用于抑制肿瘤生长情况的药物的效果检测方法

本发明涉及检测，具体涉及一种用于抑制肿瘤生长情况的药物的效果检测方法。

背景技术：

1、目前，以pd-1/pd-l1免疫检查点抑制剂和抗体偶联药物为代表的免疫疗法已成为膀胱癌治疗的新方向，吡柔比星、表柔比星、丝裂霉素、吉西他滨、顺铂等是目前针对膀胱癌的临床化疗常用药物。由于相关技术中对于化疗药物的治疗效果的评估方法一般是基于免疫缺陷型小鼠膀胱癌荷瘤模型，无法提供肿瘤生长的微环境，因此，无法准确检测该药物对原发肿瘤生长的抑制情况。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明提供了一种用于抑制肿瘤生长情况的药物的效果检测方法，包括：

2、提供药物治疗组的动物、阴性对照组的动物和空白对照组的动物，其中，药物治疗组的动物、阴性对照组的动物和空白对照组的动物均为原位膀胱肿瘤动物模型；

3、在预设周期内，向药物治疗组的动物按照预设频率施加目标药物；向阴性对照组的动物按照预设频率施加生理盐水；

4、在预设周期内，定期提取每一组动物的血清进行免疫调节性细胞因子检测，得到与每一组动物对应的免疫调节性细胞因子数量变化特征；

5、处死药物治疗组的动物、阴性对照组的动物和空白对照组的动物，并分别提取每一组动物的目标组织进行流式细胞术分析和病理切片分析，得到与每一组动物对应的目标细胞群体数量变化特征；

6、根据目标细胞群体数量变化特征和免疫调节性细胞因子数量变化特征，生成目标药物抑制肿瘤生长情况的检测结果。

7、根据本发明的实施例，分别提取每一组动物的目标组织进行流式细胞术分析和病理切片分析，得到与每一组动物对应的目标细胞群体数量变化特征，包括：

8、针对每一组动物，提取目标组织进行病理切片分析，得到目标细胞群体在目标组织的微环境中的数量分布特征；

9、提取目标组织进行流式细胞术分析，得到目标细胞群体数量在目标组织中的比例特征；

10、根据数量分布特征和比例特征，得到目标细胞群体数量变化特征。

11、根据本发明的实施例，上述用于检测药物抑制肿瘤生长情况的方法，还包括：

12、分别提取每一组动物的目标组织；

13、称量目标组织的重量和体积；

14、通过对比不同组动物的目标组织的重量和体积，得到目标药物的药物疗效评估结果。

15、根据本发明的实施例，原位膀胱肿瘤动物模型的建立方法包括：

16、在无菌环境中，通过无菌导尿管向小鼠的目标区域中注入无菌溶液，并将无菌导尿管置留在小鼠的尿道内，其中，目标区域表征用于生长肿瘤的区域；

17、通过无菌导尿管向目标区域内注入无菌多聚赖氨酸，经过第一预设时长后，排出目标区域中的内容物；

18、通过无菌导尿管向目标区域内注入目标细胞液，并移除无菌导尿管，得到原位膀胱肿瘤动物模型。

19、根据本发明的实施例，无菌多聚赖氨酸包括无菌多聚赖氨酸的磷酸缓冲盐溶液。

20、根据本发明的实施例，通过无菌导尿管向目标区域内注入无菌多聚赖氨酸，经过第一预设时长后，排出目标区域中的内容物，包括：

21、通过无菌导尿管向目标区域内注入无菌多聚赖氨酸；

22、无菌导尿管封闭后留在小鼠的尿道中；

23、经过第一预设时长后，开放无菌导尿管，并通过按压小鼠的下腹部，排出目标区域中的内容物。

24、根据本发明的实施例，第一预设时长包括20～30分钟。

25、根据本发明的实施例，通过无菌导尿管向目标区域内注入目标细胞液，并移除无菌导尿管，得到原位膀胱肿瘤动物模型，包括：

26、通过无菌导尿管以预设速率向目标区域内注入目标细胞液，经过第二预设时长后，移除无菌导尿管，得到原位膀胱肿瘤动物模型。

27、根据本发明的实施例，目标细胞液包括以下任意一种：鼠源细胞系、人源细胞系。

28、根据本发明的实施例，第二预设时长包括1～1.5小时。

29、根据本发明的实施例，由于采用原位膀胱肿瘤动物模型，可以采用流式细胞术检测到肿瘤生长的微环境中目标细胞的群体变化特征，结合免疫调节性细胞因子检测和病理切片的结果，可以解决相关技术中采用免疫缺陷型动物模型无法准确检测该药物对原发肿瘤生长的抑制情况的问题。

技术特征：

1.一种用于抑制肿瘤生长情况的药物的效果检测方法，包括：

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述分别提取每一组动物的目标组织进行流式细胞术分析和病理切片分析，得到与每一组动物对应的目标细胞群体数量变化特征，包括：

3.根据权利要求1所述的方法，还包括：

4.根据权利要求1所述的方法，其中，所述原位膀胱肿瘤动物模型的建立方法，包括：

5.根据权利要求4所述的方法，其中，所述无菌多聚赖氨酸包括无菌多聚赖氨酸的磷酸缓冲盐溶液。

6.根据权利要求4所述的方法，其中，所述通过所述无菌导尿管向所述目标区域内注入无菌多聚赖氨酸，经过第一预设时长后，排出所述目标区域中的内容物，包括：

7.根据权利要求6所述的方法，其中，所述第一预设时长包括20～30分钟。

8.根据权利要求4所述的方法，其中，所述通过所述无菌导尿管向所述目标区域内注入目标细胞液，并移除所述无菌导尿管，得到原位膀胱肿瘤动物模型，包括：

9.根据权利要求8所述的方法，其中，所述目标细胞液包括以下任意一种：鼠源细胞系、人源细胞系。

10.根据权利要求9所述的方法，其中，所述第二预设时长包括1～1.5小时。

技术总结
本发明公开了一种用于抑制肿瘤生长情况的药物的效果检测方法，包括：提供药物治疗组的动物、阴性对照组的动物和空白对照组的动物，其中，每一组动物均为原位膀胱肿瘤动物模型；在预设周期内，向药物治疗组的动物按照预设频率施加目标药物；向阴性对照组的动物按照预设频率施加生理盐水；在预设周期内，定期提取每一组动物的血清进行免疫调节性细胞因子检测，得到免疫调节性细胞因子数量变化特征；处死各组动物，并分别提取每一组动物的目标组织进行流式细胞术分析和病理切片分析，得到目标细胞群体数量变化特征；根据目标细胞群体数量变化特征和免疫调节性细胞因子数量变化特征，生成目标药物抑制肿瘤生长情况的检测结果。

技术研发人员：周静,沈德贇,肖峻
受保护的技术使用者：安徽省立医院（中国科学技术大学附属第一医院）
技术研发日：
技术公布日：2024/3/11