岩藻多糖及其组合物在治疗多动症中的应用的制作方法

文档序号:31701467发布日期:2022-10-01 08:27阅读:276来源:国知局

1.本发明涉及生物技术领域,具体的,涉及岩藻多糖及其组合物在治疗多动症中的应用。


背景技术:

2.岩藻多糖,被称为墨角藻多糖、岩藻聚糖硫酸酯、褐藻糖胶、褐藻多糖硫酸酯等,主要来源于褐藻,是一类含有岩藻糖和硫酸基团的多糖。它具有多种生物学功能,如抗凝血、抗肿瘤、抗血栓、抗病毒、抗氧化和增强机体免疫机能等,因而被广泛地应用于医药领域和现代食品工业。
3.注意缺陷与多动障碍俗称多动症,指发生于儿童时期,与同龄儿童相比,以明显注意集中困难、注意持续时间短暂、活动过度或冲动为主要特征的一组综合征。目前将岩藻多糖应用于治疗多动症的相关研究非常罕见,因此需要开发一种适用于治疗多动症的岩藻多糖组合物。
4.岩藻多糖的提取方法一般为冷法提取、热水浸提、酸提、碱提等,但是大分子多糖不利于吸收,目前现有的提取方法一般获得大分子岩藻多糖,不利于儿童吸收,因此开发一种适用于儿童多动症的岩藻多糖迫在眉睫。


技术实现要素:

5.本发明提出岩藻多糖及其组合物在治疗多动症中的应用,解决了现有技术中的岩藻多糖在治疗多动症的领域中技术空白的问题。
6.本发明的技术方案如下:
7.岩藻多糖在制备治疗多动症的组合物中的应用。
8.作为进一步的技术方案,所述岩藻多糖的制备方法包括以下步骤:
9.s1、在海带浸泡液中加入复合酶、甲基磺酸钙进行酶解;
10.s2、灭酶;
11.s3、将酶解液加入乙醇溶液中充分搅拌后离心;
12.s4、弃上清液后加入稀盐酸制备成溶液进行超滤,干燥得到小分子岩藻多糖。
13.作为进一步的技术方案,所述复合酶包括β-葡聚糖水解酶、α-淀粉酶、碱性蛋白酶,三者的质量比为1:2:2。
14.作为进一步的技术方案,所述海带浸泡液为将海带粉碎后加水溶胀得到。
15.作为进一步的技术方案,所述水的质量为海带质量的8-10倍。
16.作为进一步的技术方案,所述复合酶的质量为海带浸泡液质量的1%-1.5%。
17.作为进一步的技术方案,所述甲基磺酸钙的质量为海带浸泡液的0.5%-1%。
18.作为进一步的技术方案,所述步骤s4中超滤时设置留分子量为5000。
19.本发明还提出一种含有岩藻多糖的组合物,包括以下重量份组分:小分子岩藻多糖10-15份、白术5-8份、茯苓3-5份、酸枣仁1-2份、薏苡仁8-10份、金银花4-5份,所述小分子
岩藻多糖为按照权利要求2-8任意一项所述的制备方法得到的小分子岩藻多糖。
20.本发明还提出含有岩藻多糖的组合物在制备治疗多动症的组合物中的应用。
21.本发明的有益效果为:
22.1、本发明中开创性的提出了将岩藻多糖在儿童多动症中的应用,能够起到养心安神、补脾平肝的作用,可在儿童多动症的治疗中发挥一定的效果。
23.2、本发明的还提出了一种岩藻多糖提取方法,通过复合酶以及甲基磺酸钙协同作用,不仅提高了岩藻多糖的提取率,还适用于在儿童多动症的治疗。其中β-葡聚糖水解酶、α-淀粉酶能够促进小分子多糖被酶解,甲基磺酸钙能够促进酶解反应的进程。
24.3、本发明中组合物,以岩藻多糖和薏苡仁为君药,治心肝、虚证调脾肾,清心平肝,安神定志,以白术、茯苓为臣药,补益肝肾、健脾养心,以酸枣仁为佐药,调补心肾,加强君臣药治疗作用,制约君、臣药的烈性,以金银花为使药,抵心肝火旺、痰火内扰证。
具体实施方式
25.下面将结合本发明实施例,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都涉及本发明保护的范围。
26.实施例中,岩藻多糖的提取率为干燥后提取物的量与海带的质量比的百分数。
27.岩藻多糖的纯度为液相测试测定得到。
28.实施例1
29.提取岩藻多糖:
30.s1、将海带粉碎后加水溶胀得到海带浸泡液,水的质量为海带质量的8倍;
31.s2、在海带浸泡液中加入1%的复合酶和0.5%的甲基磺酸钙在40-42℃进行酶解1h,复合酶为β-葡聚糖水解酶、α-淀粉酶、碱性蛋白酶的混合酶,质量比为1:2:2;
32.s3、煮沸灭酶;
33.s4、将酶解液加入2倍质量的乙醇溶液中充分搅拌后离心;
34.s5、弃上清液后加入稀盐酸制备成浓度为2%的溶液进行超滤,设置留分子量为5000,干燥得到小分子岩藻多糖。经计算,提取率为5.6%,纯度为32.4%。
35.实施例2
36.提取岩藻多糖:
37.s1、将海带粉碎后加水溶胀得到海带浸泡液,水的质量为海带质量的10倍;
38.s2、在海带浸泡液中加入1.5%的复合酶和1%的甲基磺酸钙在40-42℃进行酶解1.5h,复合酶为β-葡聚糖水解酶、α-淀粉酶、碱性蛋白酶的混合酶,质量比为1:2:2;
39.s3、煮沸灭酶;
40.s4、将酶解液加入2倍质量的乙醇溶液中充分搅拌后离心;
41.s5、弃上清液后加入稀盐酸制备成浓度为2%的溶液进行超滤,设置留分子量为5000,干燥得到小分子岩藻多糖。经计算,提取率为5.9%,纯度为31.5%。
42.实施例3
43.提取岩藻多糖:
44.s1、将海带粉碎后加水溶胀得到海带浸泡液,水的质量为海带质量的9倍;
45.s2、在海带浸泡液中加入1.2%的复合酶和0.8%的甲基磺酸钙在42-44℃进行酶解1h,复合酶为β-葡聚糖水解酶、α-淀粉酶、碱性蛋白酶的混合酶,质量比为1:2:2;
46.s3、煮沸灭酶;
47.s4、将酶解液加入2倍质量的乙醇溶液中充分搅拌后离心;
48.s5、弃上清液后加入稀盐酸制备成浓度为2%的溶液进行超滤,设置留分子量为5000,干燥得到小分子岩藻多糖。经计算,提取率为5.7%,纯度为31.9%。
49.实施例4
50.提取岩藻多糖:
51.s1、将海带粉碎后加水溶胀得到海带浸泡液,水的质量为海带质量的9倍;
52.s2、在海带浸泡液中加入1.2%的复合酶和0.8%的甲基磺酸钙在42-44℃进行酶解1h,复合酶为α-淀粉酶、碱性蛋白酶的混合酶,质量比为3:2;
53.s3、煮沸灭酶;
54.s4、将酶解液加入2倍质量的乙醇溶液中充分搅拌后离心;
55.s5、弃上清液后加入稀盐酸制备成浓度为2%的溶液进行超滤,设置留分子量为5000,干燥得到小分子岩藻多糖。经计算,提取率为5.2%,纯度为31.0%。
56.实施例5
57.提取岩藻多糖:
58.s1、将海带粉碎后加水溶胀得到海带浸泡液,水的质量为海带质量的9倍;
59.s2、在海带浸泡液中加入1.2%的复合酶和0.8%的甲基磺酸钙在42-44℃进行酶解1h,复合酶为β-葡聚糖水解酶、α-淀粉酶、碱性蛋白酶的混合酶,质量比为2:1:2;
60.s3、煮沸灭酶;
61.s4、将酶解液加入2倍质量的乙醇溶液中充分搅拌后离心;
62.s5、弃上清液后加入稀盐酸制备成浓度为2%的溶液进行超滤,设置留分子量为5000,干燥得到小分子岩藻多糖。经计算,提取率为5.4%,纯度为31.2%。
63.实施例6
64.将白术7份、茯苓4份、酸枣仁2份、薏苡仁9份、金银花4份混合后水煎提取,与12份实施例3得到的岩藻多糖混合造粒得到组合物。
65.动物实验
66.4周龄多动症模型shr大鼠30只,随机分成三组,每组十只,雌雄各半,实验组1灌服1g实施例6中的组合物,实验组2灌服1.5g实施例6中的组合物,空白组灌服0.9%生理盐水,每天上午灌服,灌服3天。在最后一次灌服后30min,用跳台法训练小鼠5min,训练后,对大鼠皮下注射亚硝酸钠,第二天在同一时间用跳台法测定大鼠的错误次数,结果如表1所示。
67.表1大鼠跳台实验结果
68.组别跳台错误次数空白组2.7
±
0.95实验组11.9
±
0.74实验组21.8
±
0.63
69.其中,实验组1和实验组2与空白组相比,p<0.05,均具有显著性差异,实验组1和2
之间不具有显著性差异,本发明的组合物能够显著降低大鼠跳台错误次数,说明灌服本发明的组合物后,大鼠主动回避反应更加迅速,学习记忆能力增强。
70.人群实验
71.疗效评价标准:
72.痊愈:上课时注意力集中,情绪较稳定,学习成绩基本达到同年龄儿童水平。
73.好转:动作减少,静坐时间较长,注意力稍集中,学习成绩有所上升。
74.未愈:症状与学习成绩无明显变化。
75.共有20例病例服用实施例6组合物,每日10g,服用28天,其中,男12例,女8例,年龄7-14岁。痊愈15例,好转4例,有效率95%,均无副作用。
76.典型病例
77.1、王某宇,男,10岁,本公司某员工之子,9岁时出现手腿动不停,说话不停,写作稳不住心,去儿童医院诊断为多动症,服用过治神经药,病情减缓,但半年仍未痊愈,服用本实施例6组合物,每天10g,28天后痊愈。
78.2、刘某欣,女,12岁,本公司某员工侄女,情绪不稳定,患儿纳呆,口渴多饮,喜动不安,诊断为儿童多动症;服用本发明的中药制剂28天后痊愈。
79.以上仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
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