一种用于治疗子宫肌瘤的中药组合物、制备方法及应用与流程

1.本发明属于中医药技术领域，尤其涉及一种用于治疗子宫肌瘤的中药组合物、制备方法及应用。


背景技术：

2.目前，子宫肌瘤是女性生殖器官中最常见的一种良性肿瘤，也是人体中最常见的肿瘤之一，又称为纤维肌瘤、子宫纤维瘤。由于子宫肌瘤主要是由子宫平滑肌细胞增生而成，其中有少量纤维结缔组织作为一种支持组织而存在，故称为子宫平滑肌瘤较为确切。简称子宫肌瘤。
3.目前来说，针对子宫肌瘤的治疗，主要是有手术治疗以及药物治疗两种。而相对来说，手术治疗方式比较复杂，恢复周期长，需要综合患者的整体病情选择性治疗；而药物治疗也分为中药治疗以及西药治疗，但西药副作用大，中药治疗需要治疗及时且疗程长。因此，亟需一种新的用于治疗子宫肌瘤的中药组合物及其制备方法，以弥补现有技术的缺陷。
4.通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：（1）现有针对子宫肌瘤的治疗方法中，手术治疗方式比较复杂，恢复周期长，且需要综合患者的整体病情选择性治疗。
5.（2）现有针对子宫肌瘤的药物治疗方法中，西药的副作用大，中药治疗需要治疗及时且疗程长。


技术实现要素：

6.针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种用于治疗子宫肌瘤的中药组合物、制备方法及应用。
7.本发明是这样实现的，一种用于治疗子宫肌瘤的中药组合物，所述用于治疗子宫肌瘤的中药组合物按照质量百分数计，由水苏碱50%、黄酮甙20%以及随属成分30%组成；其中，所述随属成分按照质量百分比1：1：1~2：2~3计，由益母草碱、杜毕碱、益母草定和益母草酰胺组成。
8.本发明的另一目的在于提供一种应用所述用于治疗子宫肌瘤的中药组合物的用于治疗子宫肌瘤的中药组合物的制备方法，所述用于治疗子宫肌瘤的中药组合物的制备方法包括以下步骤：步骤一，进行水苏碱有机酸离子液体的制备：通过超临界流体萃取装置从益母草中进行水苏碱提取物的制备；利用所述水苏碱提取物制备盐酸水苏碱，并将所述盐酸水苏碱和有机酸通过离子交换法得到水苏碱有机酸离子液体；步骤二，进行黄酮甙的生物提取：添加复合酶后分别进行生物转化和酸化处理，过滤，利用吸附树脂和解吸剂对滤液进行吸附解吸处理，减压浓缩析出结晶粗品后，通过重结晶法得到黄酮甙纯品；步骤三，进行随属成分的制备：将鲜益母草筛选洗净粉碎后，通过加入乙醇进行滤
液提取，并将所述提取液通过酸性阳离子交换树脂柱进行交换；利用氨水洗脱至生物碱提取完全后，减压浓缩，干燥，鉴定后即得随属成分；步骤四，进行中药组合物的制备：将制备得到的水苏碱、黄酮甙和随属成分溶解于水溶液中，并经过高速剪切和微射流高压均质处理得到药物纳米混悬液，通过浓缩压片制得药剂学上允许的剂型。
9.在一实施例中，所述步骤一中的水苏碱有机酸离子液体的制备方法包括：（1）将益母草粉碎后过80~120目筛并置于超临界流体萃取装置中，加入乙醇为夹带剂并通入co2进行萃取后，将萃取液通过滤膜超滤浓缩，得粗提物；（2）将所述粗提物在0.5~1.5mpa的操作压力条件下进行真空干燥后，采用制备型液相色谱进行分离纯化，真空浓缩，加入盐酸制得盐酸水苏碱；（3）将盐酸水苏碱和有机酸分别溶于乙醇中，通过离子交换法得到水苏碱有机酸离子液体后，除去溶剂，并采用hplc法对所述盐酸水苏碱含量进行测定。
10.在一实施例中，所述萃取条件为：在萃取压力为30~40mpa、萃取温度为30~50℃、co2的流速为25~35l/h的条件下进行萃取。
11.在一实施例中，所述步骤二中的黄酮甙的生物提取方法包括：（1）添加复合酶，通过发酵进行生物转化，得到发酵液；对所述发酵液加酸调节ph值并进行酸化处理，得酸化液；（2）将所述酸化液过滤去除滤渣后得滤液，将所述滤液减压浓缩至原体积的20~50%，并通过吸附树脂吸附后洗涤至洗涤液无色，得洗涤液；（3）将所述黄酮甙粗品利用解吸剂解吸后，得解吸液；将所述解吸液减压浓缩析出结晶粗品后，通过重结晶法得到黄酮甙纯品。
12.在一实施例中，所述复合酶为木质素降解酶、纤维素酶和果胶酶的混合物；所述发酵环境温度为25~45℃，所述发酵液ph值为4.5~6.5，所述发酵时间为1~5天；所述酸化处理的ph值为0.5~4.5，所述酸化处理时间为2~4h。
13.在一实施例中，所述步骤三中的随属成分的制备方法包括：（1）将鲜益母草筛选洗净后利用粉碎机进行破碎处理并过20~40目筛后，将益母草段进行打浆榨汁，过滤，滤渣加纯净水反复榨取2~3次后，合并滤液；（2）将所述滤液置于提取罐内，加入乙醇进行滤液提取，静置，过滤，得提取液，并将所述提取液通过酸性阳离子交换树脂柱进行交换，得交换液；（3）将所述交换液利用氨水洗脱至生物碱提取完全，收集洗脱液，调节ph值为6~7，过滤，将滤液减压浓缩，干燥，并通过hplc法进行随属成分的鉴定。
14.在一实施例中，所述hplc法的鉴定参数包括：色谱柱为agilent zorbax hilic plus；柱温为35~42℃；流速为1ml/min；流动相为乙腈-0.2%醋酸；检测波长为277nm；雾化温度为40~50℃；蒸发温度为45~55℃。
15.在一实施例中，所述步骤四中的中药组合物的制备方法包括：（1）将制备得到的水苏碱、黄酮甙和随属成分溶解于水溶液中，得初悬液；（2）将步骤（1）制得的所述初悬液经过高速剪切处理，得粗悬液；其中，所述高速剪切转速为15000~30000rpm，所述高速剪切时间为20~40min；
（3）将步骤（2）制得的所述粗悬液经过微射流高压均质处理得到药物纳米混悬液，通过浓缩压片制得药剂学上允许的剂型；其中，所述微射流高压均质的压力为20000~35000psi，循环次数为15~30次。
16.在一实施例中，所述药剂学上允许的剂型包括：注射液、粉针、冻干粉针、凝胶剂、泡腾片、分散片、胶囊剂、软胶囊剂、微囊剂、颗粒剂、丸剂、微丸、散剂、滴丸剂、缓释制剂、控释制剂、凝胶剂、口服液体制剂、煎膏剂、浸膏剂或膜剂。
17.本发明的另一目的在于提供一种利用所述用于治疗子宫肌瘤的中药组合物制备的压片糖果、茶、茶饮料或饼干。
18.结合上述的所有技术方案，本发明所具备的优点及积极效果为：本发明提供的用于治疗子宫肌瘤的中药组合物的制备方法简单易操作，采用超临界流体萃取法进行水苏碱有机酸离子液体的制备，条件温和，制备周期短，所得产品纯度高；采用微生物菌株或生物酶作用原料中黄酮糖甙元的生物转化技术进行黄酮甙的生物提取，提高了产物中黄酮甙元含量。
19.本发明制备得到的中药组合物具有抗凝、抗血栓、抗心肌缺血、抗再灌损伤、扩张冠状动脉，增加冠状动脉血流、改善微循环、强心、利尿、降血压，止咳、化痰、平喘、兴奋呼吸中枢、肌松，以及提高女性性功能、兴奋子宫、保肾等功效，且无苦味，药效稳定，见效快，治疗周期短，更易为人们接受，具有广阔的市场前景，是现代制药企业的理想产品。
20.当理解的是，以上的一般描述和后文的细节描述仅是示例性和解释性的，并不能限制本发明的公开。
附图说明
21.此处的附图被并入说明书中并构成本说明书的一部分，示出了符合本公开的实施例，并与说明书一起用于解释本公开的原理。
22.图1是本发明实施例提供的用于治疗子宫肌瘤的中药组合物的制备方法流程图。
23.图2是本发明实施例提供的水苏碱有机酸离子液体的制备方法流程图。
24.图3是本发明实施例提供的黄酮甙的生物提取方法流程图。
25.图4是本发明实施例提供的随属成分的制备方法流程图。
26.图5是本发明实施例提供的中药组合物的制备方法流程图。
具体实施方式
27.为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合附图对本发明的具体实施方式做详细的说明。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明。但是本发明能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似改进，因此本发明不受下面公开的具体实施的限制。
28.针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种用于治疗子宫肌瘤的中药组合物及其制备方法，下面结合附图对本发明作详细的描述。
29.本发明实施例提供的用于治疗子宫肌瘤的中药组合物按照质量百分数计，由水苏碱50%、黄酮甙20%以及随属成分30%组成；所述随属成分按照质量百分比1：1：1~2：2~3计，由
益母草碱、杜毕碱、益母草定和益母草酰胺组成。
30.如图1所示，本发明实施例提供的用于治疗子宫肌瘤的中药组合物的制备方法包括以下步骤：s101，进行水苏碱有机酸离子液体的制备：通过超临界流体萃取装置从益母草中进行水苏碱提取物的制备；利用所述水苏碱提取物制备盐酸水苏碱，并将所述盐酸水苏碱和有机酸通过离子交换法得到水苏碱有机酸离子液体；s102，进行黄酮甙的生物提取：添加复合酶后分别进行生物转化和酸化处理，过滤，利用吸附树脂和解吸剂对滤液进行吸附解吸处理，减压浓缩析出结晶粗品后，通过重结晶法得到黄酮甙纯品；s103，进行随属成分的制备：将鲜益母草筛选洗净粉碎后，通过加入乙醇进行滤液提取，并将所述提取液通过酸性阳离子交换树脂柱进行交换；利用氨水洗脱至生物碱提取完全后，减压浓缩，干燥，鉴定后即得随属成分；s104，进行中药组合物的制备：将制备得到的水苏碱、黄酮甙和随属成分溶解于水溶液中，并经过高速剪切和微射流高压均质处理得到药物纳米混悬液，通过浓缩压片制得药剂学上允许的剂型。
31.如图2所示，本发明实施例提供的步骤s101的水苏碱有机酸离子液体的制备方法包括：s201，将益母草粉碎后过80~120目筛并置于超临界流体萃取装置中，加入乙醇为夹带剂并通入co2进行萃取后，将萃取液通过滤膜超滤浓缩，得粗提物；s202，将所述粗提物在0.5~1.5mpa的操作压力条件下进行真空干燥后，采用制备型液相色谱进行分离纯化，真空浓缩，加入盐酸制得盐酸水苏碱；s203，将盐酸水苏碱和有机酸分别溶于乙醇中，通过离子交换法得到水苏碱有机酸离子液体，除去溶剂，并采用hplc法对所述盐酸水苏碱含量进行测定。
32.本发明实施例提供的萃取条件为：在萃取压力为30~40mpa、萃取温度为30~50℃、co2的流速为25~35l/h的条件下进行萃取。
33.如图3所示，本发明实施例提供的步骤s102的黄酮甙的生物提取方法包括：s301，添加复合酶，通过发酵进行生物转化，得到发酵液；对所述发酵液加酸调节ph值并进行酸化处理，得酸化液；s302，将所述酸化液过滤去除滤渣后得滤液，将所述滤液减压浓缩至原体积的20~50%，并通过吸附树脂吸附后洗涤至洗涤液无色，得洗涤液；s303，将所述黄酮甙粗品利用解吸剂解吸后，得解吸液；将所述解吸液减压浓缩析出结晶粗品后，通过重结晶法得到黄酮甙纯品。
34.本发明实施例提供的复合酶为木质素降解酶、纤维素酶和果胶酶的混合物；所述发酵环境的温度为25~45℃，发酵液ph值为4.5~6.5，所述发酵时间为1~5天；所述酸化处理的ph值为0.5~4.5，所述酸化处理时间为2~4h。
35.如图4所示，本发明实施例提供的步骤s103的随属成分的制备方法包括：s401，将鲜益母草筛选洗净后利用粉碎机进行破碎处理并过20~40目筛后，将益母草段进行打浆榨汁，过滤，滤渣加纯净水反复榨取2~3次后，合并滤液；s402，将所述滤液置于提取罐内，加入乙醇进行滤液提取，静置，过滤，得提取液，
并将所述提取液通过酸性阳离子交换树脂柱进行交换，得交换液；s403，将所述交换液利用氨水洗脱至生物碱提取完全，收集洗脱液，调节ph值为6~7，过滤，将滤液减压浓缩干燥，通过hplc法进行随属成分的鉴定。
36.本发明实施例提供的hplc法的鉴定参数包括：色谱柱为agilent zorbax hilic plus；柱温为35~42℃；流速为1ml/min；流动相为乙腈-0.2%醋酸；检测波长为277nm；雾化温度为40~50℃；蒸发温度为45~55℃。
37.如图5所示，本发明实施例提供的步骤s104的中药组合物的制备方法包括：s501，将制备得到的水苏碱、黄酮甙和随属成分溶解于水溶液中得初悬液；s502，将步骤s501制得的所述初悬液经过高速剪切处理，得粗悬液；s503，将步骤s502制得的所述粗悬液经过微射流高压均质处理得到药物纳米混悬液，通过浓缩压片制得药剂学上允许的剂型。
38.本发明实施例提供的高速剪切转速为15000~30000rpm，所述高速剪切时间为20~40min；微射流高压均质压力为20000~35000psi，循环次数为15~30次。
39.本发明实施例提供的药剂学上允许的剂型包括：注射液、粉针、冻干粉针、凝胶剂、泡腾片、分散片、胶囊剂、软胶囊剂、微囊剂、颗粒剂、丸剂、微丸、散剂、滴丸剂、缓释制剂、控释制剂、凝胶剂、口服液体制剂、煎膏剂、浸膏剂或膜剂。
40.下面结合药理学分析对本发明的技术方案作在一实施例中描述。
41.水苏碱是唇形科母草属（leonurus linn.）植物的主要生物碱之一，占益母草植株总质量的0.09~1.01%。研究表明水苏碱除治疗子宫出血、子宫收缩异常等妇科疾病外，还对心血管疾病具有治疗作用，可减轻缺氧和复氧对人脐静脉内皮细胞的损伤、改善高糖诱导的内皮细胞衰老、治疗多种原因引起的心脏肥大等多重作用。除此之外，水苏碱还具有抑制炎症和氧化应激的效果，且存在一定的抗肿瘤活性。
42.黄酮甙（flavonoid glycosides）又称黄碱素类，是广泛存在于植物界的一类天然色素，具有广泛的生物活性，包括抗氧化、抗衰老、抗肿瘤等特性。
43.下面结合具体实施例对本发明的技术方案作在一实施例中描述。
44.子宫肿瘤：黄酮甙；还有益母草的主要成分：益母草主要成分生物碱。
45.抗肿瘤：黄酮甙625mg/kg腹腔注射，连续15天对小鼠宫颈癌（u14）、连续8天对小鼠肉瘤-180（s180）均有抑制作用。
46.子宫肌瘤，使用一到两个月见效，六到八个月根除子宫肿瘤。
47.禁忌，辛辣。
48.本品为唇形科植物益母草（leonurus japonicus houtt.）的地上部提取的生物碱类成分，总生物碱含量≥80%。
49.主要成分为水苏碱（stachydrine）含量：50%。
50.随属成分包括：益母草碱（leonurine）、杜毕碱（dubiin）、益母草定（leonuridine）、益母草酰胺（leonuruamide），含量：30%。
51.本品为类白色至灰黄色粉末，可溶于氯仿、丙酮、乙醇、甲醇。
52.鉴别方法如下：
取本品加乙醇制成0.5%溶液作供试液。取标准品水苏碱、益母草碱、益母草定加乙醇制成各含1mg/ml溶液作对照液。取益母草标准对照药材1.0g加70%乙醇30ml，超声提取30分钟，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml溶解作对照液。取上述三液各10μl，分别点于同一硅胶g板，以丙酮-无水乙醇-盐酸（10：6：1）展开，105℃加热15分钟，放冷，喷稀碘化铋钾试液-三氯化铁试液（10：1）混合液。标品斑点对应位置显相同颜色斑点，比对标准药材斑点，对应率≥60%。
53.检查方法如下：干燥失重：不得过5.0%；炽灼残渣：不得过0.4%；重金属：不得过10ppm；含量测定方法如下：照高效液相色谱法测定。
54.色谱条件丙基酰胺键合硅胶柱。
55.流动相：乙腈-0.2%冰醋酸（80：20）。
56.蒸发光散射检测器检测。
57.理论板数≥6000。
58.对照液：取盐酸益母草碱标品加70%乙醇制成0.5mg/ml溶液备用。
59.供试液：取本品加70%乙醇制成1.0mg/ml溶液备用。
60.测定法：取上述二液各10μl注入液相色谱仪测定，并计算总生物碱含量。
61.功能包括：抗凝，抗血栓，抗心肌缺血，抗再灌损伤，扩张冠状动脉。
62.增加冠状动脉血流，改善微循环，强心，利尿，降血压。
63.止咳，化痰，平喘，兴奋呼吸中枢，肌松。
64.提高女性性功能，兴奋子宫，保肾。
65.贮藏条件为：阴凉，干燥，避光。
66.本领域技术人员在考虑说明书及实践这里公开的公开后，将容易想到本公开的其它实施方案。本技术旨在涵盖本公开的任何变型、用途或者适应性变化，这些变型、用途或者适应性变化遵循本公开的一般性原理并包括本公开未公开的本技术领域中的公知常识或惯用技术手段。说明书和实施例仅被视为示例性的，本公开的真正范围和精神由所附的权利要求指出。
67.应当理解的是，本公开并不局限于上面已经描述并在附图中示出的精确结构，并且可以在不脱离其范围进行各种修改和改变。本公开的范围应由所附的权利要求来限制。