一种肉苁蓉超微粉及其制备方法和应用与流程

1.本发明涉及中药炮制领域，具体涉及一种肉苁蓉超微粉及其制备方法和应用。


背景技术：

2.肉苁蓉(学名：cistanche deserticola ma)，别名寸芸、苁蓉、查干告亚(蒙语)，是一种寄生在沙漠树木梭梭根部的寄生植物，从梭梭寄主中吸取养分及水分。肉苁蓉性状为：肉质茎，呈长圆柱形或下部稍扁，略弯曲，长3-375px，下部较粗，直径5-375px；向上渐细，直径2-375px。肉苁蓉素有“沙漠人参”之美誉，具有极高的药用价值，是中国传统的名贵中药材。具有补肾阳，益精血，润肠道；主肾阳虚衰；精血不足之阳痿；遗精；白浊；尿频余沥；腰痛脚弱；耳鸣目花；月经衍期；宫寒不孕；肠燥便秘等功效。
3.肉苁蓉超微粉通常是采用肉苁蓉鲜干片进行超微破碎得到，肉苁蓉鲜干片就是用新鲜肉苁蓉直接切片风干获得的饮片。现有技术中有通过优化肉苁蓉鲜干片的干燥方式再进行超微破碎的记载；例如：中国专利文献cn111265569a中公开的一种肉苁蓉超微粉的制备方法，其中就公开了先采用真空微波干燥的方式对肉苁蓉片进行干燥，然后再经过风循环环境对其进行干燥，最后对干燥后的肉苁蓉片进行超微粉碎。
4.无论是采用上述超微粉的制备工艺，还是现有技术中其他的超微粉碎工艺，对获得的超微粉中有效成分含量进行检测得知，有效成分的含量并没有明显提高，尤其是其中的主要活性成分松果菊苷、毛蕊花糖苷、苯乙醇苷等，这些活性成分的含量并未有显著变化。


技术实现要素：

5.因此，本发明的目的在于提供能够显著提高肉苁蓉超微粉中主要活性成分含量的一种肉苁蓉超微粉及其制备方法和应用。
6.一种肉苁蓉超微粉的制备方法，包括：
7.原料获取：获取除杂后的新鲜肉苁蓉；
8.增效：切段、蒸制并收集蒸制过程中的液体；
9.打浆：将增效后的肉苁蓉与收集的液体混合打浆获得浆料；
10.干燥：将浆料在65-75℃进行干燥；
11.粉碎：对干燥后的肉苁蓉进行超微破碎即可。
12.所述蒸制为常压蒸制，蒸制时间为至少10min，优选为10-30min，更优选为20min。
13.所述肉苁蓉超微粉的粒径小于300目；优选的，所述粉碎步骤的过程为：先将干燥后的肉苁蓉进行初粉碎获得目数在20目以上的初级粉末，再采用低温超微粉碎的方式获得目数在300目以上的超微粉。
14.低温超微粉碎时的温度为2-8℃。
15.所述干燥步骤中，干燥的时间为20-28h，优选为24h；所述干燥的温度优选为70℃。
16.所述增效步骤中，切段的长度为8-30cm，优选为20cm。
17.一种肉苁蓉超微粉，采用上述的一种肉苁蓉超微粉的制备方法制备得到。
18.上述的一种肉苁蓉超微粉在制备润肠通便药物中的应用。
19.本发明技术方案，具有如下优点：
20.1.本发明提供的一种肉苁蓉超微粉的制备方法，其中采用蒸制后的新鲜肉苁蓉和蒸制水进行混合打浆并在65-75℃条件范围内进行干燥，利用干燥后的物料进行破碎得到超微粉；本发明通过上述方法中蒸制、与蒸制水混合破碎打浆、65-75℃条件范围内干燥的方式相结合，可以有效达到将超微粉中主要活性成分松果菊苷、毛蕊花糖苷、苯乙醇苷等的含量显著提高的目的。通过试验验证可知，与常规肉苁蓉鲜干片采用65-75℃干燥后进行超微破碎的手段相比，本发明中松果菊苷等主要活性成分的含量可以提高几十上百倍，效果十分显著。
21.2.本发明提供的一种肉苁蓉超微粉的制备方法中，干燥步骤只需一次即可，操作更加简单，能耗更低。
22.3.本发明提供的一种肉苁蓉超微粉的制备方法中，优先采用初粉碎获得粒径目数在20目以上的初级粉末，再采用低温超微粉碎的方式获得粒径目数在300目以上的超微粉的方式；初粉碎时，粒径相对较大，不会存在粘附的情况，进一步超微粉碎时采用低温超微粉碎的方式，可以有效克服肉苁蓉中糖类将较细的颗粒粘附在超微粉碎机壁上导致粉碎困难的问题，实现均匀超微粉碎的目的。
附图说明
23.为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
24.图1是本发明实施例1和对比例1的超微粉中松果菊苷的含量对比图；
25.图2是本发明实施例1和对比例1的超微粉中毛蕊花糖苷的含量对比图；
26.图3是本发明实施例1和对比例1的超微粉中两苷的含量对比图；
27.图4是本发明实施例1和对比例1的超微粉中苯乙醇苷的含量对比图；
28.图5是本发明实施例1和对比例1的超微粉中苯乙醇苷类的含量对比图；
29.图6是本发明实施例1和对比例1的超微粉中环烯醚萜类的含量对比图；
30.图7是本发明实施例1和对比例1的超微粉中总黄酮的含量对比图；
31.图8是本发明实施例1和对比例1的超微粉中甜菜碱的含量对比图；
32.图9是本发明实施例1和对比例1的超微粉中粗多糖的含量对比图；
33.图10是本发明实施例1和对比例1的超微粉中总糖的含量对比图；
34.图11是本发明实施例1和对比例1的超微粉中氨基酸的含量对比图；
35.图12是本发明实施例1和对比例1的超微粉中蛋白质的含量对比图。
具体实施方式
36.提供下述实施例是为了更好地进一步理解本发明，并不局限于所述最佳实施方式，不对本发明的内容和保护范围构成限制，任何人在本发明的启示下或是将本发明与其
他现有技术的特征进行组合而得出的任何与本发明相同或相近似的产品，均落在本发明的保护范围之内。
37.实施例中未注明具体实验步骤或条件者，按照本领域内的文献所描述的常规实验步骤的操作或条件即可进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规试剂产品。
38.实施例1
39.采用四批次的新鲜肉苁蓉，分别编号为1、2、3、4。采用该四批次的新鲜肉苁蓉进行如下超微粉的制备：
40.(1)取原料新鲜肉苁蓉净制，除去杂质；
41.(2)将整根新鲜肉苁蓉切成约20cm小段；
42.(3)将切好的小段肉苁蓉放入蒸锅中进行蒸制，同时收集蒸制过程中从肉苁蓉析出的液体，蒸制时间为20min；
43.(4)将蒸制后的小段肉苁蓉与收集的液体一同加入到打浆机中进行湿法粉碎；
44.(5)将固液混合物均匀平铺到托盘上，将托盘放入鼓风干燥箱中进行烘干，烘干温度为70℃，烘干时间为24h，期间翻动浆液使其受热均匀；
45.(6)将烘干的固体进行粗粉碎获得初级粉末，初级粉末的粒径的目数达到20目以上即可；
46.(7)将初级粉末置于超微粉碎机中进行超微粉碎，对肉苁蓉粉进行筛分，筛分出目数小于300目的颗粒重新进行粉碎，目数≥300目的粉末即为超微粉。
47.实施例2
48.采用与实施例1不同的另一批次的新鲜肉苁蓉，本实施例中将其编号为5，分为四份，利用该新鲜肉苁蓉进行如下超微粉的制备：
49.(1)取原料新鲜肉苁蓉净制，除去杂质；
50.(2)将整根新鲜肉苁蓉切成约20cm小段；
51.(3)将切好的小段肉苁蓉放入蒸锅中进行蒸制，同时收集蒸制过程中从肉苁蓉析出的液体，四份新鲜肉苁蓉蒸制时间分别为0min、10min、20min、30min；
52.(4)将蒸制后的小段肉苁蓉与收集的液体一同加入到打浆机中进行湿法粉碎；
53.(5)将固液混合物均匀平铺到托盘上，将托盘放入鼓风干燥箱中进行烘干，烘干温度为70℃，烘干时间为24h，期间翻动浆液使其受热均匀；
54.(6)将烘干的固体进行粗粉碎获得初级粉末，初级粉末的粒径的目数达到20目以上即可；
55.(7)将初级粉末置于超微粉碎机中进行超微粉碎，对肉苁蓉粉进行筛分，筛分出目数小于300目的颗粒重新进行粉碎，目数≥300目的粉末即为超微粉。
56.实施例3
57.采用实施例1中任一批次的新鲜肉苁蓉，本实施例中采用编号为1的新鲜肉苁蓉，该新鲜肉苁蓉进行如下超微粉的制备：
58.(1)取原料新鲜肉苁蓉净制，除去杂质；
59.(2)将整根新鲜肉苁蓉切成约20cm小段；
60.(3)将切好的小段肉苁蓉放入蒸锅中进行蒸制，同时收集蒸制过程中从肉苁蓉析
出的液体，四份新鲜肉苁蓉蒸制时间分别为20min；
61.(4)将蒸制后的小段肉苁蓉与收集的液体一同加入到打浆机中进行湿法粉碎；
62.(5)将固液混合物均匀平铺到托盘上，将托盘放入鼓风干燥箱中进行烘干，烘干温度为75℃，烘干时间为22h，期间翻动浆液使其受热均匀；
63.(6)将烘干的固体进行粗粉碎获得初级粉末，初级粉末的粒径的目数达到20目以上即可；
64.(7)将初级粉末置于超微粉碎机中进行超微粉碎，对肉苁蓉粉进行筛分，筛分出目数小于300目的颗粒重新进行粉碎，目数≥300目的粉末即为超微粉。
65.实施例4
66.采用实施例1中任一批次的新鲜肉苁蓉，本实施例中采用编号为1的新鲜肉苁蓉，该新鲜肉苁蓉进行如下超微粉的制备：
67.(1)取原料新鲜肉苁蓉净制，除去杂质；
68.(2)将整根新鲜肉苁蓉切成约20cm小段；
69.(3)将切好的小段肉苁蓉放入蒸锅中进行蒸制，同时收集蒸制过程中从肉苁蓉析出的液体，蒸制时间为20min；
70.(4)将蒸制后的小段肉苁蓉与收集的液体一同加入到打浆机中进行湿法粉碎；
71.(5)将固液混合物均匀平铺到托盘上，将托盘放入鼓风干燥箱中进行烘干，烘干温度为65℃，烘干时间为26h，期间翻动浆液使其受热均匀；
72.(6)将烘干的固体进行粗粉碎获得初级粉末，初级粉末的粒径的目数达到20目以上即可；
73.(7)将初级粉末置于超微粉碎机中进行超微粉碎，对肉苁蓉粉进行筛分，筛分出目数小于300目的颗粒重新进行粉碎，目数≥300目的粉末即为超微粉。
74.对比例1
75.与实施例1进行对比，本实施例中无蒸制、打浆的步骤，具体过程如下：
76.(1)取原料新鲜肉苁蓉净制，除去杂质；
77.(2)将整根新鲜肉苁蓉切成约0.3cm的小片；
78.(3)将切好的小片肉苁蓉平铺到托盘上，将托盘放入鼓风干燥箱中进行烘干，烘干温度为70℃，烘干时间为24h，烘干期间翻动肉苁蓉使其受热均匀；
79.(4)将烘干的肉苁蓉进行粗粉碎获得初级粉末，初级粉末的粒径的目数达到20目以上即可；
80.(5)将初级粉末置于超微粉碎机中进行超微粉碎，对肉苁蓉粉进行筛分，筛分出目数小于300目的颗粒重新进行粉碎，目数≥300目的粉末即为超微粉。
81.试验例1
82.将实施例1和对比例1中的制备得到的不同批次的肉苁蓉超微粉进行有效成分含量的检测，分别检测出超微粉中松果菊苷、毛蕊花糖苷、苯乙醇苷、苯乙醇苷类、环烯醚萜类、总黄酮、甜菜碱、粗多糖、总糖、氨基酸、蛋白质的含量。
83.其中，松果菊苷、毛蕊花糖苷采用药典中记载的方法进行检测；
84.苯乙醇苷：包括苁蓉苷a、管花苷a、异毛蕊花糖苷、2
’‑
乙酰毛蕊花糖苷、管花苷b，上述各个成分的含量采用《hplc法同时测定肉苁蓉饮片中8种成分的含量》中的检测方法对
其进行检测；
85.苯乙醇苷类：包括肉苁蓉苷a、管花苷a、异毛蕊花糖苷、2
’‑
乙酰毛蕊花糖苷、管花苷b、松果菊苷、毛蕊花糖苷；
86.环烯醚萜类：包括京尼平苷酸与8-表马钱子酸(8-表番木鳖酸)，上述各个成分的含量采用《hplc法同时测定肉苁蓉饮片中8种成分的含量》中的检测方法对其进行检测；
87.粗多糖：采用《保健食品功效成分的检测方法》第一节多糖的检测中公开的方法一“粗多糖的苯酚-硫酸分光光度测定法”进行测量；
88.总黄酮：采用《保健食品理化及卫生指标检验与评价技术指导原则(2020年版)》中第二部分第十五章中的“保健食品中总黄酮的测定”进行测量；
89.甜菜碱：采用高效液相色谱法测定甜菜碱的含量，高效液相色谱法的色谱条件为：流动相为80:20的乙腈-水，检测波长196nm，柱温30℃，流速1.0ml/min；
90.氨基酸：gb5009.124-2016；
91.总糖：gb/t 10782-2006；
92.蛋白质：gb 5009.5-2016(第一法)；
93.检测结果如图1-图12所示。
94.该图1-图12中，1-1表示编号为1的批次的肉苁蓉按照实施例1方法制备得到的肉苁蓉超微粉，1-2表示编号为1的批次的肉苁蓉按照对比例1方法制备得到的肉苁蓉超微粉；2-1表示编号为2的批次的肉苁蓉按照实施例1方法制备得到的肉苁蓉超微粉，2-2表示编号为2的批次的肉苁蓉按照对比例1方法制备得到的肉苁蓉超微粉；以此类推，不再赘述。
95.通过对实施例1和对比例1的含量结果进行方差分析，分析结果如下表1所示。
96.表1
97.[0098][0099]
通过上述检测得到的表1和图1-图12的结果可知：松果菊苷提高约134倍左右，毛蕊花糖苷提高约93倍左右，两苷(松果菊苷+毛蕊花糖苷)提高约126倍左右，苯乙醇苷提高约14倍左右，苯乙醇苷类提高约51倍左右，粗多糖提高约2倍左右，总黄酮提高约10倍左右。即，松果菊苷、毛蕊花糖苷、苯乙醇苷、粗多糖、总黄酮都有不同程度的显著提升；而环烯醚萜类物质、甜菜碱、氨基酸、蛋白质、总糖则变化不大。
[0100]
同时，将实施例2制备得到的超微粉进行检测，得到的各成分的含量如下表2所示。
[0101]
表2
[0102]
[0103][0104]
通过上述表2结合实施例1的检测结果可知：通过本发明的一种肉苁蓉超微粉的制备方法制备得到的肉苁蓉超微粉，可以显著提高松果菊苷、毛蕊花糖苷、苯乙醇苷等主要活性成分的含量，相比现有技术中公开的常规超微粉而言，效果十分显著。
[0105]
并且，本试验例还对实施例3和4制备得到的肉苁蓉超微粉中的有效成分含量也进行了检测，检测结果表明：本发明实施例3和4与实施例1中的1-1的结果差异并不显著，证明实施例3和实施例4的方法也可以显著提高松果菊苷、毛蕊花糖苷、苯乙醇苷等主要活性成分的含量。
[0106]
试验例2-润肠通便小鼠实验
[0107]
1材料和方法
[0108]
1.1样品
[0109]
实施例1中编号1的肉苁蓉超微粉，性状为浅黄色粉末。肉苁蓉饮片的人体推荐剂量为每日3g/60kgbw，置于阴凉干燥处保存，受试物用千分之二的羧甲基纤维素钠溶液配制，供实验用。
[0110]
1.2实验动物
[0111]
选用北京华阜康生物科技股份有限公司[许可证号：scxk(京)2014-0004]繁殖的16g～20g昆明种健康清洁级雄性小鼠共60只，分为6组，每组10只，其中30只作为实验一批，进行小肠运动实验；另30只分为3组，每组10只，作为实验二批，进行粪便重量的测定。
[0112]
1.3剂量
[0113]
肉苁蓉饮片推荐剂量为成人(按60kg体重计)每日3g，相当于0.05g/kgbw/d。实验设人体推荐量的30倍，即每日1.50g/kgbw。
[0114]
1克肉苁蓉超微粉中含有1克肉苁蓉饮片。
[0115]
取5.0g样品粉末，加羧甲基纤维素钠溶液至50.0ml，为受试物。
[0116]
空白对照组与模型对照组给予等量羧甲基纤维素钠溶液。
[0117]
备注：为消除羧甲基纤维素钠对实验的影响，配制使用的无菌水均换成羧甲基纤维素钠溶液。
[0118]
每日一次经口给予，连续灌胃7d后测各项指标。小鼠灌胃体积为0.15ml/10gbw。同时设空白对照组(0g/kgbw)和模型对照组(0g/kgbw)，用羧甲基纤维素钠溶液代替无菌水，每日灌胃体积与各受试物组相同。各剂量组均给予维持饲料。
[0119]
1.4仪器与试剂
[0120]
bs223s电子天平(2008007)、t1000电子天平(2014005)、bs2202s电子天平(2014007)、解剖器械、直尺、灌胃针、活性炭粉、阿拉伯树胶、盐酸洛哌丁胺。
[0121]
1.5实验方法
[0122]
1.5.1小肠运动实验
[0123]
连续给予受试物7d后，各组小鼠禁食不禁水16h。模型对照组和肉苁蓉超微粉组灌胃给予盐酸洛哌丁胺(4mg/kgbw)，空白对照组灌胃给予羧甲基纤维素钠溶液。给盐酸洛哌丁胺0.5h后，受试物组分别给予含相应受试样品的墨汁(含5％的活性炭、10％阿拉伯树胶)，空白对照组和模型对照组灌胃墨汁。25分钟后立即脱颈椎处死动物，打开腹腔分离肠系膜，剪取上端自幽门、下端至回盲部的肠管，置于托盘上，轻轻将小肠拉成直线，测量肠管长度为“小肠总长度”，从幽门至墨汁前沿为“墨汁推进长度”。
[0124]
按下式计算墨汁推进率：
[0125][0126]
得出的墨汁推进率再按下式进行数据转换，式中p为墨汁推进率，用小数表示。所得数据为计量资料，在小肠便秘模型成立的前提下，受试样品组小鼠的墨汁推进率显著高于模型对照组，即可判定该项指标结果阳性。
[0127]
1.5.2小鼠粪便重量的测定
[0128]
连续给予受试物7d后，各组小鼠禁食不禁水16h。空白对照组灌胃给予羧甲基纤维素钠溶液，模型对照组和肉苁蓉超微粉组灌胃给予盐酸洛派丁胺(5mg/kgbw)。给盐酸洛派丁胺0.5h后，空白对照组和模型对照组小鼠用墨汁灌胃，受试物组给予含受试样品的墨汁，动物均单笼饲养，正常饮水进食。从灌墨汁开始，记录每只动物首粒排黑便时间以及6h内排黑便重量。所得数据为计量资料，在小肠便秘模型成立的前提下，6h排黑便重量明显高于模型对照组，可判定该项指标结果阳性。
[0129]
1.6数据处理
[0130]
用excel表格进行数据处理。采用t检验，计算p值，p值》0.05，结论：各组均数间差异无显著性；用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；将p值与0.05、0.01和0.001作比较，得出是否具有显著性差异，进而得到实验结果。
[0131]
1.7结果判定依据
[0132]
6h内排黑便重量和排黑便粒数任一项结果阳性，同时小肠运动实验和排便时间任一项结果阳性，可判定该受试样品通便功能动物实验结果阳性。
[0133]
2结果
[0134]
2.1肉苁蓉超微粉对小鼠体重的影响
[0135]
表3各组小鼠的初始体重
[0136][0137]
由表3可见，小鼠的初始体重在两批实验动物各组与模型对照组(0g/kgbw)组间比较，差异均无显著性(p》0.05)。即小鼠的初始体重在各组间较为均衡。
[0138]
表4肉苁蓉超微粉对小鼠体重的影响
[0139][0140]
由表4可见，经口给予小鼠不同肉苁蓉超微粉7d，小鼠的体重在两批实验动物各受试物组与模型对照组(0g/kgbw)间比较，差异均无显著性(p》0.05)。即肉苁蓉超微粉对小鼠体重无不良影响。
[0141]
2.2肉苁蓉超微粉对小肠运动的影响
[0142]
表5肉苁蓉超微粉对墨汁推进率的影响
[0143][0144]
#：与空白对照组比较有显著差异
[0145]
*：与模型对照组比较有显著差异
[0146]
由表5可知，模型对照组与空白对照组比较，墨汁推进率有显著降低(p《0.001)，表明造模成功。与模型对照组(0g/kgbw)比较，肉苁蓉超微粉组小鼠墨汁推进率显著提高(p《0.01)；即肉苁蓉超微粉组能提高便秘模型小鼠小肠运动实验墨汁推进率。
[0147]
2.3肉苁蓉超微粉对排便重量的影响
[0148]
表6肉苁蓉超微粉对排便重量的影响
[0149][0150]
#：与空白对照组比较有显著差异
[0151]
*：与模型对照组比较有显著差异
[0152]
由表6可知，模型对照组与空白对照组比较，排便重量显著减少(p《0.05)，表明模型建立成功。与模型对照组(0g/kgbw)比较，肉苁蓉超微粉组的小鼠排便重量显著增加(p《0.05)，即肉苁蓉超微粉组能显著增加便秘模型小鼠排便重量。
[0153]
3小结
[0154]
肉苁蓉超微粉组具有润肠通便功能，受试物对小鼠体重增长无不良影响；因此，本发明的肉苁蓉超微粉可以应用在制备润肠通便药物中。
[0155]
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。