用于治疗弥漫性大B细胞淋巴瘤的联合疗法中的针对CD3和CD20的双特异性抗体的制作方法

本发明涉及靶向cd3和cd20两者的双特异性抗体，以及此类抗体联合标准护理r-chop(利妥昔单抗(rituximab)、环磷酰胺(cyclophosphamide)、多柔比星(doxorubicin)、长春新碱(vincristine)、泼尼松龙(prednisolone))方案用于治疗弥漫性大b细胞淋巴瘤(dlbcl)例如先前未治疗的高风险dlbcl的用途。还提供了有利的治疗方案。

背景技术：

1、dlbcl是最常见的非霍奇金淋巴瘤(nhl)，并且标准一线疗法是r-chop。对于新诊断dlbcl的总体群体，这种组合的治愈率在60％至70％之间(sehn等人，blood 2007；109:1867-61)。试图改善一线疗法的结果，包括加强剂量和添加其他药剂来强化治疗该方案，未能提供足够的证据来改变标准护理。

2、在国际预后指数(international prognostic index，ipi)或修订的ipi(r-ipi)中包括影响一线治疗的cr率、疾病复发和os的风险因素：年龄>60岁，ecog>1或kps<60，ldh>uln；结外疾病>1(2或以上)，以及3或4期疾病(project等人，n engl j med 1993；329:987-994；sehn等人，同上)。尽管良好风险组(1-2个ipi因素)中的患者在标准一线r-chop后具有80％的4年pfs，45％的不良风险(高风险)组(3-5个ipi因素)中的患者仅实现55％的4年pfs和os(sehn等人，同上)。

3、鉴于较差风险的受试者对目前可用治疗的功效和长期响应有限，需要新的和有效的治疗。

技术实现思路

0、发明概述

1、本文提供了通过施用与cd3和cd20结合的双特异性抗体联合标准护理r-chop方案，特别是有利的临床治疗方案，治疗患有dlbcl，例如先前未治疗的dlbcl(例如，具有高风险特征(例如，ipi或r-ipi≥3)的dlbcl)的人受试者的方法。

2、在一个方面，本文提供了治疗人受试者的弥漫性大b细胞淋巴瘤(dlbcl)的方法，该方法包括向受试者施用艾可瑞妥单抗(epcoritamab)与r-chop的组合，例如，该方法包括向受试者施用有效量的(a)利妥昔单抗、(b)环磷酰胺、(c)多柔比星、(d)长春新碱、(e)泼尼松，和(f)艾可瑞妥单抗。

3、在一个方面，本文提供了治疗人受试者的弥漫性大b细胞淋巴瘤(dlbcl)的方法，该方法包括向受试者施用双特异性抗体和有效量的(a)利妥昔单抗、(b)环磷酰胺、(c)多柔比星、(d)长春新碱、(e)泼尼松，其中该双特异性抗体包含：

4、(i)包含第一抗原结合区的第一结合臂，该第一抗原结合区与人cd3ε(epsilon)结合并包含可变重链(vh)区和可变轻链(vl)区，其中vh区包含seq id no:6的vh区序列中的cdr1、cdr2和cdr3序列，并且vl区包含seq id no:7的vl区序列中的cdr1、cdr2和cdr3序列；和

5、(ii)包含第二抗原结合区的第二结合臂，该第二抗原结合区与人cd20结合并包含vh区和vl区，其中vh区包含seq id no:13的vh区序列中的cdr1、cdr2和cdr3序列，并且vl区包含seq id no:14的vl区序列中的cdr1、cdr2和cdr3序列；

6、其中双特异性抗体以24mg或48mg的剂量施用，并且其中利妥昔单抗、环磷酰胺、多柔比星、长春新碱、泼尼松和双特异性抗体以21天周期施用。

7、在一些实施方案中，双特异性抗体以24mg的剂量(或约24mg的剂量)施用。在一些实施方案中，双特异性抗体以48mg的剂量(或约48mg的剂量)施用。

8、在一个实施方案中，双特异性抗体以24mg或48mg的剂量每周施用一次(每周施用/剂量)，例如，持续三又三分之一个21天周期(即第一周期的第15天和第2至第4周期的第1、8和15天)。在一些实施方案中，双特异性抗体在每周施用后每三周施用一次，例如，持续两个或四个21天周期。在一些实施方案中，双特异性抗体在每三周施用一次之后以28天周期每四周施用一次，例如，持续从r-chop开始起(即，从第1周期起)长达一年的用所述双特异性抗体治疗的总持续时间。在进一步的实施方案中，在施用24mg或48mg的首次每周剂量之前两周施用引发剂量(例如，0.16mg或约0.16mg)的双特异性抗体。在一些实施方案中，在施用引发剂量之后且在施用24mg或48mg的每周剂量之前，施用中间剂量(例如0.8mg或约0.8mg)的双特异性抗体。在一些实施方案中，引发剂量在中间剂量前一周施用，并且中间剂量在24mg或48mg的首次每周剂量前一周施用。

9、在一些实施方案中，利妥昔单抗以21天周期每三周施用一次，例如，持续六个或八个21天周期。在一些实施方案中，利妥昔单抗以375mg/m2的剂量施用。

10、在一些实施方案中，环磷酰胺以21天周期每三周施用一次，例如，持续六个或八个21天周期。在一些实施方案中，环磷酰胺以750mg/m2的剂量施用。

11、在一些实施方案中，多柔比星以21天周期每三周施用一次，例如，持续六个或八个21天周期。在一些实施方案中，多柔比星以50mg/m2的剂量施用。

12、在一些实施方案中，长春新碱以21天周期每三周施用一次，例如，持续六个或八个21天周期。在一些实施方案中，长春新碱以1.4mg/m2的剂量施用。

13、在一些实施方案中，泼尼松从21天周期的第1天到第5天每天施用一次，例如，持续六个或八个21天周期。在一些实施方案中，泼尼松以100mg/天的剂量施用。

14、在一些实施方案中，利妥昔单抗、环磷酰胺、多柔比星、长春新碱、泼尼松和双特异性抗体在同一天(例如，在第1至第6周期的第1天或第1至第8周期的第1天)施用，例如，如表2所示。

15、在一些实施方案中，施用以21天周期进行，其中

16、(a)双特异性抗体如下施用：

17、(i)在第1周期中，在第1天施用0.16mg的引发剂量，在第8天施用0.8mg的中间剂量，并且在第15天施用24mg的剂量；

18、(ii)在第2至第4周期中，在第1、8和15天施用24mg的剂量；

19、(iii)在第5和第6周期中，在第1天施用24mg的剂量；

20、(b)利妥昔单抗、环磷酰胺、多柔比星和长春新碱在第1至第6周期的第1天施用；以及

21、(c)泼尼松在第1至第6周期的第1至第5天施用。

22、在一些实施方案中，施用以21天周期进行，其中

23、(a)双特异性抗体如下施用：

24、(i)在第1周期中，在第1天施用0.16mg的引发剂量，在第8天施用0.8mg的中间剂量，并且在第15天施用48mg的剂量；

25、(ii)在第2至第4周期中，在第1、8和15天施用48mg的剂量；

26、(iii)在第5和第6周期中，在第1天施用48mg的剂量；

27、(b)利妥昔单抗、环磷酰胺、多柔比星和长春新碱在第1至第6周期的第1天施用；以及

28、(c)泼尼松在第1至第6周期的第1至第5天施用。

29、在一个实施方案中，双特异性抗体从第7周期起以28天周期每四周施用一次，其中双特异性抗体在每个周期的第1天施用。

30、在一些实施方案中，施用以21天周期进行，其中

31、(a)双特异性抗体如下施用：

32、(i)在第1周期中，在第1天施用0.16mg的引发剂量，在第8天施用0.8mg的中间剂量，并且在第15天施用24mg的剂量；

33、(ii)在第2至第4周期中，在第1、8和15天施用24mg的剂量；

34、(iii)在第5至第8周期中，在第1天施用24mg的剂量；

35、(b)利妥昔单抗、环磷酰胺、多柔比星和长春新碱在第1至第8周期的第1天施用；以及

36、(c)泼尼松在第1至第8周期的第1至第5天施用。

37、在一些实施方案中，施用以21天周期进行，其中

38、(a)双特异性抗体如下施用：

39、(i)在第1周期中，在第1天施用0.16mg的引发剂量，在第8天施用0.8mg的中间剂量，并且在第15天施用48mg的剂量；

40、(ii)在第2至第4周期中，在第1、8和15天施用48mg的剂量；

41、(iii)在第5至第8周期中，在第1天施用48mg的剂量；

42、(b)利妥昔单抗、环磷酰胺、多柔比星和长春新碱在第1至第8周期的第1天施用；以及

43、(c)泼尼松在第1至第8周期的第1至第5天施用。

44、在一个实施方案中，双特异性抗体从第9周期起以28天周期每四周施用一次，其中双特异性抗体在每个周期的第1天施用。

45、在一些实施方案中，双特异性抗体经皮下施用。在一些实施方案中，利妥昔单抗经静脉内施用。在一些实施方案中，环磷酰胺经静脉内施用。在进一步的实施方案中，多柔比星经静脉内施用。在又进一步的实施方案中，长春新碱经静脉内施用。在一些实施方案中，泼尼松经静脉内或口服施用。

46、在一些实施方案中，双特异性抗体、利妥昔单抗、环磷酰胺、多柔比星和长春新碱序贯施用。例如，如果在同一天施用，第一施用泼尼松，第二施用利妥昔单抗，第三施用环磷酰胺、第四施用多柔比星、第五施用长春新碱，并且最后施用双特异抗体。

47、在一些实施方案中，dlbcl是双打击(double-hit)或三打击(triple-hit)dlbcl。在一些实施方案中，dlbcl是3b级滤泡性淋巴瘤。在一些实施方案中，受试者具有≥3的国际预后指数(ipi)评分或修订的ipi评分。

48、在一些实施方案中，受试者用针对细胞因子释放综合征(crs)的预防来治疗。在一些实施方案中，预防包括在例如与双特异性抗体的同一天施用皮质类固醇(例如泼尼松，剂量为例如100mg/天或其当量，包括口服剂量)。在一些实施方案中，在施用双特异性抗体后的第二、第三和第四天进一步施用皮质类固醇。在一些实施方案中，对于涉及在每个21天周期的第1至第5天施用作为r-chop方案的一部分的泼尼松的本文所述的方法，不需要针对crs的额外预防，因为r-chop的泼尼松组分已经充当crs预防的皮质类固醇组分(即不存在双重给药的皮质类固醇)。然而，在此类实施方案中，在施用双特异性抗体但不施用r-chop的那些天，可以施用皮质类固醇诸如泼尼松或其等效物用于crs预防(即，在第一21天周期的第8至第11天和第15中idi至第18天施用泼尼松或其等效物，并且如果例如在先前周期结束时仍然crs>1级，任选地在第二21天周期(或以后的周期)的第8至第11天和第15至第18天施用泼尼松或其等效物)。

49、在一些实施方案中，如果在施用双特异性抗体之前超过120分钟施用来自r-chop的泼尼松，那么在施用双特异性抗体前约30-120分钟向受试者施用泼尼松或等效物作为crs预防。

50、在一些实施方案中，向受试者施用前驱用药(premedication)，诸如抗组胺药(例如苯海拉明(diphenhydramine)，静脉内或口服，例如50mg或其当量的剂量)和/或退热药(例如对乙酰氨基酚，例如650-1000mg的剂量)，以减少对注射的反应。在一些实施方案中，前驱用药与双特异性抗体在同一天施用。

51、在一些实施方案中，在21天周期的第1周期中和第2周期开始时施用预防和前驱用药(即，与第2周期第1天的第一剂双特异性抗体一起)。在一些实施方案中，当受试者在21天周期的第2周期首次施用双特异性抗体后经历大于1级的crs时，第2周期的21天周期过程中双特异性抗体的第二次和第三次施用期间施用预防。在一些实施方案中，当在先前周期的双特异性抗体的末次施用中，受试者经历大于1级的crs时，在随后的周期中继续进行预防。在进一步的实施方案中，在第2周期的21天周期期间施用预防和前驱用药。在又进一步的实施方案中，在随后的周期期间施用预防和前驱用药。

52、在一些实施方案中，如果受试者发展1级crs，则向受试者施用抗生素。在一些实施方案中，如果受试者发展2级或3级crs，则向受试者施用血管加压药。在一些实施方案中，如果受试者发展4级crs，则向受试者施用至少两种血管加压药。

53、在一些实施方案中，如果受试者发展2级、3级或4级crs，则向受试者施用托珠单抗(tocilizumab)。在一些实施方案中，向受试者进一步施用类固醇(例如地塞米松(dexamethasone)或甲基泼尼松龙(methylprednisolone))。在一些实施方案中，如果受试者是托珠单抗难治的，则将托珠单抗换成抗il-6抗体(例如，司妥昔单抗(siltuximab))或il-1r拮抗剂(例如，阿那白滞素(anakinra))。

54、在一些实施方案中，向受试者施用针对肿瘤溶解综合征(tls)的预防。在一些实施方案中，针对tls的预防包括在施用双特异性抗体之前施用一种或多种降尿酸剂。在一些实施方案中，拉布立酶(rasburicase)和/或别嘌呤醇(allopurinol)作为降尿酸剂施用。在一些实施方案中，当受试者显示出tls的体征时，可以使用支持性疗法，诸如拉布立酶。

55、在一些实施方案中，用本文所述方法治疗的受试者实现完全响应、部分响应或疾病稳定，例如，由lugano标准或lyric定义的。

56、在一些实施方案中，双特异性抗体的第一抗原结合区包括vhcdr1、vhcdr2和vhcdr3以及vlcdr1、vlcdr2和vlcdr3，所述vhcdr1、vhcdr2和vhcdr3分别包含seq id no:1、2和3所示的氨基酸序列，所述vlcdr1、vlcdr2和vlcdr3分别包含seq id no:4、序列gtn和seq id no:5所示的氨基酸序列；第二抗原结合区包括vhcdr1、vhcdr2和vhcdr3以及vlcdr1、vlcdr2和vlcdr3，所述vhcdr1、vhcdr2和vhcdr3分别包含seq id no:8、9和10所示的氨基酸序列，所述vlcdr1、vlcdr2和vlcdr3分别包含seq id no:11、序列das和seq idno:12所示的氨基酸序列。

57、在一些实施方案中，双特异性抗体的第一抗原结合区包括包含seq id no:6的氨基酸序列的vh区和包含seq id no:7的氨基酸序列的vl区；并且第二抗原结合区包括包含seq id no:13的氨基酸序列的vh区和包含seq id no:14的氨基酸序列的vl区。

58、在一些实施方案中，双特异性抗体的第一结合臂衍生自人源化抗体，优选衍生自全长igg1,λ(lambda)抗体(例如seq id no:22)。在一些实施方案中，双特异性抗体的第二结合臂衍生自人源抗体，优选衍生自全长igg1,κ(kappa)抗体(例如，seq id no:23)。在一些实施方案中，该双特异性抗体是具有人igg1恒定区的全长抗体。

59、在一些实施方案中，该双特异性抗体包含惰性fc区，例如，其中对应于seq id no:15的人igg1重链恒定区中位置l234、l235和d265的位置处的氨基酸分别为f、e和a的fc区。在一些实施方案中，双特异性抗体包含促进双特异性抗体形成的取代，例如，其中在第一重链中，对应于seq id no:15的人igg1重链恒定区中f405的位置处的氨基酸为l，并且其中在第二重链中，对应于seq id no:15的人igg1重链恒定区中k409的位置处的氨基酸为r，或反之亦然。在一些实施方案中，双特异性抗体具有惰性fc区(例如l234、l235和d265处的取代(例如l234f、l235e和d265a))和促进双特异性抗体形成的取代(例如f405l和k409r)两者。在进一步的实施方案中，该双特异性抗体包括包含seq id no:19和20的氨基酸序列的重链恒定区。

60、在一些实施方案中，该双特异性抗体包含第一重链和第一轻链，其分别包含seqid no:24和25所示的氨基酸序列(或由其组成)，以及第二重链和第二轻链，其分别包含seqid no:26和27所示的氨基酸序列(或由其组成)。在一些实施方案中，双特异性抗体是艾可瑞妥单抗或其生物类似物。