本发明属于组织工程，尤其涉及一种复合型脱细胞羊膜组织诱导再生活性材料与其制备方法及用途。
背景技术：
1、公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
2、羊膜位于胎盘的最内层，为厚度20-500μm的半透明膜，拥有优越的细胞外基质成分，被认为是天然支架中最好的材料而广泛运用于组织工程学中。脱细胞羊膜是一种脱细胞材料，有许多优点，如良好的生物相容性、稳定性，具有一定的血管弹性、可塑变形性，抗炎、抗感染、无毒、低免疫原性和无致瘤性等，已被用于各种部位损伤修复的研究及部分临床应用，如眼角膜浅表层缺损的临时性覆盖、皮肤浅层缺损、软骨轻度损伤后的修复及外周神经再生等领域。在体外，脱细胞羊膜还可用作细胞培养的生物载体，特别是干细胞的体外培养。但发明人发现：目前脱细胞羊膜仍存在组织诱导再生活性低、力学强度低、降解过快等问题。
技术实现思路
1、为了解决上述问题，本发明提供一种能产业化生产的复合型脱细胞羊膜组织诱导再生活性材料，用于支撑细胞贴附、增殖、迁移和分化。此外，该材料具备力学性能好、抗降解能力强及生物相容性好等特性。
2、为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
3、本发明的第一个方面，提供了一种复合型脱细胞羊膜组织诱导再生活性材料的制备方法，包括：
4、将在无菌条件下剥取的羊膜进行初步轻度脱细胞、洗除脱细胞剂后，与天然蛋白等进行仿生复合交联，必要时补加肝素等活性物，得到高性能的改性材料；
5、将所述改性材料进行多次彻底脱细胞，洗净脱细胞剂、采用保存液封存、灭菌，即得。
6、本发明通过加入天然蛋白与羊膜实现有效复合与交联对脱细胞羊膜进行保护，提高了脱细胞羊膜的组织诱导再生活性、力学性能、抗降解性及生物相容性等性能。
7、本发明的第二个方面，提供了上述方法制备的复合型脱细胞羊膜组织诱导再生活性材料。
8、本发明的第三个方面，提供了上述复合型脱细胞羊膜组织诱导再生活性材料在制备组织工程支架和软组织、硬组织再生性修复中的应用，上述复合型脱细胞羊膜组织诱导再生活性材料的用途为：角膜、皮肤、血管、神经、肌腱、腱鞘、骨、软骨、口腔等组织的再生性修复等。
9、本发明的有益效果
10、(1)本发明制备的复合型脱细胞羊膜组织诱导再生活性材料生物相容性好、免疫原性低，易于细胞贴附、增殖、迁移和分化，具有促愈合作用。
11、(2)在复合型脱细胞羊膜组织诱导再生活性材料上补充天然蛋白等仿生复合交联，可明显提高材料的交联度，既减轻后续多次彻底脱细胞过程中脱细胞剂对羊膜胶原纤维的破坏，又增加了材料的组织诱导再生活性、力学性能及抗降解性能。
12、(3)本发明工艺简单实用，产品重现性好，易实现产业化推广。
1.一种复合型脱细胞羊膜组织诱导再生活性材料的制备方法，其特征在于，包括：
2.如权利要求1所述复合型脱细胞羊膜组织诱导再生活性材料的制备方法，其特征在于，所述天然蛋白为胶原、丝素、明胶、角蛋白、球蛋白中的一种或多种。
3.如权利要求1所述复合型脱细胞羊膜组织诱导再生活性材料的制备方法，其特征在于，所述仿生复合交联的具体步骤为：将初步轻度脱细胞处理后的羊膜浸渍在天然蛋白溶液中，振荡处理，使天然蛋白沉积在羊膜上，再加入交联剂进行交联，即得。
4.如权利要求1所述复合型脱细胞羊膜组织诱导再生活性材料的制备方法，其特征在于，仿生复合交联过程中，补加活性物；优选地，所述活性物为肝素。
5.如权利要求1所述复合型脱细胞羊膜组织诱导再生活性材料的制备方法，其特征在于，所述交联剂为甲醛、戊二醛、京尼平、edc/nhs中的一种或多种。
6.如权利要求3所述复合型脱细胞羊膜组织诱导再生活性材料的制备方法，其特征在于，天然蛋白溶液的浓度为0.10％-2.0％w/v，肝素的浓度为0.10％-4.0％w/v。
7.如权利要求3所述复合型脱细胞羊膜组织诱导再生活性材料的制备方法，其特征在于，交联剂的浓度为0.10％-4.0％w/v，交联时间为0.50-2.0h；优选地，在制备交联剂溶液时，以mes为缓冲剂调ph值至4.5-7.0。
8.如权利要求1所述复合型脱细胞羊膜组织诱导再生活性材料的制备方法，其特征在于，初步轻度脱细胞剂溶液为0.10％-2.0％w/v的十二烷基硫酸钠、tritonx-100，edta、脱氧胆酸钠、原钒酸钠、胰酶、核酸酶、磷脂酶中的一种或多种，优选地，脱细胞处理时间10-60min；
9.如权利要求1-8任一项所述的方法制备的复合型脱细胞羊膜组织诱导再生活性材料。
10.如权利要求9所述的复合型脱细胞羊膜组织诱导再生活性材料，其特征在于，所述复合型脱细胞羊膜组织诱导再生活性材料的用途为：角膜、皮肤、血管、神经、肌腱、腱鞘、骨、软骨、口腔的再生性修复。