1.本发明涉及植物化学成分脂质体制备技术领域，尤其涉及一种卷柏精油脂质体的制备方法。
背景技术：
2.卷柏(selaginella tamariscina)，为蕨类植物门(pteridophyta)石松纲(lycopsida)卷柏目(selaginellales)卷柏科(selaginellaceae) 卷柏属(selaginella)植物，多年生草本，富含黄酮及苯丙素类化合物，其精油中具有较高含量的生育酚类化合物，以及特征性双黄酮类成分，对心脑血管、肌肉组织功能具有一定的调节作用。
3.由于精油在氧气、光照和热量的作用下，部分活性成分不稳定，易挥发降解，选择脂质体技术能够有效的提高卷柏精油的稳定性，同时也为其体内分布、消除、释放率等制剂相关研究提供基础。
技术实现要素：
4.本发明的目的在于提供一种卷柏精油脂质体的制备方法，具有稳定性好、粒径均匀、分散性好等优点；该制备方法易操作，可得到包封率75%以上的卷柏精油脂质体。
5.为达到上述目的，本发明采用的技术方案是：一种卷柏精油脂质体的制备方法，包括如下加工步骤：s1)将二棕榈酸磷脂酰胆碱和胆固醇的混合物加入容器中，并向容器中加入有机溶剂，加热，搅拌溶解后，减压旋转蒸发至器壁上形成薄膜，真空干燥；s2)加入pbs缓冲液，进行超声处理、和/或将容器旋转，形成混悬液，其中，超声处理、和/或容器旋转至器壁上薄膜完全脱落，用以均匀分散形成混悬液；s3)将卷柏精油缓慢加入混悬液中，低温下进行超声处理，0.45μm微孔滤膜过滤，制得制得卷柏精油脂质体。
6.作为进一步的优化，s1中所述混合物与有机溶剂的质量比为1:(20-30)，优选1:20；其中，所述二棕榈酸磷脂酰胆碱与胆固醇的质量比为(2-5):1，优选3:1。
7.作为进一步的优化，s1中所述有机溶剂为氯仿-乙醇混合溶液，二者的体积比为(4-8):1，优选(5-6):1。
8.作为进一步的优化，s1中的加热温度为40-60℃，旋转蒸发的转速为30-50r/min，蒸发温度40-55℃，真空干燥的真空度为0.08-0.1mpa。
9.作为进一步的优化，s2中所述pbs缓冲液的ph值为6.2-7.2，优选6.6-6.8；pbs缓冲液与s1中混合物的质量比为(20-30):1，优选(25-30):1。
10.作为进一步的优化，s3中所述卷柏精油与s1中混合物的质量比为1:(6-8)，优选1:6。
11.作为进一步的优化，s3中所述卷柏精油的制备方法为：取干燥的卷柏（selaginella tamariscina）地上部分，粉碎过10目筛，加入溶剂，40-50℃浸12-24h，过滤
液加入无水硫酸钠干燥，减压回收过滤液，制得卷柏精油；作为进一步的优化，s3中所述卷柏精油含有0.2-2%的穗花杉双黄酮、和/或扁柏双黄酮、和/或银杏双黄酮。
12.作为进一步的优化，所述溶剂为乙酸乙酯和石油醚，二者的体积比为1:1；所述卷柏地上部分与溶剂的质量比为1:(6-10)，优选1:8。
13.作为进一步的优化，s3中超声功率为200-300w，处理时间为20-30min。
14.与已有技术相比，本发明的有益效果体现在：1.本发明提供卷柏精油的脂质体承载方式，具有良好的储存稳定性和使用安全性；2.本发明通过优化反应条件，卷柏精油包封率达到75%以上，操作简便，易重复。
具体实施方式
15.以下是本发明的具体实施例，对本发明的技术方案作进一步的描述，但本发明并不限于这些实施例。
16.实施例1：称取二棕榈酸磷脂酰胆碱5.0g、胆固醇1.67g，置于圆底烧瓶中，加入135ml氯仿-乙醇6:1混合溶液，45℃水浴搅拌溶解，以50r/min转速，40℃水浴旋转蒸发至烧瓶内壁出现白色蜡状薄膜，常温0.1mpa下继续真空干燥6h；加入ph值为6 .8的pbs溶液170ml，300w功率超声15min使体系充分混悬；滴加卷柏精油1.1g入烧瓶，冰浴条件下300w功率超声30min，超声后的混悬液经过0.45μm微孔滤膜，制得卷柏精油脂质体。
17.将制得的卷柏精油脂质体以卷柏精油为参照，扣除体系中未包封的卷柏精油量，包封率为88.5%，平均粒径为172.4nm。
18.实施例2：称取二棕榈酸磷脂酰胆碱2.0g、胆固醇0.4g，置于圆底烧瓶中，加入50ml氯仿-乙醇8:1混合溶液，40℃水浴搅拌溶解，以30r/min转速、50℃水浴旋转蒸发至烧瓶内壁出现白色蜡状薄膜，常温0.1mpa下继续真空干燥4h；加入ph值为7.0的pbs溶液50ml，200w功率超声23min使体系充分混悬；滴加卷柏精油0.35g入烧瓶，冰浴条件下200w功率超声20min，超声后的混悬液经过0.45μm微孔滤膜，制得卷柏精油脂质体。
19.制得的卷柏精油脂质体以卷柏精油为参照，扣除体系中未包封的卷柏精油量，包封率为81.2%，平均粒径为225.7nm。
20.实施例3：称取二棕榈酸磷脂酰胆碱2.1g、胆固醇0.5g，置于圆底烧瓶中，加入70ml氯仿-乙醇4:1混合溶液，50℃水浴搅拌溶解，以50r/min转速、55℃水浴旋转蒸发至烧瓶内壁出现白色蜡状薄膜，常温0.08mpa下继续真空干燥12h；加入ph值为6 .8的pbs溶液70ml，300w超声30分钟min使体系充分混悬；滴加卷柏精油0.38g入烧瓶，冰浴条件下300w功率超声30min，超声后的混悬液经过0.45μm微孔滤膜，制得卷柏精油脂质体。
21.制得的卷柏精油脂质体以卷柏精油为参照，扣除体系中未包封的卷柏精油量，包封率为77.9%，平均粒径为161.2nm。
22.本文中所描述的具体实施例仅仅是对本发明精神作举例说明。本发明所属技术领域的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，但并不会偏离本发明的精神或者超越所附权利要求书所定义的范围。
技术特征：
1.一种卷柏精油脂质体的制备方法，其特征在于，包括如下加工步骤：s1)将二棕榈酸磷脂酰胆碱和胆固醇的混合物加入容器中，并向容器中加入有机溶剂，加热，搅拌溶解后，减压旋转蒸发至器壁上形成薄膜，真空干燥；s2)加入pbs缓冲液，进行超声处理、和/或将容器旋转，形成混悬液；s3)将卷柏精油缓慢加入混悬液中，0-10℃温度下进行超声处理，用微孔滤膜过滤，制得制得卷柏精油脂质体。2.根据权利要求1所述的卷柏精油脂质体的制备方法，其特征在于，s1中所述混合物与有机溶剂的质量比为1:(20-30)；其中，所述二棕榈酸磷脂酰胆碱与胆固醇的质量比为(2-5):1。3.根据权利要求1或2所述的卷柏精油脂质体的制备方法，其特征在于，s1中所述有机溶剂为氯仿-乙醇混合溶液，二者的体积比为(4-8):1。4.根据权利要求1所述的卷柏精油脂质体的制备方法，其特征在于，s1中的加热温度为40-60℃，旋转蒸发的转速为30-50r/min，蒸发温度40-55℃，真空干燥的真空度为0.08-0.1mpa。5.根据权利要求1所述的卷柏精油脂质体的制备方法，其特征在于，s2中所述pbs缓冲液的ph值为6.2-7.2；pbs缓冲液与s1中混合物的质量比为(20-30):1。6.根据权利要求1所述的卷柏精油脂质体的制备方法，其特征在于，s3中所述卷柏精油与s1中混合物的质量比为1:(6-8)。7.根据权利要求1或6所述的卷柏精油脂质体的制备方法，其特征在于，s3中所述卷柏精油的制备方法为：取干燥的卷柏地上部分，粉碎过筛，加入溶剂，40-50℃浸12-24h，过滤液加入无水硫酸钠干燥，减压回收过滤液，制得卷柏精油。8.根据权利要求1或6或7所述的卷柏精油脂质体的制备方法，其特征在于，s3中所述卷柏精油含有0.2-2%的穗花杉双黄酮、和/或扁柏双黄酮、和/或银杏双黄酮。9.根据权利要求7所述的卷柏精油脂质体的制备方法，其特征在于，所述溶剂为乙酸乙酯和石油醚，二者的体积比为1:1；所述卷柏地上部分与溶剂的质量比为1:(6-10)。10.根据权利要求1所述的卷柏精油脂质体的制备方法，其特征在于，s3中超声功率为200-300w，处理时间为20-30min。
技术总结
本发明公开了一种卷柏精油脂质体的制备方法，包括将二棕榈酸磷脂酰胆碱和胆固醇的混合物加入容器中，并向容器中加入有机溶剂，加热，搅拌溶解后，减压旋转蒸发至器壁上形成薄膜，真空干燥；加入PBS缓冲液，进行超声处理、和/或将容器旋转，形成混悬液，其中，超声处理、和/或容器旋转至器壁上薄膜完全脱落，用以均匀分散形成混悬液；将卷柏精油缓慢加入混悬液中，低温下进行超声处理，0.45μm微孔滤膜过滤，制得制得卷柏精油脂质体。本发明提供一种卷柏精油的脂质体承载方式，具有良好的储存稳定性和使用安全性，通过优化反应条件，卷柏精油包封率达到75%以上，操作简便，易重复。易重复。
技术研发人员：赵森淼 宋丰奎 周世瑕
受保护的技术使用者：苏州永健生物医药有限公司
技术研发日：2022.08.23
技术公布日：2022/10/25