增强的制剂稳定性和改善的冻干工艺的制作方法

本发明涉及药物物质的改善的稳定性和冻干方法。

背景技术：

1、冻干或冷冻干燥是制药业中广泛使用的用于保存生物物质和药物物质的工艺。在冻干中，存在于药物物质中的水在冷冻步骤转化为冰，然后在初级干燥步骤在低压条件下通过直接升华从药物物质中去除。然而，在冷冻期间，并非所有的水都转化为冰。一部分水被困在含有例如制剂组分和/或活性成分(药物物质)的固体基质中。因此，需要在升高的温度下进行额外的干燥步骤(二级干燥)，以去除残留的水分并达到所需的水分水平。

2、冻干工艺与制剂密切相关(bhatnagar,b.et al.,freeze-drying ofbiologics.encyclopedia of pharmaceutical science and technology,4th edition,2013,swarbrick,j.,ed.；wiley interscience:new york,ny,usa:1673-1722)。制剂也限定活性药物成分的稳定性。例如，已经表明，对于蛋白质的稳定化，需要稳定剂与蛋白质的特定比例(摩尔比大于360)来实现室温稳定性(cleland,j.l.et al.(2001)j pharm sci90(3):310-321)。也已经表明，这个比例对蛋白质结构具有特异性。因此，每种蛋白质可能需要稳定剂与活性成分的不同比例以实现相似的稳定性(wang,b.,et al.,(2009)j pharmsci 98(9):3145-3166)。正如文献(chang,l.,et al.(2009)j pharm sci98(9):2886-2908)中所讨论的，除了稳定剂和活性成分之间的特定相互作用，由于稀释效应，稳定剂与蛋白质的比例的增加也会导致两种蛋白质之间在固态下减少相互作用。

3、在早期的工作中，使用动态光散射，将蔗糖与核酸(例如dna)的质量比增加2倍，导致颗粒尺寸减少至少3倍(kasper,j.c.,et al.(2013)j pharm sci 102(3):929-946)。

技术实现思路

1、因此，本发明的一个目的是提供一种用于药物物质稳定性的方法，该方法为可扩展的、可重复的且适用于药物生产，并且具有时间效益和成本效益。本发明的一个目的是提供一种用于冻干药物物质的方法，通过该方法优选地保持药物物质的完整性和生物活性。本发明的另一个目的是提供一种包含药物物质的组合物，该组合物适合在环境温度或亚环境温度以液体、冷冻液体或干燥的固体的形式长期储存，并且与现有技术组合物相比，该组合物优选地具有更高的储存稳定性。

1.一种用于冻干液体制剂的方法，其中所述方法包括以下步骤：

2.权利要求1所述的方法，其还包括在步骤(b)中所示的初始冷冻之后的退火步骤。

3.权利要求1或2所述的方法，其中所述冻干产品包含无定形的制剂组分。

4.权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述冻干产品包含部分结晶的或无定形的制剂组分。

5.权利要求1-4中任一项所述的方法，其中在步骤(c)中所示的初级干燥期间，所述搁板温度为约-15℃至约-30℃。

6.权利要求5所述的方法，其中所述搁板温度为-25℃。

7.权利要求1-6中任一项所述的方法，其中在步骤(c)中所示的初级干燥期间，所述室压力为约25毫托至约100毫托。

8.权利要求7所述的方法，其中所述室压力为50毫托。

9.权利要求1-8中任一项所述的方法，其中在步骤(b)中所示的初始冷冻期间所述搁板温度为约-30℃至-60℃。

10.权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述退火温度为约-5℃至约-25℃。

11.权利要求10所述的方法，其中所述退火温度为-10℃。

12.一种用于生产包含药物物质和稳定剂的混合物的稳定的液体制剂的方法，其中所述方法包括将所述药物物质和所述稳定剂以特定比例混合，从而生产所述稳定制剂。

13.权利要求12所述的方法，其中所述稳定制剂还包含至少一种包封剂。

14.权利要求12-13中任一项所述的方法，其中所述稳定制剂还包含缓冲液。

15.权利要求12-14中任一项所述的方法，其中所述稳定制剂还包含盐。

16.权利要求12-15中任一项所述的方法，其中所述稳定制剂还包含表面活性剂、防腐剂、任意其他的赋形剂或其组合。

17.权利要求16所述的方法，其中所述表面活性剂、防腐剂、赋形剂或其组合选自无菌注射用水(swfi)、抑菌注射用水(bwfi)、盐水、葡萄糖溶液、聚山梨醇酯、泊洛沙姆、曲拉通、二价阳离子、乳酸林格液、氨基酸、糖、多元醇、聚合物或环糊精。

18.权利要求12-17中任一项所述的方法，其中所述药物物质选自由以下组成的组：蛋白质、肽、多糖、小分子、天然产物、核酸、免疫原、疫苗、聚合物、化学化合物及其组合。

19.权利要求18所述的方法，其中所述药物物质为核酸。

20.权利要求19所述的方法，其中所述核酸选自由以下组成的组：dna、rna、rna/dna杂交体和适配体。

21.权利要求20所述的方法，其中所述rna为mrna。

22.权利要求12-21中任一项所述的方法，其中所述药物物质浓度为约0.05mg/ml以下。

23.权利要求12-21中任一项所述的方法，其中所述药物物质浓度为至少约0.05mg/ml。

24.权利要求12-21中任一项所述的方法，其中所述药物物质浓度为至少约0.5mg/ml。

25.权利要求12-21中任一项所述的方法，其中所述药物物质浓度为至少约1mg/ml。

26.权利要求12-21中任一项所述的方法，其中所述药物物质浓度为至少约10mg/ml。

27.权利要求12-21中任一项所述的方法，其中所述药物物质浓度为至少约50mg/ml。

28.权利要求12-21中任一项所述的方法，其中所述药物物质浓度为约0.05mg/ml至约0.5mg/ml。

29.权利要求12-28中任一项所述的方法，其中所述稳定剂选自由以下组成的组：蔗糖、甘露糖、山梨醇、棉子糖、海藻糖、甘露醇、肌醇、氯化钠、精氨酸、乳糖、羟乙基淀粉、葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮、甘氨酸及其组合。

30.权利要求29所述的方法，其中所述稳定剂为蔗糖。

31.权利要求12-30中任一项所述的方法，其中所述稳定剂浓度为约100mg/ml至约200mg/ml。

32.权利要求12-31中任一项所述的方法，其中所述药物物质为mrna且所述稳定剂为蔗糖。

33.权利要求12-32中任一项所述的方法，其中所述稳定剂与所述药物物质的质量比不高于5000。

34.权利要求12-32中任一项所述的方法，其中所述稳定剂与所述药物物质的质量比不高于2000。

35.权利要求12-32中任一项所述的方法，其中所述稳定剂与所述药物物质的质量比不高于1000。

36.权利要求12-32中任一项所述的方法，其中所述稳定剂与所述药物物质的质量比不高于500。

37.权利要求12-32中任一项所述的方法，其中所述稳定剂与所述药物物质的质量比不高于100。

38.权利要求12-32中任一项所述的方法，其中所述稳定剂与所述药物物质的质量比不高于50。

39.权利要求12-32中任一项所述的方法，其中所述稳定剂与所述药物物质的质量比不高于10。

40.权利要求12-32中任一项所述的方法，其中所述稳定剂与所述药物物质的质量比不高于1。

41.权利要求12-32中任一项所述的方法，其中所述稳定剂与所述药物物质的质量比不高于0.5。

42.权利要求12-32中任一项所述的方法，其中所述稳定剂与所述药物物质的质量比不高于0.1。

43.权利要求12-32中任一项所述的方法，其中所述稳定剂和药物物质包含约200–2000:1的稳定剂和药物物质的质量比。

44.权利要求13-43中任一项所述的方法，其中所述包封剂选自由以下组成的组：脂质、脂质纳米颗粒(lnp)、脂复合体、聚合物颗粒、人工合成多聚物和整体递送系统及其组合。

45.权利要求44所述的方法，其中所述包封剂为脂质纳米颗粒(lnp)。

46.权利要求12-45中任一项所述的方法，其中所述稳定制剂在环境温度或亚环境温度储存规定的时间。

47.一种根据权利要求1或12的方法制备稳定制剂的方法，其中所述制剂作为冷冻基质、冷藏液体或冷藏的冻干产品是稳定的。

48.权利要求47所述的方法，其中所述制剂高于所述冷冻基质的玻璃化转变温度(tg’)。

49.权利要求48所述的方法，其中所述制剂在高于tg’的等温保持或储存期间保持无定形。

50.权利要求47所述的方法，其中所述储存温度为环境温度或低于环境温度。

51.一种改善权利要求1-11和47-50中任一项的冻干组合物的稳定性的方法，其通过在冻干之前或在将所述冻干组合物复溶为适于注射的形式期间，将谷胱甘肽、edta、甲硫氨酸、除铁灵和任意抗氧化剂或金属清除剂加入所述液体制剂来改善稳定性。

52.权利要求1-11和47-51所述的方法，其中所述制剂还包含至少一种包封剂。

53.权利要求1-11和47-52中任一项所述的方法，其中所述制剂还包含缓冲液。

54.权利要求1-11和47-53中任一项所述的方法，其中所述制剂还包含盐。

55.权利要求1-11和47-54中任一项所述的方法，其中所述制剂还包含表面活性剂、防腐剂、任意其他的赋形剂或其组合。

56.权利要求55所述的方法，其中所述表面活性剂、防腐剂、赋形剂或其组合选自无菌注射用水(swfi)、抑菌注射用水(bwfi)、盐水、葡萄糖溶液、聚山梨醇酯、泊洛沙姆、曲拉通、二价阳离子、乳酸林格液、氨基酸、糖、多元醇、聚合物或环糊精。

57.权利要求1-11和47-56中任一项所述的方法，其中所述药物物质选自由以下组成的组：蛋白质、肽、多糖、小分子、天然产物、核酸、免疫原、疫苗、聚合物、化学化合物及其组合。

58.权利要求57所述的方法，其中所述药物物质为核酸。

59.权利要求58所述的方法，其中所述核酸选自由以下组成的组：dna、rna、rna/dna杂交体和适配体。

60.权利要求59所述的方法，其中所述rna为mrna。

61.权利要求1-11和47-60中任一项所述的方法，其中所述药物物质浓度为约0.05mg/ml以下。

62.权利要求1-11和47-60中任一项所述的方法，其中所述药物物质浓度为至少约0.05mg/ml。

63.权利要求1-11和47-60中任一项所述的方法，其中所述药物物质浓度为至少约0.5mg/ml。

64.权利要求1-11和47-60中任一项所述的方法，其中所述药物物质浓度为至少约1mg/ml。

65.权利要求1-11和47-60中任一项所述的方法，其中所述药物物质浓度为至少约10mg/ml。

66.权利要求1-11和47-60中任一项所述的方法，其中所述药物物质浓度为至少约50mg/ml。

67.权利要求1-11和47-60中任一项所述的方法，其中所述药物物质浓度为约0.05mg/ml至约0.5mg/ml。

68.权利要求1-11和47-67中任一项所述的方法，其中所述稳定剂选自由以下组成的组：蔗糖、甘露糖、山梨醇、棉子糖、海藻糖、甘露醇、肌醇、氯化钠、精氨酸、乳糖、羟乙基淀粉、葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮、甘氨酸及其组合。

69.权利要求68所述的方法，其中所述稳定剂为蔗糖。

70.权利要求1-11和47-69中任一项所述的方法，其中所述稳定剂浓度为约100mg/ml至约200mg/ml。

71.权利要求1-11和47-70中任一项所述的方法，其中所述药物物质为mrna且所述稳定剂为蔗糖。

72.权利要求1-11和47-71中任一项所述的方法，其中所述稳定剂与所述药物物质的质量比不高于5000。

73.权利要求1-11和47-71中任一项所述的方法，其中所述稳定剂与所述药物物质的质量比不高于2000。

74.权利要求1-11和47-71中任一项所述的方法，其中所述稳定剂与所述药物物质的质量比不高于1000。

75.权利要求1-11和47-71中任一项所述的方法，其中所述稳定剂与所述药物物质的质量比不高于500。

76.权利要求1-11和47-71中任一项所述的方法，其中所述稳定剂与所述药物物质的质量比不高于100。

77.权利要求1-11和47-71中任一项所述的方法，其中所述稳定剂与所述药物物质的质量比不高于50。

78.权利要求1-11和47-71中任一项所述的方法，其中所述稳定剂与所述药物物质的质量比不高于10。

79.权利要求1-11和47-71中任一项所述的方法，其中所述稳定剂与所述药物物质的质量比不高于1。

80.权利要求1-11和47-71中任一项所述的方法，其中所述稳定剂与所述药物物质的质量比不高于0.5。

81.权利要求1-11和47-71中任一项所述的方法，其中所述稳定剂与所述药物物质的质量比不高于0.1。

82.权利要求1-11和47-71中任一项所述的方法，其中所述稳定剂和药物物质包含约200–2000:1的稳定剂和药物物质的质量比。

83.权利要求52-82中任一项所述的方法，其中所述包封剂选自由以下组成的组：脂质、脂质纳米颗粒(lnp)、脂复合体、聚合物颗粒、人工合成多聚物和整体递送系统及其组合。

84.权利要求83所述的方法，其中所述包封剂为脂质纳米颗粒(lnp)。

85.权利要求1-11和47-84中任一项所述的方法，其中所述稳定制剂在环境温度或亚环境温度储存规定的时间。

86.一种制备稳定制剂的方法，其包括以下步骤：

87.权利要求86所述的方法，其中所述稀释剂选自无菌注射用水(swfi)、盐水、葡萄糖溶液、聚山梨醇酯、泊洛沙姆、曲拉通、二价阳离子、乳酸林格液、氨基酸、糖、多元醇、聚合物或环糊精、ph缓冲稀释剂或含有防腐剂的稀释剂，例如抑菌注射用水(bwfi)、2-苯氧乙醇、m-甲酚或苯酚。

88.一种储存药物物质的方法，其包括以下步骤：

89.权利要求54所述的方法，其中所述时间为3个月以上。

90.权利要求54所述的方法，其中所述时间为8个月以上。

91.权利要求54所述的方法，其中所述时间为12个月以上。

92.权利要求54所述的方法，其中所述时期为18个月以上。

93.权利要求54所述的方法，其中所述时期为24个月以上。

94.一种稳定制剂，其使用权利要求12-46中任一项所述的方法生产。

95.一种冻干组合物，其使用权利要求1-11和47-85中任一项所述的方法生产。

96.权利要求95所述的冻干组合物，其中所述冻干组合物的饼高度高达3cm。