一种改善化疗后骨髓抑制的组合物、颗粒剂及制备方法与流程

1.本发明涉及中药领域，具体涉及一种改善化疗后骨髓抑制的组合物、颗粒剂及制备方法。


背景技术：

2.化疗后骨髓抑制通常指化疗后患者骨髓造血功能下降、骨髓中血细胞前体的活性下降，以外周血三系细胞的减少，尤其以粒细胞的减少为主要特点。骨髓抑制延缓了化疗的进程，且有可能导致严重的并发症而危及生命，化疗后骨髓抑制的研究受到广泛关注。目前临床多采用rhg-csf(简称短效升白剂)或peg-rhg-csf(简称长效升白剂)治疗化疗后骨髓抑制。短效升白剂或长效升白剂使用后均有发热、肌肉骨关节疼痛等不良反应，其中短效升白剂半衰期短，需反复用药、临床用量较大，长效升白针价格昂贵、部分地区未纳入医疗，上述情况均在一定程度上限制了此类药物的使用。因此，找到更有效的治疗药物成为目前相关研究重点。
3.中医改善化疗后骨髓抑制作用斐然，潜力巨大。广东省名老中医何世东教授创制的何氏生髓方(简称生髓方)在改善化疗后骨髓抑制等方面疗效显著，全方以菟丝子、淫羊藿、女贞子、枸杞子、黄芪、白术、鸡血藤共七味中药组成，全方共奏补肾生髓、健脾补气、补血活血之功。临床应用患者反馈良好，生髓效果稳定，安全性高。为了保护发明创造的专有权，尊重其劳动成果，也为了发明创造的推广应用，促进科技和经济的发展，故在此对何氏生髓方的生产及应用提出专利申请。
4.传统中医理论中并没有骨髓抑制的具体概念，但是结合骨髓抑制患者的临床症状，比如食欲不振、乏力、气短、汗出、畏寒等来判断，骨髓抑制患者多属于中医“虚劳”、“血虚”之范畴。再观化疗药物多为大寒大热等峻烈有毒之品，直中体内后与正气交争，扰乱中焦气血，久则累及脾肾，损伤精髓，暗耗阴血。中医经典理论认为脾主运化为后天之本、输布水谷之精微,为气血生化之源,五脏百骸皆赖以所养。肾为先天之本,主骨生髓,藏精生血。脾胃虚弱,健运失职,水谷精微不能正常输布,气血生化无源；肾精不足,髓海空虚,则精血无以化生。而中医历来对于该类虚症疾病治疗经验丰富，比如《理虚元鉴》就明确概括出:“治虚有三本,肺、脾、肾是也,肺为五脏之天,脾为百骸之母,肾为性命之根,治肺、治脾、治肾,治虚之道毕矣”的治疗精髓。历来医家充分贯彻该治疗理念，临床治疗多应用四物汤、四君子汤、八珍汤、左归丸、右归丸等经典补益之品，以补肺、健脾、益肾为法，最终都能收到较好的临床疗效。
5.针对现有技术中改善化疗后骨髓抑制层面存在的治疗价格昂贵以传统中医理论并无骨髓抑制具体概念的问题，寻找一种价格低廉且能够实现化疗后骨髓抑制的改善组合物十分必要。


技术实现要素：

6.本发明针对现有技术存在的问题，提供了一种改善化疗后骨髓抑制的组合物、颗
粒剂及制备方法，上述组合物制备方法简单，通过七种药物之间的复配，能够充分发挥各药物的功效，且各组分之间相互作用，协同增效，能够有效促进骨髓间充质干细胞的成骨分化，促进造血，改善造血微环境，从而实现化疗后骨髓抑制的改善。
7.为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
8.本发明提供了一种组合物，包括菟丝子、淫羊藿、女贞子、枸杞子、黄芪、白术和鸡血藤。
9.进一步地，所述的组合物按重量份数计，包括：9-12份菟丝子、9-12份淫羊藿、9-12份女贞子、9-12份枸杞子、18-22份黄芪、8-12份白术和12-16份鸡血藤。
10.优选地，所述的组合物按重量份数计，包括：10份菟丝子、10份淫羊藿、10份女贞子、10份枸杞子、20份黄芪、10份白术和15份鸡血藤。
11.优选地，所述菟丝子和淫羊藿的重量比为1:1。
12.优选地，所述女贞子和枸杞子的重量比为1:1。
13.优选地，所述黄芪和白术的重量比为2:1。
14.进一步地，本发明还提供了上述的组合物的制备方法，包括以下步骤：将菟丝子、淫羊藿、女贞子、枸杞子、黄芪、白术和鸡血藤加水浸泡，煎煮后合并煎液，滤过滤液浓缩后加糊精混匀，烘干粉碎，加入乙醇制成湿颗粒，干燥，整粒。
15.进一步地，所述浸泡的时间为30min。
16.进一步地，所述煎煮包括二次煎煮，即第一次煎煮和第二次煎煮。
17.进一步地，所述第一次煎煮的时间为1.5-2h，优选为2h，所述第二次煎煮的时间为0.5-1h，优选为1h。
18.进一步地，所述糊精的加入量为28-32g；优选为30g。
19.进一步地，所述乙醇的加入量为3-6g，优选为5g。
20.进一步地，本发明还提供的上述的组合物能够应用在制备治疗后骨髓抑制药物中。
21.本发明所取得的技术效果是：
22.本发明中的何氏生髓方(简称生髓方)全方以菟丝子、淫羊藿、女贞子、枸杞子、黄芪、白术、鸡血藤共七味常见中药组成。其中菟丝子性味辛、甘、平，归肝、肾、脾经，功在补益肝肾，固精缩尿，安胎，明目，止泻；淫羊藿归肝、肾经，主要功效为补肾阳，强筋骨，祛风湿，《本草纲目》中记载到：“生精补髓，养血益阳，强筋健骨，治一切虚损，耳聋目暗，眩晕虚痢”；女贞子性味甘、苦、凉，归肝、肾经，具有滋补肝肾，明目乌发的功效；枸杞味甘、平，归肝、肾经，具有滋补肝肾、益精明目的功效，为滋补肝肾，养血补精，明目之良药，《本草经集注》中记载到：“枸杞可补益精气，强盛阴道”；黄芪性味甘、微温，归脾、肺经，具有补气升阳、固表止汗、利水消肿、生津养血、行滞通痹、托毒排脓、敛疮生肌的功效，《本草备要》中记载黄芪：“生血，生肌，排脓内托，疮痈圣药。痘疹不起，阳虚无热者宜之”白术性味甘、苦、温，归脾、胃经，具有健脾益气，燥湿利水，止汗，安胎的功效，为健脾要药；鸡血藤性味苦甘温，归肝肾经，功善活血补血，调经止痛，舒筋活络。方中菟丝子、淫羊藿补肾阳为君，女贞子、枸杞子滋肾阴为臣，黄芪、白术补脾胃护后天为佐，鸡血籐补血活血为使。全方共奏补肾生髓、健脾补气、补血活血之功。临床应用患者反馈良好，生髓效果稳定，安全性高。在前期的研究工作中，我们使用网络药理学手段对于生髓方进行研究，结果显示生髓方中菟丝子、淫羊藿、女
贞子、枸杞子、黄芪、鸡血藤、白术均可促进骨髓增生、具备改善造血的正向促进功能。研究发现由黄芪得到的黄芪注射液可升高白细胞减少症模型小鼠的白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞数目。鸡血藤具有改善造血功能的作用，可通过多途径激活造血系统。鸡血藤能促进骨髓粒细胞分裂，使小鼠白细胞和骨髓有核细胞数目增加，对贫血小鼠的粒单系祖细胞的增殖也有明显的刺激作用。研究发现白术对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠白细胞及功能有明显的正向促进功能，还能显著提高正常小鼠的淋巴细胞功能。具体来说枸杞、黄芪、女贞子、菟丝子中含有的槲皮素可以增加骨髓间充质干细胞增殖活性，可以促进骨髓间充质干细胞的成骨分化，而骨髓间充质干细胞对骨髓中的造血干细胞不仅有机械支持作用，还能分泌多种生长因子(如il-6，il-11，lif，m-csf及scf等)来支持造血。槲皮素能够显著改善环磷酰胺致免疫低下的小鼠外周血白细胞计数，可以促进免疫细胞增殖、调节免疫抑制、提高机体免疫力，鸡血藤中含有的儿茶素，枸杞、黄芪、女贞子、菟丝子中和含有的槲皮素，黄芪、女贞子、菟丝子、淫羊藿中含有的山柰酚，鸡血藤、女贞子、淫羊藿中含有的木犀草素等成分能直接或间接作用于il-6、il-2、il-10、egfr,激活机体内造血功能，提升白细胞数量。木犀草素对人红细胞自然老化具有保护作用，可以延长红细胞的寿命。儿茶素可调节hbe、hbg、hba、hbb和hbd等造血基因、促红细胞生成素受体epor以及影响造血的关键转录因子myb、pu.1的表达，促进造血和红系祖细胞的增殖和分化。黄芪中含有的黄芪多糖可以提高胃癌术后辅助化疗(奥沙利铂+替吉奥sox)患者的免疫球蛋白、免疫细胞亚群及白细胞水平，改善免疫状态，促进后期康复。淫羊藿中含有的淫羊藿素通过调节t细胞极化，对itp小鼠具有促血小板生成的作用。从通路方面来说：pi3k-akt通路是细胞相应胞外生存和生长的信号的转导途径，是参与细胞生长、增殖、分化调节的信号转导通路。pi3k－akt通路与血液病密切相关。黄芪多糖能促进骨髓干细胞的增殖分化，上调pi3k和akt mrna的表达，提高ppi3k和p-akt的蛋白含量，提示黄芪多糖激活了pi3k/akt信号转导通路，黄芪多糖对骨髓干细胞的调控作用可能与pi3k/akt信号转导通路的关系密切。抑癌基因类脂磷酸酶pten可通过使pi3k活化产生的信使pip3去磷酸化而将其转变成pip2，使其失去活性，从而阻断akt磷酸化，对pi3k/akt信号通路起到负调节作用，黄芪多糖干预后，可下调pten mrna的表达，进而减少pi3k/akt信号转导通路活化的抑制，从而促进骨髓干细胞增殖。儿茶素可激活造血因子相关jak-stat信号通路，促进造血，改善造血微环境。本发明的组方通过合理的复配能够对改善化疗后骨髓抑制实现优异的协同功效。
具体实施方式
23.以下通过特定的具体实例说明本发明的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点与功效。本发明还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用，本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用，在没有背离本发明的精神下进行各种修饰或改变。
24.在进一步描述本发明具体实施方式之前，应理解，本发明的保护范围不局限于下述特定的具体实施方案；还应当理解，本发明实施例中使用的术语是为了描述特定的具体实施方案，而不是为了限制本发明的保护范围。
25.当实施例给出数值范围时，应理解，除非本发明另有说明，每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用。除非另外定义，本文中使用的所有技术和科
学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同意义。
26.值得说明的是，本发明中使用的原料均为普通市售产品，相关原料的规格和标准如表1所示，因此对其来源不做具体限定。
27.表1原辅料规格及质量标准
[0028][0029]
实施例1
[0030]
一种组合物，包括10份菟丝子、10份淫羊藿、10份女贞子、10份枸杞子、20份黄芪、10份白术和15份鸡血藤。以上七味，加水浸泡30分钟，煎煮二次，第一次煎煮2小时，第二次煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩，加入适量糊精混匀，烘干后粉碎，加入适量的乙醇制成湿颗粒，干燥，整粒，制成颗粒1000g，即得。
[0031]
对比例1
[0032]
一种组合物，包括10份菟丝子、10份淫羊藿、10份女贞子、10份枸杞子、20份五指毛桃、10份白术和15份鸡血藤。除药物种类加入不同外，制备方法同实施例1。
[0033]
对比例2
[0034]
一种组合物，包括10份菟丝子、10份淫羊藿、10份女贞子、10份枸杞子、20份黄芪、10份白术、15份鸡血藤、15份巴戟天和15份熟地黄。除药物种类加入不同外，制备方法同实施例1。
[0035]
一、本发明中组合物对小鼠化疗后骨髓抑制的影响
[0036]
试验方法：选择balb/c小鼠，随机分为5组，每组10只，其中一组作为空白组，一组为模型组，剩余各组为实例组，除空白组外，其余小鼠接种小鼠胃癌细胞(mfc，密度为1
×
107ml-1
)，每只0.2ml，当腋下肿瘤体积≥200mm3且无破溃时，胃癌荷瘤小鼠造模成功，在小鼠腹腔注射100mg/kg的环磷酰胺(ctx)，每天一次连续三天，建立小鼠化疗后骨髓抑制模型。造模成功后第二天各实例组灌胃给药各实例中的药剂0.2ml(颗粒溶解配置成3g/ml的溶液)，空白组和模型组给予等量生理盐水，每日一次，连续七天；末次给药后，小鼠摘眼球取血，与枸橼酸钠按照9:1比例混合，检测白细胞计数(wbc)、红细胞计数(rbc)、血红蛋白总量(hb)以及血小板计数(plt)，将结果统计至表2。
[0037]
表2各组对小鼠血常规指标影响
[0038]
[0039]
(注：与空白组相比，
△
：p＜0.05；
△△
：p＜0.01；与模型组相比，*：p＜0.05；**：p＜0.01)。
[0040]
由上表可知，与空白组相比，模型组小鼠的wbc、rbc、hb以及plt均显著降低，本发明中实施例1组与模型组相比，wbc、rbc、hb以及plt均极显著提高。当使用五指毛桃替代黄芪时，或另外加入巴戟天以及熟地黄时，如对比例1和对比例2所示，对比例1组与模型组相比，小鼠wbc极显著提高，rbc和plt显著提高，hb提高不显著；对比例2组与模型组相比，小鼠wbc极显著提高，plt显著提高，rbc和hb提高不显著，由此可知，本发明组合物可有效改善小鼠化疗后骨髓抑制情况。
[0041]
二、本发明中组合物改善化疗相关骨髓抑制的有效性说明
[0042]
注：
[0043]
1.研究设计中每例患者的实验室检查结果均分为前后两个阶段，第一阶段以化疗开始日期作为起点，以两周期(42天)化疗结束作为终点，第二阶段以第三周期化疗开始日期作为起点，以四周期化疗结束(42天)作为终点，每一个患者每一阶段的血常规结果均做折线图，每个折线图均做趋势线，本发明将第一阶段与第二阶段进行对比，以此来阐述说明。
[0044]
2.病例基本情况说明：总共入组11例病例，其中男性3例，女性6例，平均年龄57岁，每一个病例第一阶段所测血常规次数与第二阶段所测血常规次数相等，所有病例第一阶段共测血常规86次，所有病例第二阶段共测血常规86次。
[0045]
每例患者做第一、第二阶段血常规中各相关指标的折线图，然后做折线图的趋势线，并记录每条趋势线的斜率。第一、第二阶段同一指标斜率同正时，值越小表示该阶段该项数据变化越稳定；一正一负时，斜率为正表示该项数据上升，斜率为负表示该项数据下降，斜率为正的阶段对应的项纳入越稳定的类别；斜率同为负，认为负值越大，该项数据越稳定，该阶段该项数据纳入越稳定。
[0046]
研究参照《世界卫生组织抗癌药物急性及亚急性毒性反应分度标准》对于化疗后血常规中粒细胞计数、白细胞计数、血红蛋白、血小板计数等多项指标进行分级，并对第一、二阶段各级骨髓抑制发生情况进行统计。
[0047]
表3世界卫生组织抗癌药物急性及亚急性毒性反应分度标准
[0048][0049]
初步研究实验结果
[0050]
(1)第一阶段、第二阶段数据趋势线斜率统计结果：
[0051]
表4.两阶段数据趋势线斜率统计
[0052][0053]
表5.两阶段数据趋势线斜率稳定性统计
[0054][0055][0056]
(2)第一阶段、第二阶段各度骨髓抑制情况的比较
[0057]
表6.第一阶段、第二阶段白细胞抑制情况比较
[0058][0059]
表7.第一阶段、第二阶段中性粒细胞抑制情况比较
[0060][0061]
表8.第一阶段、第二阶段血小板抑制情况比较
[0062][0063]
表9.第一阶段、第二阶段血红蛋白抑制情况比较
[0064][0065]
临床观察结果分析：
[0066]
从表5中可以看出，第二阶段白细胞计数、中性粒细胞计数、红细胞计数、血小板计数、血红蛋白趋势线的斜率稳定性均较第一阶段上升。
[0067]
从表6-8中可以看出，白细胞计数在临床观察的第二阶段，iii度骨髓抑制出现0次，iv度骨髓抑制出现0次，而第一阶段iii度骨髓抑制出现10次，iv度骨髓抑制出现7次。中性粒细胞计数在临床观察的第二阶段，iii度骨髓抑制出现1次，iv度出现0次，而第一阶段iii度骨髓抑制出现7次，iv度骨髓抑制出现8次。血小板计数在临床观察的第二阶段，iii度骨髓抑制出现3次，iv度骨髓抑制出现0次，而第一阶段iii度骨髓抑制出现8次，iv度骨髓抑制出现3次。血红蛋白在临床观察的第二阶段，iii度骨髓抑制出现4次，iv度骨髓抑制出现1次，而第一阶段iii度骨髓抑制出现9次，iv度骨髓抑制出现5次。
[0068]
该临床观察初步结果显示：对于化疗后的骨髓抑制，随着口服生髓方时间的延长，骨髓抑制的变化逐渐稳定，发展为iii、iv度骨髓抑制的机会变小，因此，“生髓方”可能可以
较稳定的促进并维持骨髓造血。
[0069]
最后应当说明的是，以上内容仅用以说明本发明的技术方案，而非对本发明保护范围的限制，本领域的普通技术人员对本发明的技术方案进行的简单修改或者等同替换，均不脱离本发明技术方案的实质和范围。