1.本发明属于医用外用滴眼液技术领域，具体涉及一种黄精-鱼腥草滴眼液制备方法。
背景技术：
2.滴眼液是眼科疾病最常用的药物剂型之一，对于许多眼病，眼药水都有直接、快捷的治疗作用。随着人们的生活方式和工作条件的改变，用眼的时间越来越多，很容易患视疲劳症和干眼症。
3.而现有的滴眼液，以西药成分居多，同时多数含有防腐剂成分，这些成分在延长滴眼液的保质期的同时，也会对眼睛造成伤害。
4.鉴于此，申请此专利。
技术实现要素：
5.为了克服现有技术不足，本专利采用黄精多糖溶液和鱼腥草芳香水为主要原料，不含有西药成分和防腐剂成分，配方更加纯净，配制的滴眼液具有治疗干眼症、缓解视疲劳的功效。
6.本发明的目的是提供一种黄精-鱼腥草滴眼液制备方法。
7.一种黄精-鱼腥草滴眼液制备方法，所述黄精-鱼腥草滴眼液制备方法包括以下步骤：将黄精多糖提取液中加入氯化钠，再加入鱼腥草芳香水，用蒸馏水定容；得到的混合溶液中黄精多糖提取液的添加量为10wt％～50wt％，鱼腥草芳香水的添加量为40wt％～80wt％，氯化钠的添加量为8.0～8.5g/l；然后用氢氧化钠调ph至中性，混匀，过水系微孔滤膜后，灭菌，经无菌分装于经眼药水瓶中，即得所述的黄精-鱼腥草滴眼液。
8.根据本发明的具体实施方式的一种黄精-鱼腥草滴眼液制备方法，所述的方法包括以下步骤：将黄精多糖溶液100ml中加入8.0～8.5g氯化钠，再加入鱼腥草芳香水800ml，用蒸馏水定容至1000ml，然后用10％氢氧化钠调ph至7.0，混匀，过0.45μm水系微孔滤膜后，105℃灭菌30min，经无菌分装于经灭菌的8ml眼药水瓶中，即得所述的黄精-鱼腥草滴眼液。
9.根据本发明的具体实施方式的一种黄精-鱼腥草滴眼液制备方法，所述的黄精多糖溶液的制备方法，如下：
10.(1)取黄精多糖颗粒10g～30g倒入恒温至60℃～100℃的100ml热水中，搅拌至颗粒全部溶化，自然冷却至室温，加入400ml乙醇溶液，静置10h～12h；
11.(2)将醇沉液抽滤，滤液回收蒸馏后再利用，滤饼中加入100ml蒸馏水，小火加热复溶，加入0.3g一级针用活性炭小火煮沸30min，静置一夜，高速离心10min，残渣加入少量蒸馏水重复离心一次，混合上清液，即得所述的黄精多糖溶液。
12.根据本发明的具体实施方式的一种黄精-鱼腥草滴眼液制备方法，所述的黄精多糖溶液的制备方法，如下：
13.(1)取黄精多糖颗粒20g倒入恒温至90℃的100ml热水中，搅拌至颗粒全部溶化，自
然冷却至室温，加入400ml乙醇溶液，静置10h～12h；
14.(2)将醇沉液抽滤，滤液回收再利用，滤饼中加入100ml蒸馏水，小火加热复溶，加入0.3g一级针用活性炭小火煮沸30min，静置一夜，高速离心10min，残渣加入少量蒸馏水重复离心一次，混合上清液，即得所述的黄精多糖溶液。
15.根据本发明的具体实施方式的一种黄精-鱼腥草滴眼液制备方法，步骤(1)中所述的乙醇溶液的含醇量≥80％。
16.根据本发明的具体实施方式的一种黄精-鱼腥草滴眼液制备方法，步骤(2)中活性炭为活化活性炭，所述的活化活性炭的处理方法如下：将活性炭原料在105℃活化4h后，即得活化活性炭。
17.根据本发明的具体实施方式的一种黄精-鱼腥草滴眼液制备方法，所述的鱼腥草芳香水的制备方法如下：取干鱼腥草20g～60g，切成＜0.5cm的小段，放入精油提取器中，加入1000ml蒸馏水，浸泡2h,小火加热，控制温度，使收集液体的滴速为0.5ml/min～2.0ml/min，收集的液体即为所述的鱼腥草芳香水。
18.根据本发明的具体实施方式的一种黄精-鱼腥草滴眼液制备方法，所述的鱼腥草芳香水的制备方法如下：取干鱼腥草35g～50g，切成＜0.5cm的小段，放入精油提取器中，加入1000ml蒸馏水，浸泡2h,小火加热，控制温度，使收集液体的滴速为0.8ml/min～1.2ml/min，收集的液体即为所述的鱼腥草芳香水。
19.根据本发明的具体实施方式的一种黄精-鱼腥草滴眼液制备方法，所述的鱼腥草芳香水的制备方法如下：取干鱼腥草40g，切成＜0.5cm的小段，放入精油提取器中，加入1000ml蒸馏水，浸泡2h,小火加热，控制温度，使收集液体的滴速为1.0ml/min，收集的液体即为所述的鱼腥草芳香水。
20.根据本发明的具体实施方式的一种黄精-鱼腥草滴眼液制备方法，所述干鱼腥草的含水质量百分比为10％～55％。
21.上述原料中，原料的功能效果如下：
22.黄精性平味甘，入肺脾肾经。黄精具有补气及滋阴的双重作用。补气作用主要表现在补中气、肺气、肾气等方面，养阴作用主要表现在滋养胃阴、肝阴、肾阴、心阴等方面。而且，黄精属于食药两用植物，具有安全性和有效性双重功效。
23.黄精多糖是黄精提取物中的一个重要活性物质。近年来药理研究报道，黄精多糖能提高血清中免疫球蛋白水平，提高血液中白细胞和血红蛋白水平，因此具有免疫激发、免疫促进作用，是一类非特异性免疫增强剂。所以制成滴眼液，可以抗炎、抗渗出、抗增生。
24.鱼腥草性辛，微寒。归肺经。具有清热解毒，消痈排脓，利水通淋的功效；并且属于食药两用植物，具有安全性和有效性双重功效。在眼科应用中，具有调节免疫功能、抗病原微生物作用、抗过敏作用。
25.鱼腥草芳香水的主要成为甲基正壬酮，目前针对甲基正壬酮的相关医学研究，金寄春，鱼腥草的有效成分甲基正壬酮及作用机制，甲基正壬酮具有增强免疫力，抗炎等作用，成分稳定，药效确切。
26.本发明的滴眼液的活性成分为黄精多糖提取液和鱼腥草芳香水。
27.与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
28.(1)本发明的一种黄精-鱼腥草滴眼液制备方法，其工艺步骤简单，制备成分低，同
时产品品质佳，黄精多糖和甲基正壬酮的含量稳定，所制得的黄精-鱼腥草滴眼液中黄精多糖的含量约为0.8％，甲基正壬酮的含量约为4ug/ml，适合工业化生产；
29.(2)利用本发明的方法制得的黄精-鱼腥草滴眼液，以黄精多糖溶液和鱼腥草芳香水为主要原料，不含有西药成分和防腐剂成分，配方更加纯净，具有治疗干眼症、缓解视疲劳的功效。
具体实施方式
30.为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明的技术方案进行详细的描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所得到的所有其它实施方式，都属于本发明所保护的范围。
31.本发明中采用的鱼腥草和黄精多糖颗粒于普通商业途径即可获得，在此不做过多的限制。
32.实施例1
33.本实施例提供了一种黄精-鱼腥草滴眼液制备方法，所述的方法包括以下步骤：将黄精多糖溶液500ml加入8.0g氯化钠，再加入鱼腥草芳香水800ml，用蒸馏水定容至500ml，然后用10％氢氧化钠调ph至7.0，混匀，过0.45μm水系微孔滤膜后，105℃灭菌30min，经无菌分装于经灭菌的8ml眼药水瓶中，即得所述的黄精-鱼腥草滴眼液。
34.根据本发明的具体实施方式的一种黄精-鱼腥草滴眼液制备方法，所述的黄精多糖溶液的制备方法，如下：
35.(1)取黄精多糖颗粒20g倒入恒温至60℃℃的100ml热水中，搅拌至颗粒全部溶化，自然冷却至室温，加入400ml乙醇溶液，静置10h；所述的乙醇溶液的含醇量≥80％；
36.(2)将醇沉液抽滤，滤液回收再利用，滤饼中加入100ml蒸馏水，小火加热复溶，加入0.3g一级针用活性炭小火煮沸30min，静置一夜，高速离心10min，残渣加入少量蒸馏水重复离心一次，混合上清液，即得所述的黄精多糖溶液。
37.所述的鱼腥草芳香水的制备方法如下：取干鱼腥草35g，切成＜0.5cm的小段，放入精油提取器中，加入1000ml蒸馏水，浸泡2h,小火加热，控制温度，使收集液体的滴速为0.8ml/min，收集的液体即为所述的鱼腥草芳香水；所述的活性炭为活化活性炭，活化活性炭的处理方法如下：将活性炭原料在105℃活化4h后，即得活化活性炭；所述干鱼腥草的含水质量百分比为10％。
38.实施例2
39.本实施例提供了一种黄精-鱼腥草滴眼液制备方法，所述的方法包括以下步骤：将黄精多糖溶液500ml中加入8.5g氯化钠，再加入鱼腥草芳香水400ml，用蒸馏水定容至1000ml，然后用10％氢氧化钠调ph至7.0，混匀，过0.45μm水系微孔滤膜后，105℃灭菌30min，经无菌分装于经灭菌的8ml眼药水瓶中，即得所述的黄精-鱼腥草滴眼液。
40.根据本发明的具体实施方式的一种黄精-鱼腥草滴眼液制备方法，所述的黄精多糖溶液的制备方法，如下：
41.(1)取黄精多糖颗粒30g倒入恒温至100℃的100ml热水中，搅拌至颗粒全部溶化，自然冷却至室温，加入400ml乙醇溶液，静置12h；所述的乙醇溶液的含醇量≥80％；
42.(2)将醇沉液抽滤，滤液回收再利用，滤饼中加入100ml蒸馏水，小火加热复溶，加入0.3g一级针用活性炭小火煮沸30min，静置一夜，高速离心10min，残渣加入少量蒸馏水重复离心一次，混合上清液，即得所述的黄精多糖溶液。
43.所述的鱼腥草芳香水的制备方法如下：取干鱼腥草50g，切成＜0.5cm的小段，放入精油提取器中，加入1000ml蒸馏水，浸泡2h,小火加热，控制温度，使收集液体的滴速为1.2ml/min，收集的液体即为所述的鱼腥草芳香水；所述的活性炭为活化活性炭，活化活性炭的处理方法如下：将活性炭原料在105℃活化4h后，即得活化活性炭；所述干鱼腥草的含水质量百分比为55％。
44.实施例3
45.本实施例提供了一种黄精-鱼腥草滴眼液制备方法，所述的方法包括以下步骤：将黄精多糖溶液400ml中加入8.0g氯化钠，再加入鱼腥草芳香水500ml，用蒸馏水定容至1000ml，然后用10％氢氧化钠调ph至7.0，混匀，过0.45μm水系微孔滤膜后，105℃灭菌30min，经无菌分装于经灭菌的8ml眼药水瓶中，即得所述的黄精-鱼腥草滴眼液。
46.根据本发明的具体实施方式的一种黄精-鱼腥草滴眼液制备方法，所述的黄精多糖溶液的制备方法，如下：
47.(1)取黄精多糖颗粒20g倒入恒温至90℃的100ml热水中，搅拌至颗粒全部溶化，自然冷却至室温，加入400ml乙醇溶液，静置10h；所述的乙醇溶液的含醇量≥80％；
48.(2)将醇沉液抽滤，滤液回收再利用，滤饼中加入100ml蒸馏水，小火加热复溶，加入0.3g一级针用活性炭小火煮沸30min，静置一夜，高速离心10min，残渣加入少量蒸馏水重复离心一次，混合上清液，即得所述的黄精多糖溶液；所述的活性炭为活化活性炭，活化活性炭的处理方法如下：将活性炭原料在105℃活化4h后，即得活化活性炭。
49.所述的鱼腥草芳香水的制备方法如下：取干鱼腥草20g，切成＜0.5cm的小段，放入精油提取器中，加入1000ml蒸馏水，浸泡2h,小火加热，控制温度，使收集液体的滴速为0.5ml/min，收集的液体即为所述的鱼腥草芳香水；所述干鱼腥草的含水质量百分比为10％。
50.实施例4
51.本实施例提供了一种黄精-鱼腥草滴眼液制备方法，所述的方法包括以下步骤：将黄精多糖溶液300ml中加入8.5g氯化钠，再加入鱼腥草芳香水600ml，用蒸馏水定容至1000ml，然后用10％氢氧化钠调ph至7.0，混匀，过0.45μm水系微孔滤膜后，105℃灭菌30min，经无菌分装于经灭菌的8ml眼药水瓶中，即得所述的黄精-鱼腥草滴眼液。
52.根据本发明的具体实施方式的一种黄精-鱼腥草滴眼液制备方法，所述的黄精多糖溶液的制备方法，如下：
53.(1)取黄精多糖颗粒20g倒入恒温至90℃的100ml热水中，搅拌至颗粒全部溶化，自然冷却至室温，加入400ml乙醇溶液，静置12h；所述的乙醇溶液的含醇量≥80％；
54.(2)将醇沉液抽滤，滤液回收再利用，滤饼中加入100ml蒸馏水，小火加热复溶，加入0.3g一级针用活性炭小火煮沸30min，静置一夜，高速离心10min，残渣加入少量蒸馏水重复离心一次，混合上清液，即得所述的黄精多糖溶液；所述的活性炭为活化活性炭，活化活性炭的处理方法如下：将活性炭原料在105℃活化4h后，即得活化活性炭。
55.所述的鱼腥草芳香水的制备方法如下：取干鱼腥草60g，切成＜0.5cm的小段，放入
精油提取器中，加入1000ml蒸馏水，浸泡2h,小火加热，控制温度，使收集液体的滴速为2.0ml/min，收集的液体即为所述的鱼腥草芳香水；所述干鱼腥草的含水质量百分比为15％。
56.实施例5
57.本实施例提供了所述的方法包括以下步骤：将黄精多糖溶液100ml中加入8.5g氯化钠，再加入鱼腥草芳香水800ml，用蒸馏水定容至1000ml，然后用10％氢氧化钠调ph至7.0，混匀，过0.45μm水系微孔滤膜后，105℃灭菌30min，经无菌分装于经灭菌的8ml眼药水瓶中，即得所述的黄精-鱼腥草滴眼液。
58.根据本发明的具体实施方式的一种黄精-鱼腥草滴眼液制备方法，所述的黄精多糖溶液的制备方法，如下：
59.(1)取黄精多糖颗粒20g倒入恒温至90℃的100ml热水中，搅拌至颗粒全部溶化，自然冷却至室温，加入400ml乙醇溶液，静置12h；所述的乙醇溶液的含醇量≥80％；
60.(2)将醇沉液抽滤，滤液回收再利用，滤饼中加入100ml蒸馏水，小火加热复溶，加入0.3g一级针用活性炭小火煮沸30min，静置一夜，高速离心10min，残渣加入少量蒸馏水重复离心一次，混合上清液，即得所述的黄精多糖溶液；所述的活性炭为活化活性炭，活化活性炭的处理方法如下：将活性炭原料在105℃活化4h后，即得活化活性炭。
61.所述的鱼腥草芳香水的制备方法如下：取干鱼腥草40g，切成＜0.5cm的小段，放入精油提取器中，加入1000ml蒸馏水，浸泡2h,小火加热，控制温度，使收集液体的滴速为1.0ml/min，收集的液体即为所述的鱼腥草芳香水；所述干鱼腥草的含水质量百分比为25％。
62.性能测试试验
63.1、黄精多糖含量检测方法(苯酚-硫酸法)：
64.(1)标准曲线的制作：
65.准确称取葡萄糖标准品(105℃烘干1～2h)5mg，用蒸馏水溶解并定容至25ml容量瓶中，即为标准储备液；精密移取该标准储备液0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00、15.00ml分别置于100ml容量瓶中，加水定容至刻度，摇匀，即为一系列标准使用液；分别准确移取上述标准使用液2.00ml于10ml刻度试管中，向各管中分别加入新蒸馏苯酚(5％)溶液1ml，摇匀，迅速加入浓硫酸5ml(滴加时注意不要碰试管壁)，立即摇匀，反应30min后，以试剂空白(0管)为参比，测得各标准使用液的吸光度值，以各标准使用液的浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
66.(2)黄精-鱼腥草滴眼液中多糖含量的测定：
67.准确移取黄精-鱼腥草滴眼液5.00ml于250ml容量瓶中，向管中加入蒸馏水定容、摇匀；将该稀释液再次稀释10倍后取2ml于10ml刻度试管中，加入新蒸馏苯酚(5％)溶液1ml，摇匀，迅速加入浓硫酸5ml(滴加时注意不要碰试管壁)，立即摇匀，反应30min后，以试剂空白(0管)为参比，测得黄精-鱼腥草滴眼液稀释液的吸光度值，代入标准曲线查得多糖的浓度。
68.(3)黄精-鱼腥草滴眼液中多糖含量的计算：
69.70.式中：x—1000毫升滴眼液中黄精多糖质量(g)；
71.c—标曲上查得多糖浓度(ug/ml)；
[0072]v0
—最终定容的容量瓶体积(10ml)；
[0073]
f—稀释倍数(50000)；
[0074]v1
—测量时取样体积(2ml)
[0075]
1000—单位换算。
[0076]
2.黄精-鱼腥草滴眼液中甲基正壬酮含量检测方法：
[0077]
(1)标准曲线的制作：
[0078]
准确称取甲基正壬酮标准品5mg，用无水乙醇溶解并定容至100ml容量瓶中，即为0.05mg/ml标准储备液；精密移取该标准储备液适量分别置于10ml容量瓶中，加无水乙醇定容至刻度，摇匀，即为浓度为2.0ug/ml～25.0ug/ml一系列标准使用液，将各标准使用液过0.22μm微孔滤膜，注入气相(气质)仪器中，以各标准使用液的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。
[0079]
(2)色谱条件：
[0080]
色谱柱：rxi-5ms色谱柱(30m
×
0.25mm，0.25μm)、ei离子源、离子源温度230℃、电压70ev、进样口温度230℃、接口温度250℃、分流比1:10、柱温为50℃保持5min后，以7℃/min，升至90℃保持2min后，以10℃/min，升至120℃保持4min后，以10℃/min，升至180℃保持5min后，以15℃/min，升至250℃保持15min、载气为氦气流速为1ml/min、进样量2μl。
[0081]
(3)黄精-鱼腥草滴眼液中甲基正壬酮含量的测定：
[0082]
准确量取黄精-鱼腥草滴眼液25.00ml于250ml容量瓶中，加入蒸馏水混匀，定容至刻度。精密量取该溶液25.00ml过活化后c8固相萃取柱(2ml甲醇活化，10ml蒸馏水洗涤后)，用10ml蒸馏水淋洗，淋洗液吹干后，用1.8ml乙酸乙酯：无水乙醇(7:3)洗脱，并定容至2.0ml，过0.22μm微孔滤膜，注入气相(气质)仪器中，测得甲基正壬酮峰面积，代入标准曲线查得甲基正壬酮的浓度，按下式计算黄精-鱼腥草滴眼液中甲基正壬酮含量：
[0083][0084]
式中：x—黄精-鱼腥草滴眼液中甲基正壬酮浓度(μg/ml)；
[0085]
c—标曲上查得甲基正壬酮浓度(μg/ml)；
[0086]v1
—洗脱液定容体积(ml)；
[0087]
250—黄精-鱼腥草滴眼液稀释后总体积(ml)；
[0088]
25—黄精-鱼腥草滴眼液稀释液过柱体积(ml)；
[0089]v0
—准确量取黄精-鱼腥草滴眼液体积(ml)。
[0090]
利用上述方法测的实施例1-3的黄精多糖和甲基正壬酮的含量，如下表1所示：
[0091]
表1黄精多糖和甲基正壬酮的含量
[0092]
项目黄精多糖含量(％)甲基正壬酮含量(ug/ml)实施例10.774.25实施例21.134.19实施例30.804.20
实施例40.823.99
[0093]
由表1可见，所制得的黄精-鱼腥草滴眼液中黄精多糖的含量约为0.8％，甲基正壬酮的含量约为4ug/ml，且黄精多糖和甲基正壬酮的含量稳定。
[0094]
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。