治疗性pH响应性组合物的制作方法

背景技术：

1、多功能纳米颗粒在广泛的应用，例如生物传感器、诊断纳米探针和靶向药物递送系统中受到关注。这些努力在很大程度上是由于需要通过在各种生理系统中精确、时空控制药剂递送来提高生物特异性并减少诊断和疗法中的副作用。为了实现这一目标，人们致力于开发刺激响应性纳米平台。已被用于确定递送效率的环境刺激包括ph、温度、酶促表达、氧化还原反应和光诱导。在这些激活信号中，ph触发是基于两种ph差异的最广泛研究的刺激之一：(a)病理(例如肿瘤)与正常组织和(b)酸性细胞内隔室。

2、例如，由于肿瘤细胞外微环境的异常酸度(ph～6.5)，已经报道了几种ph响应性纳米系统来增加肿瘤成像的灵敏度或疗法的功效。然而，对于在酸性环境中通过水解释放药物的聚合物胶束组合物，可能需要数天才能释放药物。在那段时间内，身体可以排泄或分解胶束。

3、为了靶向酸性内体/溶酶体隔室，已经研究了具有ph可裂解连接子的纳米载体以提高有效负载的生物可用性。此外，已经设计了几种具有ph诱导电荷转换的智能纳米载体来提高药物疗效。内吞系统由一系列隔室构成，所述隔室在内化货物的分类、加工和降解中具有独特的作用。由于纳米颗粒停留时间短(<分钟)以及这些隔室中的ph差异小(例如，早期内体与溶酶体之间<1ph单位)，因此通过ph敏感性纳米颗粒选择性靶向不同的内吞隔室特别具有挑战性。

4、免疫疗法已成为癌症治疗的有力策略。诸如白介素-2(il-2)等免疫调节剂可诱导抗肿瘤免疫反应，但它们的临床应用受到不利的药物动力学特性的限制，所述特性会引起严重的剂量限制性毒性(例如血管渗漏综合征)。

5、需要改进的用于治疗应用的ph响应性胶束组合物，特别是具有增加的药物有效负载、延长的血液循环时间、在目标部位快速递送药物以及在特定窄ph范围内的响应性(例如用于靶向肿瘤或特定细胞器)的组合物。

技术实现思路

1、本文所述的嵌段共聚物为适用于治疗原发性和转移性肿瘤组织(包括淋巴结)的治疗剂。本文呈现的嵌段共聚物和胶束组合物利用癌性组织与正常组织之间的这一普遍存在的ph差异并且在由细胞吸收之后提供高度敏感和特定的响应，因此允许将治疗性有效负载部署到肿瘤组织。

2、本文描述的一个方面是一种胶束，其包含：

3、(i)式(iii)的嵌段共聚物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或水合物：

4、

5、其中：

6、n3为10-200的整数；

7、x3为40-300的整数；

8、y3为0-6的整数；

9、z3为0-10的整数；

10、x3为卤素、-oh或-c(o)oh；

11、r8和r9各自独立地为任选被取代的c1-c6烷基、c3-c10环烷基或芳基；

12、或r8和r9与其所连接的对应氮一起形成任选被取代的5至7元环；且

13、每个r10独立地为氢或icg；以及

14、(ii)由所述嵌段共聚物包封的治疗剂，其中所述治疗剂是结合至荧光染料的蛋白质。

15、本文呈现的另一方面是一种胶束组合物，其包含：

16、(i)式(iv)的嵌段共聚物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或水合物：

17、

18、其中：

19、n3为10-200的整数；

20、x3为40-300的整数；

21、y3为0-6的整数；

22、z3为0-10的整数；

23、每个r10独立地为氢或icg；且

24、x3为卤素、-oh或-c(o)oh；以及

25、(ii)由所述嵌段共聚物包封的治疗剂，其中所述治疗剂是结合至荧光染料的蛋白质。

26、在一些实施例中，r8和r9各自独立地为-ch2ch3、-ch2ch2ch3或-ch2ch2ch2ch3。在一些实施例中，r8和r9各自独立地为-ch2ch2ch2ch3。在一些实施例中，r10为氢。在一些实施例中，r10为icg。在一些实施例中，x3为50-200、60-160或90-140的整数。在一些实施例中，x3为90-140。在一些实施例中，y3为1-6、1-5、1-4或1-3的整数。在一些实施例中，y3为0。在一些实施例中，z3为1-9、1-8、1-7、1-6、1-5、1-4或1-3的整数。在一些实施例中，z3为0。在一些实施例中，n3为60-150或100-140的整数。在一些实施例中，n3为100-140。在一些实施例中，x3为卤素。在一些实施例中，x3为-br。在一些实施例中，蛋白质为约5至约20kda的蛋白质，任选地为细胞因子或其片段，或为抗体，任选地为工程化抗体或其片段。在一些实施例中，细胞因子为白介素(il)、趋化因子、干扰素、淋巴因子、单核因子、集落刺激因子或肿瘤坏死因子，任选地为il-2、il-1、il-3、il-4、il-5、il-6、il-7、il-8、il-9、il-10、il-11、il-12、il-13、il-15、il-17或il-18蛋白质，或其片段。在一些实施例中，抗体或其片段为双特异性抗体或其片段或融合蛋白，任选地为双特异性t细胞衔接子(bite)。在一些实施例中，荧光染料具有约400nm至约900nm，或约400、450、500、550、600、650、700、750、800或850nm的激发光谱，任选地为香豆素、罗丹明、花青、呫吨、荧光素或其磺化或带负电荷的形式，或来自图22的化合物。

27、在另一方面是一种治疗有需要的个体的癌症的方法，其包含施用有效量的包含本文所述的治疗剂的胶束组合物。在一些实施例中，癌症为实体肿瘤。在一些实施例中，癌症包含实体肿瘤。在一些实施例中，肿瘤为癌症，其中癌症为乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、腹膜转移癌、结直肠癌、膀胱癌、肾癌、食道癌、头颈癌(hnssc)、肺癌、脑癌或皮肤癌(包括黑色素瘤和肉瘤)。

28、在另一方面是一种增加治疗剂包封至胶束中的方法，其包含将治疗剂与荧光染料结合。在一些实施例中，方法进一步包含使结合的治疗剂与嵌段共聚物接触以形成胶束。在一些实施例中，治疗剂为约5至约20kda的蛋白质。在一些实施例中，蛋白质为细胞因子或其片段。在一些实施例中，细胞因子为白介素(il)、趋化因子、干扰素、淋巴因子、单核因子、集落刺激因子或肿瘤坏死因子。在一些实施例中，细胞因子为il-2、il-1、il-3、il-4、il-5、il-6、il-7、il-8、il-9、il-10、il-11、il-12、il-13、il-15、il-17或il-18蛋白质或其片段。在一些实施例中，治疗剂为抗体或其片段。在一些实施例中，抗体或其片段为双特异性抗体或其片段。在一些实施例中，双特异性抗体或其片段为融合蛋白。在一些实施例中，融合蛋白为双特异性t细胞衔接子(bite)。在一些实施例中，荧光染料具有约400nm至约900nm的激发光谱。在一些实施例中，荧光染料的激发光谱为约：400、450、500、550、600、650、700、750、800或850nm。在一些实施例中，荧光染料为香豆素、罗丹明、花青、呫吨、荧光素或其磺化或带负电荷的形式，或来自图22的化合物。

29、本文所述的嵌段共聚物、胶束组合物和方法的其它目标、特征和优点将从以下具体实施方式变得显而易见。然而应了解，具体实施方式和同时说明具体实施例的具体实例仅为了说明而给出，因为所属领域的技术人员根据此具体实施方式将显而易知属于本发明精神和范围内的各种变化和修改。

30、引用参考

31、本说明书中所提及的所有公开、专利以及专利申请通过引用并入本文，其程度如同每个单独的公开、专利或专利申请被专门地且单独地指示通过引用并入。