一种用于阴道微生态调节的妇科流体敷料制剂的制备的制作方法

1.本技术涉及生物医药技术的领域，更具体地说，它涉及一种用于阴道微生态调节的妇科流体敷料制剂的制备。


背景技术：

2.女性阴道微生态失衡是引起妇科外阴及阴道炎症反复发作的主要原因。在维持阴道微生态平衡的因素中，雌激素、乳酸杆菌及阴道酸碱度(ph)起着至关重要的作用。在正常的生理情况下，雌激素使阴道上皮增生变厚并富含糖原，增加对病原体的抵抗力；糖原在阴道乳酸杆菌作用下分解为乳酸，维持阴道正常的酸性环境(ph≤4.5，多在3.8～4.4)，抑制其他寄生菌及其病原体的生长，这是阴道的自净作用。
3.然而，阴道微生态平衡一旦被打破或外源病原体侵入，即可导致炎症发生，如雌激素水平改变或阴道ph升高；而目前，市场上出现的妇科凝胶多为中药成分，且主要是通过抑制有害病菌来达到治疗妇科病的目的，但是在杀灭致病菌的同时也杀灭了很多益生菌，导致阴道内菌群失调、阴道免疫力低下，从而致使阴道炎反复发作，恢复周期长。
4.因此，维持女性阴道的微生态平衡的同时缩短恢复周期，达到快速治疗女性阴道微生态失衡的目的，是摆在广大科研和医务工作者面前的重要难题。


技术实现要素：

5.为了维持女性阴道的微生态平衡的同时缩短恢复周期，达到快速治疗女性阴道微生态失衡的目的，本技术提供一种用于阴道微生态调节的妇科流体敷料制剂的制备。
6.本技术提供一种用于阴道微生态调节的妇科流体敷料制剂的制备，采用如下的技术方案：一种用于阴道微生态调节的妇科流体敷料制剂的制备，包括以下步骤：s1：预先将分别占流体敷料制剂的质量比为1-10％的甘油、0.1-1％的卡波姆以及0.2-2％的中和剂加入搅拌釜中，加热至温度为60-75℃，搅拌均匀，得到第一混合液；s2：然后往搅拌釜中加入分别占流体敷料制剂的质量比为0.1-2％的渗透压调节液、0.1-2％的乳酸以及0.1-2％的防腐剂以及纯化水，与第一混合液搅拌均匀后，即得到流体敷料制剂；所述渗透压调节液包括pbs缓冲液和益生元组合。
7.通过采用上述技术方案，渗透压调节液富含丰富的益生元组合，可以促进乳杆菌绝对数量的数十倍增长，稳固乳杆菌在阴道菌群中的优势地位，也是促进阴道微生态平衡恢复的关键一环；其次，渗透压调节液-pbs缓冲液，可以改善阴道微生态渗透压，对粘膜无刺激，加速粘膜细胞内外液体交换、加快细胞新陈代谢、为细胞分裂增殖提供必要的离子体系支持、与合并用药形成协同作用，缩短治愈周期，同时，乳酸可快速恢复阴道弱酸环境，纠正阴道ph值，并维持阴道ph值在3.8～4.5之间，抑制其他寄生菌的过度生长，协同促进乳杆菌在阴道菌群中处于优势地位。最后，卡波姆和甘油，具有保湿、修复、促愈合的功效，可以阻断病原体定值，起到类雌激素的作用，提高阴道上皮的局部免疫，快速修复粘膜损伤。本
申请采用“四管齐下”的机理，维持女性阴道的微生态平衡的同时，快速恢复健康的阴道微生态环境、加速粘膜修复、降低炎症的反复发作以及缩短疾病治愈周期。
8.优选的，预先将分别占流体敷料制剂的质量比为0.22-0.44％的燕麦提取物、0.15-0.26％的苦参提取物以及0.03-0.05％的蔓生百部提取物混合均匀，得到第二混合液，然后再加入搅拌釜中与其他组分混合均匀。
9.通过采用上述技术方案，苦参提取物是从豆科苦参属的植物苦参中提取的一种生物碱，具有消炎抗菌的功效，通过加入苦参提取物对金色葡萄球菌和大肠杆菌具有较好的抑制作用，而对乳酸杆菌没有抑制作用，以此使得流体敷料制剂能够抑制有害的细菌，并使得有益细菌不容易被杀灭，有利于维持女性阴道的微生态平衡。
10.蔓生百部提取物具有很强的抗炎抑菌的作用，通过加入蔓生百部提取物，有利于促进对金色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制作用，可以使得流体敷料制剂的抑菌效果加快，但是蔓生百部提取物会对乳酸杆菌产生抑制作用，在杀灭有害细菌的同时也会将有益细菌—乳酸杆菌杀灭，使得阴道内环境洁净失去平衡。
11.然而，研发人员在研发过程中意外发现，通过加入燕麦提取物与苦参提取物以及蔓生百部提取物互相配合，有利于促进有益细菌的繁殖，同时，能够抑制有害细菌的生长，维持最佳环境和菌群的稳定，并且，还使得流体敷料制剂更好地渗透进入皮肤，从而使得流体敷料制剂的抑菌效果加快，以此使得恢复周期进一步缩短。这是因为燕麦提取物中的某些活性成分会抑制蔓生百部提取物对乳酸杆菌的抑制作用，使得流体敷料制剂在抑制有害细菌的同时不会杀灭有益细菌，同时，由于燕麦β-葡聚糖独特的直链分子结构，可作为苦参提取物以及蔓生百部提取物中的活性成分的载体，使得流体敷料制剂的透皮吸收性能增强，以此加快流体敷料制剂的抑菌性，缩短恢复周期，从而达到快速治疗女性阴道微生态失衡的目的。
12.优选的，所述pbs缓冲液占渗透压调节液的质量百分比为70-88％，所述益生元组合占渗透压调节液的质量百分比为12-30％。
13.优选的，所述pbs缓冲液占渗透压调节液的质量百分比为80％，所述益生元组合占渗透压调节液的质量百分比为20％。
14.优选的，所述燕麦提取物的制备方法包括以下步骤：s1：将原料燕麦芽加入水中，调节ph值至9-10，然后在65-68℃下加热1-2h，得到燕麦混合液；s2：将热处理后的液体冷却，离心，收集上清液，调节上清液的ph值为5-6，然后向上清液中加入分别占原料的质量比为0.04-0.06％的淀粉酶和0.06-0.08％的纤维素酶进行酶解反应，反应结束后，抽滤，收集抽滤液，对抽滤液进行灭酶处理，即得到燕麦提取物。
15.通过采用上述技术方案，采用上述制备得到的燕麦提取物具有较高的活性，使得燕麦提取物的透皮吸收性能提高，进而使得苦参提取物以及蔓生百部提取物中的活性成分更好地渗透进入皮肤，使得流体敷料制剂的抑菌效果加快，以此使得恢复周期缩短。
16.优选的，所述中和剂为氨丁三醇、三乙醇胺以及胺基甲基丙醇中的一种或两种。
17.通过采用上述技术方案，中和剂使卡波姆沿主链产生负电荷，在碳链骨架上形成负电荷，排斥力使其形成伸展的结构，一旦卡波姆被中和至ph值在5-9之间，其分子体积则膨胀1000倍，直径增加10倍。因此，采用上述中和剂用于调节体系的酸碱度，并有助于提高
体系的凝胶性。
18.优选的，所述苦参提取物的制备方法包括以下步骤：s1：将苦参于粉碎机中粉碎，然后加入质量浓度为60-70％的乙醇，于55-65℃下加热提取3-5h，同时脱色，重复提取3-5次后合并滤液，过滤，得到苦参粗提取物；s2：将苦参粗提取物过滤除杂，浓缩除溶剂，获得苦参提取物。
19.通过采用上述技术方案，采用上述方法制备得到的苦参提取物与燕麦提取物以及蔓生百部提取物互相配合，有利于增强对金色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制作用，提高对有害细菌的生长的抑制，促进有益细菌的繁殖，维持女性阴道的微生态平衡。
20.优选的，所述蔓生百部提取物的制备方法步骤如下：将蔓生百部加水煎煮2-3h，过滤，浓缩，然后加入乙醇混合均匀，静置过滤，回收乙醇，得到浓缩液，然后微波萃取，浓缩，干燥，即得蔓生百部提取物。
21.通过采用上述技术方案，采用上述方法制备得到的蔓生百部提取物的纯度较高，杂质少，蔓生百部提取物中的活性成分较高，使得蔓生百部提取物的抑菌效果增强。
22.优选的，所述防腐剂为苯氧乙醇、尼泊金甲酯、山梨酸以及羟苯甲酯中的一种或多种。
23.通过采用上述技术方案，采用上述物质中的一种或多种作为流体敷料制剂的防腐剂，有利于提高流体敷料制剂对有害细菌的抑制效果，促进有益细菌的生长。
24.综上所述，本技术包括以下至少一种有益技术效果：1.本技术采用“四管齐下”的机理，维持女性阴道的微生态平衡的同时，快速恢复健康的阴道微生态环境、加速粘膜修复、降低炎症的反复发作以及缩短疾病治愈周期。
25.2.通过加入燕麦提取物与苦参提取物以及蔓生百部提取物互相配合，有利于促进有益细菌的繁殖，同时，能够抑制有害细菌的生长，维持最佳环境和菌群的稳定，并且，还使得流体敷料制剂更好地渗透进入皮肤，从而使得流体敷料制剂的抑菌效果加快，以此使得恢复周期缩短。
26.3.采用本技术制备得到的燕麦提取物具有较高的活性，使得燕麦提取物的透皮吸收性能提高，进而使得苦参提取物以及蔓生百部提取物中的活性成分更好地渗透进入皮肤，使得流体敷料制剂的抑菌效果加快，以此使得恢复周期缩短。
具体实施方式
27.以下结合实施例对本技术作进一步详细说明。
28.制备例1一种燕麦提取物的制备方法，包括以下步骤：s1：将10kg的原料燕麦芽加入200l水中，调节ph值至9，然后在65℃下加热1h，得到燕麦混合液；s2：将热处理后的液体冷却，离心，收集上清液，用柠檬酸调节上清液的ph值为5，然后向上清液中加入4g的淀粉酶和8g的纤维素酶进行酶解反应，反应结束后，抽滤，收集抽滤液，对抽滤液升温至90℃进行灭酶处理，即得到燕麦提取物。
29.制备例2一种燕麦提取物的制备方法，包括以下步骤：
s1：将10kg的原料燕麦芽加入200l水中，调节ph值至10，然后在68℃下加热2h，得到燕麦混合液；s2：将热处理后的液体冷却，离心，收集上清液，用柠檬酸调节上清液的ph值为6，然后向上清液中加入6g的淀粉酶和6g的纤维素酶进行酶解反应，反应结束后，抽滤，收集抽滤液，对抽滤液升温至90℃进行灭酶处理，即得到燕麦提取物。
30.制备例3一种苦参提取物的制备方法包括以下步骤：s1：将苦参于粉碎机中粉碎，然后加入质量浓度为60％的乙醇，于55℃下加热提取3h，同时脱色，重复提取3次后合并滤液，过滤，得到苦参粗提取物；s2：将苦参粗提取物过滤除杂，浓缩除溶剂，获得苦参提取物。
31.制备例4一种苦参提取物的制备方法包括以下步骤：s1：将苦参于粉碎机中粉碎，然后加入质量浓度为70％的乙醇，于65℃下加热提取5h，同时脱色，重复提取5次后合并滤液，过滤，得到苦参粗提取物；s2：将苦参粗提取物过滤除杂，浓缩除溶剂，获得苦参提取物。
32.制备例5蔓生百部提取物的制备方法步骤如下：将蔓生百部加水煎煮2h，过滤，浓缩，然后加入乙醇混合均匀，静置过滤，回收乙醇，得到浓缩液，然后微波萃取，浓缩，干燥，即得蔓生百部提取物。
33.实施例1一种用于阴道微生态调节的妇科流体敷料制剂的制备，包括以下步骤：s1：预先将甘油、卡波姆以及中和剂(具体用量见表1)加入搅拌釜中，加热至温度为60℃，搅拌均匀，得到第一混合液；s2：预先将燕麦提取物、苦参提取物以及蔓生百部提取物(具体用量见表1)混合均匀，得到第二混合液，s3：先将第一混合液降至室温，然后将第二混合液加入搅拌釜中与第一混合液混合，同时，加入纯化水搅拌均匀，然后加入渗透压调节液、乳酸以及防腐剂(具体用量见表1)，混合均匀后，即得到流体敷料制剂；其中，渗透压调节液包括pbs缓冲液和益生元组合。
34.实施例2-3与实施例1的区别在于：各组分的用量不同。具体用量见表1，各组分的用量单位均为kg。
35.表1
实施例4与实施例3的区别在于：s2中燕麦提取物采用制备例1所制备得到的燕麦提取物。
36.实施例5与实施例3的区别在于：s2中燕麦提取物采用制备例2所制备得到的燕麦提取物。
37.实施例6与实施例3的区别在于：s2中苦参提取物采用制备例3所制备得到的苦参提取物。
38.实施例7与实施例3的区别在于：s2中苦参提取物采用制备例4所制备得到的苦参提取物。
39.实施例8与实施例3的区别在于：s2中蔓生百部提取物采用制备例5所制备得到的蔓生百部提取物。
40.实施例9与实施例3的区别在于：s2中燕麦提取物采用制备例2所制备得到的燕麦提取物；苦参提取物采用制备例4所制备得到的苦参提取物；蔓生百部提取物采用制备例5所制备得到的蔓生百部提取物。
41.对比例1与实施例3的区别在于：s2中不加入燕麦提取物。
42.对比例2与实施例3的区别在于：s2中不加入蔓生百部提取物。
43.对比例3与实施例3的区别在于：s2中不加入苦参提取物。
44.对比例4与实施例3的区别在于：s2中不加入燕麦提取物和蔓生百部提取物。
45.对比例5与实施例3的区别在于：s2中不加入燕麦提取物和苦参提取物。
46.对比例6与实施例3的区别在于：s2中不加入苦参提取物和蔓生百部提取物。
47.对比例7与实施例3的区别在于：s2中燕麦提取物占流体敷料制剂的质量比为0.14％，苦参提取物占流体敷料制剂的质量比为0.32％，蔓生百部提取物占流体敷料制剂的质量比为0.1％。
48.实验1本实验参考qhkz063-2015《妇科凝胶(抑菌型)》，分别抽取实施例3与对比例3分别检测其各项性能，检测结果见表2。
49.表2检测项目指标实施例3对比例3细菌菌落数/(cfu/g)≤20041162真菌菌落数/(cfu/g)≤1002685大肠菌落不得检出，抑菌率≥50％97.6484.19金黄色葡萄球菌不得检出，抑菌率≥50％98.1590.61根据表2中检测结果可知，实施例3以及对比例3的各项性能都符合生产要求，但是实施例3的性能明显优于对比例3的性能。
50.实验2抑菌测试试验抑菌试验主要采用抑菌圈法测试流体敷料制剂对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌以及乳酸杆菌的抑菌效果，具体试验方法包括如下步骤：(1)菌种活化：将4℃冰箱保存的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、乳酸杆菌转移至新鲜的营养琼脂斜面上，37℃培养18～24h。
51.(2)菌悬液的制备：将斜面上的菌苔用10ml灭菌生理盐水分两次洗到装有玻璃珠的锥形瓶中，放到摇床上200r/min振荡10min，将菌悬液浓度调整106cfu/ml。
52.(3)抑菌平板的制备：每个试管分装20ml熔化的营养琼脂培养基，试管口多余培养基用纸巾擦掉，加橡皮塞，7支一捆包扎，121℃灭菌20min，灭菌稍冷却后置于50℃恒温水浴锅保温。在超净工作台上，每个灭菌培养皿先加入1ml菌悬液，倒入20ml培养皿，充分混匀，吹干冷凝水，待凝固。
53.(4)牛津杯法：将灭菌牛津杯用无菌镊子夹出，先置于酒精灯火焰上迅速过一下火，再垂直放置培养基表面，轻轻按压，使杯底与培养基之间无缝隙。每个平板放置5个牛津杯，每个牛津杯注入200ul流体敷料制剂，中间用生理盐水作对照，流体敷料制剂不可溢出来；每种流体敷料制剂各做3个重复，37℃培养24小时，观察测量记录抑菌圈直径(mm)，测试结果如表3所示。
54.表3根据表3中对比例1-6的数据分别与实施例3对比可得，对比例4中没有加入燕麦提取物和蔓生百部提取物，流体敷料制剂对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为6.4mm，对大肠杆菌的抑菌圈直径为7.1mm，对乳酸杆菌的抑菌圈直径≤1mm，说明苦参提取物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有抑制作用，而对乳酸杆菌没有抑制作用。
55.对比例5中没有加入燕麦提取物和苦参提取物，流体敷料制剂对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为7.5mm，对大肠杆菌的抑菌圈直径为8.4mm，对乳酸杆菌的抑菌圈直径6.8mm，说明蔓生百部提取物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有较好的抑制作用，对乳酸杆菌也具有抑制作用。
56.对比例6中没有加入苦参提取物和蔓生百部提取物，流体敷料制剂对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为2.4mm，对大肠杆菌的抑菌圈直径为3.1mm，对乳酸杆菌的抑菌圈直径≤1mm，说明燕麦提取物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有抑制作用，而对乳酸杆菌没有抑制作用。
57.对比例3中没有加入苦参提取物，流体敷料制剂对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为8.1mm，对大肠杆菌的抑菌圈直径为9.2mm，对乳酸杆菌的抑菌圈直径为≤1mm，说明加入燕麦提取物和蔓生百部提取物对乳酸杆菌没有抑制作用，这是因为燕麦提取物中的某些活性成分会抑制蔓生百部提取物对乳酸杆菌的抑制作用，使得流体敷料制剂在抑制有害细菌的同时不会杀灭有益细菌。
58.根据表3中对比例1与实施例3的数据对比可得，实施例3在对比例1的基础上新加入了燕麦提取物，流体敷料制剂对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为13.3mm，对大肠杆菌的抑菌圈直径为14.6mm，对乳酸杆菌的抑菌圈直径为≤1mm，说明同时加入燕麦提取物与苦参提取物以及蔓生百部提取物互相配合，不仅有利于增强流体敷料制剂对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制作用，还使得流体敷料制剂在抑制有害细菌的同时不会杀灭有益细菌。
59.根据表3中实施例6-7的数据分别与实施例3对比可得，实施例6-7中苦参提取物采用本技术的制备方法制备所得，相比于实施例3而言，流体敷料制剂对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径提高了2mm左右，对大肠杆菌的抑菌圈直径提高了2mm左右，说明采用本技术的制备方法制备所得的苦参提取物，与燕麦提取物以及蔓生百部提取物互相配合，有利于增强对金色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制作用，提高对有害细菌的生长的抑制，促进有益细菌的繁殖，维持女性阴道的微生态平衡。
60.实验3本实验参考《消毒技术规范》(2002年版)，分别对上述实施例以及对比例所制备的流体敷料制剂对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌在不同作用时间下的灭菌率，实验重复三次，结果取其平均值，试验结果见表4。
61.表4表4根据表4中实施例3的数据分别与对比例1-6的数据对比可得，实施例3在30min时，
对金黄色葡萄球菌的灭菌率从68.36％升高至93.87％，相比于对比例5，升高了25％左右；对大肠杆菌的灭菌率从71.03％升高至95.63％，相比于对比例5，升高了25％左右，说明采用燕麦提取物与苦参提取物以及蔓生百部提取物互相配合，能够使得流体敷料制剂的抑菌效果加快。这是由于燕麦β-葡聚糖独特的直链分子结构，可作为苦参提取物以及蔓生百部提取物中的活性成分的载体，使得流体敷料制剂的透皮吸收性能增强，以此加快流体敷料制剂的抑菌性，缩短恢复周期，从而达到快速治疗女性阴道微生态失衡的目的。
62.以上均为本技术的较佳实施例，并非依此限制本技术的保护范围，故：凡依本技术的结构、形状、原理所做的等效变化，均应涵盖于本技术的保护范围之内。