溶液中来进行对所述微乳剂的稳定。应当理解，包括药物负载、制剂的稳定性(包括在干燥过程期间)等的多种因素影响微乳剂与缓冲液的最佳比例，。

70、可以在液氮中在初始快速冷冻步骤之后进行所述冷冻干燥。

71、喷雾干燥可使用喷雾干燥器例如top bench buchi-b290进行。特别地，此类喷雾干燥可以在以下一组参数下进行：

72、·入口温度：约90至110℃

73、·出口温度：约60℃

74、·进料速率：2％(ml/min)

75、·雾化压力：6-7bar

76、·吸入真空度设置为100％。

77、应当理解，入口温度应当足够高，以在不降解制剂中的任何化合物的情况下蒸发极性(水)和非极性(有机)溶剂，并且应当理解，所提供的范围是本发明的一个实施方式，可以由本领域技术人员修改。

78、还应当理解，出口温度受装置所在实验室的室温影响，并且除了要求出口温度高于60℃从而获得干燥、自由流动的粉末以外，具体温度可以变化。出口温度同样受液体进料速率、入口温度和液滴与干燥热空气之间的热交换效率的控制。

79、根据本发明的另一方面，提供了一种用本发明的聚合物-脂质微乳剂递送体系治疗或抑制病毒性ards的方法，所述聚合物-脂质微乳剂递送体系包含选自由抗病毒药物；免疫调节化合物；和抗病毒凝集素组成的组中的一种或多种药物。

80、所述病毒性ards可以是sars-cov(包括sars-cov-2)和mers-cov或流感。优选地，所述病毒ards是sars-cov-2。

81、所述方法可以包括经由肺部施加本发明的聚合物-脂质微乳剂递送体系的液体制剂来进行递送。

82、所述方法可以包括通过口服或静脉内施加本发明的聚合物-脂质微乳剂递送体系的粉末制剂来进行递送。

83、所述方法可以包括经由肺部施加本发明的聚合物-脂质微乳剂递送体系的液体制剂和通过口服或静脉内施加本发明的聚合物-脂质微乳剂递送体系的粉末制剂来进行同步递送。

84、所述方法可以包括雾化所述液体聚合物-脂质微乳剂递送体系以通过吸入递送的步骤，所述递送包括肺部递送。