用同种异体间充质干细胞治疗阿尔茨海默病的制作方法

本技术涉及用于在有需要的受试者中治疗阿尔茨海默病的方法和组合物。一些实施方案涉及包含治疗有效量的同种异体间充质干细胞(msc)的组合物，其用于减轻阿尔茨海默病的症状，例如增加的全身炎症。其他实施方案涉及治疗方法，其中向患有阿尔茨海默病症状的受试者施用包含治疗有效量的msc的组合物。这些治疗的有效性是通过测量受试者在施用包含msc的组合物后特定生物标志物的浓度、检查他们的脑活动或形态的变化以及确定他们的认知功能是否在治疗后得到改善来评估的。

背景技术：

1、阿尔茨海默病(ad)涉及复杂的病理学，除了β-淀粉样蛋白沉积和神经原纤维缠结[1]之外，还包含多种机制。人们越来越认识到，促炎症状态会导致随后的痴呆[2-4]。在这方面，促炎细胞因子在淀粉样沉积物和神经原纤维缠结[5]附近非常丰富，全身炎症与β-淀粉样蛋白积累[4]之间存在关联。ad的进一步特征在于导致不良结局[6]的神经血管系统受损。血脑屏障(bbb)[7-10]受损会损害跨内皮的交换，导致aβp在脑中的清除效率低下和积累[11,12]。

2、由于ad进展的复杂性，使用生物标志物来预测ad的发作和进展仍然具有挑战性。尽管β-淀粉样蛋白沉积物和神经原纤维缠结的浓度可用于诊断或预测ad的发作，但有些人在尸检时显示出大量的淀粉样蛋白沉积物和神经原纤维缠结，这使他们有资格进行ad诊断，但他们从未表现出痴呆病史。目前批准的ad治疗(利斯的明、多奈哌齐、美金刚、加兰他敏、他克林)仅具有边际效益，主要是对症治疗；并且没有经过批准的疗法可以有效地阻止、逆转或预防ad。最初有希望的先导化合物的持续失败导致十多年来没有新的ad药物获得批准。最近的失败是抗淀粉样蛋白单克隆抗体索拉珠单抗(solanezumab)(ely lily)和阿杜那单抗(aducanumab)(biogen/eisai)，它们被发现对轻度或中度ad和轻度认知障碍(mci)无效。这些失败的一个共同主题是针对ad的单一病理特征。

3、同时解决ad的这些神经病理学特征可以提供治疗优势并产生新的治疗策略。药用信号传导细胞(msc，也称为间充质干细胞)是多能细胞(体外)，具有多效性作用机制(moa)，包括抗炎特性、改善血管功能的能力和促进内在组织修复和再生[13,14]。msc运输到炎症和损伤部位，因此可以靶向ad中的神经炎症部位。msc还可以通过旁分泌活动和异细胞偶联调节宿主干细胞生态位，以促进内在修复和再生[15]。最后，msc是免疫逃逸/免疫豁免性的，允许同种异体使用，并且在临床试验中具有可接受的安全性。由于其主要组织相容性复合体ii类(mhc-ii)分子的不可检测水平和低水平的mhc-i，这些免疫豁免/免疫逃逸特性使间充质干细胞有可能成为一种“现成的”疗法，易于被广大患者群体获得和使用。

4、有一些临床前数据支持msc在ad中的疗效。在动物模型中，msc穿过bbb，促进神经形成，抑制β-淀粉样蛋白沉积并促进清除，减少细胞凋亡，促进海马神经形成，改善树突形态，改善行为和空间记忆能力[18-20]。这些有益效果与炎症减少、aβ降解因子和aβ清除率增加、过度磷酸化tau蛋白减少以及替代激活的小胶质细胞标志物升高有关。这些益处的出现，至少部分是由于aβ诱导的msc释放趋化因子，这些趋化因子将替代性小胶质细胞募集到脑中以减少aβ沉积[21]。据报道，msc在aβ积累之前对年轻ad模型小鼠有效，导致脑aβ沉积显著减少，突触前蛋白[22]表达显著增加。令人印象深刻的是，这些效果持续了至少2个月，表明msc可能作为前驱ad的介入治疗剂有效。

5、因此，本技术不仅寻求提供治疗ad的方法，其中所述方法包括使用含有msc的组合物，而且本技术还寻求提供能够准确测量msc的潜在安全性并评估其在缓解有需要的受试者的ad症状中的功效的方法。

技术实现思路

1、本技术的一个目的是提供治疗或缓解ad的方法，其包括向有需要的受试者施用治疗量的同种异体msc以减轻ad症状和/或治疗ad的进展。本技术的另一个目的是提供新的生物标志物用于诊断和评估ad的进展以及治疗方法的有效性。这些生物标志物可能是患者脑区域(例如杏仁核、皮质核、海马、海马亚区和/或皮质杏仁核过渡区)大小的变化。

2、在一些实施方案中，用于诊断和评估ad进展的新生物标志物可以是细胞因子浓度的变化，其中细胞因子可以是il-4、il-6、il-8、il-10、il-12p70、il-17、sil-2rα或其组合。在优选的实施方案中，在对患有ad症状的受试者施用同种异体msc后，所述受试者的血清、血浆、脑脊液或血液中细胞因子的浓度增加。细胞因子浓度增加的范围可以从0％到10％、0.5％到10％、1.0％到10％、3％到10％、5％到10％、7％到10％，大于0％到小于或等于10％、10％至50％、20％至50％、30％至50％或大于50％。在优选的实施方案中，细胞因子浓度增加至稳定的浓度水平，其中所述浓度一旦达到并维持不同于向有需要的受试者施用msc之前的浓度水平的浓度水平，则不会下降超过0％至10％、0％至5％或0％至1％。

3、在其他实施方案中，用于诊断和评估ad进展的新生物标志物可以是神经元相关分子或肽浓度的变化，其中神经元信号分子或肽可以是tau、磷酸-tau、aβ-38、aβ-40、aβ-42、nfl或其组合。在优选的实施方案中，在对患有ad症状的受试者施用同种异体msc后，所述受试者的血清、血浆或血液中aβ-38、aβ-40或aβ-42的浓度增加。aβ-38、aβ-40或aβ-42的浓度增加的范围可以从0％到10％、0.5％到10％、1.0％到10％、3％到10％、5％到10％、7％到10％，大于0％到小于或等于10％、10％至50％、20％至50％、30％至50％或大于50％。在优选的实施方案中，将aβ-38、aβ-40或aβ-42浓度增加至稳定的浓度水平，其中所述浓度一旦达到并维持不同于向有需要的受试者施用msc之前的浓度水平的浓度水平，则不会下降超过0％至10％、0％至5％或0％至1％。

4、在其他实施方案中，在对患有ad症状的受试者施用同种异体msc后，所述受试者的血清、血浆、脑脊液或血液中tau、磷酸-tau或nfl的浓度降低。tau、磷酸-tau或nfl浓度降低的范围可以从0％到10％、0.5％到10％、1.0％到10％、3％到10％、5％到10％、7％到10％，大于0％到小于或等于10％、10％至50％、20％至50％、30％至50％或大于50％。在优选的实施方案中，tau、磷酸-tau或nfl浓度降低至稳定的浓度水平，其中所述浓度一旦达到并维持不同于向有需要的受试者施用msc之前的浓度水平的浓度水平，则不会增加超过0％至10％、0％至5％或0％至1％。

5、在其他实施方案中，用于诊断和评估ad进展的新生物标志物可以是炎症信号传导分子浓度的变化，其中炎症信号传导分子可以是pro-bnp、tnf-α或其组合。在优选的实施方案中，在对患有ad症状的受试者施用同种异体msc后，所述受试者的血清、血浆、脑脊液或血液中tnf-α或pro-bnp的浓度降低。tnf-α或pro-bnp浓度降低的范围可以从0％到10％、0.5％到10％、1.0％到10％、3％到10％、5％到10％、7％到10％，大于0％到小于或等于10％、10％至50％、20％至50％、30％至50％或大于50％。在优选的实施方案中，tnf-α或pro-bnp浓度降低至稳定的浓度水平，其中所述浓度一旦达到并维持不同于向有需要的受试者施用msc之前的浓度水平的浓度水平，则不会增加超过0％至10％、0％至5％或0％至1％。

6、在一些实施方案中，用于诊断和评估ad进展的新生物标志物可以是vegf浓度和其他血管相关生物标志物的变化。在优选的实施方案中，在对患有ad症状的受试者施用同种异体msc后，所述受试者的血清、血浆、脑脊液或血液中vegf的浓度增加。vegf浓度增加的范围可以从0％到10％、0.5％到10％、1.0％到10％、3％到10％、5％到10％、7％到10％，大于0％到小于或等于10％、10％至50％、20％至50％、30％至50％或大于50％。在优选的实施方案中，vegf浓度增加至稳定的浓度水平，其中所述浓度一旦达到并维持不同于向有需要的受试者施用msc之前的浓度水平的浓度水平，则不会下降超过0％至10％、0％至5％或0％至1％。

7、同种异体msc可以是lomecel-btm细胞，它是同种异体人间充质干细胞的longeveron制剂。有用干细胞(包括lomecel-btm品牌间充质细胞)的进一步用途和制备可在以下美国专利申请公开中找到，所有这些均通过引用并入本文：us20190038742a1；us20190290698a1；和us20200129558a1。