用于癌症免疫疗法的包含细菌的组合物的制作方法

本发明涉及癌症免疫疗法领域。具体而言，本发明涉及用于癌症治疗的包含细菌种类的组合的免疫原性组合物。

背景技术：

1、恶性肿瘤是现代医学面临的主要挑战之一。人们普遍认为，常规疗法例如手术、化疗和放疗在许多常见类型和阶段的癌症中疗效有限。

2、免疫疗法是一个不断发展的研究领域，也是治疗某些类型癌症的额外选项。尽管癌细胞呈递抗原并且存在可能对肿瘤细胞产生反应的免疫细胞，但已发现在许多情况下，免疫系统针对肿瘤未被很好激活或肯定受到抑制。这种现象的关键是肿瘤能够发展出许多免疫调节机制来逃避抗肿瘤免疫应答。免疫疗法的基本原理是，免疫系统可能被刺激以识别肿瘤细胞，并靶向它们进行破坏。

3、在此种意义上，一种传统的方法是使用灭活细菌作为治疗性疫苗来治疗恶性肿瘤。例如，coley的疫苗(酿脓链球菌(streptococcus pyogenes)和粘质沙雷氏菌(serratiamarcescens)的组合)长期以来被认为有助于治疗肉瘤和淋巴瘤，而bcg(牛分枝杆菌(mycobacterium bovis))疫苗治疗据报道对治疗几种类型的癌症有效。

4、最近，已经探索了其他类型的免疫疗法。例如，使用单克隆抗体(mab)阻断免疫检查点分子例如程序性细胞死亡配体1(pd-l1)和细胞毒性t淋巴细胞抗原4(ctla-4)，已经取得了一些成功，突出了免疫疗法在肿瘤学领域的潜力。此外，直接使用免疫细胞效应物例如活化的自然杀伤细胞、嵌合抗原受体(car)t细胞、肿瘤浸润性淋巴细胞和负载肿瘤抗原的树突状细胞的策略，已被用于增强抗肿瘤免疫。然而，尽管期望很高且有时获得有希望的结果，但事实是临床结果往往不一致，并且肿瘤可以找到脱逸的途径，甚至可以长期转移。

5、从上文可以清楚地看出，需要替代的免疫治疗方法来增强宿主抗肿瘤免疫并靶向肿瘤细胞进行破坏。

技术实现思路

1、本发明人发现，当与源自于肿瘤细胞的抗原接触时，无活性致病性细菌的组合能够产生特异性抗肿瘤免疫应答。本技术表明，所述免疫应答有效地减缓所述抗原来源的特定肿瘤的生长速率。本技术还表明，含有所述细菌群和源自于肿瘤细胞的抗原的本发明的免疫原性组合物甚至可以实现肿瘤的消失，引起针对抗肿瘤的新挑战/复发的完全缓解和记忆应答。

2、因此，本发明的第一方面提供了一种免疫原性组合物，其包含：(a)包含选自金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus)、酿脓链球菌(streptococcus pyogenes)、肺炎链球菌(streptococcus pneumoniae)、流感嗜血杆菌(haemophilus influenzae)、肺炎克雷伯氏菌(klebsiella pneumoniae)、表皮葡萄球菌(staphylococcus epidermidis)、草绿色链球菌(streptococcus viridans)、卡他莫拉菌(moraxella catarrhalis)、百日咳博德特氏菌(bordetella pertussis)、黄奈瑟氏菌(neisseria flava)、大肠埃希氏杆菌(escherichia coli)和奇异变形杆菌(proteus mirabilis)的至少三种致病性细菌种类的细菌群体，其中所述细菌是灭活细菌，和(b)肿瘤抗原决定簇。

3、不希望受到理论束缚，本发明人设定肿瘤抗原通过引导由所述细菌群体产生的非特异性免疫应答而起作用。据推测，由位于细菌细胞中的模式识别受体触发的介导先天免疫的白细胞的活化，将增强对来自于肿瘤的抗原的摄取，将最初产生的先天免疫应答转向针对该肿瘤的特异性适应性免疫应答。在这个意义上，本发明人还发现，当群体中的细菌保持其结构完整性时，即当细菌是完整细菌时，所述免疫应答增强。针对肿瘤的免疫应答也被本发明的免疫原性组合物中包含的细菌种类的特定群体增强。

4、此外，本发明人还已发现，本发明的免疫原性组合物还产生针对肿瘤的记忆免疫应答，有效地阻止复发和/或转移(参见下文的实施例)。

5、第二方面提供了一种制备免疫原性组合物的方法，所述方法包括将一种或多种肿瘤抗原决定簇与包含选自金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus)、酿脓链球菌(streptococcus pyogenes)、肺炎链球菌(streptococcus pneumoniae)、流感嗜血杆菌(haemophilus influenzae)、肺炎克雷伯氏菌(klebsiella pneumoniae)、表皮葡萄球菌(staphylococcus epidermidis)、草绿色链球菌(streptococcus viridans)和卡他莫拉菌(moraxella catarrhalis)的至少三种致病性细菌种类的细菌群体接触，其中所述细菌是灭活细菌。

6、本发明的免疫原性组合物可以通过将所述细菌群体与从肿瘤获得/衍生的抗原决定簇接触而在原位制备。在这种情况下，方便的是所述细菌群体容易获得，例如作为悬液或冻干制剂获得。因此，本发明的第三方面提供了一种细菌群体，其包含金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus)、酿脓链球菌(streptococcus pyogenes)、肺炎链球菌(streptococcus pneumoniae)、流感嗜血杆菌(haemophilus influenzae)、肺炎克雷伯氏菌(klebsiella pneumoniae)和卡他莫拉菌(moraxella catarrhalis)，其中所述细菌是灭活细菌并包含完整细胞壁。

7、本发明的免疫原性组合物也可以被提供成随时可给药到有需要的受试者的药物组合物。因此，本发明的第四方面涉及一种药物组合物，其包含治疗有效量的所述第一方面中所定义的免疫原性组合物或根据本发明的第三方面的细菌群体以及药学上可接受的赋形剂和/或载体。

8、本发明的第五方面提供了一种套装试剂盒，其包含：(a)所述第三方面中所定义的细菌群体，和任选的(b)其在制备所述第一方面的免疫原性组合物中使用的说明书。

9、第六方面提供了本发明的第三方面的细菌群体或本发明的第五方面的套装试剂盒的用途，其用于制备本发明的第一方面中所定义的免疫原性组合物。

10、第七方面提供了一种本发明的第一方面中所定义的免疫原性组合物或本发明的第四方面中所定义的包含所述免疫原性组合物的药物组合物用作药物的用途。这可以被重新表述为本发明的第一方面中所定义的免疫原性组合物或本发明的第四方面中所定义的包含所述免疫原性组合物的药物组合物的用途，其用于制备药物。本发明还公开了一种预防和/或治疗有需要的受试者的方法,所述方法包括给药本发明的第一方面中所定义的免疫原性组合物或本发明的第四方面中所定义的包含所述免疫原性组合物的药物组合物。

11、本发明的第八方面提供了一种本发明的第一方面中所定义的免疫原性组合物或本发明的第四方面中所定义的包含所述免疫原性组合物的药物组合物在预防和/或治疗肿瘤的方法中的用途。这可以被重新表述为本发明的第一方面中所定义的免疫原性组合物或本发明的第四方面中所定义的包含所述免疫原性组合物的药物组合物的用途，其用于制备预防和/或治疗肿瘤的药物。本发明还公开了一种预防和/或治疗肿瘤的方法，所述方法包括向有需要的受试者给药本发明的第一方面中所定义的免疫原性组合物或本发明的第四方面中所定义的包含所述免疫原性组合物的药物组合物。

12、在第九方面中，本发明提供了一种本发明的第一方面中所定义的免疫原性组合物或本发明的第四方面中所定义的包含所述免疫原性组合物的药物组合物在与手术、辐射或抗肿瘤剂的联合疗法中的用途，其用于预防和/或治疗肿瘤。这一方面也可以被表述为本发明的第一方面中所定义的免疫原性组合物或本发明的第四方面中所定义的包含所述免疫原性组合物的药物组合物的用途，其用于制备在与手术、辐射或抗肿瘤剂的联合疗法中用于预防和/或治疗肿瘤的药物。这一方面也可以被表述为一种预防和/或治疗肿瘤的方法，所述方法包括与手术、辐射或抗肿瘤剂联合，向有需要的受试者给药本发明的第一方面中所定义的免疫原性组合物或本发明的第四方面中所定义的包含所述免疫原性组合物的药物组合物。

13、此外，本发明人已令人吃惊地发现，由金黄色葡萄球菌(staphylococcusaureus)、酿脓链球菌(streptococcus pyogenes)、肺炎链球菌(streptococcuspneumoniae)、流感嗜血杆菌(haemophilus influenzae)、肺炎克雷伯氏菌(klebsiellapneumoniae)和卡他莫拉菌(moraxella catarrhalis)组成的细菌群体在治疗结肠肿瘤中有效，其中所述细菌是灭活细菌。因此，本发明的第十方面提供了一种由金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus)、酿脓链球菌(streptococcus pyogenes)、肺炎链球菌(streptococcus pneumoniae)、流感嗜血杆菌(haemophilus influenzae)、肺炎克雷伯氏菌(klebsiella pneumoniae)和卡他莫拉菌(moraxella catarrhalis)组成的细菌群体用于预防和/或治疗胃肠道、神经系统、造血系统、生殖系统(例如宫颈、卵巢、子宫、阴道和外阴)、泌尿道、内分泌系统、皮肤、心脏、大脑、眼、睾丸、肌肉、骨骼或乳腺的肿瘤的用途，其中所述细菌是灭活细菌。这一方面也可以被表述为一种由金黄色葡萄球菌(staphylococcusaureus)、酿脓链球菌(streptococcus pyogenes)、肺炎链球菌(streptococcuspneumoniae)、流感嗜血杆菌(haemophilus influenzae)、肺炎克雷伯氏菌(klebsiellapneumoniae)和卡他莫拉菌(moraxella catarrhalis)组成的细菌群体(其中所述细菌是灭活细菌)的用途，其用于制备药物，所述药物用于预防和/或治疗胃肠道、神经系统、造血系统、生殖系统(例如宫颈、卵巢、子宫、阴道和外阴)、泌尿道、内分泌系统、皮肤、心脏、大脑、眼、睾丸、肌肉、骨骼或乳腺的肿瘤。这一方面也可以被表述为一种预防和/或治疗胃肠道、神经系统、造血系统、生殖系统(例如宫颈、卵巢、子宫、阴道和外阴)、泌尿道、内分泌系统、皮肤、心脏、大脑、眼、睾丸、肌肉、骨骼或乳腺的肿瘤的方法，所述方法包括向有需要的受试者给药由金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus)、酿脓链球菌(streptococcuspyogenes)、肺炎链球菌(streptococcus pneumoniae)、流感嗜血杆菌(haemophilusinfluenzae)、肺炎克雷伯氏菌(klebsiella pneumoniae)和卡他莫拉菌(moraxellacatarrhalis)组成的细菌群体，其中所述细菌是灭活细菌。

14、本发明的第十一方面涉及一种所述第三方面中所定义的细菌群体或所述第四方面中所定义的包含所述细菌群体的药物组合物在预防和/或治疗肿瘤中的用途，其中所述预防和/或治疗包括在治疗间隔内同时、顺序或单独给药所述细菌群体和一种或多种肿瘤抗原决定簇。这可以被重新表述为一种所述第三方面中所定义的细菌群体或所述第四方面中所定义的包含所述细菌群体的药物组合物的用途，其用于制备预防和/或治疗肿瘤的药物，其中所述药物在治疗间隔内与一种或多种肿瘤抗原决定簇同时、顺序或单独给药。本发明还公开了一种预防和/或治疗肿瘤的方法，所述方法包括向有需要的受试者给药与一种或多种肿瘤抗原决定簇结合的治疗有效量的所述第三方面中所定义的细菌群体或所述第四方面中所定义的包含所述细菌群体的药物组合物，其中所述细菌群体和一种或多种肿瘤抗原决定簇在治疗间隔内同时、顺序或单独给药。