用于预防、治疗或减轻病毒感染性疾病或呼吸道疾病的包含副干酪乳杆菌来源的囊泡的组合物的制作方法

本发明涉及用于预防、治疗或减轻病毒感染性疾病或呼吸道疾病的组合物，其包含源自副干酪乳杆菌(lactobacillus paracasei)的囊泡作为活性成分等。本技术要求分别于2021年2月1日和2021年12月8日向韩国知识产权局提交的韩国专利申请第10-2021-0014070号和第10-2021-0174687号的优先权和权益，这些申请的说明书及附图所公开的全部内容均并入在本技术中。

背景技术：

1、病毒感染性疾病会引起多种疾病，其症状也根据病毒的种类而不同。引起呼吸道疾病的病毒的实例包括流感病毒、冠状病毒、鼻病毒等，引起肠炎(例如腹泻)的病毒的实例包括轮状病毒和肠道病毒，引起免疫疾病的病毒的实例包括逆转录病毒，以及引起癌症的病毒的实例包括腺病毒、乳头瘤病毒、乙型和丙型肝炎病毒等。此外，疱疹病毒还可能导致面部或生殖器皮肤出现唇疱疹。

2、近来，随着covid-19大流行在全球范围内广泛传播，由病毒感染引起的呼吸道疾病及其并发症已成为世界范围内的主要问题。此外，越来越多的证据表明，过去被认为是非感染性疾病的疾病是由实际的感染原引起的，并且已经发现幽门螺杆菌是胃癌的代表性病因，并且人乳头瘤病毒是宫颈癌的重要病因。特别是当疾病伴有免疫功能障碍时，感染covid-19、流感、细菌等期间的并发症如严重肺炎会导致致命的后果，因此越来越需要能够调节免疫功能障碍的药物。

3、炎症(inflammation)是针对细胞和组织的损伤或感染的局部或全身保护机制，通常由作为体液调节因子(humoral mediator)发生的级联生物反应引起，体液调节因子构成直接对损伤或感染做出反应的免疫系统，或者刺激局部或全身效应系统(effectorsystem)。用于治疗或预防炎性疾病的常见组合物主要分为甾体和非甾体组合物，其中大多数在许多情况下常常伴随着各种副作用。

4、已知在人体内共存的微生物数量达到100万亿个，是人体细胞的约10倍，并且微生物的基因数量是人类的100倍。微生物群(microbiota)或微生物组(microbiome)是指存在于特定栖息地的微生物群落(microbial community)，包括细菌(bacteria)、古细菌(archaea)和真核生物(eukarya)。

5、共存于我们体内的细菌和存在于周围环境中的细菌会分泌纳米尺寸的囊泡，以与其它细胞交换信息，例如基因、低分子化合物和蛋白质。粘膜会形成物理防御膜，尺寸为200纳米(nm)或更大的粒子不能通过，因此共存于粘膜中的细菌不能通过粘膜，但细菌来源的细胞外囊泡的尺寸为约20至200纳米，从而相对自由地经粘膜而通过上皮细胞被吸收到我们体内。细菌来源的囊泡虽然是细菌分泌的，但它们在其成分、体内吸收率和副作用风险方面与细菌不同，因此细菌来源的囊泡的使用与活细胞的使用完全不同或具有显著的效果。局部分泌的细菌来源的囊泡通过粘膜上皮细胞被吸收而引起局部炎症反应，通过上皮细胞的囊泡被全身吸收而分布到各个器官，调节所分布器官中的免疫和炎症反应。例如，来源于病原性革兰氏阴性菌如大肠杆菌(escherichia coli)的囊泡引起局部炎症反应和癌症，并且在被吸收到血管中后通过血管内皮细胞炎症反应促进全身炎症反应和血液凝固。此外，这些囊泡被吸收到胰岛素作用的肌肉细胞等中，导致胰岛素抵抗和糖尿病。相反，来自有益细菌的囊泡可能被吸收到各个器官的特定细胞中，通过调节核心免疫功能和代谢功能障碍来抑制疾病的爆发。

6、副干酪乳杆菌(lactobacillus paracasei)是一种革兰氏阳性杆菌，不仅在厌氧环境中而且在有氧环境中也能生长良好，已知为共存于我们体内的有益细菌。细菌将具有双层结构的细胞外囊泡(extracellular vesicle,ev)分泌到细胞外环境中，用于交换细胞间蛋白质、脂质、基因等。源自革兰氏阳性菌(例如副干酪乳杆菌)的囊泡除了包含细菌来源的蛋白质和核酸外，还包含肽聚糖(peptidoglycan)和脂磷壁酸(lipoteichoic acid)，它们是细菌细胞壁的成分。特别是，囊泡被吸收到细胞中并迁移到内质网(endoplasmicreticulum,er)，甚至在病毒复制过程中，在内质网中也会形成病毒膜。

7、然而，尚无将副干酪乳杆菌分泌的囊泡用于预防、治疗或减轻由病毒、细菌因素等引起的病毒感染性疾病或呼吸道疾病的已知案例。

技术实现思路

1、[技术问题]

2、作为解决上述问题的深入研究的结果，本发明人证实了，当从副干酪乳杆菌细菌中分离出囊泡并口服施用时，囊泡被递送至肺部，并且当将该囊泡口服施用于由化学、病毒和细菌致病因素等引起的呼吸道疾病动物模型时，显著抑制了呼吸道疾病的发生。此外，本发明人证实了，当将源自副干酪乳杆菌的囊泡口服施用于covid-19病毒感染的仓鼠模型时，显著抑制了covid-19病毒的复制，并且同时显著抑制了肺炎的发生。另外，本发明人证实了，当将源自副干酪乳杆菌的囊泡口服施用于流感病毒感染的小鼠模型时，显著抑制了由流感病毒引起的临床症状，由此完成了本发明。

3、因此，本发明旨在提供一种用于预防或治疗病毒感染性疾病或呼吸道疾病的药物组合物，其包含源自副干酪乳杆菌的囊泡作为活性成分。

4、另外，本发明旨在提供一种用于预防或减轻病毒感染性疾病或呼吸道疾病的食品组合物，其包含源自副干酪乳杆菌的囊泡作为活性成分。

5、另外，本发明旨在提供一种用于预防或治疗病毒感染性疾病或呼吸道疾病的吸入剂组合物，其包含源自副干酪乳杆菌的囊泡作为活性成分。

6、另外，本发明旨在提供一种用于预防或减轻病毒感染性疾病的化妆品组合物，其包含源自副干酪乳杆菌的囊泡作为活性成分。

7、然而，本发明要解决的技术问题不限于前述问题，并且本领域技术人员可以从以下描述中清楚地理解未提及的其它问题。

8、[技术方案]

9、为了实现如上所述的本发明的目的，本发明提供了一种用于预防或治疗病毒感染性疾病或呼吸道疾病的药物组合物，其包含源自副干酪乳杆菌的囊泡作为活性成分。

10、另外，本发明提供了一种用于预防或减轻病毒感染性疾病或呼吸道疾病的食品组合物，其包含源自副干酪乳杆菌的囊泡作为活性成分。

11、另外，本发明提供了一种用于预防或治疗病毒感染性疾病或呼吸道疾病的吸入剂组合物，其包含源自副干酪乳杆菌的囊泡作为活性成分。

12、另外，本发明提供了一种用于预防或减轻病毒感染性疾病的化妆品组合物，其包含源自副干酪乳杆菌的囊泡作为活性成分。

13、作为本发明的示例性实施方案，所述病毒感染性疾病可以是选自由以下组成的组中的任意一种或多种病毒感染性疾病：冠状病毒(coronavirus)、小核糖核酸病毒(picornavirus)、甲病毒(alphavirus)、流感病毒(influenza virus)、弹状病毒(rhabdovirus)、逆转录病毒(retrovirus)、乙型肝炎病毒(hepatitis b virus)、甲型肝炎病毒(hepatitis a virus)、丙型肝炎病毒(hepatitis c virus)、腺病毒(adenovirus)、疱疹病毒(herpes virus)、痘病毒(poxvirus)、细小病毒(parvovirus)、呼肠孤病毒(reovirus)、呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,rsv)和副流感病毒(parainfluenza virus)感染性疾病，但不限于此。

14、作为本发明的另一个示例性实施方案，冠状病毒感染性疾病可以是选自由以下组成的组中的任意一种或多种：普通感冒(common cold)、严重急性呼吸综合征(severeacute respiratory syndrome,sars)、中东呼吸综合征(middle east respiratorysyndrome,mers)和冠状病毒感染疾病-19(covid-19)，但不限于此。

15、作为本发明的又一个示例性实施方案，小核糖核酸病毒感染性疾病可以是选自由以下组成的组中的任意一种或多种：鼻病毒感染性疾病和肠道病毒感染性疾病，但不限于此。

16、作为本发明的另一个示例性实施方案，甲病毒感染性疾病可以是选自由以下组成的组中的任意一种或多种病毒感染性疾病：巴马森林病毒(barmah forest virus)、基孔肯雅病毒(chikungunya virus)、东方马脑炎病毒(eastern equine encephalitis virus)、马雅罗病毒(mayaro virus)、阿良良病毒(o’nyong’nyong virus)、罗斯河病毒(rossriver virus)、塞姆利基森林病毒(semliki forest virus)、辛德比斯病毒(sindbisvirus)、托纳特病毒(tonate virus)、乌纳病毒(una virus)、委内瑞拉马脑炎病毒(venezuelan equine encephalitis virus)和西方马脑炎病毒(western equineencephalitis virus)感染性疾病，但不限于此。

17、作为本发明的另一个示例性实施方案，逆转录病毒感染性疾病可以是选自由以下组成的组中的任意一种或多种病毒感染性疾病：禽白血病病毒(avian leukosis virus)、劳斯肉瘤病毒(rous sarcoma virus)、小鼠乳腺肿瘤病毒(mouse mammary tumourvirus)、鼠白血病病毒(murine leukemia virus)、猫白血病病毒(feline leukemiavirus)、牛白血病病毒(bovine leukemia virus)、人类嗜t淋巴细胞病毒(human t-lymphtrophic virus)和人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,hiv)感染性疾病，但不限于此。

18、作为本发明的另一个示例性实施方案，疱疹病毒感染性疾病可以是选自由以下组成的组中的任意一种或多种病毒感染性疾病：单纯疱疹病毒1(herpes simplex virus-1,hsv-1)、单纯疱疹病毒2(herpes simplex virus-2,hsv-2)、水痘带状疱疹病毒(varicellazoster virus,vsz)、爱泼斯坦-巴尔病毒(epstein-barr virus,ebv)、巨细胞病毒(cytomegalovirus,cmv)、玫瑰疹病毒(roseolovirus)和卡波西肉瘤相关疱疹病毒(kaposi’s sarcoma-associated herpesvirus,kshv)感染性疾病，但不限于此。

19、作为本发明的另一个示例性实施方案，呼吸道疾病可以是选自由以下组成的组中的一种或多种疾病：急性鼻炎(acute rhinitis)、慢性鼻炎(chronic rhinitis)、急性鼻窦炎(acute sinusitis)、慢性鼻窦炎(chronic sinusitis)、嗅觉障碍(dysosmia)、急性支气管炎(acute bronchitis)、慢性支气管炎(chronic bronchitis)、急性细支气管炎(acutebronchiolitis)、慢性细支气管炎(chronic bronchiolitis)、病毒性肺炎(viralpneumonia)、细菌性肺炎(bacterial pneumonia)、间质性肺炎(interstitialpneumonitis)、血管性肺炎(vascular pneumonia)和特发性肺纤维化(idiopathicpulmonary fibrosis)，但不限于此。

20、作为本发明的又一个示例性实施方案，囊泡可以具有10nm至300nm的平均直径，但不限于此。

21、作为本发明的又一个示例性实施方案，囊泡可以从副干酪乳杆菌的培养液中分离，但不限于此。

22、作为本发明的又一个示例性实施方案，囊泡可以使用从通过添加副干酪乳杆菌制备的食品中分离的囊泡来获得，但不限于此。

23、作为本发明的又一个示例性实施方案，囊泡可以是由副干酪乳杆菌天然分泌的或人工产生的，但不限于此。

24、另外，本发明提供了用于预防、治疗或减轻病毒感染性疾病或呼吸道疾病的方法，该方法包括向受试者施用包含源自副干酪乳杆菌的囊泡作为活性成分的组合物。

25、另外，本发明提供了源自副干酪乳杆菌的囊泡用于预防、治疗或减轻病毒感染性疾病或呼吸道疾病的用途。

26、另外，本发明提供了源自副干酪乳杆菌的囊泡在制备用于治疗病毒感染性疾病或呼吸道疾病的药物中的用途。

27、[有益效果]

28、本发明人证实了，当从副干酪乳杆菌细菌中分离出囊泡并口服施用时，囊泡被递送至肺部，并且当将该囊泡口服施用于由化学、病毒和细菌致病因素等引起的呼吸道疾病动物模型时，显著抑制了呼吸道疾病的发生。此外，本发明人证实了，当将源自副干酪乳杆菌的囊泡口服施用于covid-19感染的仓鼠模型时，显著抑制了covid-19病毒的复制，并且同时显著抑制了肺炎的发生。另外，本发明人证实了，当将源自副干酪乳杆菌的囊泡口服施用于流感病毒感染的小鼠模型时，显著抑制了由流感病毒引起的临床症状。因此，根据本发明的源自副干酪乳杆菌的囊泡预期能够有效地用作用于预防、减轻或治疗病毒感染性疾病或呼吸道疾病的组合物。